小葉錦雞兒醋酸乙酯提取物的鎮(zhèn)痛作用研究

1、小葉錦雞兒醋酸乙酯提取物的鎮(zhèn)痛作用研究                    作者：李迎軍， 樸惠順， 姜海英【關(guān)鍵詞】  小葉錦雞兒；,醋酸乙酯提取物；,鎮(zhèn)痛摘要：目的探討小葉錦雞兒醋酸乙酯提取物的鎮(zhèn)痛作用。方法將小鼠隨機(jī)分為5組后采用扭體法、熱板法、電刺激法3種方法觀察小葉錦雞兒醋酸乙酯提取物的鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果小葉錦雞兒能明顯延長(zhǎng)小鼠扭體和舔足潛伏期，減少扭體和舔足次數(shù)，提高電刺激痛閾。結(jié)論小葉

2、錦雞兒醋酸乙酯提取物對(duì)小鼠有明顯鎮(zhèn)痛作用。關(guān)鍵詞：小葉錦雞兒；  醋酸乙酯提取物；  鎮(zhèn)痛The Analgesic Effects of the Ethyl Acetate Extraction of Caragana microphylla Lam Abstract：ObjectiveTo study the analgesic effects of the ethyl acetate extraction of Caragana microphylla Lam.MethodsAfter the mice were randomly divided into 5 gro

3、ups, studied the analgesic effects of the ethy1 acetate extraction of Caragana microphylla Lam with writhing test, hotplate test and electric stimulation test. ResultsThis drug obviously prolonged the incubation period of torsion body and licking feet, decreased the times of torsion body and licking

4、 feet, increased the pain threshold of electric stimulation in mice.ConclusionThe analgesic effects of the ethy1 acetate extraction of Caragana microphylla Lam has obvious analgesic effects on mice.Key words：Caragana microphylla Lam；  Ethylacetate extraction；  Analgesic    

5、小葉錦雞兒Caragana microphylla Lam為豆科錦雞兒屬植物，藥用部位為根，具有祛風(fēng)除濕、活血通絡(luò)、鎮(zhèn)靜消炎等功效1。論文論文參考網(wǎng)中華本草中記載，小葉錦雞兒具有“清熱利炎的功能，主治咽喉腫痛”2。此屬植物世界上約有100余種，分布于亞洲和歐洲的干旱、半干旱地區(qū)。我國(guó)產(chǎn)62種3，也可以栽培。朝醫(yī)稱小葉錦雞兒為骨草（治療骨髓炎的藥）朝鮮族民間作為治療骨髓炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的常用藥材。近來(lái)研究表明，該屬植物具有抗炎、降壓作用4，5，還具有較強(qiáng)的抗癌及抗病毒活性6，7。一般來(lái)說，藥物的抗炎作用與鎮(zhèn)痛作用往往具有一定的聯(lián)系，本實(shí)驗(yàn)正是通過給予小鼠不同劑量的小葉錦雞兒醋酸乙酯提取物來(lái)驗(yàn)證其

6、是否具有鎮(zhèn)痛作用，旨在為深入開發(fā)小葉錦雞兒的藥用價(jià)值提供理論依據(jù)。1  器材1.1  藥品與試劑小葉錦雞兒采集于琿春蜜江，冰醋酸，消炎痛，乙醇，其它試劑均用分析純。1.2  儀器 BL420S型生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)：成都泰盟公司，HHW型恒溫水浴箱：金壇市恒豐儀器廠，小鼠固定器，計(jì)時(shí)器。1.3  動(dòng)物昆明種小鼠，體重（20±20）g，由延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科提供。1.4  統(tǒng)計(jì)學(xué)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以±s表示，采用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析。2  方法與結(jié)果2.1  醋酸乙酯提取物的制備取小葉錦雞兒干燥根

7、的粗粉3 kg，用95%食用乙醇在50提取3次，提取液趁熱過濾，合并濾液，減壓回收乙醇得浸膏（367.4 g）。在浸膏中加適量蒸餾水成混懸液，依次用石油醚、醋酸乙酯萃取，減壓回收溶劑，得醋酸乙酯提取物（12.54 g），備用。2.2  小葉錦雞兒醋酸乙酯提取物對(duì)腹腔注射冰醋酸所致疼痛的影響8取50只小鼠 雌雄各半，隨機(jī)分為5組。大、中、小劑量組、陽(yáng)性對(duì)照組、空白組，分別給予200，100 ，50 mg/kg的小葉錦雞兒醋酸乙酯提取物、5 mg/kg的消炎痛、和同等容量的生理鹽水，續(xù)灌胃給藥4 d，于末次給藥1 h后腹腔注射0.6%冰醋酸（0.1 ml/10 g），觀察扭體的潛伏期及1

8、5 min內(nèi)扭體次數(shù)，計(jì)算抑痛率。抑痛率（%）=空白組扭體次數(shù)-藥物組扭體次數(shù)     空白組扭體次數(shù)×100%由表1可見，與空白組比較小葉錦兒大、中、小劑量組扭體的潛伏期和次數(shù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05或P<0.01），抑痛率分別為61.9%，77.1%，68.4%。表1  小葉錦雞兒乙酸乙酯提取物對(duì)腹腔注射冰醋酸所致疼痛的影響(略) 與空白組比較， *P<0.05,* P<0.01，n=102.3  小葉錦雞兒醋酸乙酯提取物對(duì)熱板所致疼痛的影響8將一自制鐵槽（26×19×30）

9、放入恒溫浴箱內(nèi)，待水浴箱內(nèi)溫度穩(wěn)定在(55±0.5)時(shí)，將小鼠放入鐵槽內(nèi)，篩選出第1次舔后足時(shí)間在530 s的50只雌性小鼠 然后進(jìn)行分組給藥，方法同上，于末次給藥1 h后將小鼠再放入鐵槽內(nèi)（溫度同上），觀察小鼠舔后足的潛伏期及1 min內(nèi)的舔后足的次數(shù)，間隔5 min后再記錄1次，取平均值，計(jì)算抑痛率。抑痛率（%）=空白組扭體次數(shù)-藥物組扭體次數(shù)     藥物組扭體次數(shù)×100%由表2可見，與空白組比較小葉錦雞兒大、中、小劑量組舔足的潛伏期和次數(shù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05或P<0.01），其抑痛率別為44.0%，37.4

10、%，42.9%。論文論文參考網(wǎng) 2.4  小葉錦雞兒醋酸乙酯提取物對(duì)電刺激所致疼痛的影響8取50小鼠 雌雄各半，分組及給藥方法同上，末次給藥1 h后將小鼠放入小鼠固定器中，在小鼠尾根部用75%乙醇進(jìn)行脫酯并涂上導(dǎo)電膏，將刺激輸出線的正負(fù)電極置于小鼠尾根部1 cm處并連接到BL420S型生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)的刺激輸出端，設(shè)置電流的初始刺激強(qiáng)度為0.1 mA，波寬為50 ms開始進(jìn)行電刺激，程序控制每次遞增0.05 mA，記錄小鼠因疼痛而產(chǎn)生嘶叫時(shí)的電流強(qiáng)度作為小鼠痛閾。間隔5 min后再記錄1次，取兩次平均值。由表3可見，與空白組比較小葉錦雞兒大、中、小劑量組的痛閾有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <

11、;0.05)。表2  小葉錦雞兒醋酸乙酯提取物對(duì)熱板致疼痛的影響(略)與空白組比較， *P<0.05,* P<0.01，n=10表3  小葉錦雞兒醋酸乙酯提取物電刺激所致疼痛的影響(略)與空白組比較， * P<0.05,n=103  討論本實(shí)驗(yàn)采用扭體法、熱板法、電刺激法研究了小葉錦雞兒醋酸乙酯提取物的鎮(zhèn)痛效果。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，小葉錦雞兒醋酸乙酯提取能明顯延長(zhǎng)腹腔注射冰醋酸和熱板所致疼痛的潛伏期，減少因疼痛而產(chǎn)生扭體和舔足的次數(shù)，提高電刺激致痛的痛閾，從而證實(shí)小葉錦雞兒有明顯的鎮(zhèn)痛效果；同時(shí)表明，各劑量組之間鎮(zhèn)痛效果不存在明顯差異，因而不具有量

12、效關(guān)系。此外，其鎮(zhèn)痛作用的有效成分、作用原理及作用部位尚需進(jìn)一步研究。參考文獻(xiàn)：1  延邊中草藥編寫組. 延邊中草藥M.延吉：延邊人民出版社，1977：569.2  國(guó)家中醫(yī)藥管理局中華本草編委會(huì). 中華本草M.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1999：392.3  劉紅霞，林文翰，楊峻山.錦雞兒屬植物化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展J.中國(guó)藥學(xué)雜志2004，39（5）：327.4  金景姬，方文龍，金正男，等.小葉錦雞兒的抗炎作用J.中國(guó)中藥雜志，1993，18（5）：306.5  屈松柏，張曉星.錦雞兒治療高血壓的臨床研究J.實(shí)用中西醫(yī)結(jié)合雜志，1989，2（2）：10.6  盛  智，田春艷，王羽雄，等.錦雞丙素對(duì)兩株入肺癌細(xì)胞株蛋白激酶和同工酶活性的影響J.上海醫(yī)科大學(xué)報(bào)，1996，26（3）：395.7  Woo ER，Kim HJ，Kwak JH，et al. Inhibi