銀翹散傳統(tǒng)飲片湯劑與配方顆粒湯劑的比較研究

1、藥物研究The medicine study基金項(xiàng)目：國(guó)家中醫(yī)藥管理局中醫(yī)藥行業(yè)科研專項(xiàng)（201007010）；江蘇省研究生培養(yǎng)創(chuàng)新工程項(xiàng)目（CXZZ11_0785）。作者簡(jiǎn)介：束雅春（1976 ），女，漢族，主管中藥師，南京中醫(yī)藥大學(xué)在讀博士生，從事中藥炮制和中藥質(zhì)量控制研究。E mail ：guzheng0512sohucom 。通訊作者：蔡寶昌（1952 ），男，漢族，教授，從事中藥炮制和中藥質(zhì)量控制研究。E mail ：bccai126com 。銀翹散傳統(tǒng)飲片湯劑與配方顆粒湯劑的比較研究束雅春1，2，3秦昆明4殷放宙2，3劉曉2，3吳蕓2，3蔡寶昌2，3，41南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，南

2、京210029；2南京中醫(yī)藥大學(xué)國(guó)家教育部中藥炮制規(guī)范化及標(biāo)準(zhǔn)化工程研究中心，南京210029；3南京中醫(yī)藥大學(xué)國(guó)家中醫(yī)藥管理局中藥炮制標(biāo)準(zhǔn)重點(diǎn)研究室，南京210029；4南京海昌中藥集團(tuán)有限公司，南京210061【摘要】目的：比較銀翹散傳統(tǒng)飲片湯劑與配方顆粒湯劑的高效液相色譜指紋圖譜、浸出物、相對(duì)密度的異同，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：采用高效液相色譜法（HPLC ），浸出物及相對(duì)密度測(cè)定法，對(duì)兩種湯劑進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果：銀翹散傳統(tǒng)飲片湯劑和配方顆粒湯劑的質(zhì)量存在較大差異。結(jié)論：需要加強(qiáng)傳統(tǒng)中藥飲片和配方顆粒的生產(chǎn)工藝研究以及等效性研究，建立和完善中藥飲片和配方顆粒的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，保證兩

3、種飲片形式都能更好的服務(wù)于中醫(yī)臨床?！娟P(guān)鍵詞】銀翹散；湯劑；中藥配方顆粒；高效液相色譜【中圖分類號(hào)】R285. 6【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】10078517（2011）23007802A Comparative Study on Traditional Yinqiaosan Decoction and Its GranuleShu Ya chun 1，2，3，Qin Kun ming 4，Yin Fang zhou 2，3，Liu Xiao 2，3，Wu Yun 2，3，Cai Bao chang 2，3，41Affliated Hospital of Nanjing University

4、of Chinese Medicine ，Nanjing 210029，China ；2Engineering Center of State Ministry of Education for Standardization of Chinese Medicine Processing ，Nanjing University of Chinese Medicine ，Nanjing 210029，China ；3Key Laboratory of State Administration of TCM for Standardization of Chinese Medicine Proce

5、ssing ，Nanjing University of Chinese Medicine ，Nanjing 210029，China ；4Nanjing Haichang Chinese Medicine Group Corporation ，Nanjing 210061，ChinaAbstract ：Objective ：To compare similarities and differences between traditional Yinqiaosan decoction and its granule in high performance liquid chromatograp

6、hic fingerprint ，extract and relative density ，thus to provide evidence for clinical applicationMethod ：High performance liquid chromatography （HPLC ）and the method of extract and relative density measuring were applied to detect two types of decoctionResult ：Traditional Yinqiaonsan decoction and tr

7、aditional one formula the quality of the native particles differ-encesConclusion ：We need to strengthen the traditional Chinese medicine decoction pieces and formula of particles and equivalent production technology research studies ，and to establish and perfect the Chinese medicine decoction pieces

8、 and formula of the industry standard particles or national standards and to ensure the two decoction pieces form can better serve the Chinese clinicalKey words ：Yinqiaosan ；Decoctions ；Compatible granule ；HPLC 銀翹散始載于清代醫(yī)家吳鞠通的代表著作溫病條辨，根據(jù)內(nèi)經(jīng)“風(fēng)淫于內(nèi)，治以辛涼，佐以苦甘；熱淫于內(nèi)，治以咸寒，佐以甘苦”的理論而創(chuàng)制的名方。由金銀花、連翹、桔梗、薄荷、荊芥、牛蒡子等

9、九味藥組成，具有辛涼解表、清熱解毒的功效，主治風(fēng)溫初起，當(dāng)時(shí)以治療風(fēng)溫、溫?zé)岵∫约澳承╇s病屬于邪在衛(wèi)分、上焦而聞名，并一直沿用至今。現(xiàn)代臨床上主要用于治療流行性感冒、急性扁桃腺炎、咽喉炎、肺炎、皰疹、麻疹、流行性腮腺炎等病毒性感染疾病，是中醫(yī)臨床上廣泛使用并且療效確切的中藥方劑之一。中藥配方顆粒是在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下，采用現(xiàn)代科技手段將傳統(tǒng)中藥飲片按一定生產(chǎn)工藝制成的提取物與適當(dāng)?shù)妮o料或藥材細(xì)粉制成的供臨床調(diào)劑使用的粉狀或顆粒狀產(chǎn)品。具有劑量準(zhǔn)確、衛(wèi)生、即沖即服和貯存攜帶方便的特點(diǎn)，現(xiàn)已被中國(guó)、日本、韓國(guó)等國(guó)家廣泛使用1。雖然中藥配方顆粒比傳統(tǒng)中藥飲片有一些優(yōu)勢(shì)，但仍有許多專家學(xué)者對(duì)中藥飲片這一

10、改革表示質(zhì)疑，例如在飲片原有形態(tài)特征消失后如何控制中藥配方顆粒的質(zhì)量，單味中藥配方顆?；旌吓浞脚c傳統(tǒng)飲片合煎湯劑是否等效，中藥配方顆粒在尚無統(tǒng)一的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)情況下，如何監(jiān)管等？本文通過對(duì)銀翹散傳統(tǒng)飲片湯劑與配方顆粒湯劑在高效液相色譜指紋圖譜、浸出物及相對(duì)密度方面的比較研究，分析二者差異，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。1實(shí)驗(yàn)材料1. 1儀器與試劑島津LC 20AB 高效液相色譜儀，包括DGU 20A3在線脫氣機(jī)、SIL 20A 自動(dòng)進(jìn)樣器、SPD M20A 檢測(cè)器、CTO 20A 柱溫箱和Class VP 色譜工作站；電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱101型（上海索譜儀器有限公司）；Mettler Toledo AL

11、104電子天平（梅特勒托利多儀器上海有限公司）。甲醇為色譜純（美國(guó)Merck 公司），其他試劑為分析純。1. 2試藥銀翹散傳統(tǒng)飲片購(gòu)自南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院中藥房，經(jīng)南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院宋金斌教授鑒定。銀翹散配方顆粒購(gòu)自南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院中藥房，由江陰天江藥業(yè)有限公司生產(chǎn)。2方法與結(jié)果2. 1色譜條件·87·中國(guó)民族民間醫(yī)藥Chinese journal of ethnomedicine and ethnopharmacy藥物研究The medicine study色譜柱：YMC Pack ODS A （250mm 4. 6mm ，5m ）（YMC Co. Ltd ，

12、Japan ）；流動(dòng)相：乙腈（A ）0. 1%甲酸水溶液（B ）梯度洗脫（0 20min ，A ：5%；20 35min ，A ：5% 10%；35 75min ，A ：10% 18%；75 95min ，A ：18% 24%；95 105min ，A ：24% 35%；105 120min ，A ：35% 45%；120 125min ，A ：2%）；流速：1mL /min；檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm ；柱溫：35 ；進(jìn)樣量：5L 。2. 2供試品溶液的制備2. 2. 1處方組成金銀花9g 、連翹9g 、桔梗6g 、淡竹葉4g 、生甘草5g 、淡豆豉5g 、牛蒡子9g 、薄荷6g 、荊芥穗5g 。

13、2. 2. 2傳統(tǒng)飲片湯劑的制備精密稱取金銀花、連翹、桔梗、淡竹葉、生甘草、淡豆豉、牛蒡子飲片加10倍量水浸泡30min ，用傳統(tǒng)砂鍋武火煮沸后，改用文火煎煮15min ，加入后下飲片薄荷、荊芥穗再煎煮5min ，趁熱濾出藥液，量得體積為292mL 的一煎藥液備用。同法再加6倍量水，煎煮15min 制備二煎藥液197mL ，合并兩次藥液，搖勻，加純凈水定容至500mL ，備用。2. 2. 3配方顆粒湯劑的制備精密稱取經(jīng)折算后的與銀翹散傳統(tǒng)飲片等量的單味藥配方顆粒，以100 熱開水沖兌至300mL ，加純凈水定容至500mL ，備用。分別精密量取傳統(tǒng)飲片湯劑與配方顆粒湯劑樣品溶液各1. 5mL

14、至5mL 容量瓶中，加入甲醇定容至刻度，邊加邊輕輕振搖，靜置30min ，用0. 45m 的微孔濾膜過濾，即得供試品溶液。 圖1銀翹散傳統(tǒng)飲片湯劑樣品色譜圖 圖2銀翹散配方顆粒湯劑樣品色譜圖2. 3兩種湯劑高效液相色譜指紋圖譜的比較精密吸取傳統(tǒng)飲片湯劑與配方顆粒湯劑供試品溶液各5L 注入液相色譜儀，按上述色譜條件操作，考察125min供試品溶液的色譜分離情況，記錄125min 色譜圖，即得。結(jié)果見圖1、圖2。2. 4兩種湯劑浸出物含量的比較按照2010版中國(guó)藥典附錄項(xiàng)下浸出物測(cè)定法，精密量取銀翹散傳統(tǒng)飲片湯劑、配方顆粒湯劑各25mL ，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105 干燥3

15、小時(shí)，置干燥器中冷卻30min ，迅速精密稱定重量。兩種湯劑平行測(cè)定3份，取平均值，得傳統(tǒng)飲片湯劑浸出物為0. 5380g ，配方顆粒湯劑浸出物為0. 3223g 。2. 5兩種湯劑相對(duì)密度的比較按照2010版中國(guó)藥典附錄項(xiàng)下相對(duì)密度測(cè)定法之比重瓶法，取潔凈、干燥并精密稱定重量的比重瓶，裝滿供試品后，置20 水浴中放置若干分鐘，使內(nèi)容物溫度達(dá)到20 ，用濾紙除去溢出側(cè)管的液體，立即蓋上罩。然后將比重瓶自水浴中取出，再用濾紙將比重瓶的外面擦凈，精密稱定，減去比重瓶的重量，求得供試品的重量后，將供試品傾去，洗凈比重瓶，裝滿新沸過的冷水，再照上法測(cè)得同一溫度時(shí)水的重量2，兩種湯劑分別平行測(cè)定3份，根

16、據(jù)公式計(jì)算，得傳統(tǒng)飲片湯劑相對(duì)密度為1. 0075393，配方顆粒湯劑相對(duì)密度為1. 0035308。3討論銀翹散屬解表類方劑，且其中多味飲片中均含有揮發(fā)性成分。因此，傳統(tǒng)飲片第一次煎沸后改文火煎15min 后加入后下藥物，再煎5min ，以盡量減少揮發(fā)性成分的損失3。銀翹散配方顆粒湯劑處方劑量經(jīng)折算后與銀翹散傳統(tǒng)飲片湯劑等量，因此，兩者實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較更具有客觀性與可比性。就實(shí)驗(yàn)結(jié)果總體而言，指紋圖譜技術(shù)在兩種湯劑的應(yīng)用中屬“整體輪廓”比較，二者色譜圖形和相對(duì)應(yīng)的色譜峰保留時(shí)間基本相似，所含主要化學(xué)成分大致相同，但部分成分的相對(duì)含量差別較大，尤其是銀翹散配方顆粒湯劑大多數(shù)化學(xué)成分的含量（以峰面積

17、計(jì)）只是傳統(tǒng)飲片湯劑的1/2，個(gè)別化學(xué)成分只達(dá)到了1/3。根據(jù)二者浸出物和相對(duì)密度的測(cè)定結(jié)果比較，銀翹散配方顆粒湯劑也均小于傳統(tǒng)飲片湯劑。因此，通過本研究發(fā)現(xiàn)，銀翹散傳統(tǒng)飲片湯劑和配方顆粒湯劑質(zhì)量存在顯著差異，因此兩者的臨床療效也必然有一定的差異。這就印證了為什么中藥配方顆粒自其誕生的那天起就爭(zhēng)論不斷，核心問題是中藥配方顆粒與傳統(tǒng)飲片湯劑療效是否相同。中藥配方顆粒在原料中藥材、飲片、生產(chǎn)工藝和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等各環(huán)節(jié)還有許多研究工作要做；配方顆粒湯劑與傳統(tǒng)飲片湯劑的等效性還需要更多的科研工作做支持1。只有重視從源頭上控制藥材和飲片的質(zhì)量，協(xié)調(diào)不同企業(yè)生產(chǎn)工藝，加強(qiáng)反映內(nèi)在質(zhì)量控制技術(shù)的研究，建立和完善配方顆粒行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，中藥配方顆粒的質(zhì)量才能得到