云霞百合試管鱗莖生長(zhǎng)與打破休眠技術(shù)研究

1、. . . . / 46碩士學(xué)位論文云云霞霞百百合合試試管管鱗鱗莖莖生生長(zhǎng)長(zhǎng)與與打打破破休休眠眠技技術(shù)術(shù)研研究究StudyStudy onon thethe DevelopmentDevelopment andand DormancyDormancy ofof YunxiaYunxia LilyLily BulbletsBulblets inin VitroVitro. . . . / 46摘 要本試驗(yàn)以#花卉研究所培育的系百合新品種云霞的試管鱗莖為試驗(yàn)材料，成功選出了云霞試管鱗莖瓶快速生長(zhǎng)的培養(yǎng)基配方、篩選出了云霞試管鱗莖的最佳冷藏條件、方式與其田間種植的規(guī)格。研究結(jié)果如下：1以不同濃度梯度

2、的蔗糖、NAA 與改良 MS 研究云霞試管鱗莖瓶結(jié)球技術(shù)，結(jié)果表明：MS+ NAA 1.0mg/L+活性炭 0.4g/L+瓊脂 6.5g/L+蔗糖 60g/L 最有利于試管鱗莖的快速生長(zhǎng)。2通過(guò)對(duì)不同貯藏溫度、貯藏時(shí)間條件下試管鱗莖的可溶糖、淀粉、還原糖含量的綜合對(duì)比測(cè)定，成功篩選出云霞試管鱗莖的冷藏條件為：4冷藏 50d 有利于云霞試管鱗莖休眠的解除，且發(fā)芽整齊，植株健康。3通過(guò)測(cè)定不同規(guī)格和不同冷藏方式下試管鱗莖的田間膨大率、萌芽率與出苗整齊度，成功篩選出試管鱗莖田間種植的最佳規(guī)格和冷藏方式，結(jié)果為：周徑為4.930.33cm 以上，包埋方式冷藏有利于試管鱗莖田間的萌發(fā)與膨大。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞

3、：百合；試管鱗莖；生長(zhǎng)；休眠. . . . i / 46StudyStudy onon thethe DevelopmentDevelopment andand DormancyDormancy ofof YunxiaYunxia LilyLily BulbletsBulbletsinin VitroVitroXiXi HuipengHuipeng ( (Horticulture and Landscape)Directed by Professor Li ZhilinABSTRACTABSTRACTThe experiment was conducted to study the new v

4、arieties of oriental lily vitro bulblets Yunxia, which cultivated by FRI of Yunnan Academy of Agricultural Science. Through the vitro bulblets Yunxia, the experiment successfully elected the rapid development culture medium, screened out the best refrigerated, the best way of cold storage and the si

5、ze of vitro bulblets planted in the farmland. Results shows:1.With the gradient of Sucrose, NAA and macroelement, we screened out the culture medium(MS+ NAA 1.0mg/L+Activated Carbon 0.4g/L+The Agar 6.5g/L+Sucrose 60g/L) , which benefited for the rapid development of vitro bulblets Yunxia.2.By measur

6、ing the content of soluble sugar, starch, reducing sugar storaged under the different temperature and time, successfully screened out the the best way of cold storage conditions to discharge the dormancy of vitro bulblets Yunxia, which was storaged at 4 for 50d.3.By measuring the swelling rate, germ

7、ination rate and emergence uniformity determination planted in the farmland at different size and way of storage, successfully screened out the the best size and way of storage for the vitro bulblets Yunxia, which the perimeter was up 4.930.33cm storaged at embedding.KeyKey words:words:lily; vitrobu

8、lblets;development; dormancy. . . . / 46目 錄摘 要 I英文摘要 II目 錄 I1 引言 11.1 百合簡(jiǎn)介 11.2 百合試管鱗莖研究進(jìn)展 11.2.1 培養(yǎng)基量元素對(duì)試管鱗莖生長(zhǎng)的影響11.2.2 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)試管鱗莖生長(zhǎng)的影響 21.2.3 蔗糖濃度對(duì)試管鱗莖生長(zhǎng)的影響 31.2.4 溫度對(duì)試管鱗莖生長(zhǎng)的影響 41.2.5 光照條件對(duì)試管鱗莖生長(zhǎng)的影響 41.3 百合鱗莖研究進(jìn)展 41.3.1 百合休眠的概念 41.3.2 百合鱗莖休眠形成的研究 51.3.2.1 蔗糖濃度對(duì)鱗莖休眠形成的影響 51.3.2.2 激素對(duì)百合鱗莖休眠形成的影響 5

9、1.3.2.3 溫度對(duì)百合鱗莖休眠形成的影響 61.3.2.4 光照對(duì)百合鱗莖休眠形成的影響 61.3.3 百合鱗莖休眠解除的研究 71.3.3.1 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)鱗莖休眠解除的影響 71.3.3.2 低溫處理對(duì)百合鱗莖休眠解除的影響 71.4 百合產(chǎn)業(yè)化發(fā)展現(xiàn)狀 91.4.1 百合產(chǎn)業(yè)的國(guó)外市場(chǎng)現(xiàn)狀 91.4.2 我國(guó)切花百合和鱗莖生產(chǎn)技術(shù)發(fā)展現(xiàn)狀 101.5 研究目的與意義 112 云霞百合試管鱗莖生長(zhǎng)的研究 122.1 材料與方法 122.1.1 試驗(yàn)材料 122.1.2 主要試劑與儀器設(shè)備 122.1.3 試驗(yàn)材料處理 122.1.4 觀測(cè)指標(biāo)與測(cè)量方法 122.1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分

10、析 132.2 結(jié)果與分析 132.2.1 蔗糖濃度對(duì)云霞百合試管鱗莖生長(zhǎng)的影響 132.2.2 NAA 濃度對(duì)云霞百合試管鱗莖生長(zhǎng)的影響 132.2.3 改良 MS 對(duì)云霞百合試管鱗莖生長(zhǎng)的影響 142.3 討論 153 不同貯藏溫度、時(shí)間對(duì)云霞百合試管鱗莖田間萌發(fā)的影響。163.1 試驗(yàn)材料 163.2 試驗(yàn)方法 16. . . . I / 463.2.1 種球預(yù)處理 163.2.2 測(cè)定容 163.2.3 測(cè)定方法 163.3 數(shù)據(jù)處理 213.4 結(jié)果與分析 213.4.1 不同低溫與貯藏期間云霞百合試管鱗莖淀粉含量的動(dòng)態(tài)變化 213.4.2 不同低溫與貯藏期間云霞百合試管鱗莖可溶性糖

11、含量的動(dòng)態(tài)變化 223.4.3 不同低溫與貯藏期間云霞百合試管鱗莖還原糖含量的動(dòng)態(tài)變化 243.4.4 不同貯藏溫度和時(shí)間對(duì)云霞百合試管鱗莖萌發(fā)的影響 263.5 討論 274 不同大小、貯藏方式對(duì)云霞百合試管鱗莖田間萌發(fā)的影響 274.1 試驗(yàn)材料 274.2 試驗(yàn)方法 284.2.1 種球預(yù)處理 284.2.2 測(cè)定容 284.3 數(shù)據(jù)處理 284.4 結(jié)果與分析 284.4.1 不同規(guī)格對(duì)云霞百合試管鱗莖田間生長(zhǎng)與萌發(fā)的影響 284.4.2 不同貯藏方式對(duì)云霞百合試管鱗莖田間生長(zhǎng)與萌發(fā)的影響 294.5 討論 305 結(jié)論 305.1 篩選出了新品種云霞試管鱗莖快速生長(zhǎng)的培養(yǎng)基配方 30

12、5.2 篩選出了新品種云霞試管鱗莖打破休眠的最佳低溫冷藏條件 315.3 篩選出了新品種云霞試管鱗莖田間種植的最佳規(guī)格和貯藏方式 31附圖 32參考文獻(xiàn) 35致 41. . . . 0 / 461 引言1.1 百合簡(jiǎn)介百合(Lilium spp.)為單子葉植物亞綱百合科(Liliaceae)百合屬（Lilium)多年生草本植物1,2，是世界著名的五大鮮切花之一。由于其花大色美、氣質(zhì)高雅、花莖挺拔、姿態(tài)優(yōu)雅，被視為純潔的象征3。因其地下鱗莖是由許多鱗片抱合而成，又寓意為百年好合，倍受世人喜愛(ài)。百合主要分布在北半球的溫帶和寒溫帶地區(qū)，少數(shù)分布在熱帶高海拔地區(qū)。中國(guó)是百合屬植物的自然分布中心，也是世

13、界百合起源中心4。全世界百合約有 90 多種，起源于我國(guó)的有 47 個(gè)種、18 個(gè)變種，約占世界百合屬植物的一半，其中 36 個(gè)種、15 個(gè)變種為我國(guó)特有種5。按英國(guó)皇家園藝學(xué)會(huì)對(duì)百合栽培品種的分類方法，栽培雜種系中的亞洲百合雜種系、百合雜種系、麝香百合雜種系、喇叭型百合雜種系等都利用了原產(chǎn)我國(guó)的百合種質(zhì)資源6。尤其是 19 世紀(jì)后期，歐洲百合的大多數(shù)品種由于病毒病的蔓延瀕臨滅絕，我國(guó)的岷江百合引入歐洲后，才使歐洲百合重放異彩7。1.2 百合試管鱗莖研究進(jìn)展1.2.1 培養(yǎng)基量元素對(duì)試管鱗莖生長(zhǎng)的影響延龍9等研究發(fā)現(xiàn)，隨著培養(yǎng)基量元素的增加，試管鱗莖生成的數(shù)量和重量都在增加，大量元素濃度高于標(biāo)

14、準(zhǔn)濃度 MS 時(shí)，有利于鱗莖的形成和膨大，且隨著大量元素濃度的增加，鱗莖的直徑和鮮重增加，在 2 MS 時(shí)形成的鱗莖最大，最大直徑達(dá)2.06 cm，平均直徑為 1.65cm，平均鮮重為 2.68 g，分別是對(duì)照的 1.37 和 2.85 倍，其增大倍數(shù)是處理前的 12.8 倍。而大量元素濃度低于標(biāo)準(zhǔn)濃度 MS 時(shí)，規(guī)律性不強(qiáng)，其中 1/2 MS 的效果最差，1/4 MS 時(shí)結(jié)鱗莖率為 97%，但所結(jié)鱗莖的直徑和鮮重均較對(duì)照差，說(shuō)明高濃度的大量元素可以促進(jìn)鱗莖的形成和膨大，低濃度的大量元素可以促進(jìn)鱗莖的形成，但不利于鱗莖的膨大。愛(ài)華10等研究發(fā)現(xiàn)，大量元素的濃度與試管成鱗莖之間找不到明顯的相關(guān)性

15、。從鱗莖增加的數(shù)量來(lái)看：不同濃度大量元素的影響趨勢(shì)是 MS1/2MS3/2 MS2 MS1/4 MS；從鱗莖直徑的生長(zhǎng)來(lái)看：1/4 MS、1/2 MS、MS，這 3 種濃度對(duì)試管鱗莖的生長(zhǎng)的影響是一樣的，3/2 MS 和 2 MS這 2 種濃度對(duì)鱗莖生長(zhǎng)的影響也沒(méi)有差異，后 2 種濃度比前 3 種稍好。潔11等研究發(fā)現(xiàn)，高濃度的大量元素有利于鱗莖的膨大，而不利于鱗莖的誘導(dǎo)，3MS 時(shí)形成的鱗莖最大，但鱗莖形成率則下降到 146%。Merel Langens-Gerrits12-14對(duì)Star Gazer研究發(fā)現(xiàn)，隨著培養(yǎng)基量元素. . . . 1 / 46的增加，鱗莖中 P 和 S 的含量增加

16、，60gL-1的蔗糖濃度中 P、S 的含量要比 30gL-1蔗糖濃度的 P、S 的含量少，其它元素含量則不受蔗糖濃度的影響。而大量元素的變化對(duì)鱗莖生長(zhǎng)的影響并不存在再分配的問(wèn)題，而是一個(gè)持續(xù)的過(guò)程。1.2.2 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)試管鱗莖生長(zhǎng)的影響馬小萍15等報(bào)道，基本培養(yǎng)基中附加 NAA 有助于鱗莖的生長(zhǎng)。Lim.等發(fā)現(xiàn)較低濃度的 NAA 促進(jìn) Dame Blanche 和 CasaBlanea 百合品種麟莖形成、同時(shí)增加CasaBlanea 和 AcaPulco 百合品種續(xù)莖的重量。冬云16等在對(duì)山丹研究時(shí)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)赤霉素濃度為 lmg/L 時(shí)，小鱗莖的平均增重最大為 927mg。延龍9以百合S

17、iberia試管苗為材料，研究發(fā)現(xiàn)在 0.5mg/LNAA 時(shí)，鱗莖的直徑和鮮重均最大，其增大倍數(shù)是處理前的 7.l 倍；NAA 大于 0.5mg/L 時(shí)，隨質(zhì)量濃度的增加，鱗莖的直徑和鮮重均有所下降，說(shuō)明在誘導(dǎo)試管鱗莖形成時(shí)，以較低質(zhì)量濃度 NAA 為宜。清波等人發(fā)現(xiàn)，當(dāng) 2-4D 濃度為 0.5mg/L 龍牙百合鱗球增重最佳17。倩中等報(bào)道，IBA 誘導(dǎo)百合生根的最佳濃度以低于 1.0mg/L 為好18。柏云等研究發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)基中添加一定濃度的 6-BA 和 IAA 有利于小鱗莖直徑的增大。其中以 6-BA 濃度為0.2mg/L、IAA 濃度為 0.5mg/L 和 l.0mg/L 時(shí)小鱗莖

18、平均直徑增加量最大19。冬云等對(duì)野生百合山丹的研究發(fā)現(xiàn)，隨著培養(yǎng)基中 PP333 濃度的增加，百合小鱗莖的平均增重也逐漸增加，至 PP333 濃度達(dá) 4 mg/L 時(shí)最大為 1736 mg20。胡鳳榮等發(fā)現(xiàn)，PP333 濃度達(dá) 32 mg/L 和 l.6 mg/L 時(shí)，Sorbonne 和 Siberia 的組培苗小鱗莖平均直徑增加最大21。杰等人研究結(jié)果表明，當(dāng)矮壯素濃度為 0.l mg/L，小鱗莖膨大膨大最明顯22。愛(ài)華等研究發(fā)現(xiàn)，隨著 NAA 濃度的增加，試管鱗莖個(gè)數(shù)顯示出增加的趨勢(shì)，在 0.1 mg/L 到 0.5 mg/L 的濃度處理在直徑生長(zhǎng)上未表現(xiàn)出明顯差異，而當(dāng)濃度增加到 0.

19、5 mg/L 以上時(shí)，試管小鱗莖個(gè)數(shù)和小鱗莖直徑開(kāi)始下降；隨著 NAA 濃度的增加，增生鱗莖的數(shù)量和直徑均表現(xiàn)為先緩慢增大后減小的趨勢(shì)。以小鱗莖數(shù)量為指標(biāo)考慮認(rèn)為 NAA 濃度為 0.5 mg/L 時(shí)最好，以直徑為指標(biāo)考慮認(rèn)為 NAA 濃度為0.2 mg/L 時(shí)最好，兩指標(biāo)在 0.2 mg/L 和 0.5 mg/L 兩處理間無(wú)極顯著差異10。麗靜等研究表明，多效唑濃度為 10 mg/L 時(shí)能促進(jìn)鱗莖的誘導(dǎo)和膨大，鱗莖平均鮮重可達(dá) 0.84 g，增大倍數(shù)則高達(dá) 4.20 倍，分別是對(duì)照的 1.68 倍和 2.71 倍，且鱗莖形成率達(dá)到了 72.4%。當(dāng)多效唑濃度10 mg/L 時(shí)，則表現(xiàn)出一定的

20、抑制作用，芽的生長(zhǎng)嚴(yán)重受抑制，試管鱗莖明顯矮化，畸形。同時(shí)，多效唑?qū)θ~片的生長(zhǎng)起明顯的抑制作用，濃度越高，抽葉數(shù)越少，株高迅速下降。當(dāng)多效唑濃度達(dá) 40 mg/L 時(shí)，則不抽葉23,24。潔等研究表明，水酸濃度在 0.050.20 mg/L 圍，鱗莖形成率顯著提高，鱗莖數(shù)量增加明顯。當(dāng)水酸濃度為 0.20 mg/L 時(shí)，新增鱗莖數(shù)達(dá) 1.91 個(gè)，為對(duì). . . . 2 / 46照的 1.44 倍，鱗莖形成率則達(dá)到 71.2%。但水酸對(duì)百合鱗莖的膨大作用不顯著，鱗莖鮮重與增大倍數(shù)無(wú)顯著變化，其結(jié)果表明，水酸處理有利于百合鱗莖的誘導(dǎo)11。S.Kumar 對(duì) Star Gazer研究發(fā)現(xiàn)，生長(zhǎng)調(diào)節(jié)

21、劑丁酰肼（Alar） ，矮壯素（Cycocel）和多效唑（Paclobutrazol）在 1.0mg/L 時(shí)會(huì)生出更多的鱗莖，且鱗莖生根和生葉的數(shù)量會(huì)減少，但濃度過(guò)大時(shí)，會(huì)抑制鱗莖的形成25。1.2.3 蔗糖濃度對(duì)試管鱗莖生長(zhǎng)的影響有研究報(bào)道，在蔗糖濃度為 3075g/L 的圍，隨著蔗糖濃度的增加，可促進(jìn)小球莖的形成和生長(zhǎng)。當(dāng)蔗糖濃度為 75g/L 時(shí)形成的球莖最大，高于 75g/L 則球莖變小。不同蔗糖濃度下的結(jié)球率都為 100%，說(shuō)明蔗糖濃度對(duì)結(jié)球影響不大，但與球的大小有關(guān)26。延龍研究表明，蔗糖質(zhì)量濃度為 30 g/L 時(shí)，結(jié)鱗莖率只有 20%；蔗糖質(zhì)量濃度50 g/L 時(shí)，結(jié)鱗莖率達(dá)

22、100%，且隨蔗糖質(zhì)量濃度的增加，所結(jié)鱗莖的直徑、鮮重增加。當(dāng)蔗糖質(zhì)量濃度為 90 g/L 時(shí)，形成的鱗莖最大，直徑最大達(dá) 1.86 cm，平均直徑為 1.59cm，平均鮮重為 2.09 g，為對(duì)照直徑的 1.99 倍，鮮重的 5.36 倍，鮮重較處理前的單芽增大了 9.1 倍，但與 70 g/L 蔗糖處理差異不顯著；當(dāng)蔗糖質(zhì)量濃度90 g/L 時(shí)，鱗莖的直徑和鮮重有所下降9。潔等研究結(jié)果表明，隨著蔗糖質(zhì)量濃度的增加，百合鱗莖的鮮重均增加；當(dāng)蔗糖質(zhì)量濃度為 60g/L 時(shí)，新增鱗莖個(gè)數(shù)最多，鱗莖形成率達(dá) 75%，且對(duì)鱗莖葉的生長(zhǎng)有促進(jìn)作用，鱗莖葉鮮重達(dá) 0.96g；蔗糖質(zhì)量濃度為 90g/L

23、時(shí)，鱗莖鮮重達(dá) 0.89 g，增大倍數(shù)達(dá) 3.71；當(dāng)蔗糖質(zhì)量濃度為 120g/L 時(shí)，形成的鱗莖最大，平均鮮重為 1.23g，為對(duì)照的 2.28 倍，且鱗莖增大倍數(shù)達(dá) 4.39，而葉鮮重則相對(duì)減少。其結(jié)果表明，對(duì)于百合試管鱗莖誘導(dǎo)而言，培養(yǎng)基中蔗糖的濃度以 60 g/L 最佳，而蔗糖濃度為 120g/L 時(shí)最有利于鱗莖的膨大，蔗糖濃度為 90g/L 時(shí)對(duì)百合試管鱗莖的誘導(dǎo)與膨大均有顯著效果11。愛(ài)華等研究結(jié)果表明，不同蔗糖濃度增生鱗莖數(shù)量差異不顯著，而直徑表現(xiàn)出顯著差異。當(dāng)蔗糖濃度50g/L 時(shí)，隨著蔗糖濃度的增大，增生鱗莖數(shù)增多，直徑也逐漸增大；當(dāng)蔗糖濃度為 90 g/L 時(shí)，增生鱗莖數(shù)繼

24、續(xù)增加，但直徑卻減??；而當(dāng)蔗糖濃度為110g/L 時(shí)，增生鱗莖數(shù)較 90 g/L 有所減少，但鱗莖直徑增大很多10,27。Merel Langens-Gerrits 對(duì)Star Gazer研究發(fā)現(xiàn)，鱗莖重量隨著蔗糖濃度的增加而增加，而且鱗片本身重量也是隨著蔗糖濃度增加而增加14。S.Kumar 對(duì)Star Gazer研究發(fā)現(xiàn)，蔗糖濃度在 90g/L 時(shí)生成鱗莖的數(shù)量大于 60g/L，且很少有鱗莖生根和葉片25。. . . . 3 / 461.2.4 溫度對(duì)試管鱗莖生長(zhǎng)的影響傅玉蘭等對(duì)接種用試管鱗莖預(yù)先給予 8的低溫處理，分別處理 10 d、20 d、30 d 和未經(jīng)低溫過(guò)程的對(duì)照組，接種于一樣

25、的培養(yǎng)基，經(jīng)過(guò) 1 個(gè)月的一樣條件培養(yǎng)后，其試管鱗莖增殖率出現(xiàn)明顯差異。凡經(jīng)過(guò) 8低溫處理過(guò)的鱗莖均比對(duì)照組的增殖率高。其中，以處理 20 d 的試管鱗莖增殖率最高，達(dá) 857.5%，明顯高于其他組。證明一定的低溫條件可提高百合鱗莖的生理活性，有利于促進(jìn)其生長(zhǎng)和增殖，低溫程度則以 8、20 d 效果最佳28。Merel Langens-Gerrits 對(duì)Star Gazer研究發(fā)現(xiàn)，25培養(yǎng) 12 周，15培養(yǎng) 2 周會(huì)誘導(dǎo)試管鱗莖在田間抽莖，15條件下延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間對(duì)鱗莖抽莖沒(méi)有進(jìn)一步促進(jìn)作用。25培養(yǎng) 12 周后，把鱗莖從外植體上剝離放在潮濕的濾紙上，在 15條件下繼續(xù)培養(yǎng) 4 周，無(wú)法促進(jìn)

26、鱗莖抽莖，這說(shuō)明培養(yǎng)基中某種養(yǎng)分或者外植體對(duì)鱗莖抽莖是必要的12。王月芳等對(duì)百合研究表明高溫明顯抑制鱗片誘導(dǎo)再生苗形成，但對(duì)不定芽的發(fā)生有促進(jìn)作用15。1.2.5 光照條件對(duì)試管鱗莖生長(zhǎng)的影響傅玉蘭等研究結(jié)果表明，培養(yǎng)期間的光照強(qiáng)度和鱗莖增殖率并未呈現(xiàn)明顯的相關(guān)性。而且 1 500 lx 的光照強(qiáng)度和 2300 lx 的光照強(qiáng)度對(duì)百合試管鱗莖的增殖效果基本一樣，對(duì)試管鱗莖增殖的影響比較微弱，在 5002 300 lx 之間的光照強(qiáng)度圍，光照強(qiáng)弱對(duì)試管鱗莖增殖的影響差異不明顯28。朱旭東等對(duì)百合試管鱗莖進(jìn)行低溫處理，隨著溫度的降低，鱗莖大小增長(zhǎng)幅度也明顯下降，溫度低于 0時(shí)，鱗莖停止生長(zhǎng)。其結(jié)果

27、表明，百合試管鱗莖最佳保存溫度為-1，但實(shí)際操作中可以選擇5，適當(dāng)繼代培養(yǎng)，可持續(xù)保存；從栽培后鱗莖的生長(zhǎng)勢(shì)看，低溫處理對(duì)組培苗的生長(zhǎng)有十分重要的影響，最有利于其生長(zhǎng)的是 8 周、5，次之是 12 周、10，其他溫度都不太利于組培苗的生長(zhǎng)29。Lim 等的研究表明每天 16h 的光照可形成較多的小鱗莖，而連續(xù)黑暗培養(yǎng)可促進(jìn)鱗莖的迅速長(zhǎng)大30。Park 等的研究表明對(duì)鱗莖生長(zhǎng)最適宜的光周期和光照強(qiáng)度分別是 24h 的光照和 2500-5000 lux 的光照強(qiáng)度31。Kumar 等研究認(rèn)為鱗莖在連續(xù)的光照中比在黑暗中形成的數(shù)量多，連續(xù)的黑暗刺激了鱗莖鮮重，且再生的鱗莖都不產(chǎn)生葉片32。1.3 百

28、合鱗莖研究進(jìn)展1.3.1 百合休眠的概念休眠（dormancy）是一個(gè)復(fù)雜的生理過(guò)程，它是指任何含有分生組織的植物結(jié)構(gòu)其可見(jiàn)生長(zhǎng)速度下降或暫停的現(xiàn)象，以利植物抵御外界干旱、低溫或高溫危害的. . . . 4 / 46一種狀態(tài)；是植物在進(jìn)化中形成的一種對(duì)環(huán)境條件和季節(jié)性氣候變化的生物學(xué)適應(yīng)和馴化的結(jié)果33-36。百合在離體培養(yǎng)過(guò)程中隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)會(huì)逐漸進(jìn)入休眠狀態(tài)，休眠后鱗莖的生長(zhǎng)并不停止，休眠的誘導(dǎo)與生長(zhǎng)原基的發(fā)育變化有關(guān)，休眠形成后鱗莖的生長(zhǎng)原基只發(fā)育成鱗片，而不會(huì)發(fā)育成鱗片葉。通常將有生活力的百合試管鱗莖在未經(jīng)低溫處理的情況下種于田間，以它的萌發(fā)率作為休眠程度的的判斷標(biāo)準(zhǔn)，萌發(fā)率越高，

29、說(shuō)明休眠程度越淺，反之則越深33。1.3.2 百合鱗莖休眠形成的研究1.3.2.1 蔗糖濃度對(duì)鱗莖休眠形成的影響海濤報(bào)道，Aguettazetal 等對(duì)L.speciosum Thunb.研究發(fā)現(xiàn)，蔗糖濃度小于30g/L-1時(shí)，試管鱗莖休眠程度很淺，蔗糖濃度大于 30g/L-1時(shí)，百合試管鱗莖休眠程度與 30g/L-1時(shí)相似，高濃度蔗糖加深休眠可能是因?yàn)榕囵B(yǎng)基中蔗糖濃度過(guò)高導(dǎo)致培養(yǎng)基中水勢(shì)下降，迫使試管鱗莖細(xì)胞失水形成逆境生理，從而形成脫落酸（ABA） ，ABA 進(jìn)而促使鱗莖進(jìn)入休眠狀態(tài)33。1.3.2.2 激素對(duì)百合鱗莖休眠形成的影響目前人們普遍認(rèn)為植物的休眠是由植物源激素所控制的，是源抑制

30、物和促進(jìn)物之間平衡的結(jié)果37。Aung 的研究證實(shí)，各種鱗莖植物在鱗莖發(fā)育的特殊階段發(fā)生著與溫度相聯(lián)系的激素的出現(xiàn)含量變化，目前已經(jīng)提取出來(lái)并被證實(shí)的有：赤霉素、細(xì)胞分裂素、脫落酸、生長(zhǎng)素和乙烯等38。氟啶酮（Fluridone）是源脫落酸（Abscisic acid，ABA）合成的抑制劑。在百合組培的試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)基中加入脫落酸不影響組培小鱗莖的休眠狀態(tài)，但加入氟啶酮可以有效抑制鱗莖的休眠，若同時(shí)加入脫落酸，F(xiàn)luridone 的這種作用會(huì)被逆轉(zhuǎn)，外源 ABA 在 15C、20C、25C 條件下不會(huì)促進(jìn)休眠的形成，說(shuō)明一定量的源 ABA 是休眠形成的必要因素39。具有鱗片葉的試管鱗莖源

31、ABA 含量要比不生鱗片葉的高，外植體中源 ABA 的含量要比它上面著生的試管鱗莖的含量高，源 ABA 的含量隨著試管鱗莖的培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)而增加，這種增加可能是從鱗片外植體的吸收而來(lái)的39。M.M. Langens-Gerrits 研究發(fā)現(xiàn)，ABA 在 20C 條件下會(huì)加深 Star Gazer, C. King 和Snow Queen的休眠，但對(duì)L. speciosum Thunb 沒(méi)有作用。Star Gazer在 15C 條件下， Snow Queen在 30C 條件下都不形成休眠，在此條件下加入外源 ABA 對(duì)休. . . . 5 / 46眠沒(méi)有影響。說(shuō)明，外源 ABA 只會(huì)加深由溫度引起

32、的休眠，但是在不能誘導(dǎo)休眠形成的溫度條件下（Star Gazer15C， Snow Queen30C）外源 ABA 對(duì)休眠沒(méi)有促進(jìn)作用13。1.3.2.3 溫度對(duì)百合鱗莖休眠形成的影響溫度是誘發(fā)和控制休眠最重要的環(huán)境因素35。對(duì)L. speciosum Thunb 的研究發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)溫度對(duì)試管鱗莖休眠的形成有重要影響，15C 幾乎不會(huì)誘導(dǎo)休眠，25C 會(huì)促進(jìn)休眠加深40。不同基因型百合，對(duì)溫度的感應(yīng)并不一樣。對(duì)溫度的不同反應(yīng)，反映了不同基因型百合源產(chǎn)地的氣候差異，對(duì)L. speciosum Thunb，鐵炮百合L. longiflorum Thunb， Star Gazer ， C.king和

33、Snow Queen的研究發(fā)現(xiàn)，在 20、25時(shí)，試管鱗莖都會(huì)形成休眠，除此之外， Snow Queen在15的低溫條件下也會(huì)形成休眠，且隨著溫度的升高休眠程度變淺， C.king百合在 30的高溫條件下也會(huì)形成休眠。 Star Gazer逐漸進(jìn)入休眠狀態(tài)（10 周） ，Snow Queen進(jìn)入休眠很快（6 周）41。對(duì)L. speciosum Thunb 的研究發(fā)現(xiàn)，鱗莖是逐漸進(jìn)入休眠的，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)休眠程度逐漸加深，而且隨著溫度的升高鱗莖進(jìn)入休眠的時(shí)間越快，在 25培養(yǎng) 4 周的試管鱗莖經(jīng)過(guò)低溫處理與未經(jīng)過(guò)低溫處理在田間的萌發(fā)率一樣，但是隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，未經(jīng)低溫處理的鱗莖萌發(fā)率逐

34、漸降低直至 0，在 20培養(yǎng)的鱗莖在 8 周后萌發(fā)率才達(dá)到最大值，在 15下培養(yǎng)的鱗莖萌發(fā)率從一開(kāi)始就不斷增長(zhǎng)，直到 70保持不變。從溫度和培養(yǎng)時(shí)間對(duì)休眠形成的影響看，百合試管鱗莖需要在 15-20以上一定的熱量積累休眠才能形成42-43。1.3.2.4 光照對(duì)百合鱗莖休眠形成的影響在自然條件下，多數(shù)植物的冬季休眠的誘導(dǎo)因子是短日照，短日照有利于冬季休眠的球根植株地下貯藏器官的形成，加速鱗莖進(jìn)入休眠。光照對(duì)于休眠的作用主要發(fā)生在鱗莖的生長(zhǎng)發(fā)育階段，在采收后的影響未見(jiàn)報(bào)道。部分學(xué)者研究了短日照誘導(dǎo)休眠的機(jī)理，可能是短日照下，葉片產(chǎn)生抑制物質(zhì)，并從葉片上轉(zhuǎn)移到鱗莖的生長(zhǎng)點(diǎn)所導(dǎo)致的44。光照會(huì)影響

35、Snow Queen的休眠形成，光照 16h，黑暗 8h 要比黑暗條件下萌發(fā)率高得多（分別是 80，58） ，但光照對(duì)L. speciosum Thunb 的休眠沒(méi)有影響13。. . . . 6 / 461.3.3 百合鱗莖休眠解除的研究1.3.3.1 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)鱗莖休眠解除的影響一般認(rèn)為在球根休眠導(dǎo)入過(guò)程中，抑制生長(zhǎng)的激素增加，休眠解除過(guò)程中促進(jìn)生長(zhǎng)的激素增加。各類植物激素對(duì)于休眠的作用不是獨(dú)立的，他們之間表現(xiàn)出復(fù)雜的互作關(guān)系。在百合低溫貯藏期間，ABA、ZR 含量隨著貯藏溫度降低呈現(xiàn)為下降趨勢(shì)，GA3含量則呈現(xiàn)為上升趨勢(shì)，各種激素濃度的變化與與休眠的解除有密切的相關(guān)性45-46。紅梅

36、通過(guò)對(duì)百合鱗莖低溫解除休眠中物質(zhì)代的相關(guān)性研究發(fā)現(xiàn)，源 ABA 是抑制頂芽不能萌發(fā)的主要因子。ABA 和 GA3共同調(diào)節(jié)了百合鱗莖的休眠。3 種促進(jìn)生長(zhǎng)的源激素 GA3、ABA、ZR 在低溫處理過(guò)程中都有升高過(guò)程，但 ZR 和 IAA 對(duì)促進(jìn)百合鱗莖萌發(fā)的貢獻(xiàn)率較小47-51。生長(zhǎng) 14 周的試管鱗莖用赤霉素（GA3）浸泡 4h，10 周后萌發(fā)率達(dá)到 88%，GA3處理后的鱗莖要比低溫處理的鱗莖提前 1 周萌發(fā)，比 Fluridone 處理的鱗莖提前 2 周萌發(fā)。低溫處理后的試管鱗莖會(huì)新形成白色鱗片，24 周后增重，但是經(jīng) GA3和 Fluridone處理過(guò)的鱗莖雖然萌發(fā)，卻沒(méi)有新鱗片生成，老

37、鱗片萎縮，干枯，鱗莖不增重。GA3有解除休眠的作用但是卻無(wú)法像低溫處理一樣使鱗莖的淀粉轉(zhuǎn)化成糖13。1.3.3.2 低溫處理對(duì)百合鱗莖休眠解除的影響低溫處理是打破百合鱗莖休眠最有效的方法52。研究認(rèn)為，低溫是個(gè)外界環(huán)境信號(hào)，植物接受到信號(hào)誘導(dǎo)后進(jìn)入休眠狀態(tài)，隨著低溫的積累，植物漸漸進(jìn)入源休眠的中期，當(dāng)?shù)蜏胤e累達(dá)到一定程度時(shí)，植物部產(chǎn)生一系列生理生化變化，進(jìn)入休眠的后期，這些變化達(dá)到一定水平，植物便打破休眠開(kāi)始生長(zhǎng)53-56。琳等對(duì)白天使 、 普瑞頭 、 索邦 、 西伯利亞百合大鱗莖進(jìn)行低溫處理發(fā)現(xiàn)，-2只能延長(zhǎng)種球的休眠，使種球一直保持處理前的生理狀態(tài)，但白天使有萌芽現(xiàn)象。而2既可打破休眠又可

38、延長(zhǎng)休眠，具有雙重效應(yīng)，這取決于種球采挖時(shí)其部生理狀況，7只對(duì)打破休眠有效。15處理四種百合鱗莖均未萌發(fā)57。羅麗蘭等報(bào)道，在組織培養(yǎng)中，低溫（15）下所形成的百合子鱗莖無(wú)休眠或休眠比較淺，而在較高溫度下組培形成的百合小鱗莖休眠程度較深52。毅等研究表明，無(wú)論是組培獲得的百合鱗莖，還是種間雜交種的鱗莖，或者其他繁殖方法獲得的鱗莖，均可在013處理 30110d 打破休眠58。很多組織培養(yǎng)的作物都處于休眠狀態(tài)，球根作物在組織培養(yǎng)時(shí)產(chǎn)生的小鱗莖通常也處于休眠狀態(tài)，通過(guò)環(huán)境刺激通常可以解除休眠，110C 的低溫可以解除百合試管鱗莖的休眠59。組培生產(chǎn)的小鱗莖，在不同低溫處理不同時(shí)間，小鱗莖萌發(fā)的數(shù)量

39、、遲早差異很大，而且在同種低溫處理下，. . . . 7 / 46隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)，萌發(fā)的時(shí)間也相應(yīng)提前，整齊度也相應(yīng)提高60。在實(shí)際生產(chǎn)中，常利用低溫、變溫處理適當(dāng)?shù)臅r(shí)間來(lái)打破百合鱗莖的休眠61-63。許多研究證明，鱗莖植物在低溫作用下，外觀上幾乎沒(méi)有形態(tài)和結(jié)構(gòu)的變化，但鱗莖中發(fā)生著復(fù)雜的生理生化變化44。百合鱗莖貯藏著大量的碳水化合物為以后生長(zhǎng)所利用。在低溫作用下淀粉等貯藏態(tài)碳水化合物開(kāi)始轉(zhuǎn)化，貯藏于0下的百合鱗莖積累更多的可溶性糖。當(dāng)鱗莖貯藏于1時(shí)，將有大量的蔗糖積累，而淀粉作為蔗糖合成的主要碳源，在貯藏過(guò)程中將相應(yīng)得減少；貯藏于4時(shí)，鱗莖的碳水化合物改變較少，但其變化仍舊趨向于可溶性

40、糖含量增加，淀粉含量減少64-70。在低溫處理期間，鱗莖發(fā)生“低溫糖化”作用，主要貯藏物質(zhì)，淀粉水解，而可溶性碳水化合物則累積增多71-74。，紅梅等以百合為材料，對(duì)不同貯藏溫度下不同部位的鱗片，進(jìn)行淀粉的測(cè)定，并研究了其與鱗莖萌發(fā)之間的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)鱗莖不同部位（層、中層、外層鱗片，鱗莖盤，短縮芽等）淀粉含量存在明顯差異；不同部位的鱗片的淀粉含量隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)而下降，其中，中部鱗片在貯藏的101d下降了50左右，同時(shí)，溫度越低，越有利于鱗片中淀粉的降解；貯藏67天后淀粉含量不再有明顯的變化55。涂淑萍等研究得出，亞洲百合雜種系的黃寶貝(Yellow Baby)，鐵亞雜交種系的達(dá)諾(Ceb D

41、azzle)，百合雜種系的卡薩布蘭卡(CasaBlanca)也有類似報(bào)道，發(fā)現(xiàn)它們?cè)诶洳靥幚沓跗诘?7d，淀粉含量迅速下降，37d后淀粉含量變化比較平緩，并且期間都存在淀粉含量上升的過(guò)程50。管畢財(cái)?shù)劝l(fā)現(xiàn)，龍牙百合在休眠過(guò)程中還原糖含量增加，在低溫處理40d時(shí)達(dá)到最大值，發(fā)芽后還原糖含量急劇下降75-80。從百合鱗莖不同部位來(lái)看，紅梅等發(fā)現(xiàn)，頂芽的可溶糖含量在貯藏初期的34d達(dá)到最大值，其次是鱗莖盤55。涂淑萍等研究認(rèn)為，低溫貯藏期間，鱗莖的淀粉酶（淀粉酶和 淀粉酶）活性增加，可溶性糖主要是蔗糖含量增加，淀粉酶的活性與糖分的積累呈正相關(guān)?？扇苄蕴堑姆e累對(duì)于百合鱗莖的萌發(fā)與初期的生長(zhǎng)具有重要的作

42、用50 81-82。紅梅等，在百合的研究中發(fā)現(xiàn)，鱗莖的游離氨基酸主要集中在頂芽、層鱗片和鱗莖盤等相對(duì)幼嫩的器官中，并且在貯藏前期 34d 發(fā)生明顯變化，其中谷氨酸族的氨基酸在鱗莖代中起重要作用。在此期間，鱗莖的休眠雖未完全解除，但是頂芽在鱗莖迅速伸長(zhǎng)和增粗，說(shuō)明氨基酸含量變化與鱗莖休眠的逐步解除有關(guān)，是為鱗莖萌發(fā)進(jìn)行的生理準(zhǔn)備83。紅梅等在研究百合低溫貯藏期間酚類物質(zhì)含量的變化中發(fā)現(xiàn)，酚類物質(zhì)含量呈增加趨勢(shì)，而且發(fā)芽鱗莖的酚類物質(zhì)含量極顯著高于休眠鱗莖，在此期間，頂芽在鱗莖迅速伸長(zhǎng)和增粗，表明酚類物質(zhì)在百合鱗莖中并不屬于發(fā)芽抑制物質(zhì)84-85。用. . . . 8 / 46適當(dāng)濃度的赤霉素處理

43、某些百合鱗莖一定的時(shí)間，可打破其休眠，甚至可以代替低溫處理的春化作用52。植物源赤霉素的變化很復(fù)雜，如美麗百合的鱗莖在 15低溫處理的 60d，其赤霉素類物質(zhì)急劇下降，而這個(gè)溫度下對(duì)于打破休眠、促進(jìn)萌發(fā)非常有效；相反，在 21處理 60d，赤霉素類物質(zhì)含量卻增加，這說(shuō)明百合鱗莖的休眠狀態(tài)不單是由赤霉素物質(zhì)含量和水平?jīng)Q定的，可能是多種萌發(fā)抑制物綜合調(diào)控的44。益虹研究了百合褐變與 PPO(多酚氧化酶)，POD(過(guò)氧化物酶)活性變化的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)百合在貯藏過(guò)程中褐變與 PPO、POD 活性變化均趨于上升，且褐變度的變化規(guī)律與 PPO、POD 活性呈現(xiàn)為正相關(guān)。百合不同鱗片層的 PPO、POD 活性差

44、異較大，外 2層的活性明顯低于 3 層。百合組織的 PPO 和 POD 參與了褐變過(guò)程且 POD 活性變化是引起百合褐變的主要因素86-87。近年來(lái)許多研究者報(bào)道了一些其它生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)于鱗莖解除休眠的作用。如 Me-JA 能降低組培產(chǎn)生的百合小鱗莖的休眠程度，在高濃度的 Me-JA 環(huán)境中再生的小鱗莖不經(jīng)過(guò)低溫處理的萌發(fā)率隨著 Me-JA 的濃度上升而增高88。1.4 百合產(chǎn)業(yè)化發(fā)展現(xiàn)狀1.4.1 百合產(chǎn)業(yè)的國(guó)外市場(chǎng)現(xiàn)狀百合是一種重要的球根觀賞花卉，具有種類多，花期長(zhǎng)，花大艷麗，姿態(tài)優(yōu)美，色香各異，清雅脫俗等優(yōu)點(diǎn)，適宜大片栽植或叢植于疏林下，草坪邊、高臺(tái)畔、圍墻邊，也可做花壇，花境或綠籬材料，

45、還可盆栽種于庭院里；百合也是世界上重要的切花之一，是近年來(lái)國(guó)際市場(chǎng)上最暢銷的花卉種類之一。根據(jù)世界糧農(nóng)組織(CAFO)統(tǒng)計(jì)，近十年來(lái)，世界花卉消費(fèi)額平均增長(zhǎng)10%15%，花卉出口總額增加了 4 倍，世界圍花卉消費(fèi)額在 2001 年已接近 2000 億美元。資料還顯示，大多數(shù)發(fā)達(dá)國(guó)家花卉需求增長(zhǎng)迅速，需求大于生產(chǎn)量，總消費(fèi)額大于生產(chǎn)額，缺口要依賴其它生產(chǎn)國(guó)，花卉消費(fèi)也將不斷擴(kuò)大。以鮮切花為例，中國(guó)鮮切花消費(fèi)從 19841994 年，年均遞增 37%；近幾年來(lái)，年均遞增速度更高達(dá)60%，表現(xiàn)為低基數(shù)上的加速發(fā)展態(tài)勢(shì)89，因此可以預(yù)料，中國(guó)將會(huì)成為世界上最具潛力的花卉消費(fèi)與生產(chǎn)的大市場(chǎng)。目前，百合是

46、繼世界五大切花(月季、香石竹、菊花、唐菖蒲、非洲菊)之后的一支新秀，在國(guó)際花卉市場(chǎng)上，百合以其美麗的花姿和吉祥的寓意長(zhǎng)期走俏，歷久不衰。在世界圍，百合花的生產(chǎn)和消費(fèi)一直處于高速發(fā)展的態(tài)勢(shì)。按種植面積統(tǒng)計(jì)，2000 年世界圍百合種球生產(chǎn)主要國(guó)家依次是：荷蘭(4200hm2)，法國(guó)(420 hm2)、日本(240 hm2)、智利(135 hm2)、美國(guó)與加拿大(205 hm2)與新西蘭(7o hm2)。從19902000 年的 10 年間，百合種植面積的凈增倍數(shù)分別為：荷蘭 2.5 倍，法國(guó) 13. . . . 9 / 46倍，新西蘭 16 倍，智利 15 倍。以荷蘭為代表的歐洲，是百合種球生產(chǎn)的

47、中心，相比之下，我國(guó)百合種球生產(chǎn)面積不足 60 hm2。而在著名的花卉王國(guó)荷蘭，百合種植面積 1960 年僅為 110 hm2擴(kuò)，到 2000 年發(fā)展到 4200 hm2，栽植面積擴(kuò)大了 38倍之多。目前，荷蘭的百合生產(chǎn)面積在球根花卉生產(chǎn)中僅次于郁金香名列第二位，年產(chǎn)百合種球 25 億頭，其中 70%以上供出口，給荷蘭花卉業(yè)帶來(lái)了豐厚的利潤(rùn)，國(guó)近年來(lái)百合的生產(chǎn)和消費(fèi)也逐步增長(zhǎng)，據(jù)國(guó) 1993 年統(tǒng)計(jì)，從荷蘭進(jìn)口的百合鱗莖共約 3810 萬(wàn)個(gè)，合 197 萬(wàn)美元，生產(chǎn)的百合主要出口日本，切花百合生產(chǎn)是國(guó)花卉生產(chǎn)中效益最好的一種。但這些種球卻遠(yuǎn)遠(yuǎn)沒(méi)有滿足其它國(guó)家對(duì)百合種球的需求，僅我國(guó)一年就從荷蘭

48、與日本進(jìn)口 1 億多只百合種球，并且預(yù)計(jì)，這種需求在今后將呈顯著的增長(zhǎng)趨勢(shì)。1.4.2 我國(guó)切花百合和鱗莖生產(chǎn)技術(shù)發(fā)展現(xiàn)狀隨著百合需求量的增加，對(duì)傳統(tǒng)的百合生產(chǎn)提出了更高、更新的要求，加速優(yōu)良品種培育與生產(chǎn)成了當(dāng)務(wù)之急。百合種球的繁育技術(shù)雖然日漸成熟，但其速度慢，繁殖系數(shù)低等缺點(diǎn)還是制約了百合鱗莖和切花的大規(guī)模生產(chǎn)。所以世界上許多國(guó)家紛紛著手進(jìn)行百合的組織培養(yǎng)，由于百合的切花品種具有引人注目的顏色和形態(tài)，同時(shí)還具有抗病性、耐插性和高產(chǎn)性，商業(yè)價(jià)值大，因此，國(guó)外大多數(shù)學(xué)者進(jìn)行組織培養(yǎng)研究的主要對(duì)象是切花百合類，現(xiàn)在許多百合生產(chǎn)基地均已經(jīng)或開(kāi)始采用組織培養(yǎng)來(lái)生產(chǎn)大量的脫毒苗，用以生產(chǎn)實(shí)踐已獲得了較

49、好的經(jīng)濟(jì)效益。目前，大量生產(chǎn)的切花有三類，即亞洲百合系列、百合系列、路香百合系列。百合種系由天香百合、黃藥百合、少女百合等雜交而成，因其花色艷麗，色彩豐富，具較高的觀賞價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，為百合中的名貴種類，深受人們的歡迎，在近年來(lái)的切花百合生產(chǎn)中越來(lái)越占有較大的比重，在國(guó)外市場(chǎng)上需求量很大，市場(chǎng)價(jià)格是亞洲百合的 12 倍，其種苗供不應(yīng)求，成為市場(chǎng)最受歡迎的高檔切花品種之一。目前荷蘭是世界百合種球與切花生產(chǎn)的主產(chǎn)國(guó)，也是近數(shù)十年在球根花卉中發(fā)展最快的花卉，20 世紀(jì) 8090 年代百合的地位在球根花卉中己上升到第二位，近年來(lái)荷蘭百合的生產(chǎn)量己超過(guò)亞洲百合與鐵炮百合。在百合花卉產(chǎn)業(yè)發(fā)展先進(jìn)的國(guó)家如荷

50、蘭、法國(guó)、日本等，他們有著較長(zhǎng)的栽培歷史和完善的科學(xué)研究體系，使得相應(yīng)產(chǎn)業(yè)早己達(dá)到了工業(yè)化的程度，而我國(guó)百合切花生產(chǎn)發(fā)展的晚一些。雖然、#等地區(qū)有一定的栽培規(guī)模，但產(chǎn)量少，主要供應(yīng)本地區(qū)和國(guó)市場(chǎng)，而且栽培技術(shù)、切花質(zhì)量和保鮮技術(shù)方面與國(guó)外相比均存在較大的差距。長(zhǎng)期以來(lái)，我國(guó)百合尤其是系百合(Liium Orineatl Hybrdis)的商品種球一直依賴進(jìn)口。由于國(guó)外品種并不是專為中國(guó)所育，即便是同一品種的種球，. . . . 10 / 46由于產(chǎn)地不同，休眠程度也不同。比如球根花卉的主產(chǎn)國(guó)荷蘭屬于典型的地中海氣候，而中國(guó)屬于大陸東岸型氣候，在這兩種氣候型下植株本身的生長(zhǎng)規(guī)律有較大差異。故進(jìn)口

51、百合鱗莖在次年往往出現(xiàn)退化現(xiàn)象，如此種球又得進(jìn)口。另外，百合的生長(zhǎng)周期較長(zhǎng)，生產(chǎn)技術(shù)復(fù)雜，花期控制難度大，造成生產(chǎn)成本較高。我國(guó)百合種球生產(chǎn)尚處于探索階段，由于受氣候條件，繁育技術(shù)等方面的限制，普遍存在種球退化，繁殖系數(shù)低，促成栽培效果較差的問(wèn)題。我國(guó)至今沒(méi)有一家企業(yè)或生產(chǎn)基地能夠進(jìn)行百合商品種球的規(guī)?；a(chǎn)。而據(jù)調(diào)查，估計(jì)在今后的 5 到 10年，我國(guó)花卉市場(chǎng)的百合銷量將會(huì)呈顯著的上升趨勢(shì)。1.5 研究目的與意義我國(guó)在 90 年代初開(kāi)展百合引進(jìn)鮮切花的商品化種植和相關(guān)的研究工作，在鮮切花生產(chǎn)、新品種選育和種球鱗片扦插繁殖技術(shù)研究方面開(kāi)展了較多研究工作，并取得較大進(jìn)展，但是到目前為止，我國(guó)用于

52、切花生產(chǎn)的百合品種全部是國(guó)外品種，生產(chǎn)用種球 80%以上依靠進(jìn)口，百合種球繁育技術(shù)嚴(yán)重滯后89。要實(shí)現(xiàn)種球國(guó)產(chǎn)化還有較遠(yuǎn)的路要走，還需在繁育關(guān)健技術(shù)有新的突破，特別是原種繁育中試管鱗莖高效生產(chǎn)技術(shù)和試管鱗莖休眠生理方面有待進(jìn)一步開(kāi)展深入的研究。要想改變這種對(duì)國(guó)外種球的依賴，只有加快國(guó)百合鱗莖的生產(chǎn)技術(shù)的研究，建立國(guó)產(chǎn)化種球生產(chǎn)技術(shù)，提升國(guó)百合種球生產(chǎn)技術(shù)和質(zhì)量，才能逐步緩解對(duì)國(guó)外種球的依賴。本研究以百合雜交后代為試驗(yàn)材料，一方面研究植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件對(duì)試管鱗莖生長(zhǎng)發(fā)育的影響，另一方面研究試管鱗莖的貯藏生理與影響因素，以完善百合試管鱗莖培育與貯藏技術(shù)，進(jìn)一步為試管鱗莖生產(chǎn)提供技術(shù)指

53、導(dǎo)和理論依據(jù)。通過(guò)本試驗(yàn)篩選出百合試管鱗莖生長(zhǎng)最佳的條件，獲得高效的試管鱗莖生產(chǎn)技術(shù)；檢測(cè)試管鱗莖體的生理變化，以與栽植后生長(zhǎng)發(fā)育狀況的跟蹤觀察，以求獲得出一種最佳的試管鱗莖貯藏技術(shù)。從而得出最佳百合試管鱗莖生產(chǎn)技術(shù)。2 云霞百合試管鱗莖生長(zhǎng)的研究2.1 材料與方法2.1.1 試驗(yàn)材料本試驗(yàn)在#省農(nóng)業(yè)科學(xué)院花卉研究所進(jìn)行。以#省農(nóng)業(yè)科學(xué)院花卉研究所培育的系百合新品種云霞（附圖 1）的試管鱗莖為試驗(yàn)材料。. . . . 11 / 462.1.2 主要試劑與儀器設(shè)備試劑：MS 培養(yǎng)基各基本成分、蔗糖、IBA、NAA、6-BA。儀器設(shè)備：精確度 0.001g 的電子稱、超凈工作臺(tái)、組培室與其相關(guān)設(shè)施

54、和設(shè)備。2.1.3 試驗(yàn)材料處理在超凈工作臺(tái)上選取單粒均重在 0.0860.008g 之間、生長(zhǎng)健壯、無(wú)變異、鱗莖盤無(wú)損傷的試管鱗莖叢生芽作為接種材料。將選好的叢生芽體接種于以下不同處理的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，每瓶放 6 個(gè)小鱗莖，每組 10 瓶，在（252)下連續(xù)黑暗培養(yǎng)，每 4 周繼代一次,16 周后統(tǒng)計(jì)結(jié)果。蔗糖處理：在繼代培養(yǎng)基 MS+瓊脂 6.5g/L+活性炭 0.4g/L+IBA1.0mg/L 中，分別添加 0（對(duì)照） ，30，60，90,120g/L 蔗糖。NAA 處理：以 MS+瓊脂 6.5g/L+活性炭 0.4g/L+蔗糖 60g/L 中，分別添加 0（對(duì)照） ，0.2，0.5，1.

55、0，2.0mg/L NAA。改良 MS 濃度處理：1/2MS（對(duì)照） ，MS，2MS 為梯度，并同時(shí)加入瓊脂 6.5g/L+活性炭 0.4g/L+IBA1.0mg/L+蔗糖 60g/L。2.1.4 觀測(cè)指標(biāo)與測(cè)量方法鱗莖的鮮重:從培養(yǎng)基中取出誘導(dǎo)的小鱗莖,剪去葉片和根,稱鮮重。鱗莖的直徑:用游標(biāo)卡尺測(cè)量小鱗莖的最大直徑和最小直徑，用三次測(cè)量的平均值作為觀測(cè)結(jié)果。初始單芽鮮重=接種單芽后培養(yǎng)基與瓶的總質(zhì)量-未接種前的培養(yǎng)基與瓶的總質(zhì)量。鱗莖的增大倍數(shù)=最終形成鱗莖鮮重/初始單芽鮮重。2.1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析本試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理采用 DPS 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，差異顯著性測(cè)驗(yàn). . . . 12 / 4

56、62.2 結(jié)果與分析2.2.1 蔗糖濃度對(duì)云霞百合試管鱗莖生長(zhǎng)的影響表 1 蔗糖濃度對(duì)云霞百合試管鱗莖鱗生長(zhǎng)的影響Table 1The effects of sucrose concentration on the growth of Yunxia Lily bulblets in vitro蔗糖濃度/gL-1Concentrationof sucrose初始鱗莖鮮重mgFresh weight per bulblet16 周鱗莖直徑 cmDiameter of bulblet16 周鱗莖鮮重mgFresh weight per bulblet16 周鱗莖增大倍數(shù)Multiple bulble

57、ts swelling0（CK）96.671.410.550.07c100.211.49c1.043085.830.760.680.15b193.965.58b2.266095.830.430.710.20a323.217.39a3.379088.131.130.790.24a374.7550.89a4.2512098.751.610.760.22a334.1724.52a3.38注：同一列中，不同小寫字母表示差異顯著(P90 g/L 時(shí)，鱗莖的直徑和鮮重有所下降，而且變異率明顯增高（附圖 2）。因此，從經(jīng)濟(jì)、高效的角度考慮，應(yīng)選擇蔗糖濃度 60 g/L 為宜。2.2.2 NAA 濃度對(duì)云霞百

58、合試管鱗莖生長(zhǎng)的影響由表 2 可以看出在不同質(zhì)量濃度的 NAA 培養(yǎng)基中，鱗莖的膨大率發(fā)生了明顯的. . . . 13 / 46差異，其中 NAA 質(zhì)量濃度為 2.0g/L 時(shí)，鱗莖的膨大率最小，最小的試管鱗莖直徑僅有 0.45cm，平均直徑為 0.68cm；在 NAA 濃度為 1.0g/L 時(shí)，鱗莖的膨大率最高，為種植前的 7 倍，NAA 濃度小于 1.0g/L 時(shí)，鱗莖的膨大率有所下降，但依然比 NAA 濃度為 2.0g/L 時(shí)高。說(shuō)明相對(duì)較低濃度的 NAA 有利于試管鱗莖的膨大，在本試驗(yàn)中，NAA 濃度在 1.0g/L 時(shí)，對(duì)鱗莖的膨大最有效。表 2 NAA 濃度對(duì)云霞百合試管鱗莖鱗生長(zhǎng)

59、的影響Table 2The effects of NAA concentration on the growth of Yunxia Lily bulblets in vitroNAA 濃度g/L-1Concentrationof NAA初始鱗莖鮮重mgFresh weight per bulblet16 周鱗莖直徑cmDiameter of bulblet16 周鱗莖鮮重mgFresh weight per bulblet16 周鱗莖增大倍數(shù)Multiple bulblets swelling0.274.660.520.690.03b403.161.06bC5.40.576.670.920.

60、720.04b 480.031.25bAB 5.61.085.720.750.860.06a536.692.11aA7.02.088.041.130.680.04b457.811.94bBC5.2注：同一列中，不同大寫字母表示差異極顯著(P中部鱗片外部鱗片，這與涂淑萍12用Casa Blanca等品種試驗(yàn)的結(jié)果一致。本研究在4貯藏時(shí)，碳水化合物的代比-1明顯活躍，而紅梅3在2，7，13貯藏百合大球時(shí)結(jié)論為：不同部位鱗片的淀粉含量隨著貯藏溫度的降低而下降，貯藏溫度越低，越有利于鱗片中淀粉的盡早降解。兩者結(jié)果不一致，同時(shí)，本研究還通過(guò)田間試驗(yàn)萌芽試驗(yàn)也驗(yàn)證4貯藏優(yōu)于-1。此外，在-1和4貯藏時(shí)不同