水中菌落總數(shù)測定

1、動物檢疫檢驗技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫水中菌落總數(shù)測定水中菌落總數(shù)測定 能力目標(biāo)：能力目標(biāo)： 掌握生活飲用水菌落總數(shù)的測定方法掌握生活飲用水菌落總數(shù)的測定方法 掌握水源水菌落總數(shù)的測定方法掌握水源水菌落總數(shù)的測定方法 判定水被細菌污染的程度和水的衛(wèi)生質(zhì)量判定水被細菌污染的程度和水的衛(wèi)生質(zhì)量動物檢疫檢驗技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫水中菌落總數(shù)測定水中菌落總數(shù)測定水中菌落總數(shù)的測定 檢驗依據(jù)：GB/T5750.12-2006 方法：平皿計數(shù)法動物檢疫檢驗技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫水中菌落總數(shù)測定水中菌落總數(shù)測定實驗內(nèi)容實驗內(nèi)容1 1培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基制備2 2水樣稀釋與接種水樣稀釋與接種3 3結(jié)果分析與報告結(jié)果分析與報告動物

2、檢疫檢驗技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫水中菌落總數(shù)測定水中菌落總數(shù)測定實驗器材實驗器材 水樣1、4號號自來水自來水2、5號號水源水（養(yǎng)殖場）水源水（養(yǎng)殖場）3、6號號桶裝水桶裝水 培養(yǎng)基 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基動物檢疫檢驗技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫水中菌落總數(shù)測定水中菌落總數(shù)測定實驗器材實驗器材 設(shè)備、器材 無菌工作臺、無菌工作臺、酒精燈酒精燈、滅菌滅菌吸管吸管、滅菌試管滅菌試管、稀釋液稀釋液、滅菌平皿滅菌平皿、恒溫、恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)箱、高高壓蒸汽滅菌器、菌落計數(shù)器、壓蒸汽滅菌器、菌落計數(shù)器、天平、電爐等天平、電爐等動物檢疫檢驗技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫水中菌落總數(shù)測定水中菌落總數(shù)測定實驗操作實驗操作 生活飲用水 用

3、滅菌吸管吸取用滅菌吸管吸取1mL充分混勻的水樣，注入滅菌平皿中充分混勻的水樣，注入滅菌平皿中 水源水 吸取吸取1ml充分混勻的水樣，注入盛有充分混勻的水樣，注入盛有9ml滅菌生理鹽水的滅菌生理鹽水的試管中，混勻制成試管中，混勻制成1 : 10稀釋液稀釋液 吸取吸取1 : 10的稀釋液的稀釋液1ml注入盛有注入盛有9mL滅菌生理鹽水的試滅菌生理鹽水的試管中，混勻制成管中，混勻制成1 ：100稀釋液稀釋液動物檢疫檢驗技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫水中菌落總數(shù)測定水中菌落總數(shù)測定 按同法依次稀釋成按同法依次稀釋成1: 1000 , 1: 10000稀釋液等備用稀釋液等備用 根據(jù)對水樣污染情況的估計，選擇根據(jù)對水

4、樣污染情況的估計，選擇3 3個個適宜稀釋度適宜稀釋度, ,分別作分別作1010倍遞增稀釋的同時，倍遞增稀釋的同時，即以吸取該稀釋度即以吸取該稀釋度的吸管移的吸管移1mL1mL稀釋液于滅菌平皿中稀釋液于滅菌平皿中動物檢疫檢驗技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫水中菌落總數(shù)測定水中菌落總數(shù)測定 每遞增稀釋一次，必須更換一支1mL滅菌吸管 每個稀釋度制作2個平皿 同時做空白試驗動物檢疫檢驗技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫水中菌落總數(shù)測定水中菌落總數(shù)測定 傾注營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基 溫度：溫度：4646左右左右 用量：用量：15mL20mL15mL20mL 培養(yǎng) 溫度：溫度：3636士士11 時間：時間：4848士士2h2h水樣與培養(yǎng)基水樣

5、與培養(yǎng)基混勻后混勻后動物檢疫檢驗技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫水中菌落總數(shù)測定水中菌落總數(shù)測定4848小時后小時后動物檢疫檢驗技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫水中菌落總數(shù)測定水中菌落總數(shù)測定菌落計數(shù)及報告方法 記下各平板的菌落數(shù)后，求出同一稀釋度兩個平板的平均菌落數(shù) 選擇平均菌落數(shù)在30300之間者進行計算動物檢疫檢驗技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫水中菌落總數(shù)測定水中菌落總數(shù)測定不同稀釋度的選擇及報告方法 只有一個稀釋度的平均菌落數(shù)符合此范圍時，則將該菌只有一個稀釋度的平均菌落數(shù)符合此范圍時，則將該菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告（見表中實例（見表中實例1 1）實實例例不同稀釋液的平均菌落數(shù)不同稀釋液的平均菌落數(shù)菌落總數(shù)

6、菌落總數(shù)（CFU/mLCFU/mL）報告方式報告方式 （CFU/mLCFU/mL）1010-1-11010-2-21010-3-31 113651365164164202016 40016 40016 00016 000動物檢疫檢驗技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫水中菌落總數(shù)測定水中菌落總數(shù)測定 若有兩個稀釋度，其生長的菌落數(shù)均在若有兩個稀釋度，其生長的菌落數(shù)均在3030030300之間，則視之間，則視二者之比值來決定二者之比值來決定（見表中實例（見表中實例2 2、3 3、4 4）實實例例不同稀釋液的平均菌落數(shù)不同稀釋液的平均菌落數(shù)兩個稀釋兩個稀釋度菌落數(shù)度菌落數(shù)之比之比菌落總數(shù)菌落總數(shù)（CFU/mLCFU

7、/mL）報告方式報告方式 （CFU/mLCFU/mL）1010-1-11010-2-21010-3-32 22760276029529566661.61.6377503775038 00038 0003 32890289027127160602.22.2271002710027 00027 0004 4 150 150 30308 8 2 2 1500 1500 1500 1500不同稀釋度的選擇及報告方法動物檢疫檢驗技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫水中菌落總數(shù)測定水中菌落總數(shù)測定 只若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于只若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300300，則應(yīng)按稀釋度，則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀

8、釋倍數(shù)報告之最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之（見表中實例（見表中實例5 5）實實例例不同稀釋液的平均菌落數(shù)不同稀釋液的平均菌落數(shù)菌落總數(shù)菌落總數(shù)（CFU/mLCFU/mL）報告方式報告方式 （CFU/mLCFU/mL）1010-1-11010-2-21010-3-35 5多不可計多不可計16501650513513513000513000510 000510 000不同稀釋度的選擇及報告方法動物檢疫檢驗技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫水中菌落總數(shù)測定水中菌落總數(shù)測定 只有若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于只有若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于3030，則應(yīng)按稀釋，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之度最

9、低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之（見表中實例（見表中實例6 6）實實例例不同稀釋液的平均菌落數(shù)不同稀釋液的平均菌落數(shù)菌落總數(shù)菌落總數(shù)（CFU/mLCFU/mL）報告方式報告方式 （CFU/mLCFU/mL）1010-1-11010-2-21010-3-36 62727 11 115 5270270270270不同稀釋度的選擇及報告方法動物檢疫檢驗技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫水中菌落總數(shù)測定水中菌落總數(shù)測定 若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在3030030300之間，則應(yīng)以之間，則應(yīng)以最接近最接近3030或或300300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之

10、（見表（見表中實例中實例7 7）實實例例不同稀釋液的平均菌落數(shù)不同稀釋液的平均菌落數(shù)菌落總數(shù)菌落總數(shù)（CFU/mLCFU/mL）報告方式報告方式 （CFU/mLCFU/mL）1010-1-11010-2-21010-3-37 7多不可計多不可計3053051212305003050031 00031 000不同稀釋度的選擇及報告方法動物檢疫檢驗技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫水中菌落總數(shù)測定水中菌落總數(shù)測定 若所有稀釋度的平板上均無菌落生長，則以未檢出報告之 不要用“多不可計”報告不同稀釋度的選擇及報告方法動物檢疫檢驗技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫水中菌落總數(shù)測定水中菌落總數(shù)測定 菌落數(shù)在菌落數(shù)在100100以內(nèi)時以內(nèi)

11、時 按實有數(shù)字，以整數(shù)報告按實有數(shù)字，以整數(shù)報告 菌落數(shù)大于菌落數(shù)大于100100時時 第第3 3位數(shù)位數(shù)“四舍五入四舍五入”，取前，取前2 2位數(shù)字，后面用位數(shù)字，后面用0 0代替代替 也可用也可用1010的指數(shù)來表示的指數(shù)來表示 見表中見表中“報告報告方式方式”欄欄不同稀釋度的選擇及報告方法動物檢疫檢驗技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫水中菌落總數(shù)測定水中菌落總數(shù)測定實例實例不同稀釋液的平均菌落數(shù)不同稀釋液的平均菌落數(shù)兩個稀釋度菌落兩個稀釋度菌落數(shù)之比數(shù)之比菌落總數(shù)菌落總數(shù)（CFU/mLCFU/mL）報告方式報告方式 （CFU/mLCFU/mL）1010-1-11010-2-21010-3-31 1136513651641642020-16 40016 40016 00016 000或或1.61.610104 42 22760276029529566661.61.6377503775038 00038 000或或3.83.810104 43 32890289027127160602.22.2271002710027 00027 000或或2.72.710104 44 4 150 150 30308 8 2 2 1500 150