當(dāng)歸對(duì)神經(jīng)和免疫系統(tǒng)作用的研究現(xiàn)狀與展望

1、當(dāng)歸對(duì)神經(jīng)和免疫系統(tǒng)作用的研究現(xiàn)狀與展望 08-05-18 10:51:00 作者：何立編輯：studa20【關(guān)鍵詞】 當(dāng)歸 補(bǔ)血機(jī)制 神經(jīng)系統(tǒng) 免疫系統(tǒng)當(dāng)歸略呈圓柱形，外表黃棕色至深褐色有縱皺紋及橫長(zhǎng)皮孔，質(zhì)柔韌，有特異的濃郁香氣，味甘辛微苦。在傳統(tǒng)中醫(yī)學(xué)研究中，當(dāng)歸一般被認(rèn)為是一種補(bǔ)血藥品。但隨著對(duì)中醫(yī)中藥學(xué)研究的深入，近年來不但發(fā)現(xiàn)了當(dāng)歸的多種新用途、新功效，也對(duì)當(dāng)歸的補(bǔ)血作用的機(jī)理提出了若干解釋。1 當(dāng)歸的傳統(tǒng)補(bǔ)血作用機(jī)制研究進(jìn)展 對(duì)當(dāng)歸的傳統(tǒng)補(bǔ)血作用的研究，主要體現(xiàn)在對(duì)當(dāng)歸補(bǔ)血湯的功效研究進(jìn)展之中。當(dāng)歸補(bǔ)血湯出自李東垣的內(nèi)外傷辨惑論，全方由黃芪、當(dāng)歸組成，二藥用量之比為5：1，主治勞

2、倦內(nèi)傷、氣弱血虛，為經(jīng)典的氣血雙補(bǔ)名方。目前較為流行的理論認(rèn)為，當(dāng)歸補(bǔ)血湯的補(bǔ)血機(jī)理涉及到對(duì)血細(xì)胞的發(fā)生與增殖的刺激。張英華等1通過實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)在體外培養(yǎng)體系中有無外源性集落刺激因子()兩種情況下，含有不同比例的當(dāng)歸、黃芪血清與正常血清相比，均能明顯促進(jìn)紅細(xì)胞系祖細(xì)胞(CFUE)、(BFUE)的增殖，結(jié)論認(rèn)為當(dāng)歸補(bǔ)血湯能刺激骨髓造血祖細(xì)胞，并有可能增強(qiáng)粒系、單核巨噬細(xì)胞的生長(zhǎng)、成熟與釋放，從而達(dá)到生血補(bǔ)血作用。對(duì)于該理論中當(dāng)歸刺激血細(xì)胞造血的具體過程，目前存在更進(jìn)一步的研究，主要包括苗明三等2 通過當(dāng)歸補(bǔ)血湯粗多糖對(duì)放血和環(huán)磷酰胺并用所致大鼠氣血雙虛模型的影響，對(duì)當(dāng)歸補(bǔ)血湯在促進(jìn)紅細(xì)胞生成素（E

3、PO）造血過程中所起作用的研究，以及陳玉春等3通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)觀察發(fā)現(xiàn)當(dāng)歸補(bǔ)血湯能顯著提升大鼠血清EPO水平的研究。兩項(xiàng)研究的結(jié)論均認(rèn)為當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)紅細(xì)胞的作用機(jī)理與促進(jìn)EPO分泌有關(guān)，認(rèn)為當(dāng)歸補(bǔ)血湯通過促進(jìn)EPO分泌，進(jìn)而通過EPO的生物學(xué)效能刺激紅細(xì)細(xì)胞的產(chǎn)生、成熟和釋放，補(bǔ)充因破壞和死亡而減少的紅細(xì)胞，維持血細(xì)胞的相對(duì)穩(wěn)定，發(fā)揮補(bǔ)血作用。 對(duì)于當(dāng)歸的補(bǔ)血機(jī)制的研究，還存在一種損傷減輕理論，即認(rèn)為當(dāng)歸補(bǔ)血湯不但有促進(jìn)血細(xì)胞產(chǎn)生的功能，同樣還存在著減輕血細(xì)胞因各種原因所造成的損失的功效。金若敏等4采用乙酰苯肼60 mgkg和環(huán)磷酰胺160 mgkg聯(lián)合造成小鼠的血虛狀態(tài)，取血測(cè)定小鼠的外周血象，

4、取股骨測(cè)定骨髓有核細(xì)胞數(shù)量，以電鏡觀察骨髓超微結(jié)構(gòu)，觀察模型小鼠的游泳時(shí)間、體溫及放免法測(cè)定血漿cAMP、cGMP的比值等方法，表明當(dāng)歸補(bǔ)血湯不但能顯著增加模型小鼠的紅細(xì)胞、白細(xì)胞、骨髓有核細(xì)胞的數(shù)量，還能夠降低血虛動(dòng)物由于外周血中紅細(xì)胞大量減少引起的網(wǎng)織紅細(xì)胞代償性增加，改善網(wǎng)織紅細(xì)胞在外周血中的比例，并能減輕骨髓細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的損傷。另外，童延清等5通過對(duì)給予皮下注射2 000 U重組紅細(xì)胞生成素(rHu EPO)，但同時(shí)加當(dāng)歸補(bǔ)血湯口服治療組與單純注射3 000 U重組紅細(xì)胞生成素的對(duì)照組之間治療效果的比較，得出的結(jié)果表明，當(dāng)歸補(bǔ)血湯所含的阿魏酸成分能直接減少H2O2的含量，并與膜磷脂酰乙

5、醇胺結(jié)合，通過直接清除自由基或抑制氧化反應(yīng)等途徑，拮抗自由基對(duì)紅細(xì)胞的損害，從而延長(zhǎng)紅細(xì)胞的壽命，有效減少貧血的可能。 對(duì)于當(dāng)歸的有效成分及作用途徑，也存在不少相關(guān)研究。當(dāng)歸的化學(xué)成分主要為揮發(fā)油和水溶性成分。李春云等6通過氣相色譜-質(zhì)譜(GCMS)聯(lián)用法,對(duì)當(dāng)歸揮發(fā)油中的活性成分進(jìn)行了分析,共分離鑒定了43種成分，其中主要成分為蒿苯內(nèi)酯(2974)。在對(duì)水溶性成分的研究中，姜蓉等7對(duì)當(dāng)歸多糖（APS）在當(dāng)歸“補(bǔ)血”的生物學(xué)機(jī)理中的作用做了闡明，通過采用造血祖細(xì)胞體外培養(yǎng)及免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)，證明了APS是當(dāng)歸補(bǔ)血或促進(jìn)血細(xì)胞發(fā)生的有效成分，APS對(duì)小鼠造血干細(xì)胞(CFU-S)、小鼠與人髓系造血

6、祖細(xì)胞(BFU-E，CFU-E，CFU-GM，CFU-MK)的增殖分化有顯著促進(jìn)作用。張英華等8在實(shí)驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn)，對(duì)體外培養(yǎng)體系中直接加入當(dāng)歸補(bǔ)血湯水煎劑的上清液時(shí)，補(bǔ)血湯反而對(duì)粒-巨噬細(xì)胞系祖細(xì)胞(CFuGM)的增殖有明顯的抑制，只有在采用血清藥理學(xué)方法模擬體內(nèi)環(huán)境時(shí)，當(dāng)歸補(bǔ)血湯才能生效。并由此推測(cè)當(dāng)歸補(bǔ)血湯諸成分須先經(jīng)動(dòng)物機(jī)體的選擇性吸收及代謝，才能轉(zhuǎn)化為有效成分并產(chǎn)生效應(yīng)。 總的說來，目前對(duì)當(dāng)歸補(bǔ)血機(jī)制的研究，主要包括兩種理論，其一是當(dāng)歸能刺激血細(xì)胞的增殖，其二是當(dāng)歸能拮抗外界環(huán)境對(duì)血細(xì)胞的損傷，兩者均得到了相關(guān)實(shí)驗(yàn)的證實(shí)，且兩者之間并無沖突，故當(dāng)歸的補(bǔ)血效果可能為兩種模式共同作用所致，而

7、以目前研究來看，前一種可能為主要因素。2 當(dāng)歸對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)作用研究進(jìn)展 探索當(dāng)歸對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用是一個(gè)近年來新興的研究方向，尤其是在對(duì)神經(jīng)損傷的保護(hù)和修復(fù)方面，出現(xiàn)了較為豐富的研究成果。由于神經(jīng)組織的復(fù)雜性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)了一些目前尚無具體理論解釋的現(xiàn)象。下面將對(duì)當(dāng)歸在不同生理環(huán)境下的保護(hù)與修復(fù)功能的研究結(jié)果進(jìn)行歸納：2.1 當(dāng)歸在腦缺血模型中對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的作用腦血管病(Cerebral vascular disease，CVD)以其發(fā)病率、死亡率及致殘率高而對(duì)人類構(gòu)成極大的威脅，其中缺血性腦血管病(Ischemic cerebral vascular disease，ICVD)占CVD的82，

8、故研究當(dāng)歸在治療腦缺血過程中所起作用有著重要意義，亦是目前研究工作中的一大重點(diǎn)。廖維靖等912在此方面做出了較為深入的研究。在一項(xiàng)新的研究中，他們采用磁共振成像(magnetic resonance imaging，MRI)技術(shù)，將雄性大鼠隨機(jī)分成假手術(shù)組、缺血損傷組、當(dāng)歸治療組，通過研究不同組大鼠腦缺血再灌注時(shí)的大腦T2加權(quán)成像(T2-weighted imaging，T2wI)和局域質(zhì)子譜(0H MR spectroscopy， HMRs)的變化，并通過測(cè)定作為神經(jīng)元維持結(jié)構(gòu)和功能的標(biāo)志代謝物13N一乙酰天門冬氨酸(Nacetylaspartate，NAA)的相對(duì)比值，證實(shí)了缺血損傷使神經(jīng)

9、元維持結(jié)構(gòu)和功能的物質(zhì)代謝受損，而當(dāng)歸治療使腦組織的血液循環(huán)獲得重建，代謝改善，從而為活血化淤治則提供了分子水平神經(jīng)元代謝物質(zhì)變化的證據(jù)。但在該實(shí)驗(yàn)中，由于觀察時(shí)間不足，尚無法確定當(dāng)歸對(duì)神經(jīng)元成分的長(zhǎng)期影響。鄒凡等14采用蒙古沙土鼠制作全腦缺血模型，研究缺血后海馬區(qū)的神經(jīng)再塑及當(dāng)歸注射液對(duì)腦的可塑性的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)當(dāng)歸注射液可促進(jìn)缺血損傷后腦組織的結(jié)構(gòu)再塑。但上述兩者的實(shí)驗(yàn)對(duì)于具體作用機(jī)制沒有深入研究，僅有鄒凡等提出了一個(gè)假設(shè)，認(rèn)為促進(jìn)樹突的重建、軸突的出芽伸長(zhǎng)和新觸突的建立可能是當(dāng)歸對(duì)腦缺血治療作用的基礎(chǔ)。X. Kuang等15的研究工作則從作用機(jī)制方面入手，對(duì)當(dāng)歸的作用路線進(jìn)行了探索，

10、包括他們對(duì)當(dāng)歸中的Z-ligustilide (LIG)成分在腦缺血再灌注時(shí)的作用機(jī)制進(jìn)行的研究。在這一研究中，X. Kuang等人通過對(duì)經(jīng)人工處理致使缺血后再灌注的小鼠進(jìn)行LIG治療，并比照治療結(jié)果，認(rèn)為L(zhǎng)IG分子的抗氧化和抗細(xì)胞凋亡作用是當(dāng)歸的神經(jīng)保護(hù)作用的原因之一。與他的研究方向類似，張光毅16、王智勇17、劉玲等18也對(duì)當(dāng)歸在保護(hù)和修復(fù)腦缺血導(dǎo)致的神經(jīng)損傷中的具體成分與機(jī)制做了相當(dāng)程度的研究，在此不再贅述。2.2 當(dāng)歸對(duì)早期胚胎發(fā)育缺氧的保護(hù)作用宮內(nèi)缺氧是胚胎發(fā)育中的常見癥，多種疾病均可引起宮內(nèi)缺氧，其結(jié)果將影響胚胎的生長(zhǎng)發(fā)育，而神經(jīng)系統(tǒng)是胚胎發(fā)育中出現(xiàn)最早的系統(tǒng)之一。因此，研究當(dāng)歸對(duì)

11、早期胚胎發(fā)育缺氧的保護(hù)作用也成為目前的熱點(diǎn)。吳雨嶺等19，20將孕15d孕鼠采用低張性缺氧模型致鼠胚宮內(nèi)缺氧，讓鼠胚大腦組織經(jīng)c-Fos和神經(jīng)元特異性標(biāo)記物-神經(jīng)元特異烯醇化酶(NSE)免疫組化雙標(biāo)染色后,進(jìn)行圖像分析，發(fā)現(xiàn)三組鼠胚大腦中神經(jīng)元特異烯醇化酶陽性細(xì)胞數(shù)量差異沒有顯著性；而缺氧組中c-FosNSE雙染陽性細(xì)胞比對(duì)照組增多(P0.05)；當(dāng)歸組雙染陽性細(xì)胞比缺氧組減少(P0.05)。從中得出的結(jié)論認(rèn)為缺氧可刺激鼠胚大腦神經(jīng)元內(nèi)c-Fos的表達(dá)，而當(dāng)歸注射液對(duì)缺氧鼠胚大腦神經(jīng)元可能有保護(hù)作用。在余鴻等21更進(jìn)一步的研究中，首創(chuàng)性的將c-Fos蛋白和NOS二者同時(shí)應(yīng)用于宮內(nèi)缺氧的神經(jīng)細(xì)胞

12、的研究，通過c-Fos蛋白和NOS雙標(biāo)記表達(dá)的變化，觀察宮內(nèi)缺氧對(duì)鼠胚神經(jīng)細(xì)胞的影響，并通過對(duì)比研究了當(dāng)歸注射液對(duì)缺氧神經(jīng)細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)缺氧前應(yīng)用當(dāng)歸注射液鼠胚大腦皮質(zhì)NOS和c-Fos陽性細(xì)胞數(shù)較缺氧組明顯減少，說明當(dāng)歸注射液減弱了缺氧引起的神經(jīng)細(xì)胞傷害性刺激。在此結(jié)果之上，綜合已有研究，余鴻等推測(cè)機(jī)理可能包括擴(kuò)張血管、抑制子宮平滑肌收縮和拮抗自由基對(duì)組織的損害。但目前尚未發(fā)現(xiàn)對(duì)該推測(cè)的進(jìn)一步證明。2.3 當(dāng)歸對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)作用的其他研究當(dāng)前對(duì)當(dāng)歸在神經(jīng)系統(tǒng)中所起作用的研究正朝著多向化的趨勢(shì)發(fā)展，除去上述兩個(gè)研究前沿外，還在多個(gè)領(lǐng)域有所進(jìn)展和突破。劉金保等22以體外擴(kuò)增培養(yǎng)的大鼠間

13、質(zhì)干細(xì)胞(mesenehymal stemcells，MSCs)為研究對(duì)象，通過光鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞特異性抗原標(biāo)志的方法，發(fā)現(xiàn)MSCs在含當(dāng)歸注射液的牛血清的誘導(dǎo)下能夠分化成為神經(jīng)元樣細(xì)胞。羅煥敏等23選用體外培養(yǎng)的、加入灌服當(dāng)歸芍藥散改良方小鼠的血清后的海馬神經(jīng)元作模型, 通過觀察形態(tài)變化、比較長(zhǎng)短徑、計(jì)算存活率和存活神經(jīng)元中有突起神經(jīng)元所占比率等方法，參照對(duì)照組進(jìn)行對(duì)比研究，檢驗(yàn)并證實(shí)了當(dāng)歸對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的作用途徑來自于間接效果。這類研究成果對(duì)于延緩衰老和治療老年性癡呆具有重要的價(jià)值，并可能產(chǎn)生重大的經(jīng)濟(jì)效應(yīng)。 可以看出，對(duì)當(dāng)歸藥理作用的研究與對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)研究的結(jié)合，是

14、一項(xiàng)前沿研究，但在目前的研究工作中，大多都采用了復(fù)方藥物作為研究對(duì)象，而對(duì)當(dāng)歸的主要有效成分的分離還只處于起步階段，提出的很多理論也尚未得到有效證實(shí)。因此，在具體的藥物成分的分離等方面還有很長(zhǎng)的一段路要走。3 當(dāng)歸對(duì)機(jī)體免疫作用的研究進(jìn)展 研究當(dāng)歸對(duì)機(jī)體免疫機(jī)能的增進(jìn)作用也是目前研究領(lǐng)域中的一大熱點(diǎn)，綜合大量研究發(fā)現(xiàn)：當(dāng)歸多糖（AP）成分是當(dāng)歸的免疫促進(jìn)功能的主要成分，并主要表現(xiàn)在對(duì)細(xì)胞免疫的促進(jìn)上，最近的研究還發(fā)現(xiàn)當(dāng)歸具有抗腫瘤的功效。下面將對(duì)這幾個(gè)方面的研究進(jìn)行總結(jié)：3.1 當(dāng)歸對(duì)細(xì)胞免疫的增進(jìn)作用楊鐵虹等24研究證實(shí)了當(dāng)歸多糖對(duì)細(xì)胞免疫功能具有增強(qiáng)作用, T細(xì)胞是當(dāng)歸多糖的靶細(xì)胞之一。該文通過機(jī)械分散法制備小鼠單個(gè)脾細(xì)胞懸液，使用MTT比色法檢測(cè)脾細(xì)胞和T細(xì)胞的增殖，并以免疫磁珠法從小鼠脾細(xì)胞中分離純化T細(xì)胞后, 用流式細(xì)胞術(shù)觀察AP對(duì)CD4+ T細(xì)胞比率的影響。發(fā)現(xiàn)當(dāng)歸總多糖AP20及其3個(gè)組分AP21、AP22和AP23在30100 mg/L劑量的范圍內(nèi),能顯著促進(jìn)脾細(xì)胞的增殖(P 0. 01)；其中組分AP3能顯著促進(jìn)混合淋巴細(xì)胞和T細(xì)胞的增殖反應(yīng), 顯著增加培養(yǎng)的脾細(xì)胞中CD4+ T細(xì)胞亞群的比率，