慢性支氣管炎中藥藥研究思路與方法

1、概 述 慢性支氣管炎（chronic bronchitis）是由于感染或非感染因素引起的氣管，支氣管粘膜炎性變化，粘液分泌增多 主要特征：臨床上以長期咳嗽，咯痰，氣短或伴有喘息為主要特征。 病 因 吸煙 普遍認(rèn)為吸煙為慢性支氣管炎的主要發(fā)病因素，吸煙能使支氣管上皮纖毛變短，不規(guī)則，纖毛運(yùn)動(dòng)發(fā)生障礙，降低局部抵抗力，削弱肺泡吞噬細(xì)胞的吞噬作用，又能引起支氣管痙攣，增加氣道阻力。理化因素 大氣污染，粉塵，刺激性煙霧（如二氧化硫），化學(xué)毒物等慢性刺激，均可使支氣管粘膜發(fā)生慢性炎癥，削弱了呼吸道的防御功能促進(jìn)本病發(fā)生。感染因素 呼吸道的反復(fù)感染與慢性支氣管炎發(fā)病，發(fā)展和加重關(guān)系密切，患者常見的細(xì)菌有流

2、感嗜血桿菌，肺炎雙球菌，甲型鏈球菌，奈瑟球菌等，在急性發(fā)作期，常見病毒以流感病毒，副流感病毒，鼻病毒，腺病毒，呼吸道合胞病毒為多見。在機(jī)體免疫力功能低下時(shí)，病毒的感染引起支氣管粘膜損傷，為細(xì)菌的繼發(fā)感染創(chuàng)造了條件，引起本病的發(fā)生和反復(fù)發(fā)作。過敏因素 許多抗原性物質(zhì)，如塵埃、塵螨、細(xì)菌、真菌、寄生蟲、花粉、化學(xué)物質(zhì)氣體等以及寒冷的空氣均可引起慢性支氣管炎速發(fā)型和遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)。引起支氣管平滑肌收縮，粘膜血液循環(huán)障礙和分泌物排出困難。對具有過敏史和哮喘型慢性支氣管炎患者來說，此病多數(shù)與過敏因素有關(guān) 病 機(jī) 呼吸道局部防御和免疫功能的失調(diào) 在正常情況下，下呼吸道始終保持無菌狀態(tài)。全身或呼吸道局部的防

3、御功能減退，免疫球蛋白減少，組織退行性變，單核吞噬系統(tǒng)機(jī)能衰退等可導(dǎo)致患者感染或無菌性炎癥反應(yīng)性急性支氣管炎，反復(fù)發(fā)作可轉(zhuǎn)化成慢性支氣管炎。而支氣管反應(yīng)性的異常升高或免疫反應(yīng)的亢進(jìn)也可能導(dǎo)致支氣管對外來因素的過敏性病理組織學(xué)變化，造成急性支氣管哮喘，進(jìn)而發(fā)展成慢性支氣管炎。植物神經(jīng)功能失調(diào) 表現(xiàn)為支氣管粘膜的迷走神經(jīng)感受器反應(yīng)性增高，副交感神經(jīng)功能亢進(jìn)，外來因素的刺激，可引起支氣管收縮，產(chǎn)生痙攣，分泌物增加，產(chǎn)生咳嗽，咯痰，氣喘等癥狀。 3.病理組織學(xué)的變化 在一種或多種因素的影響下，慢性支氣管炎患者和支氣管發(fā)生漸進(jìn)性的病理組織學(xué)變化。小支氣管壁明顯增厚，其中平滑肌層增厚最明顯，粘液腺和漿液腺

4、增大支氣管粘膜發(fā)生潰瘍，肉芽組織增生、肥大、分泌物增多，細(xì)支氣管粘膜腫脹。軟骨可發(fā)生不同程度的萎縮與變性，部分被結(jié)締組織所取代，細(xì)支氣管壁的支撐力明顯減弱，導(dǎo)致管腔狹窄及產(chǎn)生活瓣作用，吸氣時(shí)氣體尚能進(jìn)入肺泡，呼氣時(shí)，支氣管收縮，陷閉而呼出困難，粘液潴留于管腔內(nèi)。炎性滲出物的積聚 ：缺氧引起支氣管及細(xì)支氣管痙攣收縮使氣流阻塞，氣道炎癥可使支氣管粘膜的柱狀上皮細(xì)胞變性、壞死、增生和鱗狀化生。吸煙、理化因素以及炎癥使氣管、支氣管纖毛發(fā)生粘連、倒伏、卷曲、折斷、甚至脫落，纖毛的運(yùn)送清除功能減弱，受損，使粘液和炎性滲出物（含有細(xì)菌、病毒、異物），在支氣管內(nèi)滯留，特別是伴有慢性粘液高分泌病變，可使肺泡通氣

5、不足，肺內(nèi)氣體分布不均勻，通氣血流比例失調(diào)，彌散功能減低，其結(jié)果出現(xiàn)低氧血癥。吸煙可致肺局部中性蛋白酶活性增強(qiáng)，而與遺傳因素有關(guān)的1抗胰蛋白酶的缺乏則使抑制多種酶（包括中性蛋白酶）活性的減弱，這種肺局部中性蛋白酶活性增強(qiáng)與抑制間平衡出現(xiàn)障礙，當(dāng)肺部有炎癥時(shí)，白細(xì)胞，肺巨噬細(xì)胞釋放出的纖維蛋白溶解酶，能引起肺臟廣泛損害和肺氣腫發(fā)生。 研究思路 一、對植物神經(jīng)系統(tǒng)的影響慢性支氣管炎的主要誘因如長期吸煙，理化因素刺激所致的呼吸道病理生理的變化與植物神經(jīng)系統(tǒng)功能失調(diào)所致的影響類似。（一）抗膽堿藥（M受體阻滯藥）洋金花，莨菪堿等抗膽堿藥用于治療氣管痙攣已有100多年歷史，該類藥物不僅可使支氣管擴(kuò)張，也可

6、減少腺體分泌，降低副交感神經(jīng)張力。國內(nèi)七十年代曾使用大劑量洋金花提取物（東莨堿）治療慢性支氣管炎，雖然出現(xiàn)明顯的副作用（中樞精神癥狀），但其愈顯率達(dá)60%以上，可見，氣管平滑肌解痙，腺體分泌抑制等抗膽堿作用加之東莨堿的中樞鎮(zhèn)靜，興奮呼吸中樞，改善微循環(huán)等作用可以作為治療慢性支氣管炎藥物重要的藥效。具有抗膽堿作用的中藥華山參滴丸等已作為治療慢性支氣管炎的藥物應(yīng)用。（二）受體激動(dòng)藥麻黃及其麻黃生物堿類藥，對與受體都有激動(dòng)作用，激動(dòng)氣道平滑肌上2受體能緩解支氣管平滑肌痙攣，激動(dòng)肥大細(xì)胞與嗜堿細(xì)胞膜上的2受體可以抑制過敏介質(zhì)的釋放，緩解由于過敏反應(yīng)所致的支氣管平滑肌痙攣和支氣管粘膜充血水腫，有利于解除

7、喘息，同時(shí)其受體的激動(dòng)作用亦有助于粘膜充血水腫的緩解。但是受體激動(dòng)以及1受體的激動(dòng)又可能減弱平喘作用，引起心動(dòng)過速，血管收縮等副作用。因此，近年來選擇性2受體激動(dòng)藥發(fā)展很快，如沙丁胺醇，特布他林，丙卡特羅，氯丙那林等一批支氣管擴(kuò)張劑用于治療慢性支氣管炎的支氣管痙攣，其中沙丁胺醇，丙卡特羅尚有祛痰和促進(jìn)纖毛運(yùn)動(dòng)的作用。在中藥中雖然有一些如蕓香草，牡荊等具有止喘祛痰作用的中藥口服和噴霧劑，但由于未進(jìn)一步進(jìn)行藥理作用機(jī)理的研究，因而限制了新藥的進(jìn)一步開發(fā)和藥物的正確使用，對此，應(yīng)該引起研究者的思考。 二.祛痰作用慢性支氣管炎患者呼吸道內(nèi)產(chǎn)生大量粘液分泌物，氣管支氣管收縮加之病變使纖毛運(yùn)動(dòng)功能障礙，使

8、痰液潴留于呼吸道內(nèi)，阻塞呼吸道影響通氣，又可使細(xì)菌生長引起繼發(fā)感染，對氣管的刺激反應(yīng)又可以引起咳嗽反射和喘息，其中咳嗽反射應(yīng)屬于良性反射，有利于排痰作用。因此，應(yīng)用有效的祛痰藥，使痰液稀釋和松動(dòng)并及時(shí)排出體外，是慢性支氣管炎急性發(fā)作和遷延期有效的治療方法。祛痰藥的藥理作用包括（一）降低痰液粘稠度，稀釋痰液作用 滿山紅，牡荊，貓眼草，側(cè)柏葉等治療慢性支氣管炎藥以及桔梗，遠(yuǎn)志，貝母等多數(shù)中藥均經(jīng)小鼠酚紅實(shí)驗(yàn)證明具有促進(jìn)氣管分泌液的作用；蕓香草，牡荊油類揮發(fā)油制劑以及遠(yuǎn)志，桔梗等含皂甙的制劑也能增加粘液分泌，促進(jìn)纖毛運(yùn)動(dòng)，降低痰液粘稠度。 （二）粘痰溶解作用近年來西藥發(fā)現(xiàn)溴已新能使痰液中酸性糖蛋白的

9、多糖纖維裂解，還能使呼吸道粘液腺和杯狀細(xì)胞中合成酸性糖蛋白減少，羧甲司坦使低粘度的唾液粘蛋白分泌增加，高粘度的巖藻粘蛋白產(chǎn)生減少，從而降低痰液粘滯度，氨溴索則能促使呼吸道表面活性物質(zhì)的形成，調(diào)節(jié)漿液性和粘液性物質(zhì)的分泌，增加中性粘多糖的分泌，減少酸性粘多糖的合成，并促進(jìn)代謝，使呼吸道粘液粘稠度下降，利于排出，還可以改善纖毛運(yùn)動(dòng)，可見痰液的成分分析和纖毛運(yùn)動(dòng)對分析中藥祛痰藥理作用是不可缺少的。中藥的粘痰溶解作用的研究尚少，應(yīng)予重視。三.慢性支氣管炎病理變化的影響慢性支氣管炎藥物的藥效學(xué)研究首先應(yīng)進(jìn)行慢性支氣管炎動(dòng)物模型的篩選和研究，尤其應(yīng)觀察其呼吸道和肺組織的病理組織學(xué)和生化測試結(jié)果的影響。目前

10、，多數(shù)中藥僅進(jìn)行止咳，祛痰，平喘，抗炎等藥效學(xué)的研究，其中祛痰作用重點(diǎn)觀察呼吸道分泌的增加，與慢性支氣管炎患者氣管杯狀細(xì)胞增加，腺體痰液分泌量過多并不一致。近年來，新藥藥效學(xué)研究過程中逐漸重視慢性支氣管炎動(dòng)物模型觀察其藥理作用，艾麻口服液用脂多糖復(fù)制的大鼠模型，復(fù)方薤白膠采用SO2復(fù)制的大鼠慢支模型，咳喘寧用煙薰的大鼠慢支模型，清源化痰顆粒用寒冷加煙薰的小鼠慢支模型，其觀察指標(biāo)主要是為病理組織學(xué)變化，包括管壁纖維組織增生，上皮細(xì)胞壞死脫落，慢性炎細(xì)胞浸潤，腺體和杯狀細(xì)胞增生，也有測定血漿和支氣管灌洗液中內(nèi)皮素，降鈣素基因相關(guān)肽，肺組織中丙二醛，SOD者，以說明藥物對慢性支氣管炎的作用。綜上所述

11、，慢性支氣管炎藥效學(xué)研究時(shí)應(yīng)考慮中藥標(biāo)本兼治的特點(diǎn)，作為治標(biāo)應(yīng)以祛痰（包括粘液分泌量的增加或減少，粘稠度下降），平喘（M受體阻滯，受體激動(dòng)）以及促進(jìn)纖毛運(yùn)動(dòng)為主，止咳僅作為必要時(shí)的輔助作用，輕度止咳對本病無臨床意義。作為治本，則主要觀察對慢性支氣管炎動(dòng)物模型的病理組織學(xué)的影響，應(yīng)能恢復(fù)各種因素造成的病理組織學(xué)損傷，為臨床研究提供確切的藥理學(xué)依據(jù)。 研究方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇慢性支氣管炎模型以大鼠和小鼠較常用，豚鼠、家兔和犬也有使用。祛痰試驗(yàn)以大鼠，貓，兔，犬（集痰法）較常用，大鼠和小鼠適用于篩選（氣管染料排出法）。大鼠、家兔、貓、鴿、蛙、雞可用于纖毛活性和纖毛運(yùn)動(dòng)的研究。 動(dòng)物模型 慢性支氣管炎模

12、型 祛痰和纖毛運(yùn)動(dòng) 慢性支氣管炎模型 .原理 慢性支氣管炎由上呼吸道病毒或細(xì)菌反復(fù)感染引起，也可由某些理化因素或抗原性物質(zhì)多次刺激造成，因此利用化學(xué)物質(zhì)（如氨水，SO2）、煙霧（煙葉，鋸木煙）以及復(fù)合因素刺激（如細(xì)菌或寒冷） 方法 大鼠煙熏模型 置27M3煙室內(nèi)，用混合煙150200mg/m2（200g鋸末，1520g煙葉，67g辣椒及1g硫磺混合，2030min內(nèi)燒化，顆粒在0.51m以上），吸入，每周6次，44天即可形成慢性支氣管炎病變?；蛑棉篃煂Ｓ孟渲校s1m3）用白松刨花或煙葉10g點(diǎn)燃后將煙送入箱內(nèi)，每日一次，每次保持30分鐘（中間補(bǔ)充薰一次保持煙霧濃度）15天以后出現(xiàn)不同程度炎癥病

13、理變化，20天見典型慢性支氣管炎病理變化。 小鼠二氧化硫模型 吸入2%SO2，每日10秒，1018天出現(xiàn)支氣管炎病變，27天后出現(xiàn)重型支氣管炎病變。豚鼠煙熏模型 用香煙一支半，在211容器內(nèi)燃化共10分鐘，換氣5分鐘，每天一次，每周6次，同時(shí)置氣溫78中一小時(shí)，隔天1次，45天改為每周2次，2835天可出現(xiàn)慢性支氣管炎病變，6周后病變保持并逐漸加重。 另外據(jù)報(bào)道有用流感桿菌9億/ml，甲鏈6億/ml，卡他9億/ml，肺炎雙球菌6億/ml，以4:3:2:1混合菌液在大鼠麻醉下滴鼻0.1ml每周1次，6周有形成慢性支氣管炎趨勢以及用氣管內(nèi)注入脂多糖的方法建立大鼠慢性支氣管炎模型。目前尚有用0.00

14、10.044mg/L含CL2空氣，每日2530min讓小鼠吸入，約35天后成功造慢性支氣管炎疾病模型以及用每升含0.3ml氨水的空氣每1520分鐘重復(fù)一次，每次23分鐘，一日8次（僅刺激一或用天），32天后成功造成小鼠慢性支氣管炎模型的報(bào)道。祛痰和纖毛運(yùn)動(dòng) 原理 用氣管插管可以直接測定從氣管或支氣管排出的粘液量，從而判斷藥物對杯狀細(xì)胞和腺細(xì)胞粘液分泌的影響。通過測定粘液中粘多糖，肺表面活性物質(zhì)等可以了解藥物對痰液粘度和成分的影響，通過墨汁或木屑在氣管表面的運(yùn)動(dòng)，可以觀察藥物對纖毛運(yùn)動(dòng)的影響。 方法 呼吸道分泌量測定： 家兔，貓或犬麻醉后用氣管插管，收集流出的呼吸道液體。大鼠可用毛細(xì)管法收集氣管

15、粘液，測定分泌量。利用酚紅，伊文思籃或熒光素鈉測定小鼠或大鼠，家兔呼吸道內(nèi)的分泌量以間接觀察粘液分泌量。 粘液成分分析： 豚鼠氣道粘液粘多糖測定，豚鼠麻醉處死，氣管稱重，用棉棒或?yàn)V紙取出粘液用蒸餾水洗下，離心，取上清液，加入四硼酸硫酸溶液和咔唑溶液，混勻加熱，冷卻后在530nm比色，測定粘多糖含量。大鼠用生理鹽水自氣管沖洗肺，取得肺泡沖洗液，用氯仿提取磷脂，加鋨酸溶液分離卵磷脂，用薄層色譜掃描定量測定肺表面活性物質(zhì)。 纖毛活性和纖毛運(yùn)動(dòng)：家鴿（或蛙，家兔，雞）麻醉背位固定，切開氣管，用木屑，印度墨汁，碳粒，塑料顆粒，在一定光源下觀察其運(yùn)動(dòng)速度以判斷纖毛運(yùn)動(dòng)。大鼠麻醉后通過專用設(shè)備（如光纖鏡）深入氣管。接顯微鏡，電視屏幕或攝像，觀察纖毛擺動(dòng)頻率，以觀察纖毛活性?？陀^指標(biāo) 慢性支氣管炎模型通常采用病理組織學(xué)方法，可見氣管粘膜上皮組織增生，上皮有灶性壞死及鱗狀上皮化生，杯狀細(xì)胞增生，粘膜下層及小支氣管周圍有明顯的淋巴細(xì)胞浸潤，末梢支氣管擴(kuò)張和炎性滲出物充填。肺部可見慢性灶性間質(zhì)性肺炎及慢