枳實中多甲氧基黃酮類化合物的研究

1、枳實中多甲氧基黃酮類化合物的研究    按內(nèi)容性質(zhì)和研究方法的不同可以把論文分為理論性論文、實驗性論文、描述性論文和設計性論文.                         作者：韓金旦，王奎武，沈蓮清Curiosity killed the cat.  【摘要】  目的研究

2、枳實中的多甲氧基黃酮類化合物。方法對枳實95%乙醇提取物的醋酸乙酯部分和正丁醇部分進行色譜分離，通過核磁共振和質(zhì)譜分析鑒定其化合物的結構。結果從枳實中分離鑒定出4個多甲氧基黃酮類化學成分，分別為桔皮晶 (Tangeretin，)，蜜桔黃素 (Nobiletin ，)，4', 5, 7, 8-四甲氧基黃酮(4',5,7,8-Tetramethoxyflavone，)，5-降甲基蜜桔黃素( 5-Demethylnobiletin，)。結論，化合物均為首次從枳實中分離得到()。 【關鍵詞】 &#

3、160;枳實;多甲氧基黃酮;化學成分Abstract：ObjectiveTo investigate the chemical constituents of Fructus Aurantii Immaturus.MethodsThe constituents of the EtOAc-solube portion and normal butanol solube portion in the&

4、#160;95% ethanol extract were isolated and purified by means of chromatography.Compounds were identified by 1H-NMR, 13C-NMR and MS.Results Four polymethoxylated flavonoids were isolated 

5、;and identified as Tangeretin (), Nobiletin (), 4', 5, 7, 8-Tetramethoxyflavone () and 5-Demethylnobiletin ().ConclusionCompounds- were isolated from Fructus Aurantii Immaturus for the&#

6、160;first time.Key words： Fructus Aurantii Immaturus;Polymethoxylated flavonoids;Chemical constituents枳實Fructus Aurantii Immaturus是蕓香科植物酸橙Citrus aurantium L.及其栽培變種或甜橙Citrus sinesis Osbeck的干燥幼果，具有破氣消積、化痰散痞的作用，用于治療積滯內(nèi)停、痞滿脹痛、瀉痢后重、大便不通、結胸、

7、胃下垂、脫肛、子宮脫垂等癥1，主要含揮發(fā)油、生物堿(辛弗林、N-甲基酪胺)、黃酮類化合物、維生素C及維生素D等成分2。黃酮類化合物是枳實中的主要有效活性成分，此前的研究多集中在枳實中含有的蕓香柚皮苷與柚皮苷、橙皮苷與新橙皮苷等黃酮苷類化合物中37，而對多甲氧基類黃酮化合物(PMFs)的研究較少。近年來有關PMFs抗癌的研究取得了很大進展811，由于PMFs對多種癌細胞有較強的抑制作用，受到國內(nèi)外的廣泛關注。國內(nèi)外對多甲氧基黃酮類成分的抗癌活性報道越來越多，提示這類成分具有潛在的新藥開發(fā)價值。為進一步開發(fā)利用枳實中的多甲氧基黃酮類成分，作者利用現(xiàn)代色譜和波譜技術對其所含有的此類黃酮進行了分離純化

8、和結構鑒定，從中得到了4個PMFs類活性成分，分別鑒定為桔皮晶 (Tangeretin，)，蜜桔黃素 (Nobiletin，)，4'，5，7，8-四甲氧基黃酮(4'，5，7，8-Tetramethoxyflavone， Tetramethyl-O -isoscutellarein， )，5-降甲基蜜桔黃素( 5-Demethylnobiletin， )。God sends fortune to fools.  1儀器與材料1.1儀器與試劑X-4 數(shù)字顯示顯微熔點測定儀 (溫度計未

9、校正);Nicolet NEXUS-470 型紅外光譜儀(溴化鉀壓片);Bruker 500 AVANCE  型核磁共振儀，內(nèi)標為TMS (實驗所測 1H-NMR和13C-NMR 分別為500，125 MHz);Thermo LCQ FLEET 型電噴霧質(zhì)譜儀(ESI-MS);柱色譜用硅膠 (青島海洋化工廠);Sephadex LH-20 (Pharmaeia 公司);GF254高效薄層板 (煙臺匯友硅膠開發(fā)有限公司

10、)。其余試劑均為分析純(醫(yī)藥學/臨床醫(yī)學論文 )。Deeds are fruits; words are but leaves.  1.2材料枳實，由杭州惠松醫(yī)藥公司提供。2方法與結果What I have done is due to patient thought.  2.1提取與分離將枳實10 kg機械粉碎后，用95%的乙醇水溶液回流提取3次，減壓蒸餾回收溶劑后得到浸膏1.5 kg，上述浸膏加入2.5 L水，成懸浮液，分別用醋酸乙酯，正丁醇萃取，減壓蒸餾回收溶劑，得到醋酸乙酯部分浸膏335 g，正丁醇部分浸膏847g。醋酸乙酯部

11、分浸膏經(jīng)多次硅膠柱層析，Sephadex LH-20純化得到化合物桔皮晶()，蜜桔黃素()，4', 5, 7, 8-四甲氧基黃酮()和5-降甲基蜜桔黃素()。2.2結構鑒定分離所得的化合物結構見圖1。2.2.1化合物淡黃色針狀結晶， mp. 153154。 ESI-MS m/z：373 M+H+;IR (KBr) cm-1：2 948， 2 842， 1 651，1 588，1 512， 1

12、0;462， 1 362， 1 265，1 111， 1 075， 1 016，828;1H-NMR (DMSO-d6) ：7.89 (2H， dd，J=9.0，2.0 Hz， H-2'，6')， 7.03 (2H，dd，J=9.0，2.0 Hz，H-3'，5')，6.64 (1H，s，H-3)，4.11，4.03，3.97，3.95，3.89，(each 3H，s

13、，5×OCH3);13C-NMR (DMSO-d6) ：161.1 (C-2)，106.4 (C-3)，177.3 (C-4)，148.2 (C-5)，143.9 (C-6)，151.2 (C-7)，138.9 (C-8)，147.6 (C-9)，114.6 (C-10)，123.6 (C-1')，127.6 (C-2'，6')，114.3 (C-3?，5?)，162.1 (C-4')，62.1，61.9

14、，61.6，61.5，55.3 (5×OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻 11 報道的桔皮晶數(shù)據(jù)基本一致，故該化合物鑒定為桔皮晶(Tangeretin) 。見圖1。2.2.2化合物淡黃色針狀結晶，mp. 137138。ESI-MS m/z：403M+H+ ，425M+Na+;IR (KBr) cm-1：2 944，2 840，1 588，1 514，1 462，1 365，1 267，1 016，830;1H-NMR

15、0;(DMSO-d6) ：7.59(1H，d，J=8.0 Hz，H-6')，7.49(1H，s，H-2)，7.10(1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，6.80 (1H，s，H-3)，4.02，3.97，3.87，3.78(each 3H，s， 4×OCH3)，3.84(6H，s，2×OCH3);13C-NMR (DMSO-d6)：161.3 (C-2)，107.3 (C-3)，176.9 (C-4)，148.6 (C-5)，144.6 (C-6

16、)，152.0 (C-7)，138.7 (C-8)，148.2 (C-9)，115.3 (C-10)，124.2 (C-1)，109.4 (C-2)，150.0 (C-3)，152.2 (C-4)，112.2 (C-5)，119.8 (C-6)，62.3，62.2，62.0，61.9，56.2，56.1 (6×OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻11報道的蜜桔黃素數(shù)據(jù)基本一致，故該化合物鑒定為蜜桔黃素(Nobiletin) 。見圖1。 論文教育信息網(wǎng)  2

17、.2.3化合物 淡黃色針狀結晶，mp. 166 167。ESI-MS m/z： 343M+H+，365 M+Na+;1H-NMR (CDCl3)：7.97 (2H，dd，J=7.0，2.0 Hz，H-2，6)，7.12 (2H，dd，J=7.0，2.0 Hz，H-3，5)，6.68(1H，s，H-8)，6.67(1H，s，H-3)，3.98，3.88，3.85，3.84(each 3H，s，4×OCH3); 13C-NMR (CDCl3)：163

18、.2(C-2)，107.7(C-3)，177.2(C-4)，157.0(C-5)，131.3(C-6)，157.7(C-7)，95.1(C-8)，152.4(C-9)，109.4(C-10)，124.6(C-1)，128.9(C-2，6)，116.0(C-3，5)，160.9 (C-4)，62.4，57.7，57.6，56.9(4×OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻12報道的Tetramethyl-O-isoscutellarein數(shù)據(jù)基本一致，故化合物鑒定為4'，5，7，8-四甲氧基黃酮(Tetramethyl-O-isoscutellarein) 。見圖1。2

19、.2.4化合物 淡黃色針狀晶體，mp. 145146。ESI-MS m/z： 389M+H+，411M+Na+;IR (KBr) cm-1：2 940，1 650，1 514，1 483，1 374，1 145，1 023，835;1H-NMR (DMSO-d6) ：7.62(1H，d，J=8.0 Hz，H-6)，7.49(1H，s，H-2)，7.09(1H，d，J=8.0Hz，H-5)，6.96(1H，s，H-3)， 4.0

20、2，3.91，3.89，3.85，3.81(each 3H，s，5×OCH3);13C-NMR (DMSO-d6)：163.9(C-2)，103.9 (C-3)，183.0(C-4)，149.0(C-5)，136.2(C-6)，152.7(C-7)，133.0(C-8)，145.6(C-9)，106.6(C-10)，123.1(C-1)，109.5(C-2)，149.4(C-3)，152.9(C-4)，112.1(C-5)，120.3(C-6)，62.2，62.0，60.9，56.1，56.0(5×OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻11報道的5-降甲基

21、蜜桔黃素數(shù)據(jù)基本一致，故該化合物鑒定為5-降甲基蜜桔黃素(5-Demethylnobiletin) 。見圖1。圖1化合物，和的結構式3結論從中藥枳實中分離得到了4 個多甲氧基黃酮類化學成分，分別為桔皮晶 (Tangeretin，)，蜜桔黃素 (Nobiletin，)，4',5,7,8-四甲氧基黃酮(4',5,7,8-Tetramethoxyflavone，)和5-降甲基蜜桔黃素(5-Demethylnobiletin，)。所有化合物均為首次從該中藥中分離得到。Still waters have deep bottoms.  【參

22、考文獻】  1國家藥典委員會.中國藥典，部S.北京:化學工業(yè)出版社,2005:172.2王文凱, 甘曉蘭. 中藥枳實研究概況J. 湖南中醫(yī)藥導報, 2003,9(12): 55.3傅國強, 王少軍, 錢星文, 等. RP-HPLC法測定枳實藥材中橙皮苷含量J. 江西中醫(yī)學院學報, 2004, 16(2): 62.4彭國平, 牛賀明, 徐麗華. 枳實活性成分的研究J. 南京中醫(yī)藥大學學報, 2001

23、,17(2): 91.5王萬能, 全學軍, 陸天健, 等. 超聲波協(xié)助桔皮總黃酮的提取J. 江蘇農(nóng)業(yè)學報, 2006,22(2): 168.6朱玲, 楊峰, 唐德才. 枳實的藥理研究進展J. 中醫(yī)藥學報, 2004, 32(2): 64.7譚生建, 劉剛, 姜韌, 等. 高效液相色譜法測定枳實中導滯丸中橙皮苷和黃芩苷含量J. 解放軍藥學學報, 2006, 22(5): 

24、;387.8吳宏偉, 雷海民, 李強, 等.高效液相色譜法測定陳皮多甲氧基黃酮部位中3種黃酮的含量J. 藥物分析雜志, 2007, 27(12): 1895.9張淑芬，馬炳倫，鄭大威, 等. 柑桔果皮中多甲氧基黃酮的LC-APCI-MS定性分析J. 分析測試學報, 2004, 23(9): 110.10Xiao Wang, Fuwei Li, Hongxia Zhang, et al. Preparative isolation and purification of polymethoxylated flavones from Tange