香椿葉中總黃酮的提取方法及藥理作用研究進(jìn)展

1、香椿葉中總黃酮的提取方法及藥理作用研究進(jìn)展李寶霞 董雙濤 冀小君 蔡翠芳 山西生物應(yīng)用職業(yè)技術(shù)學(xué)院 030031【摘要】本文對(duì)香椿葉中總黃酮的提取方法及香椿葉的藥理作用研究進(jìn)展做了綜述，以備相關(guān)研究者參考。【關(guān)鍵詞】香椿，總黃酮，藥理作用香椿（Toon sinensis Roem）為楝科香椿屬落葉喬木，又名椿、椿芽、椿甜樹(shù)、椿陽(yáng)樹(shù)等1。香椿因其濃郁的香氣，柔嫩的質(zhì)地和獨(dú)特的口感，深受人們的喜愛(ài)，是我國(guó)傳統(tǒng)的調(diào)味蔬菜，同時(shí)又是一味多用的良藥。本草綱目記載：椿葉、椿皮、椿根性溫味微苦，無(wú)毒，均可入藥。1 香椿葉中總黃酮的提取方法 現(xiàn)有文獻(xiàn)報(bào)道的關(guān)于香椿葉中總黃酮的提取方法主要有以下幾種：1.1超臨

2、界 CO2提取在此方法下，最佳提取工藝：稱(chēng)取 50g原料，設(shè)定萃取壓力 30MPa，萃取溫度 45，分離室溫度 35、壓力7Mpa；分離室溫度 35、壓力與儲(chǔ)罐平衡；萃取時(shí)間2.5h；夾帶劑用量為3mL/g原料：CO2流量 35L/h，提取 5次,前 2次用無(wú)水乙醇、后 3次用 85%乙醇做夾帶劑，提取物平均得率0. 5%2。1.2微波輔助提取 在此方法下，最佳提取工藝：乙醇濃度50%，料液比1:40(g/mL)，微波作用時(shí)間9min，微波功率500w，總黃酮得率4. 285%3。1.3超聲波輔助提取在此方法下，最佳提取工藝：乙醇溶液濃度40%、乙醇用量40 mL1g粗粉、超聲電功率150 W

3、、作用時(shí)間40 min、超聲頻率20 kHz，在這個(gè)條件下試驗(yàn)，總黃酮提取率為98. 24%4。1.4酶法輔助提取在此方法下，最佳提取工藝：酶濃度0.20mg/mL，酶解溫度45，酶解pH 5.0，酶解時(shí)間120min，浸提溫度90，浸提時(shí)間120min，料液比140?？傸S酮得率可達(dá)2.00%5。1.5半仿生法提取在此方法下，最佳提取工藝：稱(chēng)取香椿葉粉25g，分別以pH=2的鹽酸溶液，pH=7.5、pH=8.5的氯化氨-氨水的緩沖溶液作為提取液，料液比 112(g/mL)，在 80條件下，每次提取1h，共提取3次。在此條件下, 黃酮提取量為10.3417mg/g香椿葉 6-7。1.6常規(guī)溶劑提

4、取1.6.1溶劑回流法提取 在此方法下，最佳提取工藝：料液比19、溫度70、提取時(shí)間90min、乙醇濃度70%、提取4次。香椿葉總黃酮提取量為20.154 5mg/g8。1.6.2乙醇浸提法 在此方法下，最佳提取工藝：乙醇濃度70%、料液比150、浸提溫度70、浸提時(shí)間2. 0 h，在此提取工藝條件下香椿葉總黃酮的提取率可達(dá)5.84%9。1.6.3堿提酸沉法在此方法下，最佳提取工藝：準(zhǔn)確稱(chēng)取一定重量的樣品，加入6倍樣重的蒸餾水，煮沸。在攪拌條件下，緩慢加入石灰乳至pH 89。在此條件下，微沸 2030 min , 趁熱過(guò)濾。濾渣再加入 6倍量的水，同上操作 1 次，合并濾液。在 6070 下，

5、用鹽酸調(diào)節(jié) pH至5.0 攪勻，靜置24 h, 抽濾。沉淀物水洗至中性 , 60恒溫下干燥得粗提物。1.7不同提取方法提取效率的比較黃酮提取率大小順序?yàn)椋何⒉ǚ?gt;酶法>超聲波法>常規(guī)溶劑回流法>超臨界 CO2提取>半仿生提取法。由于微波提取時(shí)伴有攪拌，可以使試樣與試劑的接觸界面不斷快速更新，有助于提高提取效率，同時(shí)微波技術(shù)具有即時(shí)深層加熱作用，極大地縮短了提取時(shí)間，特別有利于用連續(xù)微波萃取線作連續(xù)式生產(chǎn)10 。在常規(guī)溶劑提取方法中總黃酮的提取率：乙醇回流法>乙醇浸提法>堿提酸沉法。相比之下，乙醇回流法操作簡(jiǎn)單，溶劑易回收，且工業(yè)酒精價(jià)格便宜，是一種可行

6、的方法11。2香椿葉的藥理作用2.1抗菌作用陳元坤12等研究表明：香椿皮水煎液及乙醇處理后的水煎液對(duì)大腸桿菌C83902、沙門(mén)氏菌C500、葡萄球菌CAU0183 的最小抑菌濃度為0.125 g/mL，對(duì)大腸桿菌K88分離株的最小抑菌濃度為0.25 g/mL；朱育鳳等13的研究表明，香椿葉水、醇提取物對(duì)金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌有抑殺作用。2.2抗炎作用阮志鵬14等研究認(rèn)為，香椿葉水提物抗炎作用機(jī)制：低、高劑量香椿葉水提物可降低腫脹足爪組織中NO及PGE2 （血清中前列腺素 E2）含量；低劑量香椿葉水提物可降低血清中NO含量。香椿葉水提物可能通過(guò)影響炎癥介質(zhì)釋放和減少NO的生成而起到抑

7、制角叉菜膠性大鼠足腫脹作用。2.3抗癌作用陳玉麗15等研究香椿葉不同提取部位的體外抗腫瘤作用，香椿葉提取物的各萃取部位在體外對(duì)SGC-7901（人胃腺癌細(xì)胞）和K562（白血病細(xì)胞）有明顯的抑制作用，乙酸乙酯部位的半數(shù)抑制濃度分別為168.47g /mL 和102.53g /mL。結(jié)果表明：香椿葉提取物的各萃取部位能抑制人胃腺癌細(xì)胞SGC-7901和白血病細(xì)胞K562的增殖，有較強(qiáng)的體外抗腫瘤活性。2.4對(duì)體外蛋白質(zhì)非酶糖基化的抑制作用尋找有效的非酶糖基化抑制劑，以解決糖尿病慢性并發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展，是研究者的一個(gè)重要課題。陳紹紅16等通過(guò)建立體外蛋白質(zhì)非酶糖基化模型, 研究了在體外模型中香椿葉

8、醇提物對(duì)蛋白質(zhì)非酶糖基化具有抑制作用。2.5體外抗氧化作用香椿葉中70 %乙醇提取物在菜油中的抗氧化性較強(qiáng)，與檸檬酸的協(xié)同效果最好，其抗氧化能力均強(qiáng)于單個(gè)乙醇提取物和單用檸檬酸的抗氧能力。另外，用70 %乙醇提取物在豬肉保鮮防腐方面有明顯的作用17-18，是天然抗氧化劑的良好來(lái)源。陳叢瑾等19測(cè)得香椿葉提取物以總黃酮計(jì)算的清除DPPH·（1，1-二苯基苦基苯阱）的半數(shù)抑制濃度（IC50）值約為蘆丁的6.7倍、槲皮素的3.3倍、沒(méi)食子酸的1.6倍。王昌祿等20研究表明，香椿老葉提取純化后的物質(zhì)具有很強(qiáng)的抗氧化活性，采用Fe3+被還原成Fe2+的方法測(cè)定的總還原力時(shí)總還原力為（863.5

9、9±13.90）mg/g；DPPH·清除能力和Fe3+還原抗氧化能力測(cè)試（FRAP）均呈現(xiàn)明顯的劑量依賴(lài)性關(guān)系，顯著高于相同濃度的2，4 二叔丁基甲基苯酚（BHT）（P0.01），與同濃度的維生素C相當(dāng)。可以使用不同的抗氧化模型來(lái)評(píng)價(jià)香椿葉提取物的抗氧化活性21-25。3結(jié)語(yǔ)綜上所述，香椿作為我國(guó)藥食兩用的植物具有較強(qiáng)的藥理作用，國(guó)內(nèi)外的研究多集中在香椿葉和香椿樹(shù)皮上, 對(duì)化學(xué)成分的研究多集中在總黃酮、沒(méi)食子酸及衍生物及多糖類(lèi)成分, 并且對(duì)黃酮和多糖類(lèi)成分藥理作用的研究較多。因此有必要對(duì)香椿中的揮發(fā)油進(jìn)行進(jìn)一步提取分離，以期開(kāi)發(fā)出一種天然無(wú)害的可用于食品的香料物質(zhì)?！緟⒖嘉?/p>

10、獻(xiàn)】1中國(guó)科學(xué)院中國(guó)植物志編輯委員會(huì)中國(guó)植物志M北京：科學(xué)出版社，1997.2 周富臣，盧斌斌，李炎強(qiáng)等香椿葉超臨界CO2 萃取物在卷煙中的作用研究J香料香精化妝品2008,8（4）：26-29.3孟志芬，谷永慶，張偉鋼香椿葉中總黃酮的微波提取工藝J光譜實(shí)驗(yàn)室.2008,11(3):1095-1098.4 丁彩梅，曾榮華，丘泰球等香椿葉黃酮類(lèi)化合物超聲強(qiáng)化提取研究J中成藥2005,12（12）：1390-1391.5 孟志芬，董彩霞，任多勝酶法提取香椿葉中總黃酮的工藝研究J光譜實(shí)驗(yàn)室2005,9(5):1086-1089.6 陳叢瑾，黃克瀛，王貴武等香椿葉總黃酮不同提取方法的比較J食品研究與開(kāi)

11、發(fā).2009,3(3):57-59.7 陳叢瑾，黃克瀛，李德良正交試驗(yàn)法優(yōu)選香椿葉總黃酮的半仿生提取工藝J食品科技2007,6:119-121.8 陳叢瑾，楊國(guó)恩，黃克瀛溶劑回流法提取香椿葉總黃酮的工藝研究J. 中國(guó)藥房2008（19）：2108-2110.9 黃紅英，鄧斌，周蕓等香椿葉總黃酮提取工藝的研究J.安徽農(nóng)業(yè)科2010,11（38）：5879-5881.10劉川生.微波萃取技術(shù)在天然藥物提取中的研究進(jìn)展J.中國(guó)天然藥物,2003,1(3):187-19.11 李秀信, 張?jiān)好? 劉青利, 香椿果實(shí)中黃酮類(lèi)化合物的提取及鑒定J. 河北 林果研究.2002,6(6):126-128.12

12、 陳元坤，歐紅萍，房春林等香椿皮及臭椿皮體外抑菌活性測(cè)定J. 四川畜牧獸醫(yī)2011（5）：27-28.13 朱育鳳，周琴妹，陶開(kāi)春臭椿葉與香椿葉的比較鑒別及體外抗菌試驗(yàn)J中藥材，2000，23（8）：484.14 阮志鵬，陳玉麗，林麗珊香椿葉水提物對(duì)小鼠炎癥抑制作用J中國(guó)公共衛(wèi)生2010,3(26):334-336.15 陳玉麗，阮志鵬，林麗珊等香椿葉提取物的體外抗腫瘤活性J福建中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)2011，21（2）：30-3216陳紹紅, 任鵬康, 趙云濤香椿葉醇提物對(duì)體外蛋白質(zhì)非酶糖基化的抑制作用J安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)2010, 38( 11): 5642 564317 李秀信，張?jiān)好?，劉青利等香椿葉

13、提取物抗氧化作用的研究J.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)2002,9（23）：114-117.18 余鈾，兩種天然抗氧化劑對(duì)豬肉保鮮效果的比較研究J食品科學(xué)，1995，16 (10) :69 7119 陳叢瑾，黃克瀛，李德良等香椿葉提取物清除DPPH自由基的測(cè)定方法J.林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè)，2006，26（3）：69.20 王昌祿，江慎華，陳志強(qiáng)等香椿老葉中活性物質(zhì)提取及其抗氧化活性的研究J農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào)，2007，23（10）：229.21 Chen HY，Lin YC，Hsieh CL. Evaluation of antioxidantactivity of aqueous extract of some selected nutraceuticalherbsJ. Food Chemi，2007，104（4）：1 418.22 周麗，張京芳，陸剛等不同生長(zhǎng)期香椿葉片的抗氧化活性及其抗氧化作用分析J西北植物學(xué)報(bào)，2007，27（3）：526.23 田迪英，楊榮華果蔬抗氧化活性的研究J食品與發(fā)酵工業(yè)，2003，29（4）：372