金膽膠囊中龍膽苦苷的定性定量研究

1、金膽膠囊中龍膽苦苷的定性定量研究         09-01-30 16:27:00     作者：潘利明，王青    編輯：studa20【摘要】  目的 建立金膽膠囊的定性定量分析方法。方法 采用薄層色譜法對金膽膠囊中的龍膽進行鑒別；HPLC法對金膽膠囊中的龍膽苦苷進行含量測定，色譜柱: DiamonsilTM 柱(200 mm×4.6 mm, 5 m) ；流動相: 甲醇水（體積比3070），流速1.0 mL/m

2、in；柱溫:30 ；檢測波長：270 nm。結果 金膽膠囊與龍膽苦苷對照品在相同的位置上顯綠色熒光斑點；龍膽苦苷標準曲線的回歸方程為: A=257.26 + 0.1058，r=0.999 9，在0.020.32 mg/mL質量濃度范圍內線性關系良好，平均回收率為99.37，RSD2.20（n5）。結論 所建立的定性定量方法簡便易行，專屬性強，重現(xiàn)性好，可作為控制金膽膠囊質量的方法。 【關鍵詞】  金膽膠囊；龍膽苦苷；薄層色譜法；高效液相色譜法Abstract:Objective To establish a method for analyzing Jindan capsules.M

3、ethod Gentiopicroside in Jindan capsules was analyzed by TLC. The content of gentiopicroside was determined by HPLC using a DiamonsilTM column (200 mm ×4.6 mm, 5  m). The mobile phase consisted of methanolwater（3070）with a flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was 270 nm.Result

4、  Jindan capsule and the control gentiopicroside had the same green fluorescence spot on TLC. The standard curve of gentiopicroside was as following: Y=257.26x+0.1058(r=0.999 9) with a good linearity over the range of 0.020.32 mg/mL. The average recovery of gentiopicroside was 99.37% with RSD&#

5、160; 2.20% (n=5). Conclusion The method is sample and reproducible for the quality control of Jindan capsules.Key words:Jindan capsules;  gentiopicroside；TLC;  HPLC    金膽膠囊是由龍膽、金錢草、茵陳、虎杖等13味藥材組成的復方制劑，具有清熱祛濕、理氣化瘀、疏肝利膽等功能，臨床上用于治療急慢性膽囊炎、膽結石。龍膽為方中君藥，具有利膽、抗炎、健胃、降壓等作用。龍膽中主含環(huán)烯醚萜苷類成

6、分, 龍膽苦苷為其中主要有效成分1,2。為控制其質量，本文對處方中的龍膽進行了定性定量研究，現(xiàn)報道如下：1  儀器與試藥1.1  儀器    Agilent1100高效液相色譜儀包括：真空脫氣機，四元梯度泵，自動進樣器，二極管陣列檢測器（DAD檢測器）；AS3120A Ultrasonic Cleaner超聲波清洗器（Automatic ScienceTianJin）；分析天平（上海精密科學儀器有限公司）；R202 旋轉蒸發(fā)器（上海申勝生物技術有限公司）。1.2  試劑與藥品    甲醇為色譜純；硅膠GF

7、254板（青島海洋化工廠）；正丁醇、無水乙醇、乙酸乙酯等試劑均為分析純；龍膽苦苷對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：0770200004）；金膽膠囊樣品（自制，批號為20071027、20071030、20071102）。龍膽藥材購買自廣州致信中藥飲片有限公司，經(jīng)廣東藥學院中藥鑒定教研室劉基柱老師鑒定為龍膽科植物條葉龍膽Gentiana manshurica Kitag。2  龍膽的薄層鑒別2.1  龍膽對照藥材溶液的制備    稱取龍膽藥材適量，研細，取10 g，加入甲醇50  mL，超聲處理30 min，濾過，濾液用等量的乙酸乙

8、酯萃取3次，分取乙酸乙酯萃取部分的溶液，濃縮至1  mL，作為對照藥材溶液。2.2  龍膽苦苷對照品溶液的制備    精密稱取龍膽苦苷對照品加甲醇制成1  mL含0.9  mg的對照品溶液。2.3  金膽膠囊供試品溶液的制備    取本品10粒，傾出其中粉末稱重4.54 g，加入甲醇50  mL，超聲提取40 min，過濾，濾液用等量的乙酸乙酯萃取2次，分取乙酸乙酯溶液，減壓濃縮至1   mL，作為金膽膠囊供試品溶液。2.4  陰性對照溶液的制備    除龍膽外，按處方配制諸藥，照供試品制備工藝操作，取約5 g研勻，按“2.4”項下法制得陰性對照溶液。2.5  薄層層析    吸取供試品溶液、對照品溶液、陰性對照溶液及對照藥材溶液各10 L,分別點于同一硅膠GF254薄層板上,以氯仿甲醇水（體積比30103）為展開劑,展開,取出,晾干,置紫外燈(365 nm) 下檢視2。供試品色譜中，在與對照品色譜中相應的位置上（Rf=0.57），顯相同綠色熒光斑點，而陰性對照色譜在相應的位置上則無斑點。見圖1。3  龍膽苦苷的含量測定3.1