生物制品學(xué)復(fù)習(xí)題

1、生物制品學(xué)復(fù)習(xí)題名詞解釋生物制品：指采用現(xiàn)代生物技術(shù)手段人為地創(chuàng)造一些條件，借用某些微生物、動(dòng)物 或動(dòng)物體來(lái)生產(chǎn)某些初級(jí)或次級(jí)代謝產(chǎn)物，或利用生物體的某一組成部分，制成作 為診斷或治療或預(yù)防疾病或達(dá)到某種特殊醫(yī)學(xué)目的的醫(yī)藥用品，統(tǒng)稱為生物制品。 滅活疫苗：又稱死疫苗，是指利用加熱或甲醛等理化方法，將人工大量培養(yǎng)的完整 的病原微生物殺死，使其喪失感染性和毒性而保持其免疫原性，并結(jié)合相應(yīng)的佐劑 而制成的疫苗。減毒活疫苗：又稱弱毒疫苗，是指將微生物的自然強(qiáng)毒株通過(guò)物理的、化學(xué)的和生 物學(xué)的方法，連續(xù)傳代，使其對(duì)原宿主喪失致病力或只引起亞臨床感染，但仍保持 良好的免疫原性、遺傳特性，由此制備的疫苗稱為

2、減毒活疫苗。亞單位疫苗：指提取或合成細(xì)菌、病毒外殼的特殊蛋白結(jié)構(gòu)及抗原決定簇制成的疫 苗。因不是完整病毒而是病毒的一部分物質(zhì)，故稱亞單位疫苗。細(xì)胞因子：是一組由機(jī)體的免疫細(xì)胞和非免疫細(xì)胞合成和分泌的小分子或中等分子 量的可溶性蛋白質(zhì)（多肽）與糖蛋白。合成肽疫苗：也成為表位疫苗，是指用化學(xué)方法合成能夠誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生免疫保護(hù)的 多肽制成的疫苗。微膠囊疫苗：也稱可控緩釋疫苗，是指使用微膠囊技術(shù)將特定的抗原包裹后制成的 疫苗。單克隆抗體：小鼠骨髓瘤細(xì)胞和經(jīng)某抗原免疫過(guò)的免疫細(xì)胞融合后產(chǎn)生雜合細(xì)胞， 可持續(xù)分裂并產(chǎn)生相應(yīng)抗體，該抗體稱單克隆抗體。血液代用品：指具有載氧功能、維持血液滲透壓和酸堿平衡及擴(kuò)充容

3、量的人工制劑。 人HCG:人絨毛膜促性腺激素，是婦女在妊娠時(shí)由胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞合成并分泌的一 種異源二聚體的糖蛋白激素?；蚬こ炭贵w：根據(jù)研究者的意圖在基因水平對(duì)Ig分子進(jìn)行剪切、連接或修飾，甚 至是在人工全合成后導(dǎo)入受體細(xì)胞表達(dá)，產(chǎn)生新型抗體，也成第三代抗體。普通冰凍血漿：又稱冷凍血漿，制備的血液來(lái)源于保質(zhì)期內(nèi)過(guò)期不滿五天的抗凝全 血或保存期滿一年的新鮮冷凍血漿。血漿蛋白制品：是指從人血漿中分離制備的有明確臨床療效和應(yīng)用意義的蛋白制品 的總稱，國(guó)際上也稱血漿衍生物。冷沉淀：又稱冷沉淀抗血友病因子。將約 200ml新鮮冷凍血漿在16c復(fù)融后留下 冰渣狀不溶性成分，迅速離心后得到白色沉淀物即“冷沉

4、淀”，主要有效成分是凝血 因子vm o細(xì)胞工程：以細(xì)胞為基本單位，在體外條件下進(jìn)行培養(yǎng)、繁殖，或人為地使用細(xì)胞 某些生物學(xué)特性按人們的意愿發(fā)生改變，從而改變生物品種或創(chuàng)造新品種，加速繁 育動(dòng)植物個(gè)體，或獲得某種更有用的活性物質(zhì)或生物制品的過(guò)程?；蚬こ桃呙纾阂卜Q遺傳工程疫苗，是指使用重組DNA技術(shù)克隆并表達(dá)保護(hù)性抗原 基因，利用表達(dá)的抗原產(chǎn)物，或重組體本身制成的疫苗。雙特異性抗體：對(duì)天然抗體分子進(jìn)行改造，把其他效應(yīng)物如毒素、酶、細(xì)胞因子、 受體分子通過(guò)一定方法與兩種雜交抗體 Fab片段或V區(qū)連接起來(lái)，使之既可與靶細(xì) 胞結(jié)合，又可介導(dǎo)其他一些效應(yīng)功能，從而最大限度殺傷靶細(xì)胞，這種具有雙特異 性的

5、抗體分子就稱為雙特異性抗體。人源性抗體：以人體為來(lái)源，從經(jīng)過(guò)免疫的組織中提取分離得到的抗體制品，稱人源性抗體?？躬?dú)特型抗體疫苗：指適用于特定抗原的免疫原性相近的抗抗體（Ab2）作抗原制成 的疫苗，是免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)學(xué)說(shuō)發(fā)展到新階段的產(chǎn)物。單鏈抗體：在重鏈V區(qū)cDNA3 '端（VH端）與輕鏈V區(qū)cDNA5 '端（VL端）之 問，用一寡聚核甘酸接頭鏈接成單鏈可變區(qū)基因片段，表達(dá)出一具有抗原結(jié)合能力 的多肽稱單鏈抗體?；蚬こ蹋河址QDNA的體外重組技術(shù)，即重組 DNA的實(shí)際應(yīng)用。它是把細(xì)胞中的 DNA分離出來(lái)，在體外進(jìn)行切割、拼接和重組后，引入到適當(dāng)?shù)募?xì)胞中進(jìn)行復(fù)制和 表達(dá)。問答1.生物

6、制品原料的保存方法有哪些？答：（1）冷凍法：適用于所有的生物原料，常用-40C速凍；（2）有機(jī)溶劑脫水法：常用的有機(jī)溶劑是丙酮。適用于原料少而價(jià)值高、有機(jī)溶 劑對(duì)活性物質(zhì)沒有破壞作用的原料。（3）防腐劑保鮮：常用乙醇、苯酚、甘油等。該法適用于液體原料，如發(fā)酵液、 提取液等。對(duì)不同的生物還有不同的保存方法，例如對(duì)于動(dòng)物細(xì)胞可以有組織塊保存法、 組織懸液保存法、單層細(xì)胞保存法等。對(duì)于微生物菌種的保存有斜面保存法、礦油 法、干硅膠法、真空冷凍干燥法等。2.簡(jiǎn)述人源性生物制品的特點(diǎn)。答：（1）效價(jià)高，療效可靠。此類藥物本身即是人體中具有重要功能的酶、激素等生 理活性物質(zhì)，經(jīng)純化后很少的量即可產(chǎn)生顯著療

7、效，效價(jià)高，治療效果極好。（2）安全性好，不宜產(chǎn)生副反應(yīng)。人體來(lái)源的藥物與人體內(nèi)成分差異極小， 不易 產(chǎn)生如免疫反應(yīng)等副作用。（3）穩(wěn)定性好。該類提純產(chǎn)品均可制成凍干制劑， 在低溫下可長(zhǎng)期保存，有利于 運(yùn)輸、貯存和使用。（4）資源有限，研究意義重大。人體許多成分都具有藥物活性，但由于倫理和法 律的因素，人源性生物制品的原料是十分有限的。通過(guò)對(duì)人體活性物質(zhì)的結(jié)構(gòu)、功 能的深入研究，對(duì)于使用現(xiàn)代生物技術(shù)生產(chǎn)藥物具有十分重要的意義。3.理想菌苗的條件有哪些？答：1）安全，不能有毒性，大量人群應(yīng)用疫苗，即使有低水平的毒性也不能接受。2）遺傳性狀穩(wěn)定，無(wú)致癌性，無(wú)致畸或致流產(chǎn)性。3）結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單清楚，可生物

8、降解，有生物相容性，與組織抗原無(wú)免疫學(xué)交叉反應(yīng)4）接受疫苗接種的各年齡組人群必須能夠很高比例地產(chǎn)生保護(hù)性免疫。成功的 疫苗一般能產(chǎn)生長(zhǎng)效的免疫記憶。5）多價(jià)，有更大的覆蓋面，最好一次性免疫。6）能口服，能有效誘導(dǎo)粘膜免疫。7）為大量人群應(yīng)用，疫苗必須廉價(jià)。8）易于生產(chǎn)、貯存及服務(wù)，不需冷藏。4 .簡(jiǎn)述治療性疫苗與預(yù)防性疫苗的區(qū)別。答：治療性疫苗與預(yù)防性疫苗的主要區(qū)別有：(1)治療性疫苗的適用對(duì)象是感染者，或免疫應(yīng)答底下的患者，故疫苗療法屬免疫治 療；而預(yù)防性疫苗的接種對(duì)象是健康群體，對(duì)易感人群均可應(yīng)用，主要起免疫預(yù)防 作用，它對(duì)機(jī)體大多無(wú)病理?yè)p傷，使用安全可靠。(2)治療性疫苗與預(yù)防性疫苗使用

9、的目的不同， 后者是為了防病，前者是為了治療或 防止病情惡化。(3)治療性疫苗的另一個(gè)突出特點(diǎn)是應(yīng)用時(shí)必須考慮適應(yīng)癥與禁忌癥，也可根據(jù)需要進(jìn)行各種組合和調(diào)整。作為一種新興的以治療為目的的疫苗，在設(shè)計(jì)思路、制備手 段和應(yīng)用技術(shù)方面均體現(xiàn)多元化、多層面和與現(xiàn)代分子生物學(xué)及細(xì)胞學(xué)技術(shù)密切結(jié) 合的特點(diǎn)，其復(fù)雜程度遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出傳統(tǒng)的預(yù)防性疫苗。5 .簡(jiǎn)述血液代用品的基本要求。答：(1)人血液代用品應(yīng)該具有較高的攜氧能力，在氧分壓正常生理范圍內(nèi)，能有效 的向組織供氧。(2)與人血液所有組分具有良好的生物相容性，同時(shí)能很好的維持血液滲透壓、 酸堿平衡、粘稠度和血容量。(3)無(wú)免疫原性(無(wú)致敏原性)、無(wú)血液病源微

10、生物污染。(4)體內(nèi)循環(huán)半衰期在24h以上，在正常灌注條件下不產(chǎn)生腎毒副作用。(5)在低溫條件下，產(chǎn)品保質(zhì)期大于 6個(gè)月。6 .簡(jiǎn)述尿激酶制備方法。答：目前主要用吸附法從新鮮男性尿液中提取尿激酶，吸附劑主要選用樹脂和硅藻 土。(1)硅藻土吸附法：收尿-沉淀除雜-硅藻土吸附-洗脫-除熱源、色素-CMC濃縮-干燥724樹月旨吸附法：預(yù)處理-吸附-清洗-洗脫-鹽析-再次吸附、鹽析-吸附-洗脫-凍干7 .簡(jiǎn)述細(xì)胞破碎方法。答：(1)磨切法。該法屬于機(jī)械破碎法，對(duì)大規(guī)模破碎細(xì)胞的效果較好，特別是對(duì) 于有大量菌絲體的微生物和一些有亞細(xì)胞器的微生物細(xì)胞。(2)壓力法。有滲透壓法、高壓法和減壓法 3種。(3)

11、反復(fù)凍融法。該法是將細(xì)胞放在低溫下冰凍，然后在室溫中融化，如此反復(fù)多 次而使細(xì)胞壁破裂的細(xì)胞破碎技術(shù)。該方法具有設(shè)備簡(jiǎn)便、活性保持好等優(yōu)點(diǎn)，但 用時(shí)較長(zhǎng)，只適用于細(xì)胞壁較脆弱的菌體，破碎率低，且反復(fù)凍融易使一些蛋白質(zhì) 變性。(4)超聲波振蕩破碎法。是當(dāng)今應(yīng)用較多的一種細(xì)胞破碎方法。該方法破碎效果較好，但由于局部發(fā)熱，對(duì)活性有損失。超聲破碎的效率與聲頻、聲能、 pH、離子強(qiáng) 度、細(xì)胞濃度及菌種類型等因素有關(guān)。(5)酶融破碎法。是利用酶反應(yīng)分解細(xì)胞壁上的特殊連接鍵，破壞細(xì)胞是細(xì)胞內(nèi)含 物溶解出來(lái)的目的。該法分為外加酶和自溶酶法。與其它破碎方法相比，酶融破碎法具有容易控制(pH、溫度)、專一性好和經(jīng)

12、濟(jì)等優(yōu)點(diǎn)。但它可使細(xì)胞懸浮液粘度 增大，過(guò)濾速度下降，所以應(yīng)用較少。8,簡(jiǎn)述我國(guó)開發(fā)治療性疫苗需要注意的問題。答：（1）創(chuàng)新性與可行性。為發(fā)展我國(guó)的科技事業(yè)，我國(guó)研制疫苗應(yīng)盡可能不重復(fù) 國(guó)外已有的疫苗類型或路線，同時(shí)構(gòu)思時(shí)也要考慮可行性。過(guò)于復(fù)雜化的研究最終 只能停留于實(shí)驗(yàn)室而不可能進(jìn)入產(chǎn)業(yè)化。（2）加強(qiáng)基礎(chǔ)性研究。基礎(chǔ)研究是開發(fā)產(chǎn)品的先決條件，只有長(zhǎng)期進(jìn)行基礎(chǔ)性研究 才會(huì)提出新的思路和策略，否則所謂的“新”思路只能停留于模仿性或低水平的重 復(fù)。（3）長(zhǎng)期評(píng)估與考核。雖然治療性的疫苗研究與應(yīng)用已有較長(zhǎng)的歷史，但對(duì)一種新 藥物的療效評(píng)估原則同樣適用于治療性疫苗，需要較長(zhǎng)期的考核才能提出適應(yīng)癥與

13、禁忌癥。（4）重視不同機(jī)體的免疫應(yīng)答類型。 由于治療性疫苗的作用是通過(guò)誘生免疫應(yīng)答而 完成的，因此應(yīng)充分估計(jì)不同個(gè)體進(jìn)行治療性疫苗的特殊性，可能這種“個(gè)體”化 特征較一般藥物應(yīng)用更為突出。（5）防止片面性。在研制和開發(fā)治療性疫苗中既要看到發(fā)展治療性疫苗的前景及價(jià) 值，又需考慮并非所有持續(xù)性感染的人群均用一種治療方法即可完全消除病原體。 因此客觀全面的認(rèn)識(shí)與評(píng)估治療性疫苗，是人類成功的運(yùn)用治療性疫苗控制持續(xù)性 感染的關(guān)鍵之一。9,現(xiàn)代生物技術(shù)包括哪些內(nèi)容？答：包括農(nóng)業(yè)生物技術(shù)，家畜生物技術(shù)，食品生物技術(shù)，環(huán)保生物技術(shù)，能源生物 技術(shù)，海洋生物技術(shù)，醫(yī)藥生物技術(shù)，生物制品技術(shù)等。10.簡(jiǎn)述基因工程

14、生物制品的質(zhì)量要求。答：除了一般生物制品安全性、效力性方面的共同要求之外，基因工程生物制品的 質(zhì)量要求還包括以下幾點(diǎn)：（1）要求提供關(guān)于表達(dá)體系的詳細(xì)資料，以及工程菌（或工程細(xì)胞）的特征、純度 （是否污染）和遺傳穩(wěn)定性等資料。（2）提供培養(yǎng)方法和產(chǎn)量穩(wěn)定性、純化方法以及各步中間產(chǎn)品的收率和純度，除去 微量的外來(lái)抗原、核酸、病毒或微生物等方法。（3）基因工程產(chǎn)品的理化性質(zhì)和生物學(xué)性質(zhì)與天然產(chǎn)品完全相同者一般不需重復(fù)所 有動(dòng)物毒性試驗(yàn)，與天然產(chǎn)品略有不同者續(xù)作較多試驗(yàn)，與天然產(chǎn)哦有很大不同者 續(xù)作更多試驗(yàn)，包括致癌、致畸和對(duì)生育力的影響等。（4）凡蛋白質(zhì)工程產(chǎn)品，必須非常慎重地評(píng)價(jià)其對(duì)人體的有益和

15、有害作用，提供足 夠的安全性資料。（5）所有基因工程產(chǎn)品都必須經(jīng)過(guò)臨床試驗(yàn)，以評(píng)價(jià)其安全性和有效性。11,有哪些病毒能通過(guò)血液傳播？答：目前已經(jīng)確認(rèn)可以通過(guò)受污染的血液和其制品傳播的病毒主要有：乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）、人類免疫缺陷病毒（HIV）、和嗜人T淋巴細(xì)胞 病毒I型（HILV-I ）等，此外，尚有巨細(xì)胞病毒（CMV）、非淋巴細(xì)胞瘤病毒（EBV）、 甲型肝炎病毒（HAV）、人類乳頭狀瘤病毒（HPV）和雅克病病毒（CJDV）等。其中HIV、HBV、HCV幾種病毒由于感染率高，危害特別嚴(yán)重，受到人們的普 遍關(guān)注。12 .簡(jiǎn)述胰島素的用途和制備方法。答：胰島素的用途：胰島

16、素可作用于全身幾乎所有的組織細(xì)胞，其最主要的靶器官 是肝臟、肌肉及脂肪組織，調(diào)節(jié)糖、蛋白質(zhì)、脂肪三大營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在細(xì)胞的代謝和貯 存。胰島素能促進(jìn)細(xì)胞攝取葡萄糖，在肝臟和肌肉內(nèi)促進(jìn)糖原的合成及貯存，同時(shí) 抑制糖異生，結(jié)果使血糖去路增加而來(lái)源減少，降低血糖；促進(jìn)脂肪合成和貯存， 抑制脂肪分解；增加蛋白質(zhì)合成，組織蛋白質(zhì)分解及由氨基酸異生成葡萄糖，控制 血糖水平的穩(wěn)定。胰島素的制備方法（由動(dòng)物組織提?。禾崛》椒ㄖ饕煞旨?jí)提取鋅沉淀法和磷酸鈣 凝膠法。分級(jí)提取鋅沉淀法生產(chǎn)豬胰島素的方法：提取一濃縮一鋅沉淀一除酸性蛋 白質(zhì)一結(jié)晶，收集結(jié)晶，用丙酮、乙醴脫水后，真空干燥，即得結(jié)晶胰島素。13 .生物制品的

17、分類。答：按來(lái)源分，可分為：人源生物制品，動(dòng)物源生物制品，植物源生物制品，微生物源生物制品。按使用對(duì)象分，可分為：用于人的生物制品，用于家畜的生物制品，用于家禽的生物制品，用于作物的生物 制品。按機(jī)構(gòu)與功能分，可分為：疫苗類；抗體類；人血液代用品；重組細(xì)胞因子；反義寡核甘酸和重組激素類。14 . 一般生物制品分離純化的流程？答：/胞外產(chǎn)物 發(fā)酵液一細(xì)胞分離/細(xì)胞碎片分離'胞內(nèi)產(chǎn)物一周液分離'分離包含體 蛋白質(zhì)復(fù)性純化變性蛋白 產(chǎn)品制劑高度純化初步分離一濃縮15 .低溫乙醇法原理。答：低溫乙醇法是歷史上第一個(gè)真正工業(yè)化的血漿蛋白制品生產(chǎn)方法，且至今仍是 血漿蛋白制品生產(chǎn)廠家首選的

18、方法。該法是以混合血漿為原料，逐級(jí)降低酸度（從 pH 7.0降到pH 4.0）,提高乙醇濃度（從0升到40%）,同時(shí)降低溫度（從2c降到-2C）, 各種蛋白在不同的條件下以組分（粗制品）的形式分布從溶液中析出，并通過(guò)離心 或過(guò)濾分離出來(lái)。所得粗制品須經(jīng)進(jìn)一步超濾、色譜、除菌、病毒滅活、調(diào)制等步 驟制成最終產(chǎn)品。16 .流感病毒生物學(xué)特點(diǎn)和疫苗研究進(jìn)展。答：流感病毒的生物學(xué)特點(diǎn)：流感病毒屬于正黏病毒科，根據(jù)病毒內(nèi)部蛋白抗原性的不同分為甲（A）、乙（B）、 丙（C） 3型。僅甲型和乙型流感病毒引起臨床疾病。典型的流感病毒粒子呈球形，有包膜。顆粒由 3層組成，外層是兩種突起的表 面抗原，中層是一層類

19、脂體和一層膜蛋白（MP）,核心層是RNA基因及與之結(jié)合的 核蛋白（NP）, MP和NP是決定流感病毒型別的型特異性抗原。流感病毒的基因組由分節(jié)段的單股負(fù)鏈 RNA構(gòu)成。由于基因組的階段性、高高 突變率和頻繁的基因重配，造成免疫變異性大，特別是甲型流感病毒的表面抗原。甲型流感病毒在動(dòng)物以及人類中均有發(fā)現(xiàn)，雖然動(dòng)物亞型病毒感染人類的概率 不高，但病死率很高。流感病毒疫苗研究的進(jìn)展：流感病毒滅活疫苗是目前注冊(cè)的唯一人用流感疫苗。目前用于免疫人群的疫苗 主要是針對(duì)甲型流感病毒 H1N1亞型、H3N2亞型以及乙型流感病毒的三聯(lián)滅活疫 苗。亞單位流感疫苗的成分主要是純化的流感病毒膜蛋白表面抗原。目前正在研

20、制的流感疫苗主要有減毒活疫苗、基因工程疫苗、核酸疫苗、通用 疫苗等類型。利用生物重組技術(shù)獲得基因重配的減毒活疫苗株通過(guò)基因組合，產(chǎn)生 的疫苗病毒表現(xiàn)出減毒、溫度敏感、冷適應(yīng)的特點(diǎn)，且遺傳學(xué)穩(wěn)定、不傳播，臨床 研究證明該疫苗安全有效。但由于流感病毒減毒活疫苗的效果受人群免疫狀態(tài)的嚴(yán) 重制約，重配疫苗株的基因常不穩(wěn)定，雖已有 50余年的歷史，但至今仍處于研制階 段。目前基因工程流感疫苗大多是針對(duì) HA、NA及M2蛋白。流感核酸疫苗的目的 基因主要針對(duì)NP蛋白和HA蛋白的編碼基因，這項(xiàng)研究可能提示研制出一種通用 的流感疫苗。17 .生物制品的生產(chǎn)特點(diǎn)。答：（1）起步晚，發(fā)展速度快，前景美好。（2）有

21、巨大的科研價(jià)值、經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益，因?yàn)樯镏破范嗌婕皣?guó)民的健 康長(zhǎng)壽、社會(huì)穩(wěn)定和經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展。（3）研發(fā)的產(chǎn)品面廣，具有高速的成長(zhǎng)性和廣闊的發(fā)展空間。18 .什么是基因治療？基因治療有什么目的？答：基因治療時(shí)將正?；?qū)朐煅杉?xì)胞或其它組織細(xì)胞，以糾正其特定的遺傳 缺陷，從而達(dá)到治療目的的方法。目的：預(yù)防和治療疾病?；謴?fù)異常表達(dá)或缺失的體細(xì)胞基因的功能；引入 有治療價(jià)值的其他來(lái)源基因。包括引入轉(zhuǎn)換基因，去除或轉(zhuǎn)移多種藥物的耐藥基因 等，針對(duì)以上目的，基因治療主要集中在免疫基因治療、月中瘤抑制基因治療和藥物 敏感基因治療等。19 .我國(guó)生物技術(shù)與生物制品發(fā)展優(yōu)勢(shì)和劣勢(shì)是什么？答：優(yōu)勢(shì)：政府

22、高度重視；研究開發(fā)條件明顯改善；人才和技術(shù)已有相當(dāng)儲(chǔ) 備；生物遺傳資源豐富。劣勢(shì)：科技投入明顯不足；技術(shù)儲(chǔ)備相對(duì)不足，創(chuàng)新成果不多；科技體制不 能適應(yīng)市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)的需要；發(fā)展高技術(shù)產(chǎn)業(yè)的政策環(huán)境和機(jī)制上不夠完善。論述1 .試述蛋白制品分離純化的常用方法答：(1)鹽析和有機(jī)溶劑沉淀法：這是兩種可以使蛋白質(zhì)沉淀的方法。鹽析是將硫 酸俊或硫酸鈉等中性鹽加入到蛋白質(zhì)溶液中，破壞蛋白質(zhì)的膠體顆粒在溶液中的穩(wěn) 定因素，而使其沉淀的方法。有機(jī)溶劑沉淀法是用有機(jī)溶劑如乙醇、丙酮等來(lái)沉淀 蛋白質(zhì)，但對(duì)蛋白質(zhì)有變性作用，所以必須在低溫下進(jìn)行，且蛋白質(zhì)沉淀后要立即 分離。(2)按分子大小分離的方法：有微濾法、超濾法、透

23、析法(即膜分離法)、凝膠色譜法、超速離心法等。(3)選擇性沉淀法：包括等電點(diǎn)沉淀法、變性沉淀法等。等點(diǎn)沉淀法是由于各種氨 基酸、肽、蛋白質(zhì)、酶等均為兩性電解質(zhì)，在等電點(diǎn)時(shí)化合物最穩(wěn)定，最易沉淀。 變性沉淀是根據(jù)各種蛋白質(zhì)在不同理化因子作用下穩(wěn)定性不同的原理，而常用語(yǔ)出 去提取液中的雜蛋白，適用范圍較窄。(4)各種色譜方法：有離子交換色譜、凝膠過(guò)濾色譜、親和色譜、疏水色譜與反相 色譜、高效液相色譜等。(5)電泳法：包括平板電泳、垂直板電泳、雙向電泳、雙向脈沖電泳、毛細(xì)管電泳、 等電聚焦電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳等?；驹矶际歉鶕?jù)蛋白質(zhì)在電場(chǎng)中移動(dòng)的 速率與電場(chǎng)強(qiáng)度和蛋白質(zhì)顆粒表面的靜電荷成正比。2.試述滅活疫苗、減毒活疫苗和亞單位疫苗的區(qū)別火活疫苗減毒活疫苗亞單位疫苗制備方法通過(guò)化學(xué)或物理 方法使病原體失 活通過(guò)非正常培養(yǎng) 選擇減毒株或無(wú) 毒株以化學(xué)方法獲得 病原體的某些具 免疫原性成分免疫機(jī)理病原體失去毒力， 但保持免疫原性， 接種后產(chǎn)生特異 性抗體或致敏淋 巴細(xì)胞接種后病原體字 體內(nèi)有一定生長(zhǎng) 繁殖能力，類似隱 性感染，產(chǎn)生細(xì) 胞、體液和局部免 疫接種后能刺激機(jī) 體產(chǎn)生