脂肽抗生素的研究概況

1、6 脂肽抗生素的研究概況脂肽（Lipopeptide）又名脂酰肽（Acylpeptide），是一類重要的抗菌肽，主要來(lái)源于一些由細(xì)菌、酵母菌、真菌分泌的代謝產(chǎn)物，其種類繁多、結(jié)構(gòu)復(fù)雜，是一類由脂肪鏈和肽鏈組成的具有兩親結(jié)構(gòu)的微生物次級(jí)代謝產(chǎn)物（Kosaric，1987）。脂肽一般來(lái)源于植物、動(dòng)物和微生物，但大多數(shù)脂肽來(lái)源于微生物，而其中又以來(lái)源于細(xì)菌的脂肽居多。在細(xì)菌中，脂肽一般是革蘭氏陽(yáng)性芽孢桿菌產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物。1968年，Arima等首次從枯草芽孢桿菌株發(fā)現(xiàn)脂肽類表面活性劑，呈晶狀，商品名為表面活性素（surfactin）（Arima，1968）。目前發(fā)現(xiàn)的抗菌脂肽主要有表面活性素（sur

2、factin）、芬薺素（Fengycin）、伊枯草菌素（iturin）、和桿菌霉素（Bacillomycin），抗霉枯草菌素（mycosubtilin）、制磷脂菌素（plipstatin）等。脂肽分子由親水的肽鍵和親油的脂肪烴鏈兩部分組成，脂肽分子中多個(gè)氨基酸組成的肽鏈形成親水基，脂肪烴鏈形成親油基。由于其特殊的化學(xué)組成和兩親型分子結(jié)構(gòu)，脂肽除了具有抗菌活性之外還具有生物表面活性劑的特性（Stein，2005）。脂肽在環(huán)境治理，醫(yī)藥、微生物采油等領(lǐng)域有重要的應(yīng)用前景（Jitemdra，1997；Banat，2003）。6.1 脂肽抗生素的種類及結(jié)構(gòu)特性芽孢桿菌產(chǎn)生的抗菌脂脂肽的分子結(jié)構(gòu)由脂肪酸

3、鏈和肽鏈兩部分組成，分子中的多個(gè)氨基酸組成的肽鏈形成親水基，-羥基或者氨基脂肪酸的烴鏈形成親油基，即是具兩親性的生物表面活性劑。其中親水的氨基酸通過肽鍵相互連接，再與脂肪烴鏈上的羧基和-羥基或者氨基結(jié)合形成環(huán)狀，因此，抗菌脂肽一般是以內(nèi)脂或者酰胺鍵結(jié)合而成的環(huán)脂肽（劉向陽(yáng)，2005；呂應(yīng)年，2005；Wang，2004）。芽孢桿菌脂肽抗生素主要包括表面活性素（Surfactin），伊枯草菌素（Iturin），芬薺素（Fengycin）三大類。6.1.1 表面活性素（Surfactin）Surfactin類群的脂肪酸的碳鏈長(zhǎng)度在1316個(gè)，具有LLDLLDL的手性七肽通過一內(nèi)酯鍵與脂肪酸鏈碳原子

4、的-羥基基相連，其在水溶液中分子成“馬鞍狀”構(gòu)像，該家族成員包括枯草芽孢桿菌產(chǎn)生的表面活性素（Surfactin），地衣芽孢桿菌產(chǎn)生的地衣芽孢桿菌素（Llichenyishin），短小芽孢桿菌的表面活性劑（Pumilacidin）、埃斯波素（Esperin），其中Liehenyishin、Pumilacidin、Esperin主要應(yīng)用于工業(yè)和環(huán)境治理（Meiji et al.，1969.；Yakimo et al.，1995；Naruse et al.，1990）。而Surfactin是一種脂肽類抗菌物質(zhì)，它是由-羥基脂肪酸和7個(gè)氨基酸殘基的小肽組成，肽鏈的第7位氨基酸上的羧基和脂肪酸的-羥基

5、縮合形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)（如圖1-1）。Surfactin主要存在兩種類型，即7位上的氨基酸是Leu和Val。肽鏈中典型的氨基酸組成順序?yàn)?L-)Glu-(L-)Leu-(D-)Leu-(L-)Val-(L-)Asp-(D-)Leu-(L-)Leu（Kowall et al.，1998；楊世忠等，2004）。但是由于其2位（Leu/Ile/Val）、4位（Val/Leu/Ile/Ala）、7位（Leu/Val/Ile）氨基酸的不同及脂肪酸鏈長(zhǎng)短（C13C15）的不同其類似物也較多（劉向陽(yáng)等，2005）。1991年Baumgart用二維H-NMR證明Bacillus subtilis ATCC21332

6、和Bacillus subtilis OKB105培養(yǎng)液中提取的Surfactin具有三種結(jié)構(gòu)類似物（Baumgart et al.，1991），分別命名為Surfactin A、Surfactin B、Surfactin C、其中surfaetin A是主要成分，它的環(huán)狀肽鏈上第七個(gè)氨基酸為L(zhǎng)eu，Surfactin B的七位氨基酸為Val，Surfactin C的七位氨基酸為Ile。1992年Oka等采用優(yōu)化后的高效液相色譜（HPLC），首次對(duì)枯草芽孢桿菌產(chǎn)生的六種表面活性素分離成功，并發(fā)現(xiàn)了兩種具有不同脂肪酸取代物的新表面活性素。1995年俄羅斯科學(xué)家研究從發(fā)酵液中得到5個(gè)Surfact

7、in的結(jié)構(gòu)類似物，通過質(zhì)譜技術(shù)、化學(xué)修飾和二維核磁共振技術(shù)確定了它們的結(jié)構(gòu)。隨后的研究更精確地測(cè)定了十余種Surfactin的同系物（Kowall et al.，1998），如表1-1 （Vater et al.，2002）。Surfactin表現(xiàn)出抗病毒、抗腫瘤和支原體以及一定程度的抗細(xì)菌活性，它本身并不具備抗真菌活性，但可增強(qiáng)其它脂肽特別是伊枯草菌素的抗真菌活性（Kim et al.，2004）。圖1-1 Surfactin的結(jié)構(gòu)示意圖Fig.1-1 Structure of surfactin表l-1 surfactin同系物的種類Table1-1 Sorts of surfactin

8、isoforms6.1.2 芬薺素（Fengycin）Fengycins類群包括芬薺素（Fengycin）和制磷脂素（plipastatinAl、A2、B1、B2）脂肪酸鏈碳鏈長(zhǎng)度一般在1418個(gè)，8個(gè)氨基酸成環(huán)，線狀部分包括2個(gè)氨基酸和脂肪酸鏈（Nongnuch et al.，1986）。肽鏈中氨基酸組成順序?yàn)?L-) Glu- (D-) Orn- (L-) Tyr- (D-)Thr-(L-)Glu-(D-)Ala（Val)-(L-)pro-(L-)Gln-(D-)Tyr-(L-)Ile，肽鏈的第10位Ile上的羧基和第3位的Tyr上羥基縮合形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)（Vanittanakom et al

9、.，1986；Ongena，2005；Sehneider，1999），如圖1-2。Fengycin能夠抑制絲狀真菌生長(zhǎng)，對(duì)酵母和細(xì)菌無(wú)作用（Vanittanakom et al.，1986）。它和Surfactin一樣有許多同系物，往往同時(shí)共存于發(fā)酵液中。它們被分成Fengycin A和Fengycin B兩種類型，當(dāng)肽鏈的6位上是Ala時(shí)，屬于fengyein A；而當(dāng)肽鏈的6位上是Val時(shí)，屬于FengyeinB（Wang J，2004；Steller S，1999；Deleu，2005）。2008年Das還發(fā)現(xiàn)了蘇云金芽孢桿菌cMB26（B.thuringiensis CMB26）產(chǎn)生的

10、結(jié)構(gòu)類似于Fengycin的脂肽抗生素（Kim et al.，2004）。常見的fengycin同系物如表1-2（Stinson，2003；高學(xué)文，2003）。圖1-2 Fengycin A的結(jié)構(gòu)示意圖Fig.1-2 Structure of Fengycin A表l-2 Fengycin同系物的種類Table1-2 Sorts of fengycin isoforms6.1.3 伊枯草菌素（Iturin）Iturin家族包括伊枯草菌素（Iturin）A、B，桿菌抗霉素（Bacillomycin）D、F、L，抗霉枯草菌素（Mycosubtilin）以及桿菌肽素（Bacillopeptin）A、

11、B、C（陳華等，2008；Franeoise et al.，1984；Aicha et al.，1982；Yoshio et al.，1995），其脂肪酸鏈碳鏈長(zhǎng)度一般在1417個(gè)，具有LDDLLDL手性7個(gè)強(qiáng)極性氨基酸短肽的N端氨基通過形成肽鍵脂肪酸鏈羧基相連（圖1-3）。其中最有代表性的Iturin A是由一個(gè)含有C14C17的-氨基脂肪酸和7個(gè)氨基酸殘基的環(huán)狀結(jié)構(gòu)組成，7位上的Ser的羧基基和-氨基脂肪酸的氨基縮合形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)（Hiradate et al.，2002；Besson et al.，1978）。伊枯草菌素具有較強(qiáng)的抗真菌活性（Besson et al.，1978），也有部分

12、抑制細(xì)菌的作用。Iturin的種類及其分子量見表l-3。Iturin能強(qiáng)烈抑制植物病原真菌還有部分細(xì)菌甚至還有殺蟲作用。圖1-3 Iturin的結(jié)構(gòu)示意圖Fig.1-3 Structure of Iturin表l-3 Iturin同系物的種類Table1-3 Sorts of Iturin isoforms6.2 脂肽抗生素的合成機(jī)理Lipmann在20世紀(jì)70年代首次開展了對(duì)肽生物合成的非核糖體機(jī)制分析，隨后越來(lái)越多抗菌脂肽合成的相關(guān)基因被克隆、分析，結(jié)合全基因組測(cè)序的開展，獲得了大量脂肽抗生素合成和調(diào)控的遺傳信息（chen et al.，2009）?？傊?，芽孢桿菌的脂肽類抗生素的合成受一個(gè)

13、由合成基因、調(diào)控基因共同組成大的基因簇控制，這些基因簇含有一個(gè)或多個(gè)轉(zhuǎn)錄單元，并且他們的表達(dá)是協(xié)同調(diào)控的，相似主鏈結(jié)構(gòu)的脂肽抗生素產(chǎn)物是由相似的合成基因合成的。酶的活性或者存在于一個(gè)大的功能蛋白的不同結(jié)構(gòu)域中，或者組織于一個(gè)多酶復(fù)合體中，脂肽抗生素的合成相關(guān)基因見表1-4。與核糖體合成的蛋白不同，非核糖體合成的脂肽抗生素的生物合成不以mRNA作為模板，也不需要攜帶工具tRNA，而是由多個(gè)肽合成酶組成的巨大復(fù)合物NRPS（non-ribosomal peptide synthetases），通過一種稱為“多載體硫模板機(jī)制（Multiple Carrier Thiotemplate Mechani

14、-sm）”的方式來(lái)合成的（Mohamed，1997；Saseha et al.，2001）。NRPS是目前已知分子量最大的酶，它的運(yùn)作是不依賴于核酸模板的非核糖體機(jī)制，它們?cè)谝环N模板的指導(dǎo)下，能夠識(shí)別特定的氨基酸并將其直接連接形成多肽鏈。每個(gè)肽合成酶都有一個(gè)或幾個(gè)模塊（module），每個(gè)模塊都是一個(gè)獨(dú)立的功能單元，大約由1000個(gè)氨基酸殘基組成，負(fù)責(zé)將特定的氨基酸摻入肽鏈中。肽合成酶的模塊排列順序決定了產(chǎn)物中氨基酸的排列順序，因此肽合成酶既是肽鏈合成的催化劑，也是肽鏈合成的模板。每一塊模板負(fù)責(zé)一個(gè)反應(yīng)循環(huán)，主要包括識(shí)別選擇性底物并將其活化為相應(yīng)的腺苷酸化合物，固定共價(jià)中間物和形成肽鍵。每一塊

15、模板在結(jié)構(gòu)上又可以分為3個(gè)結(jié)構(gòu)域：腺苷酸化結(jié)構(gòu)域A、疏基化結(jié)構(gòu)域T和縮合結(jié)構(gòu)域C。腺苷酸化結(jié)構(gòu)A域負(fù)責(zé)識(shí)別特定底物并通過ATP對(duì)底物進(jìn)行活化；疏基化結(jié)構(gòu)域T也被稱為肽?；d體蛋白（PCP），它負(fù)責(zé)固定反應(yīng)中間物硫酯；縮合結(jié)構(gòu)域C可以催化第一個(gè)模塊的氨基酸脫離其載體，進(jìn)而與第二個(gè)模塊上的氨基酸形成肽鍵，如此新合成的肽鏈便向前移動(dòng)了一個(gè)模塊，不斷延伸直到形成脂肽化合物。芽孢桿菌以不同的模塊為模板，結(jié)構(gòu)域有機(jī)結(jié)合發(fā)揮作用，形成多種多樣的非核糖體肽。表1-4 脂肽抗生素合成相關(guān)基因Table l-5 Lipopeptides synthesase-related genes6.3 脂肽抗生素的應(yīng)用抗菌

16、肽的應(yīng)用研究主要集中在農(nóng)業(yè)生物防治、食品工業(yè)、畜牧生產(chǎn)業(yè)、醫(yī)藥行業(yè)、環(huán)境保護(hù)等領(lǐng)域。農(nóng)業(yè)生物防治主要是是指脂肽應(yīng)用于植物病原菌的生物防治（高芬等，2003；Vollenbroich，1997）。這是由于脂肽抗生素具有廣譜的抗霉菌作用和一定的抗細(xì)菌作用，而其抗菌機(jī)理又不同于一般的抗生素，它可以使微生物的細(xì)胞膜上形成孔洞而使細(xì)胞內(nèi)容物流出而死亡或鰲合一、二價(jià)陽(yáng)離子從而抑制了多種酶類活性，不易產(chǎn)生耐藥性（Steller，1999；Deleu，2005）。此外，肽類物質(zhì)在自然界中易分解，屬于環(huán)境友好類制劑，所以，在醫(yī)藥、植物病原菌的控制等方面具有廣闊的應(yīng)用前景。一些學(xué)者已經(jīng)將抗菌脂肽的研究應(yīng)用于植物病

17、原真菌的抑制。黃現(xiàn)青研究了枯草芽孢桿菌fmbJ產(chǎn)生的脂肽對(duì)點(diǎn)青霉AS3.4356的抑制活性，測(cè)定了其抗菌譜，并進(jìn)行了桃防腐試驗(yàn)。桃防腐試驗(yàn)表明其防腐效率可以達(dá)到76.5%，具有良好的桃防腐應(yīng)用前景。Yu等將Bacillus amyloliquefaciens產(chǎn)生的iturinA用來(lái)防治西紅柿的絲核病菌（Yu et al.，2002）。在食品行業(yè)中的應(yīng)用主要是把脂肽作為食品防腐劑，并對(duì)此進(jìn)行了大量的應(yīng)用研究。食品安全和動(dòng)物食品安全有賴于生產(chǎn)過程的各個(gè)環(huán)節(jié)，解決問題的一個(gè)關(guān)鍵就是使用無(wú)污染、無(wú)殘留、無(wú)毒副作用的食品添加劑?？咕氖切》肿佣屉?，參與生命過程，具有安全無(wú)毒副作用的生物學(xué)特性（Zasl

18、off，2002）。脂肽還可以用于環(huán)境保護(hù)方面。脂肽作為表面活性劑，由于他們帶有負(fù)電荷，可以結(jié)合帶正電荷的金屬陽(yáng)離子，所以可以選擇性去除土壤中的Pb、Zn、Cu等金屬離子，其中Cu是最易去除的。有文獻(xiàn)報(bào)道地衣芽孢桿菌產(chǎn)生的脂肽地衣素是比表面活性素更穩(wěn)定的陽(yáng)離子鰲合劑（Catherine et al.，2001）。脂肽抗生素也可以用于醫(yī)藥行業(yè)。醫(yī)藥行業(yè)上脂肽的研究主要集中在動(dòng)物疾病防治及人類抗真菌藥物、抗病毒藥物、抗腫瘤藥物、抗原蟲藥物的研制上（Hino et al.，2001.；Rowley et al.，2004；Boulanger et al.，2004；汪以真等，2004）。脂肽類表面活

19、性劑也可用于微生物采油方向。由地衣芽孢桿菌NK-X3產(chǎn)生一種脂肽類生物表面活性劑，在pH為412和鈣離子質(zhì)量濃度為4000 mg/L的條件下，于120 高溫下不失活，這些特點(diǎn)有利于該產(chǎn)品在原油的增采和輸送中使用（范立梅，2000；梅建鳳，2001）。Bacillus subtilis ZW-3是王大威等人從大慶油田分離到一株枯草芽孢桿菌，其代謝產(chǎn)生的脂肽表面活性劑具有優(yōu)良的乳化和降低油水界面張力的能力，可以提高采油率9.2%，在微生物采油中具有良好的應(yīng)用前景（王大威等，2008）。6.4 脂肽抗生素的分離和鑒定6.4.1 脂肽抗生素的分離純化脂肽抗生素的分離純化方法主要有沉淀法、萃取法、色譜法

20、、超濾法、吸附法、泡沫分離法、液膜分離法（黃翔峰等，2009）。沉淀方法有多種，如硫酸鹽（80%）沉淀、MnCl2（10 mM）沉淀、濃鹽酸（6 N）沉淀等。酸沉淀是調(diào)節(jié)樣品溶液的pH值，使其達(dá)到酸性條件（一般pH=2），4 靜置過夜使溶液中的物質(zhì)完全沉淀或經(jīng)輕微攪動(dòng)加速其沉降，最后離心得到粗產(chǎn)物。酸沉淀是使用最普遍的，原因是脂肽抗生素絕大多數(shù)都具有耐強(qiáng)酸的性質(zhì)，且操作簡(jiǎn)單，效果顯著。但酸沉淀法得到的產(chǎn)物往往純度不是很高。有文獻(xiàn)報(bào)道，酸沉淀得到Surfactin產(chǎn)物的回收率可達(dá)97%，但純度只有55%（Chen，2008）。萃取法主要是去除脂肽抗生素粗產(chǎn)物中的親水性雜質(zhì)。常用的萃取劑有甲醇、二

21、氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、己烷等，這些溶劑既可以單獨(dú)使用，也可以混合使用。使用最普遍的是甲醇，能夠溶解絕大多數(shù)脂肽抗生素。色譜法可以提高樣品的純度，這是沉淀法和萃取法很難做到的。色譜法主要有高效液相色譜（high performance liquid chromatography，HPLC）、凝膠滲透色譜（gel permeation chromatography，GPC）、吸附色譜（adsorption chromatography，AC）、硅膠柱層析（silica gel column chromatography）以及薄層層析（thin layer chromatography，TLC）等

22、。高效液相色譜分離得到的產(chǎn)物純度高，是分離純化脂肽抗生素應(yīng)用較多的一種色譜技術(shù)。別小妹用高效液相法表明了Bacillus subtilis fmbR抗菌物質(zhì)含有保留時(shí)間與Surfactin相似的成分（別小妹等，2006）。Kowall等以100RP 18-TS為色譜柱分離出Surfactin的13種不同結(jié)構(gòu)體（Kowall et al.，1998）。6.4.2 質(zhì)譜在物質(zhì)鑒定中的應(yīng)用1918年，丹姆斯德（A. J. Dempster）制成了半圓形磁場(chǎng)的第一臺(tái)單聚焦質(zhì)譜儀，1958年克勞斯·比曼（Klaus Biemann）教授首先用質(zhì)譜儀分析氨基酸。質(zhì)譜有多種電離方法，包括場(chǎng)解吸、等

23、離子體解吸、激光解吸、快速粒子轟擊、電噴霧電離和大氣壓電離等（李承雷，2007）。1987年由于在生物分子中引入了基質(zhì)輔助激光解吸電離（Matrix-Asisted Laser Desorption Ionization，MALDI）以及電噴霧電離（Electrospray Ionization，ESI），質(zhì)譜技術(shù)有了躍進(jìn)。這兩種電離技術(shù)也給肽和蛋白質(zhì)分析帶來(lái)了極大飛躍。目前生物質(zhì)譜的質(zhì)量分析器主要有四類：離子阱（ion trap，IT）、飛行時(shí)間（TOF）、四極桿（Q）、和付立葉變換離子回旋共振（Fourier transform ion cyclotroresonance，F(xiàn)TICR）。他

24、們?cè)谠O(shè)計(jì)和構(gòu)造上各有不同，因而各有優(yōu)缺點(diǎn)，既可以單獨(dú)使用，也可以互相組合形成功能更強(qiáng)大的儀器。ESI-MS是美國(guó)耶路大學(xué)Fenn教授和他的同事在80年代后期提出的。ESI是當(dāng)今有機(jī)質(zhì)譜中最軟的電離技術(shù)，它是將蛋白質(zhì)的弱酸性水或水溶劑溶液通過毛細(xì)管導(dǎo)入大氣壓電離源內(nèi)（Atmosphere Pressure Ionization，API），在氣化氣的幫助下和源內(nèi)毛細(xì)管終端和反電極之間的強(qiáng)電場(chǎng)作用下，樣品溶液形成帶電荷的霧，即電噴霧。這些霧滴在熱氮?dú)饬飨抡舭l(fā)，半徑逐漸縮小，霧滴表面的電場(chǎng)不斷增強(qiáng)到某一臨界點(diǎn)時(shí)發(fā)生離子的場(chǎng)發(fā)射，或溶劑完全蒸發(fā)。生成的樣品氣相離子經(jīng)質(zhì)量分析器分析，測(cè)出它們的質(zhì)/荷比。E

25、SI-MS既可分析大分子也可分析小分子。對(duì)于分子量在1000Da以下的小分子，會(huì)產(chǎn)生M+H+ 或M-H離子，選擇相應(yīng)的正離子或負(fù)離子形式進(jìn)行檢測(cè)，就可得到分子量（楊松成，2000）。而高達(dá)20000Da大分子在ESI-MS中生成一系列多電荷離子，通過數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)能夠得到樣品的分子量，準(zhǔn)確度高于0.01%。ESI-MS不僅可與四級(jí)質(zhì)譜相連，它還能與離子阱、飛行時(shí)間質(zhì)譜及付立葉變換離子回旋共振。研究表明，ESI-MS技術(shù)是分析脂肽化合物復(fù)合體中各組分的相對(duì)分子質(zhì)量及分子結(jié)構(gòu)的有效工具（陳華等，2008）?；w輔助激光解析電離（MALDI）是由德國(guó)科學(xué)家Karas和Hillenkamp所發(fā)現(xiàn)的。MA

26、LDI通常與無(wú)質(zhì)量檢測(cè)上限飛行時(shí)間質(zhì)譜（TOF-MS）聯(lián)用，稱MALDI-TOF-MS，廣泛用于對(duì)蛋白質(zhì)的分析、鑒定（Muller et al.，2006；Howard et al.，2007）。MALDI-TOF-MS具有靈敏度高、準(zhǔn)確度高及分辨率高等特點(diǎn)，為生命科學(xué)領(lǐng)域的研究提供了一種強(qiáng)有力的分析手段（王曄茹，2007）。它的工作原理是：將微量樣品與過量小分子基體的混合溶液點(diǎn)加在樣品的靶盤上，溶劑揮發(fā)后樣品與基體在靶上形成共結(jié)晶。將靶盤裝入質(zhì)譜儀的離子源內(nèi)，當(dāng)脈沖激光照射到靶點(diǎn)上時(shí)，基體吸收了激光的能量躍遷到激發(fā)態(tài)，導(dǎo)致了樣品分子的電離和氣化。電離通常是基體上的質(zhì)子轉(zhuǎn)移到樣品分子上或者從樣

27、品分子上得到質(zhì)子。然后由高電壓將電離的樣品分子從離子源轉(zhuǎn)送到質(zhì)量分析器內(nèi)，將檢測(cè)到的離子峰為縱坐標(biāo)，離子質(zhì)荷比（m/z）為橫坐標(biāo)，形成質(zhì)量圖譜（楊松成，2000）。MALDI-TOF-MS分析時(shí)樣品制備是分析成敗的關(guān)鍵。MALDI-TOF-MS分析時(shí)能耐受一定量的小分子像鹽、去污劑等，且信息直觀、操作簡(jiǎn)單、快速準(zhǔn)確（吳多加，2005），是在微生物檢測(cè)和鑒定中應(yīng)用的一種質(zhì)譜新技術(shù)。表1-5是部分脂肽抗生素物質(zhì)分子單同位素理論分子量及相應(yīng)離子質(zhì)荷比值。表1-5 脂肽抗生素理論分子量及相應(yīng)離子質(zhì)荷比值Table l-5 The oretical molecular mass of lipopepti

28、des and corresponding m/z value脂肽MM+H+M+Na +M+K +C13Iturin A1028.52741029.53521051.51721067.4911C14Iturin A1042.54301043.55081065.53281081.5067C15Iturin A1056.55861057.56641079.54841095.5223C16Iturin A1070.57421071.58201093.56401109.5379C17Iturin A1084.60541085.59761107.57961123.5535C18Iturin A1098.

29、60541099.61321121.59521137.5691C13Iturin B1129.51141030.51921052.50121068.4751C14Iturin B1043.52701044.53481066.51681082.4907C15Iturin B1057.54261058.55041080.53241096.5063C16Iturin B1071.55821072.56601094.54801110.5219C17Iturin B1085.57381086.58161108.56361124.5375C18Iturin B1099.58941100.59721122.

30、57921138.5531C14Mycosubtilin1042.54301043.55081065.53281081.5067C15Mycosubtilin1056.55861057.56641079.54841095.5223C16Mycosubtilin1070.57421071.58201093.56401109.5379C17Mycosubtilin1084.58981085.59761107.57961123.5535C14Bacillomycin D1030.53171031.53951053.52151069.4954C15Bacillomycin D1044.54731045

31、.55511067.53711083.5110C16Bacillomycin D1058.56291059.57071081.55271097.5266C17Bacillomycin D 1072.57851073.58631095.56831111.5422C14Bacillomycin F1056.55861057.56641079.54841095.5223C15Bacillomycin F1070.57421071.58201093.56401109.5223C16Bacillomycin F1084.58981085.59761107.57961123.5535C17Bacillomycin F1098.60541099.61321121.59521137.5691C14Bacillomycin L1020.51101021.51881043.50081059.4747C15Bacillomycin L1034.52661035.53441057.51641073.4903C16Bacillomycin L1048.54221049.55001071.53201087.5059C17Bacillomycin L1062.55781063.56561085.54761101.5215C13Surfactin A1007.6496