抗菌藥物藥敏試驗(yàn)_第1頁(yè)
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v掌握紙片擴(kuò)散法的原理、操作方法及結(jié)果判讀v了解藥物敏感試驗(yàn)的方法和實(shí)際意義v含有定量抗菌藥物的紙片貼在已接種測(cè)試菌的瓊脂平板上，紙片中所含的藥物吸取瓊脂中的水分溶解后便不斷地向紙片周?chē)鷧^(qū)域擴(kuò)散，形成遞減的濃度梯度。在紙片周?chē)志鷿舛确秶鷥?nèi)的細(xì)菌的生長(zhǎng)被抑制，形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映測(cè)試菌對(duì)測(cè)定藥物的敏感程度，并與該藥對(duì)測(cè)試菌的最低抑菌濃度(MIC)呈負(fù)相關(guān)，即抑菌圈愈大，MIC愈小。試驗(yàn)程序v普通平皿培養(yǎng)基,大腸桿菌菌液,葡萄球菌菌液。v抗生素藥敏紙片（直徑5mm，青霉素，鏈霉素、氯霉素、慶大霉素、 四環(huán)素）v無(wú)菌鑷子、無(wú)菌棉簽 、量尺v取瓊脂平皿培養(yǎng)基兩個(gè)，分別在其底部中央位置標(biāo)注“大腸桿菌”和“葡萄球菌”字樣，同步進(jìn)行如下操作。 分三次接種，每次取一環(huán)。第一次密涂接種后旋轉(zhuǎn)60度二次密涂接種，然后同方向旋轉(zhuǎn)60度后再次密涂接種。v置37溫箱， 倒置培養(yǎng)18hv抑菌圈直徑15mm 高度敏感v抑菌圈直徑10-15mm 中度敏感v抑菌圈直徑10mm 低度敏感v無(wú)抑菌圈 不敏感或耐藥1.接種時(shí)均勻密涂2.貼片時(shí)，用無(wú)菌鑷子輕輕觸壓藥物紙片使之與培養(yǎng)基充分接觸3.貼片后不能再更改紙片位置4.鑷取藥物紙片時(shí)一旦掉到培養(yǎng)基表面，則繼續(xù)保持其位置，切勿鑷起重新放置，以

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