方案牛海綿狀腦病癢病監(jiān)測實施方案

1、附件2：外來動物疫病監(jiān)測實施方案牛海綿狀腦病、癢病監(jiān)測實施方案一、監(jiān)測范圍 （一）牛海綿狀腦病。重點在奶牛養(yǎng)殖場、肉牛養(yǎng)殖場、動物醫(yī)院和屠宰場進行采樣監(jiān)測，采集對象包括具有神經癥狀、緊急屠宰、非正常死亡的 2歲以上牛，以及正常屠宰的4-7歲奶牛和種牛。（二）癢病。重點對放牧羊群、種羊養(yǎng)殖場以及屠宰場進行采樣監(jiān)測，采集對象為瘙癢、神經癥狀、共濟失調、倒地不起、失明、死亡或其他癥狀的1歲以上綿羊和山羊。二、送樣時間及地點各市州將采集好的樣品先冷凍保存，然后于4月25日、6月25日、8月20日前分三次送省動物衛(wèi)生監(jiān)督所。省動物衛(wèi)生監(jiān)督所于5月10日、7月10日、9月5日分三次將采集的樣品送至中國動物

2、衛(wèi)生與流行病學中心國家牛海綿狀腦病參考實驗室。三、采樣數量和要求（一）采樣數量：各市州按照甘肅省2010年瘋牛病、癢病檢測任務分配表（附錄）中任務數量，采集相應類別腦樣，確保完成年度采樣數量。（二）采樣要求1、各市（州）采集的牛腦樣品具有神經癥狀的樣品應 80%以上為奶牛樣品；緊急屠宰、死亡或4-7歲正常屠宰牛的樣品應50%以上為奶牛樣品。2、各市州在采樣過程中要認真填寫采樣單，對臨床疑似病牛要拍照或攝像，建立詳細的采樣檔案，所有檔案、圖片和錄像等材料連同采集到的樣品一起送省動物衛(wèi)生監(jiān)督所。四、監(jiān)測結果處理與報告（一）各市州在10月30日前將瘋牛病、癢病采樣和流行病學調查總結報省動物衛(wèi)生監(jiān)督所

3、，內容包括：1、檢查的各種易感動物總數及其年齡結構；2、每種易感動物總的死亡率和由神經性疾病造成的死亡率；3、主管部門限制流通的動物類型與數量記錄；4、臨床檢查與流行病學調查的動物數量與結果；5、除牛科動物以外感染傳染性海綿狀腦?。═SEs）的動物；6、BSE相關知識的教育培訓情況；7、進口和飼喂肉骨粉的情況。省動物動物衛(wèi)生監(jiān)督所匯總后在11月30日前，向農業(yè)部獸醫(yī)局提交BSE年度工作總結，并抄送國家牛海綿狀腦病參考實驗室。（二）牛海綿狀腦病普查采樣單、非正常屠宰牛登記表、羊癢病普查采樣單及采樣送樣方案詳見附錄。附錄：1、甘肅省2010年瘋牛病、癢病檢測任務分配表2、牛海綿狀腦病普查采樣單3、

4、羊癢病普查采樣單4、非正常屠宰牛登記表5、采樣與送樣方案附錄1：甘肅省2010年瘋牛病、癢病檢測任務分配表市（州）牛腦樣品（份）羊腦樣品 (份）臨床疑似奶牛腦樣（份）奶牛腦樣（份）其它牛腦樣（份）合計酒泉市2971815張掖市21082015武威市211122515白銀市1361015臨夏州413133010甘南州1361012隴南市1541012定西市210132515平涼市28102016慶陽市1561210天水市28102015合 計208595200150附錄2：牛海綿狀腦病普查采樣單采樣單編號：第_ 張 編制：國家牛海綿狀腦病參考實驗室樣品保存條件：甲醛固定 -18以下冷凍 樣品類別

5、：腦 淋巴結 脾臟 扁桃體 其它_采樣地點： ?。ㄊ校?縣 鄉(xiāng)樣 品編 號種 類月齡健康狀況備注奶牛肉牛兼用牛正 常 屠 宰非正常屠宰*死牛急 宰疑 似*若為非正常屠宰牛請繼續(xù)填寫非正常屠宰牛登記單，樣品編號要對應。注釋：1.采樣地點相同的樣品可以登記在同一張采樣單上。樣品編號用地名的首字母+數字來表示，例如青島1號寫為QD-1，此號必須與樣品包裝編號對應起來。2.請詳細填寫采樣單位名稱、電話、地址等信息。3.有些選項可以打“”表示。采樣單位（委托采樣單位）名稱：（蓋章） 電話：采樣單位（委托采樣單位）地址： 郵編：采樣人（委托采樣人） 簽名： 年 月 日封樣單位（運送單位）名稱：（蓋章） 電

6、話：封樣單位（運送單位）地址： 郵編：送樣人（委托送樣人） 簽名： 年 月 日此單一式3聯，一聯隨樣品封存，另兩聯分別由采樣單位和養(yǎng)殖單位保存。附錄3： 羊癢病普查采樣單采樣單編號：第 張 編制：國家牛海綿狀腦病參考實驗室 樣品保存：甲醛固定 -18以下冷凍 樣品類別：腦 淋巴結 脾臟 其他 采樣地點： ?。ㄊ校?縣 鄉(xiāng)樣品編號動物種類月齡性別健康狀況備 注（若為臨床可疑，請描述病羊的品種、畜主、是否為進口等情況，可單獨附頁說明）臨床可疑山羊綿羊正常屠宰臨床可疑其他疾病1、發(fā)病初期易驚、不安、打顫、凝視，有時癲癇狀發(fā)作。2、走路時頭高舉，后肢明顯抬高，前肢搖擺不穩(wěn)類似驢跑。3、發(fā)病后期明顯瘙癢

7、，啃咬腹部和股部，或在固定物上摩擦患部，患部有皮膚破損，日漸消瘦而亡。注釋：采樣地點相同的樣品可以登記在同一張采樣單上。樣品編號用地名的首字母+數字來表示，例如青島1號寫為QD-1，此號必須與樣品包裝編號對應起來。有些選項可以打“”。采樣單位（委托采樣單位）名稱：（蓋章） 電話：采樣單位（委托采樣單位）地址： 郵編：采樣人（委托采樣人） 簽名： 年 月 日封樣單位（運送單位）名稱：（蓋章） 電話：封樣單位（運送單位）地址：（蓋章） 郵編：送樣人（委托送樣人） 簽名： 年 月附錄2:附錄4：非正常屠宰牛登記表樣品編號： 編制：國家牛海綿狀腦病參考實驗室保存條件：甲醛固定 -18以下保存 樣品類別

8、：腦 其它_ 月齡：_牛的種類：奶牛 肉牛 兼用牛 健康狀況：臨床疑似牛 緊急屠宰牛 死牛 采樣地點： 省（市） 縣 鄉(xiāng) 村詳細描述：年齡判斷依據：牙齒 養(yǎng)殖檔案 曾飼喂肉骨粉：是 否 性別：母 公 品種：_ 原產國_ 耳標_畜主/養(yǎng)殖場_臨床疑似牛（由不明原因引起的漸進性行為變化或神經癥狀，表現如下）：1 行為表現：甩頭 磨牙 過度舔舌 耳朵豎立 行為改變，如落伍 擠奶時持續(xù)踢踏 經常伸展脖子 像拉馬車樣低頭站立 面對舍門或障礙物猶豫不前 不愿進擠奶室 走路時后肢過度搖擺或伸展 2. 神經癥狀：顫抖 興奮 膽怯 恐懼 狂怒 意識異常 轉圈運動 共濟失調 癱瘓/局部麻痹 感覺過敏如聽覺、觸覺、

9、視覺 沒有外傷或感染而瀕臨死亡 其他 緊急屠宰牛：倒地不起 斜靠著物體才能站立 不愿行動 嚴重傷病 宰前檢疫認為要銷毀的牛 其他 死牛：在養(yǎng)殖場死的 在運輸過程中死的 在其他地方死的 其他描述：照片： 每省至少要對20%的臨床疑似牛進行拍照或攝像，并收集臨床疑似牛的其他材料如檔案等。若為數碼照片，則可以給照片的名稱命名為對應的樣品編號，然后以電子方式或相片（背面要標明樣品編號）發(fā)送給省站或瘋牛病檢測實驗室。若不是數碼照片，則洗出來，在其背面用圓珠筆或記號筆注明樣品編號，與采樣單一并交給瘋牛病檢測實驗室。 附錄5：采樣與送樣方案牛羊腦樣品既可以按甲醛固定處理，也可以按冷凍保存處理，然后運送至國家

10、認定的檢測實驗室進行檢測。具體方法見“方案一：新鮮牛羊腦樣品的采集與運送方案”和“方案二：甲醛固定的牛羊腦樣品的采集與運送方案”。參考實驗室建議采用方案一的規(guī)定進行采樣和運送，該方案也是當前國際上廣泛采納的方案。方案一：新鮮牛羊腦樣品的采集與運送方案1. 專用采樣工具采集牛羊腦樣品的特點：國家牛海綿狀腦病參考實驗室根據國際上通用的牛羊腦采樣工具設計出我國的牛羊腦樣品采樣工具。該工具為塑料制品，呈勺子形狀，前端帶有鋒利的齒，便于切斷腦組織。這種采樣方式有著非常明顯的優(yōu)點，如使用簡單、節(jié)約成本、工作效率高、機動性強、采樣安全。2. 采樣物品準備：數碼照相機（或數碼攝像機）、專用的采樣勺（一把勺子最

11、多可以采集三份樣品，牛腦采樣勺為藍色，羊腦采樣勺為黃色）、醫(yī)用剪刀（一把，長10cm左右）、一次性手套、橡膠檢查手套（即乳膠手套）、口罩、工作服、樣品杯（可向參考實驗室索?。⒂浱柟P、冰袋（至少3塊大號的冰袋）、大號的透明膠帶、帶蓋泡沫箱（有厚度，無破損，大小適中）、簽字筆或圓珠筆、采樣單、吸水紙等。3. 采樣步驟：A. 如果有比較典型的瘋牛病（BSE）疑似牛，則要拍照或攝像留下證據。每省至少要對20%的臨床疑似牛進行拍照或攝像，并且收集臨床疑似牛的其他材料如檔案等。采集臨床疑似牛時，采樣人員還需要通過問詢等方式弄清該病牛的其他情況，問詢內容可以包括飼養(yǎng)歷史、來源、流動等情況。這些證據材料必須

12、存檔和備份，運送樣品時一并寄送至檢測實驗室。B. 每次采樣至少有兩人在場，其中一人戴好一次性手套和橡膠檢查手套，另外一人專門登記和開啟樣品杯而不需要戴手套。通過觀察牙齒檢查牛羊的年齡，大于3歲的牛（第二對永久門齒長出）和大于18月齡的羊（第一對永久門齒長出）才可以采樣，但如果該動物為瘋牛病或癢病風險動物則沒有年齡限制。C. 在平整地面倒置牛/羊頭，即牛/羊頭的兩角和鼻子靠地放置。同時，另外一人開始填寫采樣單，并且在樣品杯上標記上對應的樣品編號（以縣/市名+序號，如青島1號）。一個樣品杯只能裝一個腦樣品。D. 在枕骨大孔處用剪刀剪開腦硬膜，目的是便于插入采樣勺。然后用一個手指伸入枕骨大孔中，沿著

13、延腦（延髓）轉一周，目的是切斷延腦與頭骨之間相連的神經和血管，以便于腦組織順利挖出。E. 從延腦腹側（也即勺子從枕骨大孔的上面進入）將采樣勺插入枕骨大孔中，插入時采樣勺要緊貼枕骨大孔的腔壁，以免損壞延腦組織。采樣勺插入的深度約為5-7cm（采羊腦時插入深度約為4 cm），然后向上一扳勺子手柄，同時往外摳出腦組織和勺子，延腦便可完整取出。注意：盡量保護好延腦“三叉口”處（腦閂部）的組織的完整性。F. 將腦組織放入編好號的樣品杯中，擰緊杯蓋，然后放置在盛有冰袋的泡沫箱中，用透明膠帶將泡沫箱的蓋子綁緊。注意：采好的樣品必須在5小時之內放入冰柜中冷凍上，以防腐??；樣品至少要冷凍24小時才能往瘋牛病檢測

14、實驗室運送。G. 各地送來的樣品要先在省動物疫病預防控制機構統(tǒng)一清理，如果沒有冷凍好的樣品，則必須及時放入冰柜中冷凍，然后由省動物疫病預防控制機構統(tǒng)一將樣品發(fā)送至檢測實驗室。4. 樣品運送：準備好帶蓋的結實的泡沫箱，該泡沫箱必須無任何破損，并且大小適中（根據樣品的量來決定）。先在泡沫箱的底部鋪上一層吸水紙，之后放入冷凍好的樣品，然后在側面放入幾塊冷凍好的冰袋，最后在樣品的上面放入幾塊冷凍好的冰袋，蓋緊箱蓋。用大號的透明膠帶封好箱口，再橫向打好包，箱子外面用記號筆寫上“易碎勿壓”以及向上的“箭頭”等字樣，然后由省動物疫病預防控制機構統(tǒng)一運送。打好包的樣品必須及時發(fā)送，并確保4天之內運送至檢測實驗

15、室。提示：一、這種包裹最好通過航空途徑運送或由專人運送，并切記要注明“易碎勿壓”。二、切記在采樣單上寫明送樣人及其聯系方式，樣品檢測完后實驗室要出具檢驗報告并寄給送樣人。方案二：甲醛固定的牛羊腦樣品采集與運送方案1. 材料A. 數碼照相機（或數碼攝像機）、采樣單、復寫紙和圓珠筆或鉛筆B. 醫(yī)用膠布（用于捆裝有樣品的紗布，并在其上寫上樣品編號）C. 電動骨鋸或采樣勺、骨鉗、斧頭D. 解剖刀、剪刀、乳膠手套E. 紗布、棉線、密封塑料桶（容積不少于5000ml）F. 固定液：即10%福爾馬林（甲醛）生理鹽水氯化鈉8.5g ；水900ml ；40%福爾馬林（甲醛）100ml2. 采樣步驟A. 如果有比

16、較典型的BSE疑似牛，則要拍照或攝像留下證據。每省至少要對20%的臨床疑似牛進行拍照或攝像，并且收集臨床疑似牛的其他材料如檔案等。采集臨床疑似牛時，采樣人員還需要通過問詢等方式弄清該病牛的其他情況，問詢內容可以包括飼養(yǎng)歷史、來源、流動等情況。這些證據材料必須存檔和備份，運送樣品時一并寄送至檢測實驗室。B. 填寫采樣單根據實際情況，按采樣單要求認真填寫。采樣地點相同的樣品可以登記在同一張采樣單上。C. 取樣（I）電鋸采樣法 a.用電鋸沿兩牛角根部到枕骨大孔上邊緣的方向將牛顱腔打開。b.用手術刀將腦膜切開，骨鉗打開顱腔，然后把腦神經和腦血管切斷。c.取出整個腦組織包括大腦、小腦和腦干（間腦、中腦、

17、腦橋和延腦）；注意千萬不要把腦干損壞。d.將每頭牛的腦組織用紗布松松地裹住(紗布容易透水)，千萬不能緊，一定要松，然后將寫有編號名稱的醫(yī)用膠布（用圓珠筆或鉛筆將編號寫在上面，編號：地名+序號+樣品類別名，如“青島市10號?！保┯妹蘧€栓在紗布口處，注意不讓膠布脫落。處理好后放入10-20倍體積10%福爾馬林生理鹽水中固定一周。注意標簽編號與采樣單的編號相對應。 e.用新的福爾馬林生理鹽水更換舊的固定液，密封在塑料桶中，桶外貼上桶中所有牛腦的編號，以便我們處理牛腦時不開桶蓋便可知桶中的牛腦情況。每個塑料桶可根據大小放置相應數量的牛腦。（II）采樣勺采集法a.準備專用的采樣勺（一把或二把便可）、醫(yī)用

18、剪刀（一把）、一次性手套、橡膠檢查手套（即乳膠手套）以及其他采樣用品如采樣單等。b.戴好一次性手套和橡膠檢查手套，專門登記的人員不需要戴手套。通過觀察牙齒檢查牛的年齡。c.在平整地面倒置牛頭，即牛頭的兩角和鼻子靠地放置。d.在枕骨大孔處用剪刀剪開腦硬膜，目的是便于插入采樣勺。然后用一個食指伸入枕骨大孔中，沿著延腦轉一周，目的是切斷延腦與頭骨之間相連的神經和血管，以便于延腦的取出。e.從延腦腹側（也即勺子從枕骨大孔的上面進入）將采樣勺插入枕骨大孔中，插入時采樣勺要緊貼枕骨大孔的腔壁，以避免損壞延腦組織。采樣勺插入的深度約為5-7cm（采羊腦時插入深度約為4 cm），然后向上一扳勺子手柄，同時往外摳出腦組織和勺子，延腦便可完整取出。f.其余步驟見(I)中的d和e。注：對于臨床疑似牛羊，采下腦后，從腦中線一分為二，一份用于甲醛固定，另一份用于20冷凍并在低溫下運送至參考實驗室。3. 樣品的包裝與運送A. 獨將采樣單郵寄給檢測實驗室，切不可與樣品一起郵寄，目的是防止采樣單被污染。B. 將固定好的牛腦放在幾個大的帶內蓋的塑料桶中密封，注意每個牛腦都隨身帶有一個唯一的編號，桶外壁上也標明桶內的所有牛腦編號。運送時桶里的固定液可以不按10-20倍體積的量，而保留適當的量便可，適當的