【導與練】2015版高考生物考點分類匯編：專題17 微生物的利用(近3年真題+模擬)

1、選修1第9單元生物技術實踐專題17微生物的利用考點五十三 微生物的分離和培養(yǎng)高考試題 1.(2013年江蘇單科,T18,2分,)某研究小組從有機廢水中分離微生物用于廢水處理。下列敘述正確的是()A.培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進行滅菌B.轉換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進行劃線C.接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D.培養(yǎng)過程中每隔一周觀察一次點睛:本題考查微生物培養(yǎng)基的配制流程和培養(yǎng)條件等知識,意在考查考生知識運用能力和實驗操作處理能力。解析:微生物分離中培養(yǎng)基的制備應是先滅菌再倒平板,A項錯誤;每一次劃線前都要灼燒接種環(huán),以殺死上次劃線結束后接種環(huán)上殘留的菌種,B項正確;接種后的培養(yǎng)皿應在恒溫培養(yǎng)箱

2、中進行培養(yǎng),光照會影響溫度等條件,C項錯誤;培養(yǎng)過程中觀察的間隔時間不能太長,適宜條件下一般不超過24 h,D項錯誤。答案:B2.(2013年廣東理綜,T6,4分,)以下為某興趣小組獲得的實驗結果及其分析,正確的是()點睛:本題主要考查色素的提取和分離,微生物的培養(yǎng),有絲分裂及影響酶活性的因素等知識,意在考查考生應用基礎知識解決實際問題的能力。解析:為葉綠素a(藍綠色),為葉綠素b(黃綠色),為葉黃素(黃色),為胡蘿卜素(橙黃色),A錯誤;用剛果紅染色法篩選纖維素分解菌時,當纖維素被纖維素分解菌分解后,會形成一個透明圈,透明圈越大,細菌分解纖維素的能力越強,B正確;C中染色體的著絲點整齊地排列

3、在赤道板上,為分裂中期,C錯誤;D圖示目的是驗證酶的高效性和酶具有催化作用等,D錯誤。答案:B3.(2012年山東基本能力測試,T55,1分,)除了高溫加熱以外,其他滅菌方法還有()A.紫外線照射 B.真空包裝C.用保鮮膜密閉D.添加防腐劑點睛:此題主要考查與滅菌相關的知識,考查學生的識記和理解能力。解析:滅菌是使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物(包括芽孢和孢子)。本題中真空包裝、添加防腐劑、用保鮮膜密閉都起到了抑菌作用,紫外線照射使細菌的蛋白質變性,核酸受破壞,是滅菌方法。答案:A4.(2012年北京理綜,T5,6分,)高中生物學實驗中,在接種時不進行嚴格無菌操作對實驗結果影響最大的

4、一項是()A.將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中B.將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上C.將轉基因植物葉片接種到無菌培養(yǎng)基上D.將土壤浸出液涂布在無菌的選擇培養(yǎng)基上點睛:本題考查對傳統(tǒng)發(fā)酵技術的應用、微生物的培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)技術中無菌操作的掌握?？疾閷W生的理解和綜合應用能力,解答本題的關鍵是熟悉相應操作過程中的注意事項。解析:在釀制葡萄酒的過程中,如果滅菌不徹底會影響葡萄酒的品質,但影響不大;在制作腐乳的過程中,發(fā)酵過程有多種微生物的參與,所以該過程不進行嚴格的無菌操作,對結果影響不大;在植物組織培養(yǎng)過程中,如果滅菌不徹底,雜菌產(chǎn)生的物質會影響外植體的生長,甚至殺死外植體,導致培養(yǎng)失敗,對結果

5、影響最大;土壤浸出液本身就含有大量的雜菌,另外在選擇培養(yǎng)基上只能生存我們所要篩選的細菌,所以無菌操作不嚴格,對結果影響也不會太大。答案:C5.(2011年重慶理綜,T2,6分,)下列有關細菌培養(yǎng)的敘述,正確的是()A.在瓊脂固體培養(yǎng)基上長出的單個菌落含有多種細菌B.在培養(yǎng)基中加入青霉素可抑制真菌而促進細菌生長C.向液體培養(yǎng)基中通入氧氣能促進破傷風桿菌的生長D.在半固體培養(yǎng)基中接種細菌培養(yǎng)后可以觀察其運動點睛:本題考查培養(yǎng)基的用途和微生物的代謝知識,考查學生的識記和理解能力。解析:瓊脂固體培養(yǎng)基上長出的單個菌落是由一個或少數(shù)同種細菌繁殖而成的同種個體的總和,A項錯誤;培養(yǎng)基中加入青霉素可選擇酵母

6、菌、霉菌等真菌而抑制細菌的生長,因為青霉素可抑制細菌細胞壁的合成,B項錯誤;破傷風桿菌的代謝類型為厭氧型,通入氧氣可使培養(yǎng)基中的破傷風桿菌代謝活動受到抑制,C項錯誤;半固體培養(yǎng)基可用于觀察細菌的運動,D項正確。答案:D6.(2013年新課標全國理綜,T39,15分,)臨床使用抗生素前,有時需要做細菌耐藥實驗。實驗時,首先要從病人身上獲取少量樣本,然后按照一定的實驗步驟操作,以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性?；卮鹣铝袉栴}:(1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落,可用法或法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面,經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。 (2)取該單菌落適當稀釋,用法接種于固體培養(yǎng)基表面,在37

7、 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h,使其均勻生長,布滿平板。 (3)為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性,將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置,培養(yǎng)一段時間后,含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對抗生素A;含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對抗生素B;含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小,說明 ;   含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小,且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落,在排除雜菌污染的情況下,此菌落很可能是抗生素D的。 (4)根據(jù)上述實驗結果,為達到抗菌目的,最好選用抗生素。 點睛:本題主要考查了微生物的培養(yǎng)與應用的

8、相關知識,涉及微生物的純化培養(yǎng)時常用的接種方法,鑒別某種微生物與抗生素作用所產(chǎn)生的效應及應用。意在考查考生對微生物基礎知識的識記能力和理解、應用能力。解析:(1)對微生物純化培養(yǎng)時 ,常用的接種方法為劃線法和稀釋涂布法。(2)若讓已經(jīng)獲得的單個菌落在固體培養(yǎng)基上大量且均勻繁殖,接種方法為涂布法。(3)對某種抗生素越敏感的致病菌,在該抗生素存在的范圍內(nèi),越不易生存,所形成的透明圈就越大。但是,如果在透明圈中還有菌落生存,則說明該菌落的耐藥性強。(4)根據(jù)(3)的結論,為了達到抗菌目的,應選擇能使該致病菌大量死亡,即產(chǎn)生的透明圈大的那種抗生素。答案:(1)劃線稀釋涂布(或涂布)(2)涂布(3)敏感

9、不敏感該致病菌對C的敏感性比對A的弱耐藥菌(4)A7.(2013年山東理綜,T34,8分,)胡蘿卜素是一種常用的食用色素,可從胡蘿卜或產(chǎn)胡蘿卜素的微生物菌體中提取獲得,流程如下:(1)篩選產(chǎn)胡蘿卜素的酵母菌R時,可選用或平板劃線法接種。采用平板劃線法接種時需先灼燒接種環(huán),其目的是。 (2)培養(yǎng)酵母菌R時,培養(yǎng)基中的蔗糖和硝酸鹽可分別為酵母菌R的生長提供和。 (3)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時,干燥過程應控制好溫度和以防止胡蘿卜素分解;萃取過程中宜采用方式加熱以防止溫度過高;萃取液濃縮前需進行過濾,其目的是。 (4)紙層析法可用于鑒定所提取的胡蘿卜素。鑒定過程中需用胡蘿

10、卜素標準品作為。 點睛:本題主要考查微生物的培養(yǎng)、植物有效成分的提取等相關知識。意在考查考生的識記、理解和應用能力。解析:(1)接種微生物的主要方法是稀釋涂布平板法和平板劃線法,接種過程為了防止雜菌的污染,要進行無菌操作,必須對接種環(huán)進行灼燒。(2)在微生物培養(yǎng)中,蔗糖主要提供碳源,也可作為能源物質,硝酸鹽提供氮源。(3)溫度過高,干燥的時間過長,會導致胡蘿卜素分解;由于萃取劑都是易燃物,易揮發(fā),直接加熱易引起燃燒、爆炸,故常用水浴加熱。(4)提取得到的胡蘿卜素往往不純,鑒定時常用標準品進行對照。答案:(1)稀釋涂布平板法(或:稀釋混合平板法)滅菌(或:防止雜菌污染)(2)碳源氮源(

11、3)時間水浴濾去不溶物(4)(實驗)對照8.(2012年上海單科,T(四),10分,)回答下列關于微生物和酶的問題。高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌,其篩選過程如圖所示。(1)過程稱為,過程是為了 。 (2)號培養(yǎng)基稱為(按功能分);該培養(yǎng)基中除了加入淀粉外,還需加入另一種重要的營養(yǎng)成分。 A.瓊脂B.葡萄糖C.硝酸銨D.碳酸氫鈉(3)一般對配制的培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌,其中“高壓”是為了。 在高溫淀粉酶運用到工業(yè)生產(chǎn)前,需對該酶的最佳溫度范圍進行測定。圖中的曲線表示酶在各種溫度下酶活性相對最高酶活性的百分

12、比。將酶在不同溫度下保溫足夠長的時間,再在酶活性最高的溫度下測其殘余酶活性,由此得到的數(shù)據(jù)為酶的熱穩(wěn)定性數(shù)據(jù),即圖中的曲線。(4)根據(jù)圖中的數(shù)據(jù),判斷該酶使用的最佳溫度范圍是。 A.4050 B.5060 C.6070 D.7080 (5)據(jù)圖判斷下列敘述錯誤的是。 A.該酶只能在最佳溫度范圍內(nèi)測出活性B.曲線35 數(shù)據(jù)點是在80 時測得的C.曲線表明80 是該酶活性最高的溫度D.曲線表明該酶的熱穩(wěn)定性在70 之后急劇下降點睛:本題主要考查微生物培養(yǎng)和酶的相關知識,考查學生的識圖和信息分析能力,解答本題的關鍵是理解稀釋涂布培養(yǎng)法的操作原理和過程。解析:欲培養(yǎng)和分離嗜熱菌單個

13、菌落可采用稀釋涂布平板法;為稀釋過程,為篩選過程;號培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基,加入硝酸銨的目的主要是補充氮元素;高壓蒸汽滅菌的目的是殺死包括細菌芽孢等在內(nèi)的全部生物;據(jù)圖可知,工業(yè)生產(chǎn)中該酶的最佳溫度范圍為6070 。酶活性受溫度影響,在不同的溫度下,都可以測定酶的活性,A錯誤。由曲線可知,該酶的最適溫度是80 ,曲線中的數(shù)據(jù)是將酶在不同溫度下保溫足夠長的時間,再在酶活性最高的溫度下測其殘余酶活性,對于B選項而言是將該酶在35 下保存,然后在80 下測定該酶活性,B、C正確。曲線顯示,酶的熱穩(wěn)定性從30 開始不斷下降,在70 后,急劇下降,D正確。答案:(1)稀釋單個菌落的篩選(或篩選)(2)選擇培

14、養(yǎng)基C(3)殺死培養(yǎng)基中的細菌芽孢(4)C(5)A9.(2011年新課標全國理綜,T39,15分,)有些細菌可分解原油,從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株?；卮饐栴}:(1)在篩選過程中,應將土壤樣品稀釋液接種于以為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,從功能上講,該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。  (2)純化菌種時,為了得到單菌落,常采用的接種方法有兩種,即和。 (3)為了篩選出高效菌株,可比較單菌落周圍分解圈的大小,分解圈大說明該菌株的降解能力。 (4)通常情況下,在微生物培養(yǎng)過程中,實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、和。無菌技術要求實

15、驗操作應在酒精燈附近進行,以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。 點睛:本題主要考查微生物實驗室培養(yǎng)的相關技術操作、土壤微生物的分離等知識,考查了考生的實驗與探究能力。解析:(1)篩選目的菌株應使用選擇培養(yǎng)基,可以在這類培養(yǎng)基中加入某種營養(yǎng)物質,促進所需要的微生物生長,這就是微生物學家常用的“投其所好”的策略。(2)平板劃線法和稀釋涂布平板法都可以將聚集在一起的細菌分散或稀釋成單個細胞,進而得到單菌落。(3)目的菌株可降解原油,從而在培養(yǎng)基上形成以目的菌株為中心的分解圈,分解圈越大表明菌株的降解能力越強。(4)常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌,酒精燈火焰附近是一個無菌區(qū),故實

16、驗操作在此處進行可防周圍環(huán)境中微生物的污染。答案:(1)原油選擇(2)平板劃線法稀釋涂布平板法(3)強(4)干熱滅菌高壓蒸汽滅菌火焰10.(2011年四川理綜,T30,9分,)有人通過實驗探究某海藻的最佳培養(yǎng)條件,以獲得最大生物量(注:生物量指單位體積的藻體干重)。(1)在有光條件下培養(yǎng)海藻時,培養(yǎng)液中必須含有,還需定時向培養(yǎng)液中通入空氣,目的是提供。海藻光合速率隨著不同光照強度的變化曲線如下圖,圖中B點表示最佳的培養(yǎng)條件。 (2)該海藻在無光條件下仍能生長,但需在培養(yǎng)液中添加葡萄糖等有機物,目的是提供。 (3)向培養(yǎng)液中添加葡萄糖配成不同濃度的培養(yǎng)液,在一定光照條件下培養(yǎng)

17、該海藻,測定海藻的生物量如下表:葡萄糖濃度(g/L)00.10.20.40.61.0海藻生物量(g/L)0.840.931.001.030.790.67要確定培養(yǎng)海藻的最佳葡萄糖濃度,還需設計的實驗。 (4)綜合上述實驗,獲得該海藻最大生物量的培養(yǎng)條件是 。 點睛:本題結合海藻的代謝考查海藻生長、發(fā)育所必需的物質和培養(yǎng)條件,考查學生對曲線、圖表的分析能力和綜合應用能力。解析:(1)海藻是植物,因此培養(yǎng)時必須在培養(yǎng)液中加入各種必需礦質元素。通入空氣,目的是提供光合作用所需CO2。B點光照強度生物量最大。(2)無光條件下海藻不能進行光合作用,因此必須提供有機物作碳源、能量來源。

18、(3)要確定培養(yǎng)海藻的最佳葡萄糖濃度,還需在0.20.6 g/L之間更細分的濃度梯度。(4)根據(jù)圖,獲得該海藻最大生物量需光照強度適宜,據(jù)表格知需添加適宜濃度葡萄糖。答案:(1)各種必需礦質元素 CO2光照強度(2)碳源和能源(3)在0.20.6 g/L之間更細分的濃度梯度(4)適宜光照強度,添加適宜濃度的葡萄糖模擬試題1.(2013成都高新區(qū)統(tǒng)考)下列有關微生物的培養(yǎng)或純化的敘述,錯誤的是()A.微生物在培養(yǎng)前要先對培養(yǎng)基進行滅菌處理再接種B.培養(yǎng)液中溶氧量的變化會影響酵母菌的繁殖和代謝途徑C.分離自養(yǎng)型微生物的方法是用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基D.分離純化微生物的常用方法是平板劃線法和稀釋

19、涂布平板法解析:微生物在培養(yǎng)前要先對培養(yǎng)基進行滅菌處理再接種,培養(yǎng)液中溶氧量的變化會影響酵母菌的繁殖和代謝途徑。分離分解纖維素菌的方法是用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基,分離純化微生物的常用方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法,所以C選項錯誤。答案:C2.(2011南通模擬)不同的微生物對營養(yǎng)物質的需要各不相同。下列有關一種以CO2為唯一碳源的自養(yǎng)微生物營養(yǎng)的描述不正確的是()A.氮源物質為該微生物提供必要的氮素B.碳源物質也是該微生物的能源物質C.無機鹽是該微生物不可缺少的營養(yǎng)物質D.水是該微生物的營養(yǎng)要素之一解析:碳源分為有機碳源和無機碳源。當有機物作為碳源時,既是碳源,又可作為能源;當無機物作為

20、碳源時,只能作為碳源,不能作為能源。答案:B3.(2013蚌埠模擬)二口惡英是持久性有機污染物,其毒性強,降解難。某種白腐真菌能利用二口惡英中的碳元素作為碳源。為了降解廢水中的二口惡英,研究人員從土壤中篩選獲得了能降解利用二口惡英的白腐真菌菌株,篩選的主要步驟如圖所示,為土壤樣品,為篩選出的目的菌株。請回答下列問題:(1)中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應加入作為唯一碳源,如果要測定中活菌數(shù)量,常采用法。 (2)、為對照組,為實驗組,、中加入馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基(培養(yǎng)真菌的培養(yǎng)基)。若在培養(yǎng)過程中沒有菌落生長,說明培養(yǎng)基沒有;若中的菌落數(shù)目明顯(填“多于”或“少于”),說明已經(jīng)篩選出一些菌落

21、。 (3)在提取白腐真菌細胞內(nèi)的分解酶時,通常先將菌株細胞制取粗酶液,再進一步獲得相應的酶;從中分離提取的酶通常需要檢測,以確定其應用價值;為降低生產(chǎn)成本,可利用技術使白腐真菌重復利用。 (4)提取白腐真菌細胞內(nèi)的蛋白質過程中,為了保證蛋白質不變性,需要對樣品進行洗脫,措施一般是需要加入;在裝填凝膠柱時,如果有存在,會攪亂洗脫液中蛋白質的洗脫次序,降低分離效果。該真菌可以產(chǎn)生某種揮發(fā)性強、易溶于有機溶劑的芳香化合物,適于采用法提取。 解析:(1)考查篩選細菌的方法,特殊的碳源和氮源可篩選目的菌,常用稀釋涂布平板法來測定細菌的數(shù)量。 (2)滅菌后的培養(yǎng)基如果未污染,

22、則上面沒有微生物菌落,為選擇培養(yǎng)基,只能適于能降解利用二口惡英的白腐真菌生長,故其上菌落少。(3)考查酶的制取和固定的方法,制取酶液需破碎細胞才方便提取,制得的酶要檢測活性。(4)考查蛋白質的洗脫方法和特殊產(chǎn)物的提取。答案:(1)二口惡英稀釋涂布平板(2)(被雜質)污染多于(3)破碎和離心酶活性(或酶活力)固定化細胞(4)緩沖液氣泡萃取4.(2012海淀二模)常見的釀酒酵母菌只能利用葡萄糖而不能利用木糖,自然界中一些酵母菌能分解木糖產(chǎn)生酒精但對酒精的耐受能力較差。下面是利用木糖發(fā)酵產(chǎn)生酒精的釀酒酵母菌的培育過程,請分析回答下列問題:(1)將自然界中采集到的葡萄帶回實驗室,用將葡萄皮上的微生物沖

23、洗到無菌的三角瓶中,瓶中的液體經(jīng)適當稀釋后,用法接種于固體培養(yǎng)基上,在適宜的條件下培養(yǎng),獲得各種菌落。 (2)將培養(yǎng)基上的酵母菌菌株轉接到以木糖為唯一碳源的培養(yǎng)基中,無氧條件下培養(yǎng)一周后,有些酵母菌死亡,說明這些酵母菌。從存活的酵母菌提取DNA,并用PCR技術大量擴增目的基因。 (3)將目的基因連接到一種穿梭質粒(可以在大腸桿菌中復制和在釀酒酵母菌中表達的質粒)上。該質粒具有兩種標記基因,即氨芐青霉素抗性基因和尿嘧啶合成酶基因。大腸桿菌被該質粒轉化后,應接種于含的培養(yǎng)基上進行篩選。將質粒導入酵母菌時,由于氨芐青霉素不能抑制酵母菌繁殖,應選擇缺乏能力的釀酒酵母菌作為受體菌。從

24、細胞結構看,酵母菌不同于大腸桿菌的主要特點是 。 (4)對轉基因釀酒酵母菌發(fā)酵能力進行測試,結果如下圖所示。據(jù)圖分析,將轉基因釀酒酵母菌接種在為碳源的培養(yǎng)基中進行發(fā)酵能力測試,最初培養(yǎng)基中的糖被快速消耗,隨著發(fā)酵繼續(xù)進行,轉基因釀酒酵母菌能夠,說明所需菌株培育成功。 解析:(1)由于葡萄皮上有酵母菌,所以可用無菌水沖洗葡萄獲得菌液,然后用稀釋涂布平板法培養(yǎng)分離。(2)以木糖為唯一碳源的培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基,可以篩選出能利用木糖的酵母菌。(3)轉入質粒的大腸桿菌對氨芐青霉素有抗性,故可以在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進行篩選。以缺乏尿嘧啶合成酶的酵母菌作為受體細胞,可以利用缺乏尿嘧

25、啶的培養(yǎng)基篩選出導入質粒的酵母菌菌株。(4)圖示實驗結果表明,在葡萄糖大量消耗后,酵母菌仍能利用木糖快速產(chǎn)生酒精,說明轉基因酵母菌培養(yǎng)成功。答案:(1)無菌水稀釋涂布平板(2)不能利用木糖發(fā)酵(或缺乏水糖發(fā)酵途徑)(3)氨芐青霉素尿嘧啶合成有核膜包被的細胞核(4)葡萄糖和木糖葡萄利用木糖產(chǎn)生酒精,并且酒精濃度升高對木糖發(fā)酵無明顯影響5.(2012西安模擬)某中學楊老師自制大蒜提取液,希望這種簡便、經(jīng)濟的提取液能夠高效地殺滅餐具上的細菌,楊老師完成了下面的探究實驗:(1)制作提取液:楊老師將大蒜榨汁后制成提取液,具體做法如下表所示。請根據(jù)表中數(shù)據(jù),在表中的括號內(nèi)填出1#提取液應加入的冷開水量:大

26、蒜提取液編號1#2#大蒜(g)350350冷開水(mL)()880無色食醋(mL)/20制備量1 000 mL1 000 mL(2)使用方法:將餐具浸泡在提取液中10 min后取出沖洗。(3)樣品抽取:將經(jīng)過處理的濾紙貼在餐具表面1 min,然后將濾紙放到50 mL無菌水中,充分振蕩后制成原液。再取1 mL原液加入mL無菌水中搖勻制成10倍稀釋液。  (4)分離及培養(yǎng):用法分離細菌。分別取1 mL原液和10倍稀釋液,分別加到伊紅-美藍培養(yǎng)基中,用滅菌、消毒后的(用具),將原液和10倍稀釋液均勻涂布到整個平板上。每個濃度各做三個培養(yǎng)皿,其目的是。 本實驗另設1 mL無菌水涂布

27、在未接種的培養(yǎng)皿上為空白對照,原因是排除 。 最后在37 下培養(yǎng)48 h。(5)觀察記錄:設計1#提取液實驗組的觀察記錄表。(6)結果分析:統(tǒng)計數(shù)據(jù),得到消毒前后的菌落總數(shù)變化(單位:cfu/cm2,每平方厘米樣品中含有的細菌群落總數(shù))編號條件總份數(shù)<111010102102103103104>1041#提取液消毒前300003189消毒后30141240002#提取液消毒前3320031216消毒后3319104000根據(jù)消毒前后的數(shù)據(jù)可知: 。 2#提取液效果高于1#,分析可能的原因: 。 請你給楊老師提出需要進一步研究的問題:  。&#

28、160;解析:設計實驗要遵循單一變量原則、對照性原則和平行重復原則,在制作提取液時,為了遵循單一變量原則,對照實驗1#和2#液體量必須相同,使其唯一的變量是有無無色食醋。本實驗探究的是大蒜提取液的殺菌效果,要防止雜菌干擾實驗結果,所以每一步都要嚴格進行無菌操作,為了使結果更可靠,統(tǒng)計更準確,原液和10倍稀釋液都要多設置幾組培養(yǎng)皿進行涂布培養(yǎng),求其平均值,以增加實驗數(shù)據(jù)的可靠性。通過統(tǒng)計消毒前后的菌落總數(shù)變化數(shù)據(jù)看,無論1#提取液還是2#提取液,都是消毒后的樣品含菌數(shù)量明顯減少,說明大蒜提取液是能夠高效殺菌的。并且2#提取液殺菌效果比1#提取液更好。答案:(1)900(3)滅菌9(4)涂布分離(

29、稀釋涂布平板)(只寫“涂布”不可)玻璃刮刀(三角刮刀、涂布器)重復實驗,減小實驗誤差滅菌不徹底對本實驗的影響(5)提取液菌落數(shù)1號培養(yǎng)皿2號培養(yǎng)皿3號培養(yǎng)皿平均值原液10倍稀釋液(6)大蒜提取液能夠高效殺菌無色食醋促使大蒜提取液呈微酸性,協(xié)同殺菌如:進一步探究同等條件下,醋和大蒜汁哪種消毒作用更好?不同濃度的大蒜汁,哪種消毒效果更好?醋作用的最適pH?(任選其中一種即可,其他合理答案也可)考點五十四 某種微生物數(shù)量的測定高考試題 (2009年安徽理綜,T6,6分,)下列是關于“檢測土壤中細菌總數(shù)”實驗操作的敘述,其中錯誤的是()A.用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B.取

30、104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1 mL,分別涂布于各組平板上C.將實驗組和對照組平板倒置,37 恒溫培養(yǎng)2448小時D.確定對照組無菌后,選擇菌落數(shù)在300以上的實驗組平板進行計數(shù)點睛:本題考查檢測土壤中細菌總數(shù)的有關實驗操作,考查學生的理解能力和綜合應用能力。解析:檢測土壤中細菌總數(shù),用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板,取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1 mL,分別涂布于各組平板上,將實驗組和對照組平板倒置,37 恒溫培養(yǎng)2448小時,在確定對照組無菌后,選擇菌落數(shù)在30300的一組平板為代表進行計數(shù)。所以D不對。答案:D模擬試題

31、1.(2012臨沂模擬)能夠測定樣品活菌數(shù)的方法是()A.稀釋涂布平板法B.直接計數(shù)法C.重量法 D.比濁法解析:直接計數(shù)法是利用特定的細菌計數(shù)板,在顯微鏡下計算一定容積里樣品中微生物的數(shù)量,不能區(qū)分死菌與活菌。重量法是用于微生物生長測定的一種方法,有濕重和干重,測蛋白質和DNA含量反映細胞的物質量。比濁法是在一定范圍內(nèi),菌懸液中細胞濃度與渾濁度成正比,即與光密度成正比,菌越多,光密度越大。稀釋涂布平板法是活菌在適宜培養(yǎng)基和良好生長條件下通過生長形成菌落,此法又稱活菌計數(shù)法。答案:A2.(2013湖南十二校模擬)某同學在101、102、103倍稀釋液的平均菌落數(shù)為2 760、295和46,則菌

32、落總數(shù)(個/mL)為()A.2.76×104B.2.95×104C.4.6×104D.3.775×104解析:菌落計數(shù)法,注意是計算不同稀釋度的平均菌落數(shù)。首先選擇平均菌落數(shù)在30300,當只有一個稀釋倍的平均菌落數(shù)符合此范圍時,則以該平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)即為該樣品的細菌總數(shù);若有兩個稀釋倍數(shù)的平均菌落數(shù)均在30300,則按兩者菌落總數(shù)之比值來決定,若比值小于2應采取兩者的平均數(shù),若大于2,則取其中較小的菌落總數(shù)。本題295、46在30300,46×103與295×102比值為1.6,應取二者平均數(shù)(46×103+295&

33、#215;102)÷2=3.775×104。若所有稀釋倍數(shù)的菌落數(shù)均不在30300,則應以最接近300或30的平均菌落乘以稀釋倍數(shù)。答案:D3.(2011中山模擬)某學者欲研究被石油污染過的土壤中細菌數(shù)量,并從中篩選出能分解石油的細菌。下列操作錯誤的是()A.利用平板劃線法對細菌進行計數(shù)B.用以石油為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選C.采用稀釋涂布平板法分離菌種D.稱取和稀釋土壤時應在火焰旁解析:平板劃線法能對細菌分離純化,但不能對細菌進行計數(shù),稀釋涂布平板法可以分離菌種還可進行計數(shù),A錯誤。答案:A4.(2013吉林省高考復習質檢)某生物興趣小組開展探究實驗,課題是:培養(yǎng)液中酵母菌種

34、群數(shù)量與時間的變化關系。實驗材料:菌種和無菌馬鈴薯培養(yǎng)液、試管、血細胞計數(shù)板、滴管、顯微鏡等。酵母菌的顯微計數(shù)方法:A.血細胞計數(shù)板:是帶有微小方格刻度的玻璃片,用于在顯微鏡下對血細胞、微生物進行計數(shù)。B.將含有酵母菌的培養(yǎng)液滴在計數(shù)板上,計數(shù)一個小方格內(nèi)的酵母菌數(shù)量,再以此為根據(jù),估算試管中的酵母菌總數(shù)。連續(xù)觀察7天,并記錄每天的數(shù)值。根據(jù)以上敘述回答下列問題: (1)根據(jù)所學知識,該課題的實驗假設是:開始時,在資源和空間無限多的環(huán)境中,酵母菌種群數(shù)量呈“J”型增長;隨著時間的推移,酵母菌種群數(shù)量呈“S”型增長。  (2)本實驗沒有另設置對照實驗,原因是。該實驗是否需要重復實驗?,

35、試解釋原因: 。  (3)在吸取培養(yǎng)液制片前,要輕輕振蕩幾次試管,原因是。如果一個小方格內(nèi)酵母菌過多,難以數(shù)清,應當采取的措施是 。 對于壓在小方格界線上的酵母菌,應當怎樣計數(shù)? 。 (4)請你設計處理實驗數(shù)據(jù)的表格。答案: (1)環(huán)境中資源和空間逐漸變得有限(2)該實驗在時間上形成前后自身對照需要為了提高實驗數(shù)據(jù)的準確性(3)使酵母菌分布均勻增加稀釋倍數(shù)上下和左右只計一邊線上菌體(4)時間(天)次數(shù)1234567123平均考點五十五 培養(yǎng)基對微生物的選擇作用高考試題 1.(2009年寧夏理綜,T40,15分,)(1)在大腸桿菌培養(yǎng)過程中,除考慮營養(yǎng)條件外,還要考

36、慮、和滲透壓等條件。由于該細菌具有體積小、結構簡單、變異類型容易選擇、等優(yōu)點,因此常作為遺傳學研究的實驗材料。 (2)在微生物培養(yǎng)操作過程中,為防止雜菌污染,需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行(填“消毒”或“滅菌”);操作者的雙手需進行清洗和;靜止空氣中的細菌可用紫外線殺滅,其原因是紫外線能使蛋白質變性,還能。 (3)若用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù),要想使所得估計值更接近實際值,除應嚴格操作、多次重復外,還應保證待測樣品稀釋的。 (4)通常,對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細菌進行初步的。 (5)培養(yǎng)大腸桿菌時,在接種前需要檢測培養(yǎng)基是

37、否被污染。對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是  。 (6)若用大腸桿菌進行實驗,使用過的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經(jīng)過處理后才能丟棄,以防止培養(yǎng)物的擴散。 點睛:本題綜合考查微生物的培養(yǎng)條件、培養(yǎng)基種類和計數(shù)等知識,考查學生的識記能力和綜合應用能力。解析:(1)大腸桿菌具有體積小、結構簡單、變異類型容易選擇、易培養(yǎng)、生活周期短等優(yōu)點,培養(yǎng)過程中,除考慮營養(yǎng)條件外,還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件。(2)滅菌使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,所以對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行滅菌,消毒使用較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物, 操作者的雙手需

38、要進行清洗和消毒, 紫外線能使蛋白質變性,還能損傷DNA的結構。(3)稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進行培養(yǎng),應保證樣品稀釋的比例適合。(4)對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細菌進行初步的鑒定。(5)培養(yǎng)大腸桿菌時,在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生(6)因為有的大腸桿菌會釋放一種強烈的毒素,并可能導致腸道出現(xiàn)嚴重癥狀,使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄,以防止培養(yǎng)物的擴散。答案:(1)溫

39、度酸堿度易培養(yǎng)生活周期短(2)滅菌消毒損傷DNA的結構(3)比例合適(4)鑒定(或分類)(5)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生(6)滅菌2.(2009年上海單科,T39,9分,)氯苯化合物是重要的有機化工原料,因其不易降解,會污染環(huán)境。某研究小組依照下列實驗方案(圖1)篩選出能高效降解氯苯的微生物SP1菌,培養(yǎng)基配方如表1。表1培養(yǎng)基的組成液體培養(yǎng)基蛋白胨牛肉膏氯苯氯化鈉硝酸銨無機鹽(無碳)蒸餾水號10 g5 g5 mg5 g-1 L號-50 mg5 g3 g適量1 L號-2080 mg5 g3 g適量1 L(1)配制號固體培養(yǎng)基時,除添加號液體培養(yǎng)基成

40、分外,還應添加1%的。 (2)培養(yǎng)基配制時,滅菌與調pH的先后順序是。 (3)從用途上來說,號培養(yǎng)基和號培養(yǎng)基分別屬于培養(yǎng)基和培養(yǎng)基。在號培養(yǎng)基中,為SP1菌提供氮源的成分是 。 (4)在營養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時,SP1的菌體會變成一個圓形的休眠體,這種休眠體被稱為。 (5)將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的號培養(yǎng)液中培養(yǎng),得到生長曲線(如圖2)。從圖2可知SP1菌在培養(yǎng)條件下最早停止生長,其原因是。 點睛:本題考查培養(yǎng)基的配制原則以及微生物的實驗室培養(yǎng)過程,意在考查考生的圖表信息轉換與分析能力。解析: (1)固體培養(yǎng)基中需加入瓊脂作為凝固劑。(2)

41、先配制培養(yǎng)基后滅菌,調pH屬于培養(yǎng)基的配制過程,故先調pH后滅菌。(3)從用途上看,號培養(yǎng)基為通用培養(yǎng)基(基本培養(yǎng)基);號培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基,以氯苯為唯一的碳源,其中為SP1菌提供氮源的成分是硝酸銨。(4)芽孢是在細胞質內(nèi)高度濃縮脫水形成的抗逆性很強的球形或橢圓形的休眠體。(5)由圖示可知SP1菌在20 mg/L氯苯培養(yǎng)條件下最早停止生長,20 mg/L氯苯可提供的碳源較少,碳源最早耗盡,影響菌體的生長繁殖。答案:(1)瓊脂(2)先調pH,后滅菌(3)通用選擇硝酸銨(4)芽孢(5)20 mg/L氯苯碳源最早耗盡模擬試題1.(2012臨沂模擬)下列能選擇出分解尿素的細菌的培養(yǎng)基是()A.KH2P

42、O4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、瓊脂、水B.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、瓊脂、水C.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、瓊脂、水D.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、水解析:能合成脲酶的細菌才能分解尿素,選擇的原則是只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長。該選擇培養(yǎng)基應只含尿素一種氮源并能讓該類細菌生長,需有碳源。分離微生物要用固體培養(yǎng)基;分解尿素的細菌屬于異養(yǎng)微生物,需要加葡萄糖作為碳源。B無氮源、C無碳源,D中牛肉膏、蛋白胨可作為氮源。

43、答案:A2.(2013河南五市聯(lián)考)請選出土壤微生物分離的正確操作步驟()土壤取樣稱取0.5 g土壤將其加入盛有50 mL無菌水的錐形瓶中吸取1 mL進行平板涂抹依次稀釋至103、104、105、106、107A.B.C.D.解析:本題考查土壤微生物的分離。正確的操作步驟為:土壤取樣,制備土壤溶液,制備土壤樣品稀釋液,涂抹平板分離。答案:C3.(2013江蘇蘇北質檢)分離纖維素分解菌的實驗過程中,操作有誤的是()A.經(jīng)選擇培養(yǎng)后將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上B.富集培養(yǎng)這一步可省略,但所培養(yǎng)的纖維素分解菌少C.經(jīng)稀釋培養(yǎng)后,用剛果紅染色D.對照組可用同樣量的培養(yǎng)液涂布到不含纖維素的培養(yǎng)基上解析:經(jīng)選擇培養(yǎng)后,再經(jīng)稀釋,才能將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上;富集培養(yǎng)可省略;經(jīng)稀釋培養(yǎng)后,可用剛果紅染色;設置對照能證明經(jīng)富集培養(yǎng)后,的確得到了欲分離的微生物。答案:A4.(2013焦作模擬)下圖表示為平板劃線法分離純化細菌示意圖。根據(jù)所學生物學知識,完成下列問題。(1)微生物所需的營養(yǎng)成分包括、水和無機鹽。 (2)培養(yǎng)微生物時,除考慮微生物生長所需的營養(yǎng)外,還要考慮微生物生長所需的溫度、以及是否需要O2等。 (3)對培養(yǎng)基進行滅菌時,多采用法,而對接種環(huán)或涂