分光光度法測定山核桃中微量元素硒的研究

1、作者簡介 賈建章(1966-,男,主管檢驗(yàn)師,主要從事理化檢驗(yàn)方面的工作?；瘜W(xué)測定方法分光光度法測定山核桃中微量元素硒的研究賈建章1,賀金明2,卿厚明3(1.陜西省宜君縣疾病預(yù)防控制中心,陜西宜君 727200;2.陜西省銅川市疾病預(yù)防控制中心,陜西銅川 719000;3.陜西省宜君縣林業(yè)中心,陜西宜君 727200摘要 目的:采用微波高壓快速消解法和紫外分光光度法測定山核桃中微量元素硒的含量。方法:采用微波消解技術(shù)處理樣品,加HCL,其中Se +6被還原成Se +4,Se +4與鄰苯二胺絡(luò)合,用甲苯萃取,紫外分光光度法測定山核桃中微量元素硒。結(jié)果:相關(guān)系數(shù)r =0.9996,加標(biāo)回收率為96

2、.0%102.0%,最大吸收波長為351n m,表觀摩爾吸收系數(shù)為1.07!105L /(m o.l co m ,硒含量在0.01 g /kg 10.0 g /kg 范圍符合比爾定律。結(jié)論:實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,該方法簡便快速、靈敏度高、結(jié)果準(zhǔn)確和檢出費(fèi)用低等優(yōu)點(diǎn),適合基層實(shí)驗(yàn)室對樣品中硒的測定。關(guān)鍵詞 微波消解;分光光度法;鄰苯二胺;硒元素中圖分類號(hào) O 657.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1004-8685(201010-2448-02Study on the spectrophoto m etric deter m ination of seleniu m in wal n utJ I A J

3、 ian -zhang 1,HE J in -m i ng 2,Q IN G H ou -m ing 3(1.Y ij un C ounty Center for disease contro l and prev enti on ,Y ij un 727200,China ;2.T ong chuan Cen ter for d isease con tril and prevention ,T ong chuan ,719000,China ;3.Y ij un Coun t y Fo restry Centre ,Y ij un 727200,ChinaAbstract O bjecti

4、ve :T o deter m i ne t he se l en i u m content in w al nut by m icrow ave fast digestion and ultrav i o let spectropho to m e try .M ethods :T he use of m icro w ave di g esti on techni que for processi ng sa m ples ,add H CL,in w hich the Se +6was reducted to Se +4,tetrav alent se l eni um and o -

5、Pheny lened i am i ne for m com plex ,ex tract w ith to l uene ,usi ng u ltrav i o l e t spec trophotom etr i c m ethod to deter m i ne selen i u m i n w alnut .R esu lts :The correlati on coe fficien t r =0.9996,the recovery o f standard add iti on is 96.0%102.0%.wave l eng th M ax .absorbance i s

6、351n m,the apparent m o l a r abso rpti on absorptiv i ty i s1.07!105L /(m o.l cm,se l en i u m conten t i n the 0.01 g /kg10.0 g /kg range m eets Beer s l aw.Conc l u si on :T he exper i m enta l resu lts show that t he me t hod is s i m p l e ,rap i d ,h i gh sens iti v ity ,the res u lt i s accur

7、ate ,t he test co st is l ow,and it is easy f o r t he dete r m i nati on of se l eniu m i n the g rass-root labo rato ry .K ey words M icro w ave d i gesti on ;Spectrom etry ;O -Phenylenedia m i ne ;Se l eniu m 山核桃是是一種落葉喬木,它的果實(shí)由于具有極高的營養(yǎng)價(jià)值和獨(dú)特的口感與風(fēng)味,愈來愈受到人們的尊崇,山核桃中含有豐富的蛋白質(zhì)、氨基酸和豐富的微量元素鈣、鎂、磷、鐵等,其中微量元素硒

8、的報(bào)道較少,所以測定山核桃中硒的含量具有重要的意義。目前測定食品中硒的方法主要有:原子吸收光譜法、熒光分析法氣相色譜法及高效液相色譜法等24。這些測定方法所需儀器設(shè)備比較昂貴、操作過程繁瑣,實(shí)際應(yīng)用十分不便。為適應(yīng)基層實(shí)驗(yàn)室檢測山核桃中硒的含量,筆者參閱大量文獻(xiàn),發(fā)現(xiàn)光度法測定硒近年來為廣大科研工作者廣泛關(guān)注,筆者采用新的微波高壓快速消解法消化,加入絡(luò)合劑后進(jìn)行萃取,用紫外分光法測定了山核桃中的硒含量,與其它方法比較,該方法具有干擾少,操作簡便,靈敏度高和檢出費(fèi)用低等優(yōu)點(diǎn)。1 實(shí)驗(yàn)部分1.1 材料山核桃樣品由宜君縣林業(yè)局核桃工作站提供,該樣品來源于宜君縣西部煤礦區(qū)。1.2 儀器和試劑UV -7

9、54型紫外分光光度計(jì)(山東高密彩虹分析儀器有限公司;PH S-2F 型數(shù)字PH 計(jì)(上海精密科學(xué)儀器有限公司;BS224S 電子天平(德國賽多利斯公司;微波消解儀(上海新儀微波化學(xué)科技有限公司。硒標(biāo)準(zhǔn)溶液1.0m g /m l (國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心-北京恒元啟天化工研究院用5m l 大肚吸管準(zhǔn)確吸取1.0mg /m l 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)5.0m l 放入1000m l 容量瓶中加蒸餾水定容成5 g /m l 的硒標(biāo)準(zhǔn)使用液;5%EDTA -2N a 溶液;鄰苯二胺溶液(0.1%臨用新配;鹽酸;甲苯;濃硝酸等,以上試劑均為分析純,所用玻璃儀器均用硝酸溶液(1+1浸泡過夜,再用純水沖洗潔凈。實(shí)驗(yàn)用水為去離子

10、水。1.3 試驗(yàn)方法1.3.1 樣品的處理 將山核桃用水洗凈,再用去離子水沖洗3次4次,置于鼓風(fēng)干燥箱中干燥,干燥溫度控制在60# 70#,并開啟通風(fēng),干燥2h3h后取出,除去硬殼,研細(xì),備用。準(zhǔn)確稱取2.0000g置于四氟乙烯溶樣杯中,加10.0m l硝酸、5.0m l雙氧水,待泡沫結(jié)束后蓋緊蓋子,放入微波消解儀中,按照說明書進(jìn)行消解,消解壓力M Pa/2.0、消解功率W/ 400、時(shí)間m i n/8,結(jié)束后溶液呈淡黃色。將消解液加熱除去多余的硝酸,然后加入鹽酸(1.0m ol/L10.0m l繼續(xù)加熱至溶液為10m l左右,冷卻,移入50m l容量瓶中,定容。同時(shí)做空白。1.3.2 樣品的

11、測定 準(zhǔn)確吸取10.0m l消化液于125m l分液漏斗中加5%EDTA-2N a溶液2.0m,l調(diào)節(jié)P H值至2.0,加水20m,l加鄰苯二胺溶液(0.1%8.0m,l振蕩混勻,暗處放置1h,加入10.0m l甲苯,振蕩5m i n,靜置10m i n,分層后將甲苯層移入50m l容量瓶中,定容,于紫外分光光度計(jì)上,用1cm 石英比色皿,以試劑空白為參比溶液,在351n m處測其吸光值A(chǔ),再從硒的標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得其濃度C,計(jì)算含量。1.3.3 繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線 于125m l分液漏斗中依次加入0、0.50m l、1.00m l、1.5m l、2.0m l、3.0m l、4.00m l硒標(biāo)準(zhǔn)使用

12、液(5.0 g/m l,分別加入5%EDTA-2N a溶液2.0m,l調(diào)節(jié)p H值至2.0,加水20m,l加鄰苯二胺溶液(0.1%8.0m,l振蕩混勻,暗處放置1h,加入10.0m l甲苯,振蕩5m i n,分層后將甲苯層移入50m l容量瓶中,于分光光度計(jì)上,以試劑空白為參比,用1c m石英比色皿,在351nm處比色定量,繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。2 結(jié)果與討論2.1 檢測波長的確定取5 g/m l的硒標(biāo)準(zhǔn)使用液5.0m l按照實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行測定,于UV-754型紫外可見光光度計(jì)從200n m600n m不同的波長下測定,結(jié)果表明在351n m處為最大吸收波長。2.2 酸度的選擇分別取5 g/m l的

13、硒標(biāo)準(zhǔn)使用液5.0m l于7個(gè)分液漏斗中,用0.1m ol/L的HC l溶液調(diào)節(jié)p H分別為1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、4.0、5.0,各加入鄰苯二胺溶液(0.1%8.0m,l放置5 h后加甲苯10.0m,l振蕩10m i n,靜置5m i n,分層后將甲苯層移入比色管中,用1c m比色杯,測其吸光度,結(jié)果表明p H值在1.52.5時(shí)吸光度值較大且穩(wěn)定,因此該方法選取p H值為2.0。2.3 樣品的硒含量和精密度試驗(yàn)分別對三個(gè)不同礦區(qū)的山核桃樣進(jìn)行測定,發(fā)現(xiàn)硒平均含量分別為0.024 g/kg,0.031 g/kg,0.058 g/kg,對含量較高的樣進(jìn)行6次平行測定,測定值為:0

14、.052 g/kg, 0.058 g/kg,0.056 g/kg,0.051 g/kg,0.048 g/kg, 0.055 g/kg,平均值=0.053 g/g。標(biāo)準(zhǔn)偏差S=0.0036,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RS D=7.0%。2.4 回收率試驗(yàn)于上述樣品溶液中,分別加入標(biāo)準(zhǔn)硒使用液1.0 g/m,l 在與樣品相同條件下對每個(gè)加標(biāo)樣品測定,結(jié)果見表1。表1 加標(biāo)樣品回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果(n=6樣品編號(hào)本底值( g/kg加入量( g/m l測定值( g/kg回收率(%2.5 共存離子的影響由實(shí)驗(yàn)可知;當(dāng)測定相對誤差為5%時(shí),加入5%EDTA-2N a溶液2.0m,l樣品中含有的重金屬離子F e3+,Cu2+,

15、Zn2+, N a+,K+等不干擾硒的測定。2.6 絡(luò)合劑鄰苯二胺加入量的選擇在固定其他條件下,只改變絡(luò)合劑加入量,測定其相應(yīng)吸收度,結(jié)果表明鄰苯二胺加入5.0m l以上時(shí)吸收度值較大且穩(wěn)定,該法選取加8.0m l。2.7 硒的價(jià)位對測定結(jié)果的影響食品中硒以主要以+4、+6價(jià)化合物存在居多,實(shí)驗(yàn)證明硒(V I不與鄰苯二胺反應(yīng)。在微波消解過程中其它條件不變的情況下加入不同量鹽酸(1.0m o l/L5.0m l、8.0m l、10.0m l、15m l進(jìn)行實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明加入8.0m l15.0m l鹽酸(1.0m o l/L硒(I V檢出率最高,硒(V I檢出率為0。3 結(jié)論用微波消解快速消化技術(shù),消除濕法消化用酸量大和對環(huán)境污染大的問題,結(jié)合紫外分光光度法測定樣品中的硒,該法標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系好,相關(guān)系數(shù)r=0.9996,在選定試驗(yàn)條件的情況下干擾離子少,操作簡