2019版 選修1 第2講 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用

1、.第2講微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用考綱要求全國卷五年考情1.微生物的別離和培養(yǎng)2019·卷T37,2019·卷T39,2019·卷T39,2019·卷T39,2019·卷T39,2019·卷T39,2019·卷T392.某種微生物數(shù)量的測定2019·卷T39,2019·卷T393.培養(yǎng)基對微生物的選擇作用2019·卷T37,2019·卷T39,2019·卷T39,2019·卷T39考點(diǎn)一| 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)對應(yīng)學(xué)生用書第236頁識記根底梳理1培養(yǎng)基1概念：人們按照微生物對

2、營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。2營養(yǎng)構(gòu)成：一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽。此外還需要滿足微生物生長對pH、氧氣以及特殊營養(yǎng)物質(zhì)的要求。3種類：按照物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。下表為某微生物培養(yǎng)基的成分KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素瓊脂H2O1.4 g2.1 g0.2 g10.0 g1.0 g15.0 g1 000 mL該培養(yǎng)基中可以為微生物提供碳源的是葡萄糖，因?yàn)榇伺囵B(yǎng)基中參加了瓊脂，故該培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基。2無菌技術(shù)1關(guān)鍵：防止外來雜菌的入侵。2不同對象的無菌操作方法連線：答案bb、aa、b3大腸桿菌的純化培養(yǎng)1制備牛肉膏蛋

3、白胨固體培養(yǎng)基2純化大腸桿菌的方法純化培養(yǎng)原理：想方設(shè)法在培養(yǎng)基上得到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的菌落，即可獲得較純的菌種。純化大腸桿菌的關(guān)鍵步驟：接種。接種方法：以下圖甲可表示用平板劃線法接種獲得的平板；以下圖乙可表示用稀釋涂布平板法接種獲得的平板。純化原理：上圖甲菌體的分散是通過一系列的連續(xù)劃線操作實(shí)現(xiàn)的；上圖乙菌體的分散是通過一系列的梯度稀釋和涂布平板操作實(shí)現(xiàn)的。4菌種的保藏方法1臨時(shí)保藏法：對于頻繁使用的菌種，先接種到試管的固定斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)，然后放入4 的冰箱中保藏。2甘油管藏法：對于需要長期保存的菌種，先將菌液轉(zhuǎn)入滅菌后的甘油中，混勻后放在20 冷凍箱中保存。教材邊角知識選修1

4、P18“旁欄小資料,微生物的接種方法只有平板劃線法和稀釋涂布平板法嗎？微生物接種的核心是什么？_【提示】不是，微生物的接種技術(shù)還包括斜面接種、穿刺接種等方法，其核心是防止雜菌的污染，保證培養(yǎng)物的純度。 運(yùn)用考向?qū)毧枷?考察無菌技術(shù)1牛奶中富含蛋白質(zhì)，長期飲用有助于增強(qiáng)體質(zhì)，但牛奶同時(shí)也是多種疾病的傳播載體。國家標(biāo)準(zhǔn)是每毫升牛奶中細(xì)菌數(shù)小于30 000個(gè)。以下是牛奶消毒及細(xì)菌檢測實(shí)驗(yàn)。分析答復(fù)：1圖中步驟稱為_消毒法。步驟是_。2培養(yǎng)基中的蛋白胨可以為微生物提供_。進(jìn)展步驟操作時(shí)，應(yīng)選用以下中的哪種工具？_。為了防止雜菌污染，此步驟應(yīng)在_附近進(jìn)展。3將接種后的培養(yǎng)基和作為對照的_同時(shí)放入37

5、恒溫培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)36小時(shí)。取出后統(tǒng)計(jì)各平板的菌落數(shù)，結(jié)果如下表所示。應(yīng)該選擇其中稀釋倍數(shù)為_的平板進(jìn)展計(jì)數(shù)，經(jīng)過消毒后的牛奶中，細(xì)菌數(shù)大約是_/mL。牛奶稀釋倍數(shù)102103104平板1菌落數(shù)87101平板2菌落數(shù)83121平板3菌落數(shù)85100解析180 °C恒溫水浴15 min是巴氏消毒法，步驟是進(jìn)展系列稀釋或梯度稀釋。2培養(yǎng)基中的蛋白胨可以為微生物提供碳源、氮源和維生素，是接種，因?yàn)樾枰?jì)數(shù)，需用稀釋涂布平板法，接種工具是涂布器；為了防止雜菌污染，此步驟應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)展。3統(tǒng)計(jì)各平板的菌落數(shù)時(shí)，應(yīng)選擇菌落數(shù)在30300的計(jì)數(shù)，經(jīng)過消毒后的牛奶中，細(xì)菌數(shù)大約是878385

6、÷3×1028 500個(gè)。答案1巴氏系列稀釋或梯度稀釋2碳源、氮源和維生素B酒精燈火焰3一個(gè)未接種的培養(yǎng)基1028 500個(gè)1考慮無菌技術(shù)的效果：滅菌的效果比消毒要好。2考慮操作對象的承受才能：活體生物材料、操作者的手等只能采用消毒，而不能滅菌。2019·湖北省七市高三一調(diào)我國規(guī)定1升自來水中大腸桿菌不得超過3個(gè)。在培養(yǎng)基中參加伊紅美藍(lán)，可以使大腸桿菌的菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤。有關(guān)部門據(jù)此對自來水中的大腸桿菌進(jìn)展檢測。詳細(xì)步驟大致如下：一用火焰灼燒自來水龍頭3分鐘，然后翻開水龍頭放水5分鐘，再用無菌的三角瓶接取1 000毫升水樣，蓋好瓶塞。二將漏斗和抽濾瓶固

7、定好，用鑷子夾住濾膜邊緣，將水樣倒入漏斗中，邊抽濾、邊加水。三用鑷子將濾膜取出、放在無菌平板上進(jìn)展培養(yǎng)，觀察并記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。答復(fù)以下問題：1實(shí)驗(yàn)中所用的醋酸纖維素濾膜、漏斗、抽濾瓶、鑷子等實(shí)驗(yàn)器材和培養(yǎng)基都需先用_法進(jìn)展滅菌。如需檢測培養(yǎng)基滅菌是否徹底，常用的方法是_。2制作本實(shí)驗(yàn)所用的無菌平板時(shí)，需要參加_、水、無機(jī)鹽等大腸桿菌所必需的營養(yǎng)成分，以及參加_，便于統(tǒng)計(jì)菌落外；還需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)整至_性。鑒別是否有大腸桿菌菌落，需要在培養(yǎng)基中參加_。3按上述步驟制作的3個(gè)樣品平板上所有的菌落數(shù)分別為49、51、47。能否據(jù)此得出每升水樣中大腸桿菌數(shù)約為49的結(jié)論？_。理由是_。解析1培養(yǎng)基常

8、用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法，檢測培養(yǎng)基滅菌是否徹底，常用的方法是將滅菌過的培養(yǎng)基在適宜的條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。2培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基需要碳源、氮源、水和無機(jī)鹽。統(tǒng)計(jì)微生物數(shù)目要用固定培養(yǎng)基，因此培養(yǎng)基需要參加瓊脂。大腸桿菌生長的最合適pH為中性或微堿性，伊紅美藍(lán)是專一鑒定大腸桿菌的指示劑，利用伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒定大腸桿菌。3該培養(yǎng)基是鑒別培養(yǎng)基，在平板上生長的菌落，只有部分是大腸桿菌形成的菌落，因此大腸桿菌數(shù)實(shí)際數(shù)值應(yīng)該小于49。答案1高壓蒸汽滅菌將滅菌過的培養(yǎng)基在適宜的條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生2 碳源和氮源瓊脂中性或微堿伊紅美藍(lán)3不能培養(yǎng)基外

9、表生長的菌落，只有部分是大腸桿菌的菌落考向2微生物的純化培養(yǎng)22019·貴州省模擬生活飲用水已經(jīng)過沉淀、過濾、加氯消毒等處理，含微生物很少，但當(dāng)水源不干凈或處理達(dá)不到要求時(shí)，仍然會含相當(dāng)量的微生物甚至含有致病性微生物。供水管道破損及二次供水等環(huán)節(jié)也可能導(dǎo)致生活飲用水的污染。因此生活飲用水的微生物平安性日常檢測是很重要的。我國生活飲用水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)GB574985中規(guī)定生活飲用水中細(xì)菌總數(shù)不得大于100個(gè)/mL，總大腸菌群不得大于3個(gè)/L。1檢驗(yàn)細(xì)菌的含量時(shí)，可以將水樣進(jìn)展一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的外表進(jìn)展培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量，進(jìn)而計(jì)算出樣本中

10、的菌株數(shù)。這種微生物的計(jì)數(shù)方法獲得的菌落數(shù)一般_填“小于“大于或“等于活菌的實(shí)際數(shù)目。2用該方法對微生物進(jìn)展計(jì)數(shù)時(shí)是否需要設(shè)置對照組？_。為什么？_。3分別取0.1 mL已稀釋102倍的水樣分別涂布到三個(gè)瓊脂固體培養(yǎng)基的外表進(jìn)展培養(yǎng)，培養(yǎng)基記錄到大腸桿菌的菌落數(shù)分別為155、158、170，那么每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為_。4為了更進(jìn)一步的研究，需要純化大腸桿菌。以下圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖，請分析接種的詳細(xì)方法。獲得圖A效果的接種方法是_，圖B效果的接種方法是_。某同學(xué)在用A方法純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是_。為了防止雜菌污染，有

11、同學(xué)建議參加抗生素，你覺得可以嗎？_。解析1用這種方法計(jì)數(shù)時(shí)，當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，因此獲得的菌落數(shù)一般小于活菌的實(shí)際數(shù)目。2設(shè)置對照的目的是為了排除非測試因素如培養(yǎng)基是否被污染對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。3由給定的數(shù)據(jù)可計(jì)算出每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為155158170÷3×102×10×1031.61×108。4讀題圖可知，獲得圖A效果的接種方法是稀釋涂布平板法，圖B效果的接種方法是平板劃線法。某同學(xué)在用A方法純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過高。因?yàn)榭股夭坏珰珉s菌，而且也可以殺

12、滅大腸桿菌，因此在培養(yǎng)基上不可以參加抗生素。答案1小于2需要因?yàn)樾枰袛嗯囵B(yǎng)基是否被污染31.61×1084稀釋涂布平板法平板劃線法菌液濃度過高土壤溶液稀釋不夠不可以工程優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)平板劃線法可以觀察菌落特征，對混合菌進(jìn)展別離不能計(jì)數(shù)稀釋涂布平板法可以計(jì)數(shù)，可以觀察菌落特征吸收量較小，較費(fèi)事，平板不枯燥效果不好，容易蔓延某研究小組研究了不同濃度的抗生素A對大腸桿菌生長的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見以下圖1。答復(fù)以下相關(guān)問題：1該培養(yǎng)基為大腸桿菌提供的主要營養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、無機(jī)鹽、_四類，而配置該培養(yǎng)基時(shí)，通常參加_作為凝固劑。2為了確保利用_法接種大腸桿菌時(shí)，形成一層菌膜，那么對菌種的稀釋倍數(shù)_。

13、另外，在培養(yǎng)和接種大腸桿菌時(shí)要特別注意進(jìn)展_操作。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，選出對大腸桿菌抑制作用最明顯的抗生素A濃度的根據(jù)是_。3為減少實(shí)驗(yàn)誤差，每一濃度的抗生素A還要制備_。4該研究小組運(yùn)用上述實(shí)驗(yàn)方法還研究了一樣濃度的a、b、c三種不同抗生素對大腸桿菌生長的影響。請?jiān)趫D2中圖示這一處理方案可模擬圖1加以必要的注解。解析1微生物生長繁殖所需要的四類主要營養(yǎng)物質(zhì)是水、無機(jī)鹽、碳源和氮源。該實(shí)驗(yàn)所用的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，常用的凝固劑是瓊脂。2圖中接種大腸桿菌時(shí)所使用的接種方法是稀釋涂布平板法，為了得到菌膜，稀釋倍數(shù)不能太大。接種和培養(yǎng)大腸桿菌的關(guān)鍵是無菌操作。據(jù)圖1分析，號圓紙片的抑菌圈最大，說明該濃度的

14、抗生素A對大腸桿菌抑制作用最明顯。3為減少實(shí)驗(yàn)誤差，每一濃度的抗生素A還要制備多個(gè)圓紙片進(jìn)展重復(fù)實(shí)驗(yàn)。4該方案的自變量為一樣濃度的a、b、c三種不同抗生素，還應(yīng)有空白對照，注意在圖中要標(biāo)記清楚，詳細(xì)圖解見答案。答案1氮源瓊脂2稀釋涂布平板不能太大無菌透明圈越大，抑制效果越明顯3多個(gè)圓紙片4圖示見以下圖所示考點(diǎn)二| 微生物的別離與計(jì)數(shù)對應(yīng)學(xué)生用書第238頁識記根底梳理1統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法1顯微鏡直接計(jì)數(shù)法原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌。2間接計(jì)數(shù)法活菌計(jì)數(shù)法原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基外表生

15、長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)C÷V×M，其中，C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積mL，M代表稀釋倍數(shù)。操作：設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性。同時(shí)為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30300的平板進(jìn)展計(jì)數(shù)。2土壤中分解尿素的細(xì)菌的別離與計(jì)數(shù)1別離原理土壤中細(xì)菌之所以能分解尿素，是因?yàn)樗鼈兡芎铣呻迕?，這種物質(zhì)在把尿素分解成無機(jī)物的過程中起到催化作用。2統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌一般用稀釋涂布平板法。3實(shí)驗(yàn)流程土壤取樣樣品的稀釋微

16、生物的培養(yǎng)與觀察細(xì)菌的計(jì)數(shù)。4鑒定方法：在培養(yǎng)基中參加酚紅指示劑，假設(shè)指示劑變紅，pH升高，說明細(xì)菌能分解尿素。3分解纖維素的微生物的別離1纖維素酶組成：纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。作用：纖維素纖維二糖葡萄糖2纖維素分解菌的挑選原理纖維素分解菌紅色復(fù)合物紅色消失，出現(xiàn)透明圈。挑選方法：剛果紅染色法，即通過是否產(chǎn)生透明圈來挑選纖維素分解菌。培養(yǎng)基：以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。實(shí)驗(yàn)流程：富含纖維素的環(huán)境：用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌的濃度：制備系列稀釋液：將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上：產(chǎn)生透明圈的菌落運(yùn)用考向?qū)毧枷?微生物

17、的選擇培養(yǎng)12019·吉林長春二模下面是挑選抗鏈霉素大腸桿菌的實(shí)驗(yàn)步驟及相關(guān)圖解。實(shí)驗(yàn)步驟：把大量對鏈霉素敏感的大腸桿菌接種在不含鏈霉素的培養(yǎng)基1的外表，進(jìn)展培養(yǎng)。待其長出密集的小菌落后，用影印法接種到不含鏈霉素的培養(yǎng)基2上，隨即再影印到含有鏈霉素的培養(yǎng)基3上，進(jìn)展培養(yǎng)。在培養(yǎng)基3上出現(xiàn)了個(gè)別抗鏈霉素的菌落，將其挑選出。請答復(fù)：1配制培養(yǎng)基時(shí)除了滿足根本的營養(yǎng)條件外，還需滿足微生物生長對特殊營養(yǎng)物質(zhì)、_、_的要求。2從功能上看，含有鏈霉素的培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。假設(shè)在培養(yǎng)基中參加伊紅和美藍(lán)，那么培養(yǎng)皿中長出的菌落顏色為_。由圖可知，1號培養(yǎng)基接種的方法為_。3對2和3進(jìn)展比較，在2上找

18、到與3上相應(yīng)的菌落，挑取其中一個(gè)菌落接種到_填“含鏈霉素或“不含鏈霉素的培養(yǎng)基上，假如有較多的菌落出現(xiàn)，那么說明該抗性基因突變發(fā)生在該菌接觸鏈霉素之_填“前或“后。43中的菌落比1、2中的菌落少很多，這說明了基因突變具有_的特點(diǎn)。解析1配制培養(yǎng)基時(shí)在提供幾種根本營養(yǎng)條件的根底上，還需滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。2鏈霉素是抗生素，對大腸桿菌具有選擇作用。在伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基上，大腸桿菌菌落顏色為黑色。由題圖可知，1號培養(yǎng)基接種的方法為稀釋涂布平板法。3培養(yǎng)基2和培養(yǎng)基3上一樣的菌落，是具有一樣性狀的大腸桿菌形成的，將培養(yǎng)基2中一個(gè)與培養(yǎng)基3相對應(yīng)的菌落接種到含鏈霉素的培養(yǎng)基上

19、，假設(shè)出現(xiàn)較多的菌落，那么說明該抗性基因突變發(fā)生在該菌接觸鏈霉素之前。4抗鏈霉素性狀是大腸桿菌基因突變后獲得的性狀，3號培養(yǎng)皿中的菌落比1號、2號中的菌落少很多，這說明了基因突變具有低頻性的特點(diǎn)。答案1pH氧氣2選擇黑色稀釋涂布平板法3含鏈霉素前4低頻性在調(diào)查和別離湖水中耐鹽細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)中，先將10升湖水水樣濃縮至10毫升，然后各取濃縮水樣1毫升，涂布到多個(gè)培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。請答復(fù)：1可以通過進(jìn)步培養(yǎng)基中_的濃度，挑選被調(diào)查細(xì)菌，這種培養(yǎng)基被稱為_培養(yǎng)基。2要進(jìn)步實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性，排除培養(yǎng)基未徹底滅菌的可能性，應(yīng)該設(shè)置的對照組是_。為檢驗(yàn)1中挑選方法的效果，可以設(shè)置的對照組是_。3在微生物的培養(yǎng)過程

20、中，實(shí)驗(yàn)室對培養(yǎng)基滅菌常用的方法是_。為防止冷凝水影響細(xì)菌的生長，需將培養(yǎng)皿_培養(yǎng)。在培養(yǎng)基上產(chǎn)生的單個(gè)菌落在生態(tài)學(xué)中可以被稱為_。4根據(jù)培養(yǎng)皿上菌落的平均數(shù)可以計(jì)算湖水中該種細(xì)菌的密度，但計(jì)算的數(shù)據(jù)要比實(shí)際活菌的數(shù)目少，原因是_。解析1此實(shí)驗(yàn)的目的是調(diào)查和別離湖水中耐鹽細(xì)菌，因此可通過進(jìn)步培養(yǎng)基中NaCl的濃度，從而挑選出被調(diào)查細(xì)菌，而其他耐鹽性較低或不耐鹽的細(xì)菌那么被殺死，這種培養(yǎng)基被稱為選擇培養(yǎng)基。2要進(jìn)步實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性，排除培養(yǎng)基未徹底滅菌的可能性，應(yīng)該設(shè)置一個(gè)未接種的培養(yǎng)皿作為對照組。1中挑選耐鹽細(xì)菌是通過參加高濃度的NaCl實(shí)現(xiàn)的，因此要檢驗(yàn)1中挑選方法的效果，可以設(shè)置的對照組是

21、未加高濃度的NaCl培養(yǎng)基進(jìn)展培養(yǎng)。3對培養(yǎng)基滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌。微生物極有可能進(jìn)入培養(yǎng)皿中附在冷凝水中，為防止冷凝水影響細(xì)菌的生長，需將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)。在培養(yǎng)基上產(chǎn)生的單個(gè)菌落為同一種生物的總和，在生態(tài)學(xué)中可以被稱為種群。4觀察培養(yǎng)皿上菌落數(shù)時(shí)，假設(shè)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，視為一個(gè)菌落，那么計(jì)算的數(shù)據(jù)要比實(shí)際活菌的數(shù)目少。答案1鹽或NaCl選擇2未接種或接種等量無菌水的培養(yǎng)皿未加高濃度鹽的培養(yǎng)基培養(yǎng)3高壓蒸汽滅菌倒置種群4當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)在平板上觀察到的是一個(gè)菌落考向2微生物的別離與計(jì)數(shù)22019·黃岡市高三聯(lián)考水污染是全球性的環(huán)境問題，微生物降解是水污染治理

22、的有效手段之一。聚乙烯醇PVA是存在于化工污水中的一種難以降解的大分子有機(jī)物，PVA 分解菌能產(chǎn)生 PVA酶分解 PVA，PVA 與碘作用時(shí)能產(chǎn)生藍(lán)綠色復(fù)合物，當(dāng) PVA 被分解時(shí)藍(lán)綠色復(fù)合物消失，形成白色透明斑，請答復(fù)以下問題：1要從土壤中挑選出能高效分解 PVA 的細(xì)菌，應(yīng)采用以_作為唯一的碳源的選擇培養(yǎng)基，實(shí)驗(yàn)中還應(yīng)設(shè)置對照組。將菌液稀釋一樣的倍數(shù)，對照組培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯_填“多于或“少于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目，從而說明選擇培養(yǎng)基具有挑選作用。2要測定土壤稀釋液中微生物的數(shù)目，可在顯微鏡下用_計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)。假設(shè)將 100 mL含有 PVA 分解菌的土壤樣品溶液稀釋104倍后，取

23、 0.1 mL稀釋液均勻涂布在選擇培養(yǎng)基外表，測得菌落數(shù)的平均值為160 個(gè)，空白對照組平板上未出現(xiàn)菌落，那么 100 mL原菌液中有PVA分解菌_個(gè)，該方法的測量值與實(shí)際值相比一般會_填“偏大“偏小或“相等。3要鑒定別離出的細(xì)菌是否為 PVA 分解菌，培養(yǎng) PVA 分解菌的培養(yǎng)基中除了參加必需的營養(yǎng)物質(zhì)外還需要參加_用于鑒別 PVA 分解菌。要比較不同菌株降解PVA 才能的大小，用含一樣 PVA 濃度的上述培養(yǎng)基來培養(yǎng)不同菌株，一定時(shí)間后，通過測定_來確定不同菌株降解 PVA 才能的大小。解析1要從土壤中挑選出能高效分解PVA的細(xì)菌，應(yīng)采用以聚乙烯醇PVA作為唯一的碳源的選擇培養(yǎng)基，目的是淘

24、汰不能分解聚乙烯醇PVA的細(xì)菌。實(shí)驗(yàn)中設(shè)置的對照組培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目，因?yàn)閷φ战M沒有淘汰不能分解聚乙烯醇PVA的細(xì)菌。2在顯微鏡下計(jì)數(shù)微生物細(xì)胞的數(shù)量可直接用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。根據(jù)題意，100 mL原菌液中有PVA分解菌的數(shù)量為160÷0.1×104×1001.6×109。由于該方法得到的菌落可能是兩個(gè)或者多個(gè)細(xì)菌共同產(chǎn)生一個(gè)菌落導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)較實(shí)際菌落數(shù)偏少，所以該方法的測量值與實(shí)際值相比一般會偏小。3根據(jù)題目告訴的鑒定PVA分解菌的原理“PVA與碘作用時(shí)能產(chǎn)生藍(lán)綠色復(fù)合物，當(dāng)PVA被分解時(shí)藍(lán)綠色復(fù)合物消失，形成白色透明

25、斑可知，要鑒定別離出的細(xì)菌是否為PVA分解菌，培養(yǎng)PVA分解菌的培養(yǎng)基中除了參加必需的營養(yǎng)物質(zhì)外還需要參加碘用于鑒別PVA分解菌。要比較不同菌株降解PVA才能的大小，用含一樣PVA濃度的上述培養(yǎng)基來培養(yǎng)不同苗株，一定時(shí)間后，通過測定白色透明斑的大小或直徑來確定不同菌株降解PVA才能的大小。答案1聚乙烯醇或PVA多于2血細(xì)胞血球1.6×109偏小3碘白色透明斑的大小或直徑32019·衡水中學(xué)高三調(diào)考為研究“某品牌酸奶中乳酸菌數(shù)量及其對抗生素耐藥性情況，某同學(xué)進(jìn)展了如下實(shí)驗(yàn)。請分析答復(fù)以下問題：1配制的細(xì)菌培養(yǎng)基除了含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽等主要營養(yǎng)成分外，還應(yīng)參加適量的_和

26、瓊脂。在培養(yǎng)基各成分溶化與滅菌之間，要進(jìn)展的是_。2接種微生物的方法有很多，圖1中過程所示的方法為_。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)后，所得數(shù)據(jù)需要乘以10n后，才可表示乳酸菌的數(shù)量單位：個(gè)/mL，這里的n_。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)，同時(shí)需要做A、B、C三個(gè)培養(yǎng)皿，原因是_。3為了檢測乳酸菌對抗生素的敏感性，取該單菌落適當(dāng)稀釋，接種于固體培養(yǎng)基外表，在37 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，使其均勻生長，布滿平板。將分別含有A、B、C三種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時(shí)間后，含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素A_填“敏感或“不敏感；含C濾紙片周圍的透明圈比含A的小，且透明圈中出

27、現(xiàn)了一個(gè)菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是_。解析1配制的細(xì)菌培養(yǎng)基除了含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽等主要營養(yǎng)成分外，還需要特殊的物質(zhì)維生素，由于該培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，因此還應(yīng)參加適量的瓊脂作為凝固劑。在培養(yǎng)基各成分溶化與滅菌之間，要先調(diào)pH。2接種微生物的方法有很多，圖1中過程所示的方法為稀釋涂布平板法。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌數(shù)落時(shí)，同時(shí)需要做A、B、C三個(gè)培養(yǎng)皿，分別計(jì)數(shù)3次，取平均值，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)后，所得數(shù)據(jù)需要乘以10n后，才可表示乳酸菌的數(shù)量單位：個(gè)/mL，這里的n6。3在抗藥性檢驗(yàn)過程中，假如在菌落周圍出現(xiàn)透明的圓圈，說明此種抗生素可抑制該細(xì)菌

28、，因此該致病菌對抗生素A敏感；含C濾紙片周圍的透明圈比含A的小，且透明圈出現(xiàn)了一個(gè)菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素C的耐藥菌。答案1維生素調(diào)pH2稀釋涂布平板法6分別計(jì)數(shù)3次，取平均值，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠3敏感抗生素C的耐藥菌2019·河南六市聯(lián)考微生物強(qiáng)化采油MEOR是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油黏度的原理，通過向油井中注入含微生物的水來進(jìn)步采油率的新技術(shù)。以下是人們挑選、純化和擴(kuò)大培養(yǎng)該類微生物的實(shí)驗(yàn)操作。請答復(fù)以下問題：1土壤是微生物的大本營，該類微生物應(yīng)取自_的土壤。2為挑選和純化該類微生物，從功能上分，應(yīng)選用_培養(yǎng)基。常用的接種

29、方法是_和_。3接種后，應(yīng)密封培養(yǎng)的原因是_，培養(yǎng)一段時(shí)間后在培養(yǎng)基上形成降油圈，此時(shí)選取_就可獲得高效菌株。4擴(kuò)大培養(yǎng)過程中需要對微生物進(jìn)展計(jì)數(shù)。取0.2 mL樣品，用固體培養(yǎng)基對其培養(yǎng)，最后統(tǒng)計(jì)三個(gè)平板，菌落數(shù)分別是200、180、220。那么樣品中微生物的數(shù)量為_個(gè)/mL。該統(tǒng)計(jì)結(jié)果_填“低于“高于實(shí)際值。解析1在長期被石油污染的土壤中生存下來的微生物，能降解石油，所以取樣時(shí)，應(yīng)從含石油多的土壤中采集。2從功能上分，應(yīng)選用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)展挑選和純化該類微生物；常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。3該類微生物是厭氧微生物，接種后應(yīng)密封培養(yǎng)；培養(yǎng)一段時(shí)間后在培養(yǎng)基上可形成降油圈，

30、降油圈越大，說明該處的微生物降解石油的才能越強(qiáng)，所以應(yīng)選擇降油圈大的菌落進(jìn)展培養(yǎng)以獲得高效菌株。4計(jì)算微生物的數(shù)量應(yīng)取三個(gè)平板的平均值，即200180220÷3÷0.21 000個(gè)/mL，該結(jié)果會低于實(shí)際值，因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)菌落連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是單個(gè)菌落數(shù)。答案1長期被石油污染含石油多的2選擇平板劃線法稀釋涂布平板法3該類微生物是厭氧型的降油圈大的菌落41 000低于真題驗(yàn)收| 感悟高考淬煉考能 對應(yīng)學(xué)生用書第239頁12019·全國卷某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。答復(fù)以下問題：1有些細(xì)菌能分解尿素，有些細(xì)菌那么不能，原因

31、是前者能產(chǎn)生_。能分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源，原因是_。但可用葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是_答出兩點(diǎn)即可。2為了挑選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇_填“尿素“NH4NO3或“尿素NH4NO3作為氮源，不選擇其他兩組的原因是_。3用來挑選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有_答出兩點(diǎn)即可。解析1有些細(xì)菌能分解尿素是因?yàn)檫@些細(xì)菌能產(chǎn)生脲酶，將尿素分解成CO2和NH3。能分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2作為碳源合成有機(jī)物，但這些細(xì)菌可用葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是：作為能源物質(zhì)氧化分解為細(xì)胞生命

32、活動(dòng)提供能量，為其他有機(jī)物的合成提供原料。2為了挑選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇尿素作為唯一氮源，這樣只有能分解尿素的細(xì)菌才能在培養(yǎng)基上生存。假設(shè)選擇“NH4NO3或“尿素NH4NO3作為氮源，能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3，不能起到挑選作用。3用來挑選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，它們可以為細(xì)菌生長提供無機(jī)營養(yǎng)；同時(shí)，KH2PO4和Na2HPO4還可以作為緩沖劑保持細(xì)胞生長過程中pH穩(wěn)定。答案1脲酶分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2來合成有機(jī)物為細(xì)胞生命活動(dòng)提供能量，為其他有機(jī)物的合成提供原料2尿素其他兩組都含有NH4NO3

33、，能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3，不能起到挑選作用3為細(xì)菌生長提供無機(jī)營養(yǎng)，作為緩沖劑保持細(xì)胞生長過程中pH穩(wěn)定22019·全國卷空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板搜集教室空氣中的微生物，以理解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實(shí)驗(yàn)步驟如下：配制培養(yǎng)基成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O；制作無菌平板；設(shè)置空白對照組和假設(shè)干實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)展相關(guān)操作；將各組平板置于37 恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù)。答復(fù)以下問題：1該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于_。假設(shè)要完成步驟，該培養(yǎng)基中的成分X通常是_。2步驟中

34、，實(shí)驗(yàn)組的操作是_。3假設(shè)在某次調(diào)查中，某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為36個(gè)/平板，而空白對照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落，這種結(jié)果說明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了_現(xiàn)象。假設(shè)將30即366個(gè)/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法_填“正確或“不正確。解析1牛肉膏和蛋白胨中均含有氮元素，因此微生物所需的氮來源于牛肉膏和蛋白胨。假設(shè)要完成步驟，需要進(jìn)展倒平板操作，用到的是固體培養(yǎng)基，所以培養(yǎng)基中要有瓊脂。2該實(shí)驗(yàn)的空白對照組為不進(jìn)展處理的無菌平板，實(shí)驗(yàn)組的操作為將各無菌平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露一樣時(shí)間。3假設(shè)空白對照組的平板上出現(xiàn)了菌落，說明實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)了污染現(xiàn)象?？瞻讓φ战M的一個(gè)平板上

35、出現(xiàn)了6個(gè)菌落，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)變量不唯一，不能確定實(shí)驗(yàn)組平板上的菌落是否僅由教室內(nèi)不同高度空氣中的微生物形成，因此不能求出實(shí)驗(yàn)組的菌落平均數(shù)。答案1牛肉膏、蛋白胨瓊脂2將各實(shí)驗(yàn)組平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露一段時(shí)間3污染不正確32019·全國卷某同學(xué)用新穎的泡菜濾液為實(shí)驗(yàn)材料別離純化乳酸菌。別離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣。答復(fù)以下問題：1別離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用_對泡菜濾液進(jìn)展梯度稀釋，進(jìn)展梯度稀釋的理由是_。2推測在別離純化所用的培養(yǎng)基中參加碳酸鈣的作用有_和_。別離純化時(shí)應(yīng)挑選出_的菌落作為候選菌。3乳酸菌在20

36、 長期保存時(shí)，菌液中常需要參加一定量的_填“蒸餾水“甘油或“碳酸鈣。解析1別離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用無菌水對泡菜濾液進(jìn)展梯度稀釋，這樣既可防止雜菌污染，又可將乳酸菌分散成單個(gè)細(xì)胞，以便在培養(yǎng)基外表形成單個(gè)菌落。2乳酸的積累影響乳酸菌的增殖，參加碳酸鈣可以中和乳酸菌代謝無氧呼吸過程中產(chǎn)生的乳酸，另外，乳酸和碳酸鈣反響，進(jìn)而導(dǎo)致碳酸鈣分解形成透明圈，有利于乳酸菌的鑒別和別離。3對于需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。在3 mL的甘油瓶中，裝入1 mL甘油后滅菌。將1 mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在20 的冷凍箱中保存。答案1無菌水泡菜濾液中菌的濃度高，直接培養(yǎng)很難別

37、離得到單菌落2鑒別乳酸菌中和產(chǎn)生的乳酸或酸具有透明圈3甘油42019·全國卷植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解。答復(fù)以下問題：1分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可將_分解成_。2在含纖維素的培養(yǎng)基中參加剛果紅CR時(shí)，CR可與纖維素形成_色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí)，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的_。3為從富含纖維素的土壤中別離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基成分見下表：酵母膏無機(jī)鹽淀粉纖維素粉瓊脂CR溶液水培養(yǎng)基甲培養(yǎng)基乙注：“表示有，“表示無。據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲_填“能或“不能用于別離和鑒別纖維素分解菌，原因是_；培養(yǎng)基乙_填“能或“不能用于別離和鑒別纖維素分解菌，原因是_。解析1纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即C1酶、Cx酶和