血清蛋白電泳最新版本

1、2011春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期編輯ppt電泳分析電泳分析血清蛋白電泳血清蛋白電泳血清免疫固定電泳血清免疫固定電泳生物化學與分子生物學實驗教學中心生物化學與分子生物學實驗教學中心生物化學與分子生物學實驗教學中心2011春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期 19/4編輯ppt電泳技術(shù)電泳技術(shù)n 電泳：電泳：溶液中帶電粒子在電場中定向移動的現(xiàn)象溶液中帶電粒子在電場中定向移動的現(xiàn)象稱為電泳（稱為電泳（electrophoresiselectrophoresis）。）。n 電泳技術(shù)電泳技術(shù)是利用帶電粒子在電場作用下定向移動是利用帶電粒子在電場作用下定

2、向移動的特性，對混合物組分進行分離、純化和測定的的特性，對混合物組分進行分離、純化和測定的一項技術(shù)。一項技術(shù)。生物化學與分子生物學實驗教學中心2011春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期 19/4編輯ppt電泳的分類電泳的分類n 按分離目的：分析電泳和制備電泳按分離目的：分析電泳和制備電泳n 按電場強度：常壓電泳和高壓電泳按電場強度：常壓電泳和高壓電泳n 按電泳媒介：自由電泳和區(qū)帶電泳按電泳媒介：自由電泳和區(qū)帶電泳 區(qū)帶電泳（按支持介質(zhì)）：淀粉凝膠電泳區(qū)帶電泳（按支持介質(zhì)）：淀粉凝膠電泳 濾紙電泳濾紙電泳 醋酸纖維素薄膜電泳醋酸纖維素薄膜電泳 瓊脂糖凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳

3、聚丙烯酰胺凝膠電泳聚丙烯酰胺凝膠電泳 按支持介質(zhì)形式：水平式電泳、垂直電泳按支持介質(zhì)形式：水平式電泳、垂直電泳n 按緩沖液按緩沖液pHpH值：連續(xù)值：連續(xù)pHpH和不連續(xù)和不連續(xù)pHpH電泳電泳生物化學與分子生物學實驗教學中心2011春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期 19/4編輯ppt臨床電泳項目臨床電泳項目n 臨床上以瓊脂糖電泳法開展的電泳項目：臨床上以瓊脂糖電泳法開展的電泳項目：血清蛋白電泳血清蛋白電泳免疫固定電泳免疫固定電泳尿蛋白電泳尿蛋白電泳同工酶電泳同工酶電泳腦脊液寡克隆電泳腦脊液寡克隆電泳本周氏蛋白電泳本周氏蛋白電泳脂蛋白電泳脂蛋白電泳生物化學與分子生物學實

4、驗教學中心2011春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期 19/4編輯ppt血清蛋白電泳（血清蛋白電泳（SPESPE）n 檢測蛋白質(zhì)水平病理改變的方法和手段。檢測蛋白質(zhì)水平病理改變的方法和手段。n 主要用于肝病、腎病、自身免疫病、血液病、多主要用于肝病、腎病、自身免疫病、血液病、多發(fā)性骨髓瘤等蛋白質(zhì)紊亂疾病的診斷。發(fā)性骨髓瘤等蛋白質(zhì)紊亂疾病的診斷。n 電泳圖譜不能直接對臨床疾病進行確診，但可通電泳圖譜不能直接對臨床疾病進行確診，但可通過特征性圖譜對某些疾病進行分類，評估疾病的過特征性圖譜對某些疾病進行分類，評估疾病的進程和活動狀況，評價治療方案是否有效。進程和活動狀況，評價治

5、療方案是否有效。生物化學與分子生物學實驗教學中心2011春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期 19/4編輯ppt血清免疫固定電泳（血清免疫固定電泳（IFEIFE）n 是一種包括瓊脂糖凝膠蛋白電泳和免疫沉淀兩個是一種包括瓊脂糖凝膠蛋白電泳和免疫沉淀兩個過程的操作，是免疫沉淀反應(yīng)的一種混合技術(shù)。過程的操作，是免疫沉淀反應(yīng)的一種混合技術(shù)。n 優(yōu)勢：將血清蛋白電泳、高分辯率、抗原優(yōu)勢：將血清蛋白電泳、高分辯率、抗原- -抗體特抗體特異性免疫反應(yīng)等有機結(jié)合，對蛋白進行分離和定異性免疫反應(yīng)等有機結(jié)合，對蛋白進行分離和定型，形象地觀察型，形象地觀察IgIg的各類重鏈和輕鏈分型。的各類重鏈

6、和輕鏈分型。生物化學與分子生物學實驗教學中心2011春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期 19/4編輯ppt血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳結(jié)果生物化學與分子生物學實驗教學中心2011春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期 19/4編輯ppt 血清蛋白質(zhì)的等電點、血清蛋白質(zhì)的等電點、平均相對分子量、及正常含量平均相對分子量、及正常含量 清蛋白清蛋白 A 1 2 pI相對分子量（104）含量（%）4.886.957725.0620255.0630495.129156.2126.857.315.6301220球蛋白球蛋白生物化學與分子生物學實驗教學中心2011春季學

7、期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期 19/4編輯ppt正常血清蛋白質(zhì)電泳圖譜正常血清蛋白質(zhì)電泳圖譜生物化學與分子生物學實驗教學中心2011春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期 19/4編輯ppt血清蛋白電泳區(qū)帶血清蛋白電泳區(qū)帶n 白蛋白區(qū)帶：主要由白蛋白構(gòu)成。白蛋白區(qū)帶：主要由白蛋白構(gòu)成。n 1 1- -球蛋白區(qū)帶：球蛋白區(qū)帶： 1 1- -抗胰蛋白酶、抗胰蛋白酶、 1 1- -脂蛋白、脂蛋白、 1 1- -酸性糖蛋白酸性糖蛋白、甲狀腺結(jié)合球蛋白、凝血酶原等。、甲狀腺結(jié)合球蛋白、凝血酶原等。n 2 2- -球蛋白區(qū)帶：球蛋白區(qū)帶： 2 2- -巨球蛋白、結(jié)合

8、珠蛋白、銅藍蛋白、巨球蛋白、結(jié)合珠蛋白、銅藍蛋白、 2 2- -脂脂蛋白、紅細胞生成素等。蛋白、紅細胞生成素等。n -球蛋白區(qū)帶：主要含鐵蛋白、球蛋白區(qū)帶：主要含鐵蛋白、-脂蛋白、補體脂蛋白、補體C3C3、C4C4、2 2- -微球微球蛋白等。蛋白等。n -球蛋白區(qū)帶含球蛋白區(qū)帶含IgGIgG、M M、A A、D D、E E免疫球蛋白。免疫球蛋白。生物化學與分子生物學實驗教學中心2011春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期 19/4編輯ppt正常參考值正常參考值n A A：323250g/L(60.350g/L(60.371.4%71.4%）n 1 1：101040g/L4

9、0g/L（1.41.42.9%2.9%）n 2 2：6 610g/L10g/L（7.27.211.3%11.3%）n ：6 613g/L13g/L（8.18.112.7%12.7%）n ：7 715g/L15g/L（8.78.716.0%16.0%）生物化學與分子生物學實驗教學中心2011春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期 19/4編輯ppt生物化學與分子生物學實驗教學中心2011春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期 19/4編輯ppt生物化學與分子生物學實驗教學中心2011春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期 19/4編輯ppt臨

10、床意義臨床意義n 1 1、M M蛋白（異常免疫球蛋白）血癥：蛋白（異常免疫球蛋白）血癥： 在在-球蛋球蛋白區(qū)、白區(qū)、-球蛋白區(qū)或兩者之間，出現(xiàn)區(qū)帶細而濃球蛋白區(qū)或兩者之間，出現(xiàn)區(qū)帶細而濃，有時呈波浪狀，在光密度計掃描圖上呈尖陡高，有時呈波浪狀，在光密度計掃描圖上呈尖陡高峰的峰的M M蛋白帶蛋白帶。n 2 2、蛋白質(zhì)缺乏癥、蛋白質(zhì)缺乏癥n 3 3、腎病、腎病n 4 4、急慢性炎癥、急慢性炎癥n 5 5、肝?。焊斡不霈F(xiàn)、肝?。焊斡不霈F(xiàn)“-“-橋橋” 原發(fā)性肝癌在原發(fā)性肝癌在AlbAlb與與1 1- -球蛋白之間出球蛋白之間出現(xiàn)一小的區(qū)帶，稱為現(xiàn)一小的區(qū)帶，稱為甲胎蛋白帶甲胎蛋白帶。生物化學與分

11、子生物學實驗教學中心2011春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期 19/4編輯ppt異常血清蛋白電泳圖譜及臨床分析異常血清蛋白電泳圖譜及臨床分析n急性炎癥及應(yīng)激型：急性炎癥及應(yīng)激型：當機體受到各種損傷或炎當機體受到各種損傷或炎癥刺激時的病理現(xiàn)象。癥刺激時的病理現(xiàn)象。n 主要特征：主要特征： Alb Alb減少或正常，減少或正常，1 1、2 2- -球蛋白增高，球蛋白增高，-球蛋白增高不明顯，當炎癥轉(zhuǎn)為慢性時，可明顯增加。球蛋白增高不明顯，當炎癥轉(zhuǎn)為慢性時，可明顯增加。n 病理生理：病理生理： Alb Alb下降主要是由于蛋白分解亢進所致下降主要是由于蛋白分解亢進所致,1 1

12、和和2 2- -球蛋白增加與急性時相反應(yīng)蛋白球蛋白增加與急性時相反應(yīng)蛋白1 1糖蛋白增加有關(guān)，糖蛋白增加有關(guān)，區(qū)帶減少是由于轉(zhuǎn)鐵蛋白分解代謝增加所致。新生兒由區(qū)帶減少是由于轉(zhuǎn)鐵蛋白分解代謝增加所致。新生兒由于結(jié)合珠蛋白合成功能不完全，當有炎癥病灶時，于結(jié)合珠蛋白合成功能不完全，當有炎癥病灶時，2 2區(qū)區(qū)帶無明顯增高，而帶無明顯增高，而1 1區(qū)帶可明顯增高。區(qū)帶可明顯增高。生物化學與分子生物學實驗教學中心2011春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期 19/4編輯pptn腎病型：腎病型：由于腎小球受損引起低蛋白血癥，蛋白尿，高脂血癥由于腎小球受損引起低蛋白血癥，蛋白尿，高脂血癥

13、以及全身性水腫。以及全身性水腫。n 主要特征：主要特征： Alb Alb明顯降低，明顯降低，1 1- -球蛋白輕度增加，球蛋白輕度增加，2 2- -球蛋白明顯增球蛋白明顯增加，加，-球蛋白降低、正?；蛟龈摺Ｐ侯愔瑯幽I病時，球蛋白降低、正?；蛟龈摺Ｐ侯愔瑯幽I病時，-球蛋白可球蛋白可降低，有時可降低至零；成人腎病綜合癥時，降低，有時可降低至零；成人腎病綜合癥時，-球蛋白通常增加，球蛋白通常增加，特別是狼瘡性腎病。特別是狼瘡性腎病。n 病理生理：病理生理： Alb Alb降低是由于腎小球濾過增加所致。降低是由于腎小球濾過增加所致。1 1- -球蛋白增加，球蛋白增加，主要是小分子量的主要是小分子量

14、的1 1糖蛋白增加，可能是為了補償由于糖蛋白增加，可能是為了補償由于AlbAlb降低引起降低引起的低滲透壓，雖然的低滲透壓，雖然1 1糖蛋白也大量丟失于尿中，但體內(nèi)合成量超過糖蛋白也大量丟失于尿中，但體內(nèi)合成量超過排泄量，故仍可增高。排泄量，故仍可增高。2 2- -球蛋白明顯增加是由于球蛋白明顯增加是由于2 2- -球蛋白和低密球蛋白和低密度脂蛋白相對增加所致。度脂蛋白相對增加所致。球蛋白降低主要是分子量小的轉(zhuǎn)鐵蛋白排球蛋白降低主要是分子量小的轉(zhuǎn)鐵蛋白排泄于尿中所致。泄于尿中所致。-球蛋白降低主要是由于漏出于尿中及體內(nèi)分解亢球蛋白降低主要是由于漏出于尿中及體內(nèi)分解亢進所造成，而慢性腎炎、狼瘡性

15、腎炎等進所造成，而慢性腎炎、狼瘡性腎炎等-球蛋白增加，可能是由于球蛋白增加，可能是由于免疫刺激，使免疫刺激，使IgGIgG增加所致。增加所致。生物化學與分子生物學實驗教學中心2011春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期 19/4編輯pptn 彌漫性肝損傷型彌漫性肝損傷型n 主要特征：主要特征： Alb Alb明顯降低明顯降低, 1-, 1-球蛋白在輕度時可略增加，但肝細胞球蛋白在輕度時可略增加，但肝細胞破壞嚴重時，則破壞嚴重時，則11、22和和球蛋白通常均降低，在膽汁郁積性肝炎球蛋白通常均降低，在膽汁郁積性肝炎時，時，22和和球蛋白可增高，球蛋白可增高，-球蛋白輕度或中度增

16、高。球蛋白輕度或中度增高。n 病理生理：病理生理： Alb Alb雖合成減少，但其半衰期長，其濃度減少多出現(xiàn)于發(fā)雖合成減少，但其半衰期長，其濃度減少多出現(xiàn)于發(fā)病后十天，隨病情恢復(fù)而至正常病后十天，隨病情恢復(fù)而至正常, ,若為慢性則逐漸減少若為慢性則逐漸減少, ,其減少程度與其減少程度與肝炎的嚴重程度相一致。肝炎的嚴重程度相一致。1-1-球蛋白在肝炎初期，作為急性期反應(yīng)物球蛋白在肝炎初期，作為急性期反應(yīng)物質(zhì)常增加，而肝損傷嚴重時則降低，在致命的肝功能衰竭時，質(zhì)常增加，而肝損傷嚴重時則降低，在致命的肝功能衰竭時，1-1-球球蛋白可降低到很低水平。蛋白可降低到很低水平。2-2-球蛋白的降低，可能是由

17、于結(jié)合珠蛋白球蛋白的降低，可能是由于結(jié)合珠蛋白合成降低所致，但膽汁郁積性肝炎時，由于脂蛋白增加，可見到合成降低所致，但膽汁郁積性肝炎時，由于脂蛋白增加，可見到2-2-球蛋白部位增高，當急性肝壞死時，球蛋白部位增高，當急性肝壞死時，2-2-球蛋白則明顯減少。球蛋白則明顯減少。球蛋球蛋白在肝炎早期幾乎無變化，當肝細胞損傷嚴重時合成減少。幾乎所有白在肝炎早期幾乎無變化，當肝細胞損傷嚴重時合成減少。幾乎所有肝臟疾病肝臟疾病-球蛋白因合成亢進均增高，其增加的范圍與疾病的嚴重球蛋白因合成亢進均增高，其增加的范圍與疾病的嚴重程度相一致。程度相一致。生物化學與分子生物學實驗教學中心2011春季學期春季學期春季

18、學期春季學期春季學期春季學期春季學期 19/4編輯pptn肝硬化型肝硬化型n 主要特征：主要特征： Alb Alb均有不同程度的降低，均有不同程度的降低，11、22和和球蛋球蛋白正?；蚪档停渍；蚪档?，-G-G明顯增高且寬度增加，可見明顯增高且寬度增加，可見-橋。橋。n 病理生理：病理生理： 肝細胞受損導(dǎo)致肝細胞受損導(dǎo)致AlbAlb明顯降低，明顯降低，-橋的出現(xiàn)橋的出現(xiàn)與血清免疫球蛋白，特別是與血清免疫球蛋白，特別是IgAIgA、IgMIgM、IgGIgG同時增加有關(guān)，同時增加有關(guān)，其中以其中以IgAIgA影響較大，當影響較大，當IgAIgA和和IgMIgM泳動在泳動在和和之間，使之間，使區(qū)

19、帶與區(qū)帶與區(qū)帶融合而形成區(qū)帶融合而形成-橋。橋。生物化學與分子生物學實驗教學中心2011春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期 19/4編輯pptn原發(fā)性肝癌原發(fā)性肝癌n 主要特征：主要特征： 在在AlbAlb與與1-1-球蛋白之間出現(xiàn)一小的區(qū)帶，稱球蛋白之間出現(xiàn)一小的區(qū)帶，稱為甲胎蛋白帶。為甲胎蛋白帶。n 病理生理；病理生理； 肝癌時，血清中的甲胎蛋白濃度為正常人的肝癌時，血清中的甲胎蛋白濃度為正常人的數(shù)十乃至數(shù)萬倍。數(shù)十乃至數(shù)萬倍。生物化學與分子生物學實驗教學中心2011春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期 19/4編輯pptn 寬幅高寬幅高-G-G血

20、癥型（多株免疫球蛋白增高癥）血癥型（多株免疫球蛋白增高癥）n 主要特征：主要特征： -G-G的寬度明顯增加，呈寬幅高峰。的寬度明顯增加，呈寬幅高峰。n 病理生理：病理生理： 多株漿細胞以大致相同的速度增殖，大多株漿細胞以大致相同的速度增殖，大量合成免疫球蛋白所致，呈多株性，若合并急性感量合成免疫球蛋白所致，呈多株性，若合并急性感染，則染，則11、22明顯增高。明顯增高。生物化學與分子生物學實驗教學中心2011春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期 19/4編輯pptn M M蛋白血癥（單株免疫球蛋白異常癥）蛋白血癥（單株免疫球蛋白異常癥）n 主要特征：主要特征：M M蛋白又叫

21、異常免疫球蛋白，其區(qū)帶寬度與蛋白又叫異常免疫球蛋白，其區(qū)帶寬度與AlbAlb帶大致相等或較其狹窄，常分布在帶大致相等或較其狹窄，常分布在22至慢至慢-G-G部位。部位。n 病理生理：病理生理： M M蛋白是由某一細胞株分泌大量結(jié)構(gòu)相同、電蛋白是由某一細胞株分泌大量結(jié)構(gòu)相同、電泳遷移率一致的蛋白。多發(fā)性骨髓瘤及原發(fā)性巨球蛋白血泳遷移率一致的蛋白。多發(fā)性骨髓瘤及原發(fā)性巨球蛋白血癥時，癥時，M M蛋白以外的其他免疫球蛋白明顯降低，其可能是蛋白以外的其他免疫球蛋白明顯降低，其可能是由于由于M M蛋白大量消耗氨基酸，致使其他免疫球蛋白相對合蛋白大量消耗氨基酸，致使其他免疫球蛋白相對合成不足，以及成不足，

22、以及M M蛋白代謝亢進，其他免疫球蛋白的分解代蛋白代謝亢進，其他免疫球蛋白的分解代謝也隨之增加，故而含量降低。謝也隨之增加，故而含量降低。 生物化學與分子生物學實驗教學中心2011春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期 19/4編輯ppt雙白蛋白血癥型雙白蛋白血癥型 主要特征：在白蛋白區(qū)有兩個主要特征：在白蛋白區(qū)有兩個區(qū)帶，光密度掃描出現(xiàn)雙峰，區(qū)帶，光密度掃描出現(xiàn)雙峰，呈剪刀狀。呈剪刀狀。產(chǎn)生原因：雙白蛋白血癥分為產(chǎn)生原因：雙白蛋白血癥分為持久型和暫時型兩種。持久型持久型和暫時型兩種。持久型主要是一種家族性血清蛋白異主要是一種家族性血清蛋白異常的疾病，極少見，為常染色常的疾病，極少見，為常染色體不完全顯性遺傳；體不完全顯性遺傳； 而暫時型而暫時型主要是指腎功能不全的患者在主要是指腎功能不全的患者在治療期間使用大劑量的治療期間使用大劑量的-內(nèi)酰內(nèi)酰胺類抗生素，可形成快泳動性胺類抗生素，可形成快泳動性的白蛋白成分，治療中斷即逐的白蛋白成分，治療中斷即逐漸消失。漸消失。 生物化學與分子生物學實驗教學中心2011春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期春季學期 19/4編輯ppt先天性白蛋白缺陷型：先天性白蛋白缺陷型：