細胞工程高考真題強化訓練

1、細胞工程高考真題強化訓練1.（13上海）在工業(yè)化大量培育植物試管苗的過程中，一般進行如下操作，則正確的操作挨次是誘導形成芽 取合適外植體 誘導形成愈傷組織誘導形成未分化狀態(tài)的細胞 誘導形成根A B C D2.（13天津）花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用肯定劑量的紫外線處理黑芥原生質體可使其染色體片段化，并丟失再生力量。再利用此原生質體作為部分遺傳物質的供體與完整的花椰菜原生質體融合，以獲得抗黑腐病雜種植株。流程如下圖。據(jù)圖回答下列問題：（1）過程所需的酶是 。（2）過程后，在顯微鏡下觀看融合的活細胞中有供體的 存在，這一特征可作為初步篩選雜種細胞的標志。（3

2、）原生質體培育液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持肯定的滲透壓，其作用是 。原生質體經過 再生，進而分裂和脫分化形成愈傷組織。（4）若分析再生植株的染色體變異類型，應剪取再生植株和 植株的根尖，通過 、 、染色和制片等過程制成裝片，然后在顯微鏡下觀看比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。（5）接受特異性引物對花椰菜和黑芥基因組DNA 進行PCR 擴增，得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定。下圖是用該引物對雙親及再生植株14 進行PCR 擴增的結果。據(jù)圖推斷，再生植株14 中肯定是雜種植株的有 。（6）對雜種植株進行 接種試驗，可篩選出具有高抗性的雜種植株。3.（13海南）單純皰疹病毒型（HSV-）可引

3、起水皰性口唇炎。利用雜交瘤技術制備出抗HSV-的單克隆抗體可快速檢測HSV-。回答下列問題：（1）在制備抗HSV-的單克隆抗體的過程中，先給小鼠注射一種純化的HSV-蛋白，一段時間后，若小鼠血清中抗 的抗體檢測呈陽性，說明小鼠體內產生了 反應，再從小鼠的 中獵取B淋巴細胞。將該B淋巴細胞與小鼠的 細胞融合，再經過篩選、檢測，最終可獲得所需的雜交瘤細胞，該細胞具有的特點是 。（2）若要大量制備抗該蛋白的單克隆抗體，可將該雜交瘤細胞注射到小鼠的 中使其增殖，再從 中提取、純化獲得。（3）通過上述方法得到的單克隆抗體可精確地識別這種HSV-蛋白，其緣由是該抗體具有 和 等特性。4.（12廣東）培育草

4、莓脫毒苗所接受的主要技術是A.組織培育 B.細胞雜交 C.顯微注射 D.核移植5.（12浙江）請依據(jù)以下供應的試驗材料，完善生物制劑W對動物不同細胞的分裂具有促進作用的試驗思路，并猜測試驗結果。試驗材料：培育液、正常體細胞、癌細胞、W、胰蛋白酶。（要求與說明：答題時不考慮加入W后的體積變化等誤差。供應的細胞均具有分裂力量，只進行原代培育且培育條件適宜）（1）試驗思路：取培育瓶若干個，分組如下： 。每組設置若干個重復樣品。各組樣品在培育箱中培育一段合適的時間后，各取其中的幾個樣品，加入 ，搖勻，在顯微鏡下用血細胞計數(shù)板分別計數(shù)并記錄細胞數(shù)。重復若干次。 。（2）猜測試驗結果（用坐標系和細胞數(shù)變化

5、曲線示意圖表示）：6.（12江蘇）下列事實能體現(xiàn)細胞全能性的是A棉花根尖細胞經誘導形成幼苗B單細胞的DNA在體外大量擴增C動物雜交瘤細胞產生單克隆抗體D小鼠體細胞經誘導培育成小鼠7.（12江蘇）（1）2,4D常用于秈稻愈傷組織的誘導， 對形態(tài)的發(fā)生有肯定的抑制作用。為促進愈傷組織再分化，在配制分化培育基時需（填“上升”、“保持”或“降低”）2,4D的濃度。（2）當秈稻愈傷組織在只含有細胞分裂素的培育基上培育時，消滅具有分生力量的綠色芽點，但連續(xù)出芽，通常在培育基中添加，以促進幼苗形成。（3）爭辯中用顯微鏡可以觀看到的現(xiàn)象是（填下列序號）。綠色芽點細胞排列松散 剛融合的秈稻和稗草雜交細胞發(fā)生質壁

6、分別胚狀體細胞中有葉綠體 分化的愈傷組織的各細胞的形態(tài)大小全都（4）經組織培育篩選獲得的秈稻葉綠素突變體，其葉綠素a與葉綠素b的比值顯著大于對比，葉綠素總量不變。某同學用（填序號：綠色紅色藍紫色黃色）光照射突變體和對比葉片，檢測到兩者光合放氧差異不大。若取等量色素提取液進行層析，會發(fā)覺突變體第條色素帶（自上而下）窄于對比組。（5）胚乳（3n）由一個精子與兩個極核受精發(fā)育而成。若用秈稻種子的胚乳誘導愈傷組織，培育三倍體，需適時晚年除胚，以免胚的存在影響愈傷組織細胞的，還可避開再生苗中混有。8.（11江蘇）下列有關植物組織培育的敘述，正確的是A愈傷組織是一團有特定結構和功能的薄壁細胞B二倍體植株的

7、花粉經脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株C用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別包裝可制成人工種子D植物耐鹽突變體可通過添加適量NaCl的培育基培育篩選而獲得9.（11江蘇）關于現(xiàn)代生物技術應用的敘述，錯誤的是A蛋白質工程可合成自然界中不存在的蛋白質B體細胞雜交技術可用于克隆動物和制備單克隆抗體C植物組織培育技術可用于植物莖尖脫毒 D動物細胞培育技術可用于轉基因動物的培育10.（10廣東）新技術的建立和應用對生物學進展至關重要。下列技術（或儀器）與應用匹配正確的是 A技術擴增蛋白質 B雜交瘤技術制備單克隆抗體 C光學顯微鏡觀看葉綠體的基粒 D花粉離體培育培育單倍體植物11.（10寧夏）請回答：（1

8、）植物微型繁殖技術屬于植物組織培育的范疇。該技術可以保持品種的 ，繁殖種苗的速度 。離體的葉肉細胞在適宜的條件下培育，最終能夠形成完整的植株，說明該葉肉細胞具有該植物的全部 。(2)把試管苗轉接到新的培育基上時，需要在超凈工作臺上進行，其緣由是避開 的污染。（3）微型繁殖過程中，適宜濃度的生長素單獨使用可誘導試管苗 ，而與 配比適宜時可促進芽的增殖。若要抑制試管苗的生長，促使愈傷組織產生和生長，需要使用的生長調整劑是 (脫落酸、2，4-D)。（4）將某植物試管苗培育在含不同濃度蔗糖的培育基上一段時間后，單株鮮重和光合作用強度的變化如圖。據(jù)圖分析，隨著培育基中蔗糖濃度的增加，光合作用強度的變化趨

9、勢是 ，單株鮮重的變化趨勢是 。據(jù)圖推斷，培育基中不含蔗糖時，試管苗光合作用產生的有機物的量 (能、不能)滿足自身最佳生長的需要。(5)據(jù)圖推想，若要在誘導試管苗生根的過程中提高其光合作用力量，應 (降低，增加)培育基中蔗糖濃度，以便提高試管苗的自養(yǎng)力量。12.（10浙江）下列關于動物細胞培育的敘述，正確的是A培育保留有的細胞在培育瓶壁上可形成多層細胞B克隆培育法培育過程中多數(shù)細胞的基因型會發(fā)生轉變C二倍體細胞的傳代培育次數(shù)通常是無限的D惡性細胞系的細胞可進行傳代培育13.（10福建）紅細胞生成素（EPO）是體內促進紅細胞生成的一種糖蛋白，可用于治逆子療腎衰性貪血等疾病。由于自然EPO來源極為

10、有限，目前臨訂、床上使用的紅細胞生成素主要來自于基因工程技術生產的重組人紅細胸生成素（rhEPO），其簡要生產流程如右圖。請回答：（1）圖中所指的是 技術。（2）圖中所指的物質是 ，所指的物質是 。（3）培育重組CHO細胞時，為便于清除代謝產物，防止細胞產物積累對細胞自身造成危害，應定其更換 。（4）檢測rhEPO的體個活性需要抗rhEPO的單克隆抗體。分泌該單克隆抗體的 細胞，可由rhEPO免疫過的小鼠B淋巴細胞與小鼠骨髓癌細胞融合而成。14.(09理綜1卷)下列關于體細胞雜交或植物細胞質遺傳的敘述，錯誤的是A.利用植物體細胞雜交技術可克服生殖隔離的限制，培育遠源雜種B.不同種植物原生質體融

11、合的過程屬于植物體細胞雜交過程C.兩個不同品種的紫茉莉雜交，正交、反交所得F1的表現(xiàn)型全都D.兩個不同品種的紫茉莉雜交，F(xiàn)1的遺傳物質來自母本的多于來自父本的17.（09浙江）用動、植物體的體細胞進行離體培育，下列敘述正確的是A.CO2培育箱 B.都須用液體培育基C.都要在無菌條件下進行D.都可體現(xiàn)細胞的全能性18.（08全國卷）下列關于細胞工程的敘述，錯誤的是A.電刺激可誘導植物原生質體融合或動物細胞融合B.去除植物細胞的細胞壁和將動物組織分散成單個細胞均需酶處理C.小鼠骨髓瘤細胞和經抗原免疫小鼠的B淋巴細胞融合可制備單克隆抗體D.某種植物甲乙兩品種的體細胞雜種與甲乙兩品種雜交后代的染色體數(shù)

12、目相同19.（08江蘇）下列關于植物組織培育的敘述中，錯誤的是A培育基中添加蔗糖的目的是供應養(yǎng)分和調整滲透壓B培育基中的生長素和細胞分裂素影響愈傷組織的生長和分化C離體器官或組織的細胞都必需通過脫分化才能形成愈傷組織D同一株綠色開花植物不同部位的細胞經培育獲得的愈傷組織基因相同20.（08江蘇）某組織培育試驗室的愈傷組織被真菌嚴峻污染，為查找污染緣由設計了4個試驗，試驗條件除圖示外共他均相同。下列各圖表示試驗結果，據(jù)圖可得出的初步結論是A污染主要不是培育基滅菌時間短造成的 B污染主要來源于組織培育所用的離體組織C調整培育基pH不能解決污染問題 D調整培育溫度不能解決污染問題21.（08寧夏）回

13、答下列有關動物細胞培育的問題：在動物細胞培育的過程中，當貼壁細胞分裂生長到細胞表面 時，細胞會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的 。此時，瓶壁上形成的細胞層數(shù)是 ，要使貼壁的細胞從瓶壁上分別下來，需要用酶處理，可用的酶是 。隨著細胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細胞分裂停止，進而消滅 的現(xiàn)象；但極少數(shù)細胞可以連續(xù)增殖，其中有些細胞會因遺傳物質發(fā)生轉變而變成 細胞，該種細胞的黏著性 ，細胞膜表面蛋白質（糖蛋白）的量 ?，F(xiàn)用某種大分子染料，對細胞進行染色時，觀看到死細胞被染色，而活細胞不染色，緣由是 。檢查某種毒物是否能轉變細胞染色體的數(shù)目，最好選用細胞分裂到 期的細胞用顯微鏡進行觀看。在細胞培育過程中，

14、通常在 條件下保存細胞，由于在這種條件下，細胞中 的活性降低，細胞的 速率降低。給患者移植經細胞培育形成的皮膚組織后，發(fā)生了排斥現(xiàn)象，這是由于機體把移植的皮膚組織當作 進行攻擊。22.（08北京）白菜、甘藍均為二倍體，體細胞染色體數(shù)目分別為20、18。以白菜為母本，甘藍為父本，經人工授粉后，將雌蕊離體培育，可得到“白菜甘藍”雜種幼苗。請回答問題：（1）白菜和甘藍是兩個不同的物種，存在 隔離。自然條件下，這兩個物種間不能通過 的方式產生后代。雌蕊離體培育獲得“白菜-甘藍”雜種幼苗，所依據(jù)的理論基礎的植物細胞具有 。（2）為觀看“白菜甘藍”染色體的數(shù)目和形態(tài)，通常取幼苗的 做臨時裝片，用 染料染色

15、。觀看、計數(shù)染色體的最佳時期是 。（3）二倍體“白菜甘藍”的染色體數(shù)為 。這種植株通常不育，緣由是減數(shù)分裂過程中 。為使其可育，可通過人工誘導產生四倍體“白菜-甘藍”這種變異屬于 細胞工程高考真題強化訓練答案1. B2.【答案】（1）纖維素酶和果膠酶（2）葉綠體（3）保持原生質體完整性細胞壁（4）雙親（或花椰菜和黑芥） 解離漂洗（5）1、2、4 （6）黑腐病菌【解析】（1）過程表示原生質體的制備，要用纖維素酶和果膠酶去掉植物細胞的細胞壁（2）用于融合的兩個細胞，一個是黑芥苗的葉肉細胞，一個是花椰菜的根部細胞，其中供體細胞特有的結構是葉綠體，可通過觀看葉綠體的有無作為初步篩選雜種細胞的標志。（3

16、）原生質體沒有細胞壁的愛護，需要加入適宜濃度的甘露醇以保證滲透壓的穩(wěn)定，以避開原生質體吸水或失水破壞原生質體的完整性；原生質體通過細胞壁雜聲形成雜種細胞，進而形成愈傷組織。（4）分析再生植株染色體變異類型，需要將再生植株細胞染色體和黑芥苗與花椰菜細胞中的染色體制片觀看進行比較，制片的基本程序是解離、漂洗、染色、制片。（5）依據(jù)圖譜，花椰菜含有堿基對為300 和600 的DNA 片段，黑芥還有堿基對為1000、1300 和1500 的片段，再生植株3,只含有長度為300 和600 的片段，與花椰菜全都，1、2、4 既含有花椰菜DNA 片段，又含有黑芥DNA 片段，為雜種植株。（6）對雜種植株接種

17、黑腐病菌，能正常生長的即為具有高抗性的雜種植株?！驹囶}評價】本題以抗黑腐病花椰菜的培育為信息載體，綜合考查了植物細胞工程、細胞分裂裝片的制作觀看、PCR 圖譜的識別等相關內容，同時也考查了考生識圖獵取信息的力量，具有肯定難度。3.【解析】（1）由題意可知，單純皰疹病毒型可引起水泡性口炎，病毒蛋白HSV-可以作為一種抗原刺激機體通過免疫反應產生特異性抗體。在單克隆抗體的制備過程中，首先應注射純化的HSV-蛋白作為抗原，一段時間后對小鼠血清進行檢測，假如抗HSV-蛋白的抗體檢測為陽性，說明小鼠體內通過體液免疫產生了特異性抗體。此時可以從小鼠的免疫器官中，如脾臟、骨髓、淋巴結等部位獵取已免疫的B淋巴

18、細胞，與小鼠的骨髓瘤細胞融合，經過篩選檢測獲得能穩(wěn)定的產生特異性抗體的雜交瘤細胞。已免疫的B淋巴細胞具有產生特異性抗體的特點，而骨髓瘤細胞能無限增殖，因此獲得的雜交瘤細胞具有既能無限增殖又能產生特異性抗體（抗HSV-蛋白的抗體）的特點。（2）獲得大量單克隆抗體途徑有兩種：體外培育和體內培育。體外培育即通過動物細胞培育技術獲得大量的雜交瘤細胞，進而產生大量的單克隆抗體；體內培育即將雜交瘤細胞注射到小鼠的腹腔中增殖，最終從小鼠的腹水中提取、純化單克隆抗體。（3）單克隆抗體是通過細胞融合技術單一的B淋巴細胞核雜交瘤細胞融合而獲得的，因此融合后的細胞只能產生一種特異性抗體，所制備的單克隆抗體具有特異性

19、強，靈敏度高的特點?！驹囶}點評】本題以皰疹病毒為素材切入，綜合考查了同學對單克隆抗體的制備原理、過程及其特點的理解。旨在考查同學的理解和應用力量。4.【答案】 【解析】草莓植株分生區(qū)的細胞含病毒的量比較少，可以利用植物組織培育技術培育出脫毒幼苗。5.【答案】（1）A組：培育液中加入體細胞。B組：培育液中加入體細胞，加入W。C組：培育液中加入癌細胞。D組：培育液中加入癌細胞，加入W。胰蛋白酶統(tǒng)計并分析所得數(shù)據(jù)。（2）【命題透析】本題以試驗設計的形式，綜合考查了必修和選修的相關內容?！舅悸伏c撥】（1）本試驗的目的是：完善生物制劑W對動物不同細胞的分裂具有促進作用的試驗思路，有兩個自變量：是否加入生

20、物制劑W、動物細胞的種類。（2）設計時應遵循單一變量及對比試驗原則，進行重復試驗可削減誤差并使試驗結果更為精確牢靠，故分組時應分4組分別進行試驗。（3）胰蛋白酶用來分解組織細胞間的蛋白質，使組織細胞相互分散開來，有利于細胞的分裂。（4）繪制曲線時，應留意橫縱坐標及各組合的最終高度。6.答案： AD解析：證明細胞全能性的實例必需滿足的三個條件：起點：高度分化的細胞；終點：形成完整的個體；外部條件：離體、養(yǎng)分物質等。B為分子克隆，C為細胞克隆。7.（1）降低（2）適量的生長素（3）（4）4（5）增殖與分化二倍體幼苗解析：2，4-D常用于植物愈傷組織的誘導和生長，但它趨向于抑制植物形態(tài)的發(fā)生，當愈傷

21、組織再分化形成新的植株個體時，要減小2，4-D抑制植物形太發(fā)生的作用。所以在配制分化培育基時需降低2，4-D的濃度。依據(jù)題意，此時已經消滅具有分生力量的綠色芽點，但不能連續(xù)出芽。由于生長素有促進再分化過程中芽的生長，所以在培育基中添加適量的生長素，以促進幼苗形成。綠色芽點細胞為分生區(qū)細胞，排列緊密；剛融合的雜種細胞沒有細胞壁，不行能發(fā)生質壁分別；愈傷組織細胞排列疏松無規(guī)章；再分化產生胚狀體，需要光照刺激，會促進葉綠體的形成，可在光學顯微鏡下觀看到葉綠體。色素具有不同的吸取光譜，葉綠素a、b主要吸取的是紅光和藍紫光。而對綠光和黃光吸取很少。在本題中，通過光合放氧速率反映出二者光合作用強度的大小，

22、自變量是葉綠素a、b比例上的差異。從結果來看，二者放氧速率差異不大，而突變體中葉綠素a與葉綠素b的比值顯著大于對比。說明該同學用的光不是紅色和藍紫色。所以是綠色和黃色。通過紙層析法分別色素時，葉綠素a、b分布于第3、4條（自上而下）。由于突變體中葉綠素a與葉綠素b的比值顯著大于對比，所以會發(fā)覺突變體第4條色素帶窄于對比組。利用胚乳誘導愈傷組織，由于胚中含有植物激素，會影響愈傷組織的增殖和分化，所以需適時剔除胚。由于胚是由受精卵發(fā)育而來的，是二倍體。剔除胚也可以避開再生苗中混有二倍體幼苗。8. D 9. B 10.解析：本題主要考查同學的理解力量。PCR技術只能用來擴增核酸，不能用來擴增蛋白質；

23、利用光學顯微鏡無法觀看到葉綠體的內部結構。答案：BD11.答案：（1）遺傳特性 快 遺傳信息 （2）微生物 （3）生根 細胞分裂素 2，4-D （4）漸漸減小 先增加后下降 不能 （5）降低12.解析：動物細胞培育可分為原代培育和傳代培育，原代培育到肯定程度后要進行傳代，由于細胞有接觸抑制現(xiàn)象，當細胞接觸時就會停止分裂(在細胞培育過程中進行的為有絲分裂，所以培育出來的多數(shù)細胞基因型相同)，但是細胞在培育過程中，傳代次數(shù)也是有限的，一般為50次就會死亡，留下來的細胞就是發(fā)生了癌變的細胞，遺傳物質發(fā)生轉變，具有不死性，但是仍保留接觸抑制現(xiàn)象，所以還是要傳代培育，這個也就是人體中癌細胞會轉移的緣由，

24、所以答案為D.答案：D13.解析：獵取目的基因的方法有三種（從基因文庫中獵取、用PCR 擴增技術、人工合成）。圖中以核DNA為模板獲得目的基因的方法為PCR技術。進行反轉錄的模板是mRNA。由題意可知重組CHO細胞適用于生產重組人紅細胞生成素(rhEPO），所以重組CHO細胞能過表達出重組人紅細胞生成素(rhEPO）或者紅細胞生成素。培育動物細胞是用液體培育基即培育液，細胞從培育液中吸取養(yǎng)分，并同時向培育液中排放代謝廢物，當代謝廢物積累時會危害細胞，因此要不斷更新培育液。制備單克隆抗體是讓淋巴B細胞與骨髓瘤細胞融合成雜交瘤細胞，然后由雜交瘤細胞來分泌抗體。答案：（1）PCR （2）mRNA r

25、hEPO (3)培育液 （4）雜交瘤14.C15.答案：（1）逆（反）轉錄 （2）限制性核酸內切酶（限制性內切酶、限制酶） DNA連接酶（注：兩空挨次可顛倒）（3）細胞融合 雜交瘤細胞 4）A蛋白 核酸（基因）序列 抗A蛋白的單克隆抗體16. 答案：(8分)(1)1吸取氧氣和養(yǎng)分物質、排出代謝廢物 (2)維持培育液適宜的pH (3)種類和劑量 (4)向乙(或丁)組裝置中放置肝臟小塊 染色體形態(tài)和數(shù)量 肝臟小塊對有機物X具有解毒作用17.C. 18.D解析：考查了細菌培育的相關學問。某些細菌如藍細菌（藍藻）、光合細菌以及紅螺菌都能進行光合作用。生長因子是指微生物生長不行或缺的微量有機物，主要包括

26、維生素、氨基酸和堿基等。而微生物的養(yǎng)分物質包括水、無機鹽、碳源、氮源和生長因子，它們都需要從外界獲得補充。培育基中加入伊紅和美藍屬于鑒別培育基，能與大腸桿菌代謝產生的有機酸結合，使菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤。19.答案：D解析：此題考查同學對植物組織培育技術的把握。培育基中加入蔗糖的目的一方面可以供應養(yǎng)分，另一方面可以調整滲透壓；在整個組織培育過程中影響再分化的關鍵是生長素和細胞分裂素的使用比例和使用挨次；組織培育過程中的第一個關鍵環(huán)節(jié)是脫分化，從而形成愈傷組織；組織培育的對象既可以是體細胞也可以是生殖細胞，因此獲得的愈傷組織的基因組成不肯定相同。20.答案：ABCD解析：據(jù)題圖可知，污染率與培育基滅菌的時間、培育基pH以及培育溫度并沒有規(guī)律性關系；