抑肽酶對兔鈍性心肌損傷的實(shí)驗(yàn)研究

1、抑肽酶對兔鈍性心肌損傷的實(shí)驗(yàn)研究         【摘要】  目的：探討大劑量抑肽酶對兔胸部撞擊傷后心肌挫傷治療作用。方法：采用兔左側(cè)胸部撞擊傷生物模型,動態(tài)觀察抑肽酶對最大縮短速度(),等容收縮期左室內(nèi)壓最大上升速度(+/),等容舒張期左室內(nèi)壓最大下降速度(-/)及左室舒張末期壓()和血漿心肌肌鈣蛋白(cTnI)的動態(tài)變化，觀察心肌病理及超微結(jié)構(gòu)的改變。測定心肌組織中CK MB、6 k PGF1含量及心肌含水量(MWC)。 結(jié)果：胸部撞擊傷后血流動力學(xué)發(fā)生明顯改變，左心室舒張期末壓(LVEDP)和左心室

2、內(nèi)壓最大下降速率(-dp/dtmax)，在傷后24h仍較傷前明顯增高(P0.01);血漿cTnI釋放較傷前增加明顯(0.05)，而治療組與創(chuàng)傷組相比較，左心功能明顯改善(0.05)，血漿cTnI釋放減少(0.05)，心肌腫脹減輕，間質(zhì)出血、肌絲斷裂和溶解明顯減輕。結(jié)論:胸部撞擊傷后造成心肌病理損害及心功能不全，大劑量抑肽酶有顯著的心肌保護(hù)作用。 【關(guān)鍵詞】  抑肽酶; 肌損傷; 心肌肌鈣蛋白胸部外傷，除可造成急性肺損傷外, 多合并有心肌挫傷，心肌損傷也是嚴(yán)重的并發(fā)癥之一，導(dǎo)致心功能不全，是早期死亡的重要原因1。及時判斷心肌損傷及其嚴(yán)重程度，保護(hù)心功能，對指導(dǎo)臨床搶救具有重要意義。本實(shí)

3、驗(yàn)利用家兔胸部沖擊傷模型，對沖擊傷后早期血漿心肌肌鈣蛋白(cTnI)濃度變化規(guī)律及其與心功能變化的關(guān)系進(jìn)行了探討，研究大劑量抑肽酶治療心功能不全的作用。1  資料與方法1.1  動物及分組：健康大白兔26只(第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院動物實(shí)驗(yàn)中心提供),雌雄不限,體重(2.40±0.20)kg，隨機(jī)分為2組:創(chuàng)傷模型組(n=10):致傷后立即給予吸氧、低分子右旋糖酐20l/kg靜注補(bǔ)液抗休克治療。抑肽酶治療組(n=10):致傷后即刻耳靜脈注射抑肽酶30000KIU/kg(蘭州大得力制藥公司提供,甘衛(wèi)藥準(zhǔn)字1996第11119號)，以后10000KIU/(kg/h)維持至

4、實(shí)驗(yàn)結(jié)束 ，其它治療同創(chuàng)傷組。1.2  撞擊傷模型： 經(jīng)兔耳緣靜脈注射30g/L戊巴比妥鈉(30mg/kg)麻醉，此后10mg/kg·h持續(xù)靜脈滴注麻醉。將動物固定,剪去胸部兔毛，右側(cè)頸總動脈和頸內(nèi)靜脈置管。用惠普心電四導(dǎo)生理記錄儀連接, 左室心肌收縮成分的最大縮短速度()，等容收縮期左室內(nèi)壓最大上升速度(+/),等容舒張期左室內(nèi)壓最大下降速度(-/)及左室舒張末期壓()。撞擊前留取血清標(biāo)本。將兔架直立，用BMI 型水平式生物撞擊機(jī)準(zhǔn)靜態(tài)撞擊兔左側(cè)胸部,撞擊點(diǎn)位于兔右側(cè)第3、4肋間與腋中線交界處,采用準(zhǔn)靜態(tài)撞擊,驅(qū)動壓力為250kPa，撞擊面積為4cm2，胸壁壓縮3cm，撞

5、擊時相為吸氣末1。1.3  觀察指標(biāo)及方法1.4  統(tǒng)計學(xué)處理：實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS11.0統(tǒng)計軟件處理。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±)表示,采用 t檢驗(yàn)和直線相關(guān)分析。0.05為差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義。2  結(jié)果  21  胸部撞擊傷后血流動力學(xué)改變： 左心室收縮/舒張功能降低，特別是LVEDP和-dp/dtmax在傷后12h仍然較傷前明顯增高(t=3.302,2.737;P0.01,0.05)，表明胸部撞擊傷后左心室功能受到損害,特別是舒張功能損害更為明顯, 抑肽酶可明顯改善急心肌挫傷時左室舒張及收縮功能,顯著升高左室

6、7;dp/dt max和降低LVEDP（表1）。表1  心功能指標(biāo)的比較（略）注:與對照組相比 *0.05;  *0.012.2  血漿cTnI濃度變化：家兔胸部爆炸沖擊傷后1h血漿cTnI顯著升高(0.05)，以后持續(xù)至12后達(dá)峰值(0 05),治療組6h-12 較傷前升高，但明顯低于創(chuàng)傷組(0.05) 見表2。表2  血清心肌肌鈣蛋白()的變化（略）注:與對照組相比 *0.05;  *0.01         2.3  心肌組織CK MB、6 k PG

7、F1含量及MWC比較：實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，治療組CK MB、6 k PGF1含量均高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.001)。治療組心肌含水量低于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.001)（表3）。表3  心肌組織CK MB、6 k PGF1含量及MWC比較（略）注:與對照組比較,P0.001表4  各組兔心肌挫傷范圍比較（略）2.4  心肌病理學(xué)變化：撞擊傷后1h即可見心內(nèi)膜點(diǎn)狀出血,光鏡下見胞漿內(nèi)灶狀溶解，炎性細(xì)胞浸潤;6后上述病變明顯增多，心肌灶狀壞死,間質(zhì)內(nèi)較多點(diǎn)片狀出血，肌纖維有溶解及波浪樣改變,局部可見核溶解。治療組心肌腫脹減輕，肌絲排列紊亂,肌絲溶解減少，間

8、質(zhì)出血減少。治療組范圍均明顯低于對照組 (P0.01) （表4）。3  討論胸部撞擊傷，可導(dǎo)致心肌直接損害，此外，也可因缺血、缺氧、感染或全身炎癥反應(yīng)綜合征，各種細(xì)胞因子的釋放而導(dǎo)致心肌損害1，造成心功能不全。肌鈣蛋白是一種由肌鈣蛋白原肌球蛋白有序構(gòu)成的復(fù)合抑制蛋白，與心肌損傷程度呈平行關(guān)系,目前被視為判斷心肌損傷最特異和敏感的指標(biāo)2。當(dāng)心肌細(xì)胞因創(chuàng)傷、缺血、缺氧等因素發(fā)生變性壞死時, cTnI可通過破損的細(xì)胞膜彌散進(jìn)入細(xì)胞間質(zhì),隨之進(jìn)入血管和淋巴管內(nèi)。血中cTnI濃度變化可特異性地反映心肌結(jié)構(gòu)蛋白的破壞情況。本實(shí)驗(yàn)采用家兔為實(shí)驗(yàn)動物，為排除傷后血容量不足和肺損傷的影響,傷后補(bǔ)足血容

9、量和摒棄肺損傷嚴(yán)重的動物。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，沖擊傷后1h即有cTnI水平升高,表明有明顯心肌損害,傷后12內(nèi)一直持續(xù)處于高水平, 心肌橫紋受損斷裂,cTnI釋放進(jìn)入血清,心肌損害有加重趨勢通過傷后cTnI的濃度變化可以反映心肌損傷的情況。同時,左室內(nèi)壓變化可直接反映心功能狀況，實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明,家兔胸部沖擊傷后cTnI水平動態(tài)變化與左室內(nèi)壓的變化密切相關(guān)(0.05),在一定程度上可反映心臟功能的變化情況。病理觀察亦發(fā)現(xiàn)心肌變性、壞死的嚴(yán)重程度與血漿cTnI升高基本一致,說明cTnI濃度變化可較敏感地反映心肌損害的有無及其嚴(yán)重程度。治療組心肌細(xì)胞CK MB含量升高,提示細(xì)胞損傷及膜的通透性改變減輕;

10、心肌細(xì)胞中6 k PGF1含量反映了前列環(huán)素含量變化,而PGI2增加可改善心肌供氧及增加冠脈血流量,從而減輕心肌損傷，有利于左室功能恢復(fù),減輕細(xì)胞水腫。   抑肽酶是一種非特異性的廣譜絲氨酸蛋白酶抑制劑。近年來發(fā)現(xiàn)抑肽酶具有抑制體外循環(huán)()手術(shù)引起的的作用3。體內(nèi)許多炎性級聯(lián)反應(yīng)是由絲氨酸蛋白酶介導(dǎo)的,抑肽酶可以與酶的活性中心特異性的結(jié)合,通過多種途徑如激肽 ，激肽釋放酶系統(tǒng)和補(bǔ)體系統(tǒng),抑制炎性反應(yīng)。此外，抑肽酶可以抑制中性粒細(xì)胞和血小板的激活，從而抑制炎性反映。應(yīng)用大劑量抑肽酶使血清中含量明顯降低，心功能改善，心肌病理損害減輕，其機(jī)理可能在于抑肽酶抑制炎癥反應(yīng)有

11、關(guān)4?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】  1 閔家新,王正國.不同致傷條件撞擊對兔鈍性胸部創(chuàng)傷傷情影響的實(shí)驗(yàn)研究J.第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報,2000,22(06):509-511.2 Adams JE, Bessey PQ,Bessey PQ.Improved detection of cardiac contusion with cardiac troponin IJ. American Heart,1996,131: 308-312.3 Landis RC, Poullin M , Poullin M.The antithrombotic and antiinflammatory mechanisms of action of aprotinin, Annals of Thoracic SugeryJ.2001,72(06):2169-2175.4