推拿加功能訓(xùn)練對膝骨關(guān)節(jié)炎家兔模型關(guān)節(jié)液中細(xì)胞因子的影響

1、推拿加功能訓(xùn)練對膝骨關(guān)節(jié)炎家兔模型關(guān)節(jié)液中細(xì)胞因子的影響         【摘要】 目的觀察推拿加功能訓(xùn)練對膝骨關(guān)節(jié)炎家兔模型關(guān)節(jié)液中細(xì)胞因子IL-1和TNF-a的影響，探討推拿加功能訓(xùn)練治療膝骨關(guān)節(jié)炎的機(jī)制。方法將新西蘭大白兔40只隨機(jī)分為空白對照組(A組)、模型對照組(B組)、電針治療組（C組）、手法治療組(D組)。除A組外，其余3組將大        【摘要】  目的觀察推拿加功能訓(xùn)練對膝骨關(guān)節(jié)炎家兔模型關(guān)節(jié)液中細(xì)胞因子

2、IL-1和TNF-a的影響，探討推拿加功能訓(xùn)練治療膝骨關(guān)節(jié)炎的機(jī)制。方法將新西蘭大白兔40只隨機(jī)分為空白對照組(A組)、模型對照組(B組)、電針治療組（C組）、手法治療組(D組)。除A組外，其余3組將大白兔左膝關(guān)節(jié)伸直位石膏固定7周制成骨性關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型，造模成功后,A組和B組正常飼養(yǎng),不處理；C組電針治療，D組給予推拿手法加功能訓(xùn)練治療，連續(xù)治療21 d。處理前、后分別取各組家兔關(guān)節(jié)沖洗液，采用放射免疫分析法（RIA），測定關(guān)節(jié)沖洗液中IL-1和TNF-a的含量。結(jié)果經(jīng)治療后，C、D組與A、B組比較有顯著性差異(P<0.05)；D組治療前后有顯著性差異(P<0.05)。結(jié)論推拿加

3、功能訓(xùn)練治療能降低膝骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)液中細(xì)胞因子IL-1和TNF-a的含量,從而發(fā)揮對膝骨關(guān)節(jié)炎的防治作用。 【關(guān)鍵詞】  膝骨關(guān)節(jié)炎 推拿手法 細(xì)胞因子膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎(Knee Osteoarthritis，KOA) 是臨床中常見的關(guān)節(jié)疾病，好發(fā)于中老年人，是由于關(guān)節(jié)滑膜退變，軟骨破壞引起的以膝關(guān)節(jié)疼痛、僵硬和活動(dòng)受限為特征的慢性骨關(guān)節(jié)病，主要病變?yōu)橄リP(guān)節(jié)軟骨退行性變和繼發(fā)性骨質(zhì)增生。近年來,臨床上不斷報(bào)道用針灸、推拿加功能訓(xùn)練及針刀等方法治療膝骨關(guān)節(jié)炎取得較好療效1。研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞因子IL-1及TNF-a是參與骨性關(guān)節(jié)炎進(jìn)程的重要介質(zhì), 是炎癥反應(yīng)的重要調(diào)節(jié)劑，是調(diào)節(jié)炎癥的始動(dòng)因素

4、，與軟骨破壞密切相關(guān)2。本實(shí)驗(yàn)研究推拿加功能訓(xùn)練對膝骨關(guān)節(jié)炎家兔模型細(xì)胞因子的影響,旨在證實(shí)推拿手法治療膝骨關(guān)節(jié)炎的療效，探討膝骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機(jī)理。1  材料與儀器1.1  儀器與試劑IL-1和TNF-放射免疫測定藥盒從解放軍總醫(yī)院放免研究所購買，采用放射免疫分析法（RIA），放免測定程序按試劑說明書進(jìn)行。離心機(jī)(中佳公司,KDC-2046型)、電針儀(廣東省汕頭市醫(yī)用設(shè)備廠, 6805-)和放射免疫計(jì)數(shù)器(眾城公司, DFM-96型10管)等。1.2 動(dòng)物健康新西蘭大白兔40只(從重慶醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物中心購買)，雌雄各半，雌無孕，體重2.02.5kg。隨機(jī)分為空白對照組（A）

5、、模型對照組（B）、電針治療組（C）和手法治療組（D），每組10只。造模成功后C，D兩組每只分別給予電針或手法治療，1次/d。2 方法2.1  動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物同等條件下穩(wěn)定飼養(yǎng)7 d后，B，C，D組按照膝關(guān)節(jié)石膏制動(dòng)法造模。先剪去所有動(dòng)物左后肢踝關(guān)節(jié)以上的兔毛，用管型石膏將其左后肢伸直位固定，石膏外以透明膠紙封好，以防兔撕咬，若石膏松動(dòng)或脫落者及時(shí)重新固定。制動(dòng)滿7周后，隨機(jī)從A，B，C，D組各抽出1只動(dòng)物處死，取關(guān)節(jié)軟骨作病理檢查以觀察造模情況，確定模型成功后解除石膏外固定。2.2 組織學(xué)檢查分別于造模成功后和治療結(jié)束后隨機(jī)從B，C，D各組中抽出1只家兔處死，處死后立即切取家兔脛

6、骨平臺(tái)內(nèi)側(cè)關(guān)節(jié)面的完整軟骨及軟骨下骨組織標(biāo)本，用10的甲醛溶液固定48 h，脫鈣23 d，石蠟縱向包埋固定，常規(guī)切片，HE染色。觀察滑膜與軟骨的病理變化3。2.3 推拿加功能訓(xùn)練方法D組每天用按摩、揉捏、點(diǎn)壓、分筋、理筋等手法以松解股四頭肌，順逆時(shí)針旋揉髕骨，再作內(nèi)旋內(nèi)收、外展外旋、屈伸髖和膝關(guān)節(jié)各5次，15 min/次，最后平地趕跑100 m，治療1次/d，連續(xù)治療21 d；C組參照實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)4與動(dòng)物針灸學(xué)5,取左后肢“內(nèi)外膝眼、陽陵泉、血海、足三里和梁丘”6個(gè)穴位。以30號、1寸毫針針刺，得氣后，針柄接電針治療儀，電壓6 V，疏密波型，頻率1.62 Hz，輸出調(diào)節(jié)強(qiáng)度12,以局部皮膚肌肉輕

7、微顫動(dòng)為度，1次/d，留針30 min/d，連續(xù)治療21 d。 正常組、模型組正常飼養(yǎng)。2.4 關(guān)節(jié)液標(biāo)本采集分別于造模成功后及治療結(jié)束后采集A，B，C，D四組的關(guān)節(jié)液，獲得4組動(dòng)物膝關(guān)節(jié)沖洗液，回收量0.40.6 ml，平均0.5 ml，于-20低溫冰箱中保存待測。具體方法：施行膝關(guān)節(jié)穿刺，證實(shí)刺入關(guān)節(jié)腔后，注入0.9%的生理鹽水0.5 ml，反復(fù)回抽、注入3次后，再盡量抽出腔內(nèi)液體。抽取關(guān)節(jié)液后，每只兔肌注2萬單位慶大霉素，以防膝關(guān)節(jié)感染。采用放射免疫分析法（RIA）處理標(biāo)本，放免測定程序按試劑說明書進(jìn)行6。2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SAS9.0以上軟件進(jìn)行分析,以±s表示,組間差異采用方差分析(ANOVA)中的SNK法,各組治療前后差異采用t檢驗(yàn)，以P<0.05作為顯著性差異的標(biāo)準(zhǔn)。3 結(jié)果3.1  病理切片觀察造模后隨機(jī)從各組中取出1只動(dòng)物處死,解剖A組動(dòng)物,肉眼觀察膝關(guān)節(jié)面光滑呈淡藍(lán)色；B，C，D組動(dòng)物關(guān)節(jié)軟骨面粗糙