藥物分析：巴比妥類(lèi)分析SYSH

1、藥物分析：巴比妥類(lèi)分析SYSH結(jié)構(gòu)性質(zhì)與鑒別特殊雜質(zhì)檢查含量測(cè)定體內(nèi)藥物分析10-1+C ONNCCCR1R2HHHHOOOHOHC NCNCCOOHHOR1R2一、巴比妥類(lèi)藥物的結(jié)構(gòu)剖析一、巴比妥類(lèi)藥物的結(jié)構(gòu)剖析 Interpretation of Chemical Structure 丙二酸脲素123456 三類(lèi)：三類(lèi)： 5, 5-二取代巴比妥類(lèi)二取代巴比妥類(lèi) 1, 5, 5-三取代巴比妥類(lèi)三取代巴比妥類(lèi) 代表物見(jiàn)表代表物見(jiàn)表10-1 (P265.) 硫代巴比妥類(lèi)硫代巴比妥類(lèi)巴比妥類(lèi)10-2123456巴比妥類(lèi)巴比妥類(lèi)5,5-二取代巴比妥類(lèi)二取代巴比妥類(lèi) R1 R2 巴比妥巴比妥 C2H5

2、- C2H5- 苯巴比妥苯巴比妥 C2H5- 戊巴比妥戊巴比妥 C2H5- 異戊巴比妥異戊巴比妥 C2H5- 司可巴比妥司可巴比妥 - C2H5-1,5,5-三取代巴比妥類(lèi)三取代巴比妥類(lèi) （少數(shù)）（少數(shù)） 如：己瑣巴比妥如：己瑣巴比妥硫代巴比妥類(lèi)硫代巴比妥類(lèi) 硫噴妥鈉硫噴妥鈉 5-3CH3CH2CH2CHCH3CH3CHCH2CH2CH3H2C CHCH2NNHOO CH3OH3CNNHOO CH3SNaC2H5H3CH2CH2CHCCH3電離，弱酸性電離，弱酸性與金屬離子反應(yīng)與金屬離子反應(yīng)氫活潑，與香草醛反應(yīng)氫活潑，與香草醛反應(yīng)UV，隨電離級(jí)數(shù)變化，隨電離級(jí)數(shù)變化IR，巴比妥類(lèi)結(jié)構(gòu)，巴比妥類(lèi)

3、結(jié)構(gòu)1. 環(huán)狀母核部分環(huán)狀母核部分 （決定巴比妥類(lèi)藥物的特性）：（決定巴比妥類(lèi)藥物的特性）：丙二酰脲（丙二酰脲（1, 3-二酰亞胺基團(tuán)）二酰亞胺基團(tuán)）堿性條件水解堿性條件水解2. 取代基部分取代基部分 （區(qū)別各種巴比妥類(lèi)藥物）：（區(qū)別各種巴比妥類(lèi)藥物）：苯環(huán)、不飽和鍵苯環(huán)、不飽和鍵(烯丙基烯丙基)、硫元素、硫元素硫元素反應(yīng)硫元素反應(yīng)碘、溴、碘、溴、高錳酸鉀反應(yīng)高錳酸鉀反應(yīng)硝化、硫酸硝化、硫酸-亞硝酸鈉、亞硝酸鈉、甲醛甲醛-硫酸反應(yīng)硫酸反應(yīng)5-4(一一) 性狀性狀白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉未，具有固定的熔點(diǎn)。白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉未，具有固定的熔點(diǎn)。空氣中穩(wěn)定，加熱多升華?？諝庵蟹€(wěn)定，加熱多升華。1.游離巴

4、比妥類(lèi)藥物微溶或極微溶于水，易溶于乙醇及有機(jī)游離巴比妥類(lèi)藥物微溶或極微溶于水，易溶于乙醇及有機(jī)溶劑；其鈉鹽則易溶于水，而不溶于有機(jī)溶劑。溶劑；其鈉鹽則易溶于水，而不溶于有機(jī)溶劑。二、性質(zhì)與鑒別二、性質(zhì)與鑒別Properties and Identification示例示例10-8 ChP中苯巴比妥鈉的熔點(diǎn)鑒別法：取本品約0.5g，加水5ml溶解后，加稍過(guò)量的稀鹽酸，即析出白色結(jié)晶性沉淀，濾過(guò)，沉淀用水洗凈，在105干燥后，熔點(diǎn)應(yīng)為174178。 特征熔點(diǎn)行為特征熔點(diǎn)行為(P271.)鑒別、純度 測(cè)定藥物本身、鈉鹽酸化析出產(chǎn)物、衍生物的熔點(diǎn) 方法：鈉鹽 + 酸 游離巴比妥類(lèi)藥物 過(guò)濾、 洗滌、干

5、燥 測(cè)熔點(diǎn)5-41. 弱酸性弱酸性2. 水解反應(yīng)（在堿性條件下水解，放出水解反應(yīng)（在堿性條件下水解，放出NH3）3. 絡(luò)合反應(yīng)（與重金屬離子絡(luò)合反應(yīng)（與重金屬離子Co, Cu, Ag, Hg反應(yīng)）反應(yīng)）4. 香草醛反應(yīng)（香草醛反應(yīng)（Vanillin反應(yīng)）反應(yīng)）5. 特殊取代基反應(yīng)（苯環(huán)，不飽和取代基，特殊取代基反應(yīng)（苯環(huán)，不飽和取代基，S）（6. 鈉鹽反應(yīng)）鈉鹽反應(yīng)）(二二) 化學(xué)性質(zhì)化學(xué)性質(zhì) 1. 弱酸性弱酸性 1, 3-二酰亞胺基團(tuán)，烯醇互變，水溶液中發(fā)生二級(jí)電離。二酰亞胺基團(tuán)，烯醇互變，水溶液中發(fā)生二級(jí)電離。 藥物具有弱酸性，可與強(qiáng)堿反應(yīng)生成水溶性的藥物具有弱酸性，可與強(qiáng)堿反應(yīng)生成水溶性

6、的(鈉鈉)鹽。鹽。 成鹽后，水溶液呈堿性，加酸后析出結(jié)晶。成鹽后，水溶液呈堿性，加酸后析出結(jié)晶。2. 水解反應(yīng)水解反應(yīng) 酰亞胺結(jié)構(gòu)，堿性條件共沸，釋放氨氣，使紅色石蕊試紙變藍(lán)。酰亞胺結(jié)構(gòu)，堿性條件共沸，釋放氨氣，使紅色石蕊試紙變藍(lán)。 本類(lèi)藥物的鈉鹽，在吸濕情況下也能發(fā)生水解。本類(lèi)藥物的鈉鹽，在吸濕情況下也能發(fā)生水解。pH 11以上以上隨堿度的增加水解速度加快。隨堿度的增加水解速度加快。P266. 示例10-1 JP15巴比妥的鑒別：取巴比妥0.2g，加氫氧化鈉試液10ml，加熱煮沸，則產(chǎn)生具氨臭的氣體，可使紅色石蕊試紙變藍(lán)。3. 絡(luò)合反應(yīng)（與重金屬離子絡(luò)合反應(yīng)（與重金屬離子Ag, Cu, Co

7、, Hg反應(yīng)）反應(yīng)）(1) 與銀鹽的反應(yīng)與銀鹽的反應(yīng)(2) 與銅鹽的反應(yīng)與銅鹽的反應(yīng)(3) 與鈷鹽的反應(yīng)與鈷鹽的反應(yīng)(4) 與汞鹽反應(yīng)與汞鹽反應(yīng) C O C C O N H R 1 R 2 N C O N a A g N O 3 A g N O 3 C O C C O R 1 R 2 N N C A g O N a C O C C O R 1 R 2 N N C A g A g O Soluble mono-silver salt Insoluble di-silver salt （5,5-取代）取代）l 銀鹽反應(yīng)：銀鹽反應(yīng)：鑒別取供試品約0.1g，加碳酸鈉試液1ml與水10ml，振搖2分鐘，

8、濾過(guò)，濾液中逐滴加入硝酸銀試液，即生成白色沉淀，振搖，沉淀即溶解；繼續(xù)滴加過(guò)量的硝酸銀試液，沉淀不再溶解。 NCCOCONNHCOR1R2CCOCONNHCOR1R2CuNSSPurpleCuSO-PyridineBarbital 4紫色或紫色沉淀綠色（含硫巴比妥）5, 5-取代基親脂性，紫色易進(jìn)入氯仿l 銅鹽反應(yīng)銅鹽反應(yīng)鑒別取供試品50mg，加吡啶溶液(110)5ml，溶解后加銅吡啶試液1ml，即顯紫色或生成紫色沉淀。purple base organicCo Barbital 2CCONHCONCOR1R2CCONHCONCOR1R2CoH2NCH(CH3)2H2NCH(CH3)2l 汞鹽

9、反應(yīng)汞鹽反應(yīng)TSNHinsoluble OH2233eprecipitatwhiteHgClor )Hg(NOBarbitall 鈷鹽反應(yīng)鈷鹽反應(yīng)NNOOOR1R2OOOCH 3H 3COHHHNNOOOR1R2OOOCH 3H 3COCH 3n +棕紅色紫色變藍(lán)色加乙醇香草醛+濃硫酸活潑氫OHCHOOCH 3NHHNOOOR1R2H2SO4- H2ONNOOOR1R2OOOCH 33 HCO+ 25. 特殊取代基反應(yīng)特殊取代基反應(yīng)（苯環(huán)，不飽和取代基，（苯環(huán)，不飽和取代基，S） 硝化反應(yīng)硝化反應(yīng)苯巴比妥與KNO3H2SO4反應(yīng)生成黃色 與與NaNO2H2SO4反應(yīng)反應(yīng)苯巴比妥與NaNO2H2

10、SO4反應(yīng)生成橙黃色橙紅色 與甲醛與甲醛H2SO4反應(yīng)反應(yīng)苯巴比妥與甲醛H2SO4反應(yīng)生成玫瑰紅色環(huán)(1) 芳環(huán)取代基的反應(yīng)(2) 不飽和鍵反應(yīng) 與溴試液或碘試液的反應(yīng)與溴試液或碘試液的反應(yīng) 司可巴比妥可使溴試液或碘試液褪色 與與KMnO4的反應(yīng)的反應(yīng) 可還原紫色的KMnO4為棕色的MnO2（3） 硫元素的反應(yīng) （黑色）白色硫噴妥鈉 PbS PbNaOH2示例示例10-4 ChP中注射用硫噴妥鈉的鑒別：取本品約0.2g，加氫氧化鈉試液5ml與醋酸鉛試液2ml，生成白色沉淀；加熱后，沉淀變?yōu)楹谏?1. UV（紫外）光譜特征（紫外）光譜特征2. IR（紅外）光譜特征（紅外）光譜特征3. TLC（

11、薄層色譜）特征（比移值一致）（薄層色譜）特征（比移值一致）4. 顯微結(jié)晶顯微結(jié)晶(三三) 譜學(xué)性質(zhì)譜學(xué)性質(zhì) A.H2SO4液(0.05mol/L,未電離)緩沖液(一級(jí)電離)C.pH13NaOH液(1mol/L,二級(jí)電離)(nm)2902702502300.51.01.5A3202802402000.80.50.2(nm)AABC2382873041.巴比妥類(lèi)藥物紫外吸收光譜特征巴比妥類(lèi)藥物紫外吸收光譜特征2. 巴比妥類(lèi)藥物薄層色譜行為巴比妥類(lèi)藥物薄層色譜行為示例示例10-3 BP2010中苯巴比妥的TLC鑒別：取苯巴比妥供試品和對(duì)照品各適量，分別加乙醇制成每1ml中約含1mg的溶液作為供試品和

12、對(duì)照品溶液，各量取10l，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以三氯甲烷-乙醇-濃氨水(80155)混合液的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)后，晾干，立即于254nm紫外光下檢測(cè)。供試品溶液的主斑點(diǎn)位置和大小與對(duì)照品溶液的均一致。3.巴比妥類(lèi)藥物紅外吸收光譜特征巴比妥類(lèi)藥物紅外吸收光譜特征5,5-二乙基巴比妥鈉二乙基巴比妥鈉5-44. 顯微結(jié)晶顯微結(jié)晶A. 巴比妥結(jié)晶； B. 苯巴比妥結(jié)晶苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查 苯巴比妥的合成工藝：苯巴比妥的合成工藝：C2H5OH,H2SO4水解酯化CH2CONH2，CH2COOC2H5C2H5ONaOCOC2H5OC2H5CCONaOC2H5CO

13、OC2H5HCl酸化 ， 消除CHCOOC2H5COOC2H5CHCOOC2H5COOC2H5C2H5Br乙基化CCOOC2H5COOC2H5C2H5CH3ONa環(huán)合CH2NH2NOCCONaC2H5CONHCONCCOC2H5CONHCONH酸析HCl 主要特殊雜質(zhì)：主要特殊雜質(zhì)： 中間體中間體 I、II、III 及反應(yīng)副產(chǎn)物苯基及反應(yīng)副產(chǎn)物苯基丙二酰脲丙二酰脲CHCOOC2H5COOC2H5COHHNHHNCHCOHNCOHNO酸度：酸度： （檢查副產(chǎn)物苯基丙二酰脲）（檢查副產(chǎn)物苯基丙二酰脲） 副副產(chǎn)物產(chǎn)物5-H 活性強(qiáng)，酸性強(qiáng)活性強(qiáng)，酸性強(qiáng) 示例示例10-9 取本品0.20g，加水10m

14、l，煮沸攪拌1min，放冷，濾過(guò)，取濾液5ml，加甲基橙指示液1滴，不得顯紅色溶液澄清度：溶液澄清度：示例示例10-9 取本品1.0g，加乙醇5ml，加熱回流3min，溶液應(yīng)澄清（檢查中間體（檢查中間體II和和III等乙醇中不溶物）等乙醇中不溶物）中性或堿性雜質(zhì)中性或堿性雜質(zhì) 利用雜質(zhì)與苯巴比妥在堿性下溶解性差異利用雜質(zhì)與苯巴比妥在堿性下溶解性差異（檢查中間體（檢查中間體 I及其副產(chǎn)物以及降解產(chǎn)物等）及其副產(chǎn)物以及降解產(chǎn)物等）示例示例10-11ChP中苯巴比妥的中性或堿性物質(zhì)檢查法：取本品1.0g，置分液漏斗中，加氫氧化鈉試液10ml溶解后，加水5ml與乙醚25ml，振搖1分鐘，分取醚層，用水

15、振搖洗滌3次，每次5ml，取醚液經(jīng)干燥濾紙濾過(guò)，濾液置105恒重的蒸發(fā)皿中，蒸干，在105干燥1小時(shí)，遺留殘?jiān)坏贸^(guò)3mg。 有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)HPLC法法5-6四、含量測(cè)定四、含量測(cè)定 Assay銀量法銀量法溴量法溴量法酸堿滴定法（醇酸堿滴定法（醇-水中、膠束中、非水）水中、膠束中、非水）紫外分光光度法紫外分光光度法 （直接（直接UV、提取后、提取后UV、差示、差示UV）HPLC法法1、銀量法、銀量法與重金屬離子絡(luò)合反應(yīng)與重金屬離子絡(luò)合反應(yīng) 基于巴比妥類(lèi)藥物在合適的堿性溶液中基于巴比妥類(lèi)藥物在合適的堿性溶液中，可與銀離子定量成鹽。，可與銀離子定量成鹽。示例示例10-14ChP中異戊巴比妥的銀

16、量測(cè)定法：中異戊巴比妥的銀量測(cè)定法：取本品約0.2g，精密稱(chēng)定，加甲醇40ml使溶解，再加新鮮配制的3%無(wú)水碳酸鈉溶液15ml，照電位滴定法，用硝酸銀滴定液(0.1mol/L)滴定，即得。每1ml硝酸銀滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于22.63mg的C11H18N2O3。 溶劑：甲醇、溶劑：甲醇、3無(wú)水碳酸鈉無(wú)水碳酸鈉電位法判斷終點(diǎn)電位法判斷終點(diǎn) 含量含量TVf /w 100%2、溴量法、溴量法司可巴比妥（不飽和取代基）司可巴比妥（不飽和取代基） 凡在凡在5位取代基含有不飽和鍵的巴比妥類(lèi)藥物，位取代基含有不飽和鍵的巴比妥類(lèi)藥物，其不飽和鍵能與溴定量地發(fā)生加成反應(yīng)，故可采用溴其不飽和鍵能與溴定量

17、地發(fā)生加成反應(yīng)，故可采用溴量法測(cè)定其含量。量法測(cè)定其含量。*指示劑：淀粉指示劑指示劑：淀粉指示劑 5-7示例示例10-15ChP中司可巴比妥鈉的溴量測(cè)定法：取本品約0.1g，精密稱(chēng)定，置250ml碘瓶中，加水10ml，振搖使溶解，精密加入溴滴定液(0.05mol/L)25ml，再加鹽酸5ml，立即密塞并振搖1分鐘，在暗處?kù)o置15分鐘后，注意微開(kāi)瓶塞，加入碘化鉀試液10ml，立即密塞，搖勻后，用硫代硫酸鈉滴定液(0.1mol/L)滴定，至近終點(diǎn)時(shí)，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正，即得。每1ml溴滴定液(0.05mol/L)相當(dāng)于13.01mg C12H17N2NaO3。3、酸堿滴定法、酸堿滴定法 非水酸量法非水酸量法弱酸性弱酸性巴比妥類(lèi)藥物在非水溶劑中酸性增強(qiáng)，用堿性標(biāo)準(zhǔn)液滴巴比妥類(lèi)藥物在非水溶劑中酸性增強(qiáng)，用堿性標(biāo)準(zhǔn)液滴定，終點(diǎn)明顯定，終點(diǎn)明顯常用溶劑：二甲基甲酰胺常用溶劑：二甲基甲酰胺非水酸量法非水酸量法-弱酸性弱酸性 巴比妥類(lèi)藥物在非水