PCR基因擴增實驗室的要求

1、PCR基因擴增實驗室的要求1.目的：規(guī)定在各區(qū)內(nèi)所進行的工作及其操作。2.適用范圍：所有在本區(qū)內(nèi)進行的工作。3.負責(zé)人：謝秋華操作人：謝秋華胡錦輝何小雪4.程序：實驗室分四區(qū)：試劑貯存區(qū)、準(zhǔn)備區(qū)；標(biāo)本接收、制備區(qū)；擴增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū)。進入各區(qū)嚴格按照單一方向進行，即試劑貯存、準(zhǔn)備區(qū)-標(biāo)本接收、制備區(qū)-擴增區(qū)-產(chǎn)物分析區(qū)。各區(qū)及其設(shè)備、物品必須有明確的標(biāo)記，嚴禁混用。進入PCR實驗室的工作人員（含衛(wèi)生員），都必須遵守實驗室的規(guī)則，尤其嚴格遵守進入PCR實驗室的唯一流向。不可進入PCR擴增后區(qū)打掃衛(wèi)生，再返回擴增前區(qū)工作。防止非本室工作人員串崗，進入本室。尤其不得為找人，而逆向誤入PCR實驗室。總

2、則(1) PCR實驗室工作人員應(yīng)具備醫(yī)學(xué)檢驗、微生物檢驗基本知識，大專以上學(xué)歷，并受過PCR實驗的基礎(chǔ)知識和技能培訓(xùn)。(2) PCR實驗室分試劑準(zhǔn)備，樣本準(zhǔn)備，PCR擴增和產(chǎn)物分析四個室，各室的實驗物品(含加樣器，試管架，吸頭，記錄紙，筆等)，不得混用，須貼上標(biāo)簽予以區(qū)別。(3) 實驗室技術(shù)人員必須嚴格按照PCR實驗室操作程序進行，包括實驗室擦洗。臺面消毒，離心管，吸頭的無菌滅活準(zhǔn)備，儀器使用和廢棄物處理等。(4) 進入實驗室的工作人員必須更換各室不同的工作服(含帽和鞋)，勤換洗工作服，以及遵守實驗室的唯一流向的規(guī)定，嚴禁反向流動。(5) 進入PCR實驗室后區(qū)的物品不許帶進PCR實驗室前區(qū)。每

3、天實驗開始前，必須清潔地面和消毒實驗室前區(qū)。實驗結(jié)束應(yīng)紫外線消毒實驗臺面，產(chǎn)物分析室紫外燈最好徹夜開啟，排風(fēng)扇應(yīng)晝夜工作。每天下班前處理好廢物，應(yīng)關(guān)好水、電、煤氣和門窗。（6）定期校準(zhǔn)和維修PCR儀、酶標(biāo)儀及離心機、水浴箱等儀器設(shè)備。（7）實驗室內(nèi)不得飲食、吸煙。4.1標(biāo)本接收區(qū)（標(biāo)本的接收在檢驗科標(biāo)本接收處進行）對送檢的標(biāo)本實行雙簽制度，并仔細檢查是否符合檢測要求，對有不符合要求的標(biāo)本及時通知相關(guān)科室重新采樣，并作記錄，每份標(biāo)本需給出唯一性編號。本區(qū)所有廢棄物分類裝入垃圾袋，封好，在垃圾筐上套好新的垃圾袋，將垃圾帶出實驗室。4.2試劑貯存、準(zhǔn)備區(qū)實驗人員進入該區(qū)須穿本區(qū)工作服，須戴一次性手套

4、。記錄實驗室干、濕度，記錄冰箱溫度。使用帶有本區(qū)標(biāo)識的記錄本、紙和筆，每項記錄，書寫工整詳細。準(zhǔn)備好的試劑送入下一區(qū)，還原實驗臺面，將本區(qū)所有廢棄物分類裝入垃圾袋，封口，在垃圾筐上套好新的垃圾袋，將本區(qū)垃圾帶出實驗室424本區(qū)工作服留在本區(qū)緩沖間425本區(qū)維持相對正壓狀態(tài)（開啟緩沖區(qū)的排氣扇）。實驗結(jié)束后，清潔實驗臺及地面打開紫外燈消毒大于120分鐘。4.3標(biāo)本制備區(qū)實驗人員進入該區(qū)須在緩沖區(qū)更換專用工作服及拖鞋。實驗中須使用一次性帽子，戴手套，手套在實驗過程中疑有污染應(yīng)立即更換。432將傳入本區(qū)的試劑放入冰箱冷凍室試劑存放專區(qū)暫存。記錄實驗室干、濕度，記錄冰箱溫度。將冰箱內(nèi)二周前的標(biāo)本密封丟

5、入垃圾筐，然后記錄標(biāo)本的保存情況。使用帶有本區(qū)標(biāo)識的記錄本、紙和筆，每項記錄，書寫工整詳細。按試劑盒說明書對標(biāo)本進行處理，將處理好的標(biāo)本在超凈工作臺內(nèi)加樣，記錄標(biāo)本的處理過程。將加樣后的試劑傳送下一區(qū)，還原實驗臺面，關(guān)閉所有儀器，記錄儀器使用時間和運行狀態(tài)437使用過的離心管、吸頭須置于盛有2000mg/L有效氯消毒液的廢液缸中，實驗結(jié)束后方丟入垃圾袋，患者樣品應(yīng)按有生物傳染性危險品對待。將本區(qū)所有廢棄物分類裝入垃圾袋，封口，在垃圾筐上套好新的垃圾袋，將垃圾帶出本區(qū)。將工作服留在本區(qū)緩沖間。本區(qū)應(yīng)避免不必要的走動，同時維持相對正壓狀態(tài)，實驗結(jié)束后，清潔實驗臺及地面打開紫外燈消毒大于120分鐘。

6、4.4擴增區(qū)實驗人員進入該區(qū)須在緩沖區(qū)更換本區(qū)專用工作服及拖鞋。記錄實驗室干、濕度，記錄冰箱溫度。使用帶有本區(qū)標(biāo)識的記錄本、紙和筆，每項記錄，書寫工整詳細。將傳入本區(qū)加樣后的試劑上機擴增。擴增完成后，記錄檢測結(jié)果，及時發(fā)放報告單，記錄儀器使用時間和運行狀態(tài)。將本區(qū)所有廢棄物分類裝入垃圾袋，封口，在垃圾筐上套好新的垃圾袋，然后將垃圾帶出實驗室。將本區(qū)工作服留在本室再離開實驗室嚴禁本區(qū)物品帶至其他區(qū)，本區(qū)應(yīng)避免不必要的走動，同時維持相對正壓狀態(tài)，實驗結(jié)束后，清潔實驗臺及地面打開紫外燈消毒大于120分鐘。4.5擴增產(chǎn)物分析區(qū)實驗人員進入該區(qū)須在緩沖區(qū)更換本區(qū)專用工作服及拖鞋。記錄實驗室干、濕度。使用帶有本區(qū)標(biāo)識的記錄本、紙和筆，每項記錄，書寫工整詳細。將傳入本區(qū)的擴增產(chǎn)物上機分析。記錄檢測結(jié)果，及時發(fā)放報告單，記錄儀器使用時間和運行狀態(tài)。將本區(qū)所有廢棄物分類裝入垃圾袋，封口，在垃圾筐上套好新的垃圾袋，然后將垃圾帶出實驗室將本區(qū)工作服留在本室再離開實驗室嚴禁本區(qū)物品帶至其他區(qū)，該區(qū)需維持負壓狀態(tài)，