HIV實(shí)驗(yàn)室SOP文件-新版

1、HIV實(shí)驗(yàn)室SO四件-新版3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室 SO 汽件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 0 頁共 70 頁目錄HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置及人員情況3HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室工作治理程序4HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室工作流程圖6HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度7一、實(shí)驗(yàn)室工作制度 7二、崗位責(zé)任制 7三、標(biāo)本治理制度 8四、試劑治理制度 11五、污染區(qū)工作守那么 12六、清潔區(qū)工作守那么 13七、環(huán)境消毒隔離制度 13八、實(shí)驗(yàn)臺消毒舉措 14九、廢棄物處置和實(shí)驗(yàn)室消毒 15十、消毒液的配置及使用舉措 16十一、消防平安制度 16十二、生物平安防護(hù)制度

2、16十三、職業(yè)暴露的防護(hù)及處理舉措 17十四、篩查檢驗(yàn)程序 18十五、檢測結(jié)果的判定方法 25十六、檢測結(jié)果報(bào)告規(guī)程25十七、檢測結(jié)果的判定方法 26十八、檢驗(yàn)結(jié)果的解釋 27十九、檢測數(shù)據(jù)的記錄與保存 28二十、呈陽性反響標(biāo)本的處理程序 28二十一、檢測數(shù)據(jù)季報(bào)方案和程序 29二十二、感染追蹤處理方案 30二十三、保密程序制度 31二十四、質(zhì)量治理制度 323 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室 SO 汽件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 1 頁共 70 頁二十五、室內(nèi)質(zhì)控分析治理制 33二十六、外部質(zhì)控血清的制備和保存 34二十七、儀器的使用維

3、護(hù) 35人類免疫缺陷病毒抗體診斷試劑盒酶聯(lián)免疫法36程序 HIV-抗體初篩試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作酶聯(lián)免疫法37人類免疫缺陷病毒抗體診斷試劑盒酶聯(lián)免疫法38人類免疫缺陷病毒抗體檢測膠體金法39科華酶標(biāo)儀的標(biāo)準(zhǔn)操作程序SOP40科華全自動洗板機(jī)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程40加樣器的維護(hù)保養(yǎng)程序41力口樣槍校準(zhǔn)記錄41生物平安柜的標(biāo)準(zhǔn)操作程序SOP42離心機(jī)操作維護(hù)規(guī)程47室內(nèi)質(zhì)量限制的標(biāo)準(zhǔn)操作程序48室間質(zhì)量評價(jià)的標(biāo)準(zhǔn)操作程序EQA55實(shí)驗(yàn)室意外和事故處理58艾滋病的職業(yè)暴露后預(yù)防60附表 1HIV 抗體篩查報(bào)告61附表 2HIV 抗體復(fù)檢檢測單62附表 3HIV 抗體檢測數(shù)季報(bào)表65附表 4 艾滋病職業(yè)暴露個(gè)案登記表6

4、6附表 5 艾滋病防治工作人員職業(yè)暴露事故匯總表 703 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室 SO 汽件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 2 頁共 70 頁HIV篩查實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置及人員情況為了更好發(fā)揮艾滋病檢測在艾滋病防治工作中的作用,根據(jù)?全國艾滋病檢測技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)?對于艾滋病的檢測要求,我院檢驗(yàn)科設(shè)置了獨(dú)立的 HIHIV V 篩查實(shí)驗(yàn)室.為了使檢測工作能夠正常進(jìn)行,保證 HIVHIV檢測結(jié)果的正確性和準(zhǔn)確性,我們不僅對工作環(huán)境條件和檢測設(shè)施加以整改,而且建立了完整的實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程,以保證 HIVHIV 檢測結(jié)果的準(zhǔn)確有效.HIVHIV 檢測實(shí)

5、驗(yàn)室分為清潔區(qū)、半污染區(qū)和操作區(qū),配備了專用的的生物平安柜、電腦、冰箱、酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、恒溫培養(yǎng)箱、離心機(jī)、高壓消毒鍋等設(shè)備和平安防護(hù)用品等.根據(jù)HIHIV V 檢測實(shí)驗(yàn)室工作的需要,我科配備從事 HIHIV V檢測工作人員4 4 名,其中專職工作治理人員 3 3 名,副高級技術(shù)人員 1 1 名,中級衛(wèi)生技術(shù)職稱人員 3 3名,所有人員從業(yè)年限均在 7 7 年以上.并積極參加省級、市級舉辦的 HIVHIV 檢測技術(shù)培訓(xùn),不斷提升質(zhì)量意識、技術(shù)水平和業(yè)務(wù)水平,保證 HIVHIV 檢測工作的質(zhì)量.HIVHIV 篩查實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人：賈向東人員：孟曉虹呂華郭長城3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV 篩查實(shí)

6、驗(yàn)室 SO 汽件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 3 頁共 70 頁HIV篩查實(shí)驗(yàn)室工作治理程序一、目的對 HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室工作全過程進(jìn)行限制,保證檢驗(yàn)工作符合規(guī)定要求,提供可靠的檢驗(yàn)數(shù)據(jù)和有效的檢驗(yàn)報(bào)告.二、范圍適用于本實(shí)驗(yàn)室開展的各類醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)工作的各個(gè)環(huán)節(jié).三、責(zé)任1、工作人員負(fù)責(zé)門診檢驗(yàn)樣品的采集.2、工作人員負(fù)責(zé)住院檢驗(yàn)樣品的接收.3、負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)組織協(xié)調(diào)完成檢驗(yàn)任務(wù),并負(fù)責(zé)對檢驗(yàn)工作質(zhì)量的監(jiān)督.4、工作人員負(fù)責(zé)執(zhí)行檢驗(yàn)任務(wù),做好檢驗(yàn)記錄,填報(bào)檢驗(yàn)數(shù)據(jù).5、報(bào)告授權(quán)審核人負(fù)責(zé)檢驗(yàn)報(bào)告的簽發(fā)、發(fā)放.6、實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)檢驗(yàn)資料的歸檔保管計(jì)算機(jī)工作.四

7、、工作程序一、檢驗(yàn)工作分類本實(shí)驗(yàn)室的檢驗(yàn)工作,根據(jù)標(biāo)本的來源不同分為采樣檢驗(yàn)和送樣檢驗(yàn),根據(jù)工作性質(zhì)分為常規(guī)標(biāo)本檢驗(yàn)和檢驗(yàn)質(zhì)量抽檢委托復(fù)檢.二、委托復(fù)檢工作需按以下程序執(zhí)行：1、當(dāng)面核對標(biāo)本姓名、性別、年齡及標(biāo)本質(zhì)量等資料；2、按要求進(jìn)行檢驗(yàn)；3、必要時(shí)委托方可全程參與檢驗(yàn)過程；4、其余程序與常規(guī)檢驗(yàn)標(biāo)本相同.三、采樣及樣品治理3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室 SO 汽件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 4 頁共 70 頁采樣執(zhí)行本科程序文件?標(biāo)本采樣治理程序?.樣品接收、分發(fā)和保管處理,執(zhí)行本科程序文件?標(biāo)本治理程序?和?標(biāo)本采樣治理程序?

8、.樣品一旦受理即給予受理編號.四、標(biāo)本檢驗(yàn)檢驗(yàn)執(zhí)行本科程序文件?標(biāo)本檢驗(yàn)治理程序?和?檢驗(yàn)工程標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程?五、檢驗(yàn)依據(jù)1、國家標(biāo)準(zhǔn)方法；2、部頒標(biāo)準(zhǔn)方法和檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)；3、衛(wèi)生技術(shù)部門推薦使用方法；4、有關(guān)科技文獻(xiàn)或雜志上發(fā)表的方法；5、自編規(guī)程的使用執(zhí)行?檢驗(yàn)方法確認(rèn)程序?.六、檢驗(yàn)實(shí)施檢驗(yàn)人員按檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)或作業(yè)指導(dǎo)書的要求按時(shí)完成檢驗(yàn)任務(wù),并按程序文件?記錄檔案治理程序?做好原始記錄.七、檢驗(yàn)報(bào)告的編制、復(fù)核和簽發(fā)按本科程序文件?檢驗(yàn)報(bào)告治理程序?執(zhí)行.八、檢驗(yàn)方法限制檢驗(yàn)必須按?全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程?規(guī)定的方法或標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法進(jìn)行,也可用經(jīng)本科技術(shù)負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)的非標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法進(jìn)行.其他檢驗(yàn)方法不

9、得采用.3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室 SO 汽件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 5 頁共 70 頁HIV篩查實(shí)驗(yàn)室工作流程圖3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室 SO 汽件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 6 頁共 70 頁HIV篩查實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度一、實(shí)驗(yàn)室工作制度1 .實(shí)驗(yàn)室保持清潔整潔,儀器設(shè)備要擺放整潔,說明書手冊要妥善保管,原始記錄不得擅自修改和銷毀.2 .進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前要摘除首飾修剪指甲,以免投手套.3 .嚴(yán)禁在艾滋病實(shí)驗(yàn)室進(jìn)食,飲水,吸煙和化裝.4 .不要將與工作無關(guān)的物品帶入實(shí)

10、驗(yàn)室.5 .進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室要穿隔離衣,戴手套必要時(shí)戴雙層手套和防護(hù)眼鏡.6 .認(rèn)真對待樣品,嚴(yán)格遵守操作規(guī)程.7 .采血時(shí)一定要注意平安,使用一次性注射器,謹(jǐn)慎操作預(yù)防刺傷皮膚以免造成污染.8 .嚴(yán)格執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室工作人員年度采血和備案年度,工作人員從事工作必須進(jìn)行 HIV 抗體和乙肝,丙肝等肝炎病毒標(biāo)記物的檢測,注射乙肝疫苗,每半年至一年進(jìn)行一次抗體檢測,并保存笑血清樣品.二、崗位責(zé)任制1 .崗位責(zé)任制是保證工作質(zhì)量和醫(yī)療平安,提升工作效率的重要環(huán)節(jié).建立崗位責(zé)任制,做到人人分工責(zé)任明確,事事有人負(fù)責(zé),立足本職,團(tuán)結(jié)互助,相互協(xié)調(diào),保證各項(xiàng)任務(wù)的勝利完成.2 .HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室由有實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人

11、員負(fù)責(zé).3 .牢固樹立把質(zhì)量放在第一位的思想,在工作中必須增強(qiáng)檢查和復(fù)查制度,以保證血液質(zhì)量及醫(yī)療平安.4 .交接工作必須認(rèn)真負(fù)責(zé),須核對實(shí)物和記錄,對工作一般情況、 存在問題和注意事項(xiàng)應(yīng)進(jìn)行具體交待,否那么,發(fā)生問題由交班人負(fù)責(zé).3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室 SO 汽件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 7 頁共 70 頁5 .職工臨時(shí)因故離開工作崗位,必須將工作委托給能勝任該項(xiàng)工作的人員,否那么,發(fā)生問題由原擔(dān)任該項(xiàng)工作者負(fù)責(zé).6 .新參加工作的職工,在未熟悉和掌握工作前不能獨(dú)立工作不能頂崗位,在確能掌握經(jīng)考核合格前方可.7 .建立 H

12、IV 篩查實(shí)驗(yàn)室專用的精密儀器和重要設(shè)備專責(zé)崗位制,其他人不得任意使用.嚴(yán)格根據(jù)儀器操作規(guī)程操作,不可擅自亂改設(shè)置.8 .但凡一物多人使用的,除共同負(fù)責(zé)外,應(yīng)指定一人為該崗位責(zé)任制負(fù)責(zé)人,負(fù)責(zé)指導(dǎo)正確操縱,定期平安檢查,經(jīng)常維護(hù)保養(yǎng),保持正常運(yùn)轉(zhuǎn),該負(fù)責(zé)人有權(quán)制止任何違章操作和有害設(shè)備平安的行為.9 .人員責(zé)任分工：每日值班人員負(fù)責(zé)樣品的采集,接收,執(zhí)行檢驗(yàn)任務(wù),做好檢驗(yàn)記錄,填報(bào)檢驗(yàn)數(shù)據(jù),簽發(fā)報(bào)告及實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的日常維護(hù)和保養(yǎng).行政班人員負(fù)責(zé)協(xié)助值班人員做好實(shí)驗(yàn)室的所有日常工作,并負(fù)責(zé)對檢驗(yàn)工作質(zhì)量的監(jiān)督,檢驗(yàn)報(bào)告的復(fù)核、 發(fā)放,結(jié)果的解釋,實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)消毒以及每日醫(yī)療廢棄物的消毒處理.實(shí)驗(yàn)

13、室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)檢驗(yàn)資料的歸檔保管計(jì)算機(jī)工作.三、標(biāo)本治理制度一、樣品的采集和處理艾滋病檢測最常用的樣品是血液,包括血清、血漿和全血.唾液或尿液有時(shí)也可作為測試樣品.常用的血液樣品的采集和處理方法如下：1、血清樣品采集和處理1 、 用一次性注射器 或真空采血管 抽取一定量靜脈血,室溫下自然放置 12h,待血液凝固、血塊收縮后再用 3000r/min 離心 15min,吸出血清備用2 、 如用濾紙片采樣,那么手指或耳垂局部嚴(yán)格按常規(guī)進(jìn)行消毒,在刺破皮膚后,迅速把濾紙片沾上,切勿讓血液滴落在其它物體外表造成污染.采血后要待血樣枯燥后再包裝送檢.2、抗凝血樣品采集和處理3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV

14、 篩查實(shí)驗(yàn)室 SO 汽件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 8 頁共 70 頁(1)、用加有抗凝劑的真空采血管(或一次性注射器抽取靜脈血,轉(zhuǎn)移至加有抗凝劑的試管),反復(fù)輕搖,別離血漿和血細(xì)胞備用.(2)、應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求選用適當(dāng)?shù)目鼓齽?如 CD4+/CD8+T 淋巴細(xì)胞測定可選用K3EDTA 或肝素或枸檬酸鈉,HIV 病毒別離、核酸定性/定量檢測可選用 K3EDTA 或枸檬酸鈉.(3)、用于核酸定性檢測時(shí),采集的抗凝全血應(yīng)在 48h 內(nèi)別離 PBMC 和血漿,否那么應(yīng)在 2448h 內(nèi)別離血漿和血細(xì)胞.3、采集樣品考前須知(1)、采集樣品原那么上應(yīng)按臨床采血

15、技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)操作.(2)、采集樣品時(shí)應(yīng)注意平安,建議采用真空采血管及蝶形針具,以預(yù)防直接接觸血液；直接接觸 HIV 感染者/艾滋病(AIDS)病人血液/體液的操作,應(yīng)戴雙層手套.(3)、所有的血液、血清、未固定的組織和組織液樣品,均應(yīng)視為有潛在傳染性,都應(yīng)以平安的方式進(jìn)行操作.(4)、應(yīng)象操作未知傳染風(fēng)險(xiǎn)樣品一樣,小心存放、拿取和使用所有可能有傳染性的質(zhì)量限制和參考物質(zhì).用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒.(5)、 采血時(shí)一定要注意平安,采血用一次性注射器,謹(jǐn)慎操作,預(yù)防發(fā)生刺傷皮膚和造成外界污染.(6)、離心機(jī)要使用密閉的罐和密封頭,以防液體溢出或在超/高速離心時(shí)形成氣溶膠.(二)樣品的保存1、用于抗體檢測的

16、血清或血漿樣品,應(yīng)存放于-20C 以下,短期(1 周)內(nèi)進(jìn)行檢測的樣品可存放于 2-8C.2、用于抗原和核酸檢測的血漿和血細(xì)胞樣品應(yīng)凍存于-20C 以下,進(jìn)行病毒RNA 檢測的樣品如需保存 3 個(gè)月以上應(yīng)置于-80C03、用于 CD4+/CD8+T 淋巴細(xì)胞測定的樣品不能長期保存,樣品采集時(shí)間超過 48h 那么不可檢測.(三)樣品的運(yùn)送3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室 SO 汽件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 9 頁共 70 頁1、實(shí)驗(yàn)室間傳遞的樣品應(yīng)為血清或血漿,除特殊情況外一般不運(yùn)送全血.2、應(yīng)采用 WHO 提出的三級包裝系統(tǒng)：第一層容

17、器： 裝樣品,要求防滲漏.樣品應(yīng)置于帶蓋的試管內(nèi),試管上應(yīng)有明顯的標(biāo)記,標(biāo)明樣品的編號或受檢者姓名、種類和采集時(shí)間.在試管的周圍應(yīng)墊有緩沖吸水材料,以免碰碎.隨樣品應(yīng)附有送檢單,送檢單應(yīng)與樣品分開放置.第二層容器：要求耐受性好、防滲漏、容納并保護(hù)第一層容器,可以裝假設(shè)干個(gè)第一層容器.將試管裝入專用帶蓋的容器內(nèi),容器的材料要易于消毒處理.第三層容器：放在一個(gè)運(yùn)輸用外層包裝內(nèi),應(yīng)易于消毒.在第三層容器外面要貼標(biāo)簽數(shù)量,收、發(fā)件人.3、血清和血漿樣品應(yīng)在 28c 條件下由專人運(yùn)送.用于 CD4+/CD8+T 淋巴細(xì)胞測定的樣品應(yīng)在室溫下 1823c 運(yùn)送.每一包裝的體積以不超過 50ml 為宜.4、

18、運(yùn)送感染性材料必須有記錄.5、 如別離血漿仍有困難,可直接將抗凝血-20C 以下凍存,采用冰壺冷藏運(yùn)輸,預(yù)防凍融.6、特殊情況下如需對個(gè)別樣品進(jìn)行復(fù)測,可以用特快專遞形式投寄,但必須按三級包裝系統(tǒng)將盛樣品的試管包扎好,預(yù)防使用玻璃容器,以保證不會破碎和溢漏.四.樣本接收和拒收標(biāo)準(zhǔn)1、簽收：實(shí)行雙簽制度,送檢者及實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)收人員均需簽名.2、認(rèn)真查對姓名,性別,年齡,住院號,病區(qū)/床號,檢測目的及工程等.對不符合要求者記入拒收標(biāo)本記錄表中,并及時(shí)通知采樣單位,正確及時(shí)地補(bǔ)采樣本,以免延誤病人的檢測報(bào)告.3、對符合檢測要求的標(biāo)本及時(shí)進(jìn)行唯一性編號詳見標(biāo)本唯一性編號標(biāo)準(zhǔn)操作程序并記入可接收標(biāo)本記錄表中

19、.4、含有感染性樣品的包裹必須在具有處理感染源設(shè)備的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)由經(jīng)過培訓(xùn)、穿戴防護(hù)衣的工作人員翻開,用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒.4.1、核對樣品與送檢單,檢查樣品管有無破損和溢漏.如發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)立即將尚存留的樣品移出,對樣品管和盛器進(jìn)行消毒,同時(shí)報(bào)告科主任等3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室 SO 汽件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 10 頁共 70 頁有關(guān)領(lǐng)導(dǎo)和專家.4.2、檢查樣品的狀況,記錄有無溶血、污染、血脂高及黃疸等情況.如果污染過重認(rèn)為樣品不能接受,那么應(yīng)將樣品平安廢棄.并要將樣品情況立即通知送樣人.4.3、 翻開標(biāo)本容器時(shí)要小心,以防內(nèi)容

20、物潑濺.樣品處理時(shí)假設(shè)內(nèi)容物有可能濺出,那么應(yīng)在生物平安柜中戴手套進(jìn)行.同時(shí)應(yīng)戴口罩、防護(hù)眼睛,以防皮膚或粘膜污染.4.4、 接收樣品時(shí)應(yīng)填寫樣品接收單.五標(biāo)本檢測1、離心機(jī)要使用密閉的罐和密封頭,以防液體溢出或在超/高速離心時(shí)形成氣溶膠.復(fù)核標(biāo)本接收過程中的每一步驟,在檢測過程中,應(yīng)嚴(yán)格根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程.2、在標(biāo)本足夠的情況下,不能浪費(fèi)、隨意丟棄或損壞標(biāo)本.應(yīng)象操作未知傳染風(fēng)險(xiǎn)樣品一樣,小心存放、拿取和使用所有可能有傳染性的質(zhì)量限制和參考物質(zhì).用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒六、標(biāo)本處理檢驗(yàn)標(biāo)本先用含 2-3g/L 有效氯消毒劑浸泡半小時(shí),再用高壓鍋高壓消毒.然后用雙層專用黃色醫(yī)用垃圾袋專人收集所有廢

21、棄醫(yī)用垃圾.送專門存放醫(yī)用垃圾處統(tǒng)一焚化處理.四、試劑治理制度一、采購與審批科主任根據(jù)需要定期擬定采購方案,交由院領(lǐng)導(dǎo)審批,批核后由科主任交與器械科,有器械科與經(jīng)銷聯(lián)系二、驗(yàn)收與登記倉管負(fù)責(zé)人根據(jù)供給商提供的試劑及清單對數(shù)量、品種、品牌、包裝等進(jìn)行驗(yàn)收,并將入庫數(shù)據(jù)登記.三、貯存3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室 SO 汽件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 11 頁共 70 頁冷藏試劑統(tǒng)一存放在 HIV 實(shí)驗(yàn)室專用的冰箱內(nèi),冷箱保管及溫度限制由倉管負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé).HIV 試劑一般應(yīng) 28c 避光保存,在有效期內(nèi)使用.四、出庫治理各室提出試劑中領(lǐng),倉

22、管人填寫出庫單據(jù),認(rèn)領(lǐng)人簽名后出庫.五、其它1、試劑的保存應(yīng)嚴(yán)格根據(jù)要求存放,以保證有效期內(nèi)能有效地使用,杜絕浪費(fèi)現(xiàn)象.2、倉管人應(yīng)對試劑庫存定期檢查,不使用過期變質(zhì)的試劑.3、易燃,易爆試劑應(yīng)分開存放遠(yuǎn)離火源和電源.4、劇毒試劑必須由科主任和負(fù)責(zé)科室保衛(wèi)的同志負(fù)責(zé)保存,放保險(xiǎn)箱內(nèi),使用時(shí)應(yīng)有兩人在場,并做好登記.五：污染區(qū)工作守那么做好污染區(qū)實(shí)驗(yàn)室廢棄物的消毒處理,未經(jīng)實(shí)驗(yàn)室治理人員許可不得進(jìn)入污染區(qū).1 1、但凡被血液、體液污染的物品要先消毒滅菌后清洗.2 2、嚴(yán)格操作程序,做好各種實(shí)驗(yàn)記錄,實(shí)驗(yàn)陽性標(biāo)本保存至 5 5年,經(jīng)過免疫印記確診的陰性標(biāo)本也要保存,不得擅自處理.3 3、禁止用口吸

23、液體,必須使用移液器操作.4 4、操作中有標(biāo)本等外濺時(shí),應(yīng)及時(shí)消毒,對大量濺出的高濃度污染物在清潔前先用 1%1%次氯酸鈉溶液浸泡,然后戴上手套擦洗.5 5、每次實(shí)驗(yàn)后,要對工作臺面消毒,用 0.2%-1%0.2%-1%次氯酸鈉溶液噴灑和浸泡.3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室 SO 汽件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 12 頁共 70 頁6 6、離開實(shí)驗(yàn)室前要脫去手套,隔離衣等防護(hù)物品,放入指定污桶,用肥皂和流水洗手.六：清潔區(qū)工作守那么1 1、實(shí)驗(yàn)室是檢驗(yàn)工作的場所,要保持清潔、安靜、物品擺放要整潔.2 2、清潔的防護(hù)服置于實(shí)驗(yàn)室清潔區(qū)內(nèi)

24、存放處.檢驗(yàn)人員工作時(shí)應(yīng)按要求穿工作服、工作衣、帽、專用鞋等.3 3、禁止將與檢驗(yàn)工作無關(guān)的物品帶入檢驗(yàn)室,禁止在檢驗(yàn)室內(nèi)會客、抽煙、吃東西.4 4、注意平安,下班后、節(jié)假日必須切斷水源、氣源、電源,關(guān)好門窗.5 5、嚴(yán)禁將污染區(qū)的物品帶入清潔區(qū).6 6、妥善保管儀器、設(shè)備的說明書、操作規(guī)程、原始記錄表、零部件、常用工具、電源線、連接線要排列整潔.7 7、檢驗(yàn)室須配置消防設(shè)備,并經(jīng)常檢查待用狀態(tài),任何人不得擅自挪用或挪動.七、環(huán)境消毒隔離制度1、 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)分為清潔區(qū)和操作區(qū),清潔區(qū)要注意保護(hù)不受污染.操作有氣溶膠可能的標(biāo)本應(yīng)配置生物平安柜及其它防護(hù)設(shè)置,如紫外線燈,排氣扇等操作區(qū)的工作臺及地面

25、每日用消毒液擦拭一次,有污染時(shí)隨時(shí)消毒,每周大掃除一次.2、采血室每日操作前用清水擦拭操作臺一次,采血結(jié)束用消毒液擦拭操作臺、桌子和地面一次,紫外線每日照射消毒二次,每月空氣細(xì)菌培養(yǎng)一次,紫外線強(qiáng)度定期測定.3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室 SO 汽件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 13 頁共 70 頁3、各種檢驗(yàn)標(biāo)本的收集,送檢必須用相應(yīng)指定的容器留取,不得外溢污染.4、靜脈及末稍采血,應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行消毒隔離舉措,靜脈抽血做到一人一針一筒一巾一帶一消毒,所用止血帶及紙墊每日消毒,末稍采血一人一片一管,杜絕交叉污染.5、一次性醫(yī)用器具包括采血針

26、,注射器、尿杯、血紅蛋白微量吸血吸管,應(yīng)嚴(yán)格做好領(lǐng)發(fā)登記,注射器先浸泡消毒后由供給室一對一調(diào)換,統(tǒng)一處理,其余一次性器具浸泡消毒后裝入污物袋送燃燒爐燃燒.6、檢驗(yàn)人員在進(jìn)行靜脈抽血時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作技術(shù),操作前必須洗手必須戴好帽子與口罩,操作臺和手被污染時(shí)應(yīng)用肥皂和流水認(rèn)真洗手,必要時(shí)用消毒液浸泡雙手,酒精、碘酒瓶每周更換消毒兩次.7、溢出試管外的血液,應(yīng)立即用碘酒棉簽擦拭干凈,注意預(yù)防玻璃碎片刺傷手,并注意試管有無破裂.8、當(dāng)針頭和碎玻璃刺傷手時(shí),用流水沖洗,擠出血水,應(yīng)立即用碘酒消毒局部.9、實(shí)驗(yàn)室操作時(shí)應(yīng)戴上手套.吸取標(biāo)本,離心振蕩等應(yīng)嚴(yán)格按操作規(guī)程,防止自身和實(shí)驗(yàn)室受污染.10、已檢

27、查標(biāo)本與容器分別浸泡于次氯酸鈉2000mg/L中兩小時(shí)后,標(biāo)本傾棄,一次性容器送燃燒,重復(fù)使用的經(jīng)清洗消毒和滅菌后再使用,均要有記錄.有毒化學(xué)試劑和放射性試劑使用后要經(jīng)無害化處理,預(yù)防污染環(huán)境.11、非科室工作人員不準(zhǔn)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,外來人員參觀需經(jīng)科主任同意方可進(jìn)入.八、實(shí)驗(yàn)臺消毒舉措1、實(shí)驗(yàn)臺消毒舉措必須符合艾滋病實(shí)驗(yàn)室的通用生物平安要求.由專人按特定程序和方法進(jìn)行清潔和消毒.2、臺面的清潔消毒,保持清潔、濕式清掃.每天開始工作前用濕布抹擦 1次,地面用濕拖把擦 1 次,禁用干抹干掃.抹布和拖把等清潔用具實(shí)驗(yàn)室專用,不得混用,用后洗凈晾干,下班前用含氯消毒劑次氯酸鈉,含有效氯 2000mg/L

28、、0.20.5%過氧乙酸或 75%乙醇抹擦 1 次.也可用便捷式高強(qiáng)度紫外線消毒器近距離照射消毒.3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室 SO 汽件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 14 頁共 70 頁3、應(yīng)象操作未知傳染風(fēng)險(xiǎn)樣品一樣進(jìn)行消毒與滅菌,小心存放、拿取和使用所有可能有傳染性的血液、質(zhì)量限制和參考物質(zhì),假設(shè)被上述物品明顯污染,如具傳染性的標(biāo)本或培養(yǎng)物外溢,濺潑或器皿打破,灑落于臺面,應(yīng)立即用消毒液消毒,用 5000mg/L 有效氯消毒劑、 過氧乙酸或乙醇灑于污染的臺面,并使消毒液浸過污染外表,保持 3060min 后再擦,拖把用后浸于上述

29、消毒液內(nèi) 1h 以上.4、各類在實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)臺上操作后的廢棄物品均應(yīng)視作物染物分類處理,所有廢棄物應(yīng)視為 HIV 污染物品,根據(jù)?傳染病防治法?處理.九、廢棄物處置和實(shí)驗(yàn)室消毒1、廢棄物處置廢棄物處置應(yīng)符合?實(shí)驗(yàn)室生物平安通用要求?GB19489-2004和?消毒技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)2002 年版0從艾滋病實(shí)驗(yàn)室出來的所有廢棄物,包括不再需要的樣品、培養(yǎng)物和其它物品,均應(yīng)視為感染性廢棄物,應(yīng)置于專用的密封防漏容器中,平安運(yùn)至消毒室,并在高壓消毒后再進(jìn)行處理或廢棄.2、HIV 常用的物理消毒方法壓力蒸汽消毒,121C,保持 1520min;枯燥空氣烘箱消毒干烤消毒,140C,保持 23h.3、HIV 常用的化

30、學(xué)消毒方法HIV 最常用的化學(xué)消毒劑是含氯消毒劑次氯酸鈉,含有效氯 20005000mg/L、75%乙醇和 2%戊二醛,保持 1030min.4、廢棄物缸：5000mg/L 次氯酸鈉.5、生物平安柜工作臺面和儀器外表：75%乙醇.6、溢出物：5000mg/L 次氯酸鈉.7、污染的臺面和器具：2000mg/L 次氯酸鈉,也可以用過氧化氫或過氧乙酸.器械可用 2%戊二醛浸泡消毒.十、消毒液的配制及使用舉措1、HIV 實(shí)驗(yàn)室最常用的化學(xué)消毒劑是含氯消毒劑次氯酸鈉,含有效氯2000-5000mg/L、75%乙醇和 2%戊二醛,保持 1030min.3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室 SO

31、汽件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 15 頁共 70 頁2、含氯消毒劑的配制：次氯酸鈉原液使用前進(jìn)行 1:201:50 稀釋(2000-5000mg/L)或聯(lián)昌84使用前進(jìn)行1:101:25(2000-5000mg/L)稀釋后,用于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的消毒.3、乙醇,俗稱酒精,能夠殺滅多種細(xì)菌,對 HIV 病毒有一定的殺滅作用,7075%的效果最好.因此,使用前新鮮配置足量 7075%的乙醇,用于生物安全柜、工作臺面和儀器外表的消毒,可以到達(dá)最正確的消毒效果.4、過氧乙酸也是目前使用比擬廣泛的一種高效消毒劑,新鮮配置 13%的過氧乙酸熏蒸,用于地面、墻壁、實(shí)驗(yàn)器材

32、及實(shí)驗(yàn)室內(nèi)資料、文件、書本等物品的消毒.0.04%的過氧乙酸用于實(shí)驗(yàn)室工作人員手浸泡 120 分鐘,再用肥皂洗手.5、2%戊二醛用于可浸泡物品的消毒,醫(yī)療器械等.6、 HIV 實(shí)驗(yàn)室常用化學(xué)消毒劑的配置,本著多用多配,少用少配,現(xiàn)用現(xiàn)配的原那么,保證消毒劑使用時(shí)的濃度,保證消毒效果.十一、消防平安制度1、根據(jù)誰主管、誰負(fù)責(zé)的原那么,實(shí)行科室負(fù)責(zé)制.2、主管領(lǐng)導(dǎo)和保衛(wèi)科對全體職工經(jīng)常進(jìn)行消防平安教育,提升思想熟悉,掌握消防知識和消防器材的使用.3、嚴(yán)格執(zhí)行?平安防火治理制度?各種火種與易燃易爆物品,必須嚴(yán)格分區(qū),保持一定的平安距離.實(shí)驗(yàn)室實(shí)施單向流向制度,通道不得亂堆放易燃爆物品和雜物.4、嚴(yán)禁

33、在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)吸煙.5、電器的安裝與撤除,必須由電工進(jìn)行,嚴(yán)禁亂接電源,亂后電線.6、各種機(jī)電設(shè)備、高溫電器設(shè)備、耐高壓容器和設(shè)施,使用時(shí)必須有專人負(fù)責(zé),隨時(shí)檢查,消除隱患,嚴(yán)防事故發(fā)生.7、各防火區(qū)域設(shè)置的消防器材和設(shè)備,應(yīng)定期進(jìn)行檢查,維修和更換,隨時(shí)處于完好狀態(tài),并不得隨便挪動.8、任何人發(fā)現(xiàn)火、水災(zāi)等隱患者,必須及時(shí)向科領(lǐng)導(dǎo)報(bào)告.科主任及時(shí)向院領(lǐng)導(dǎo)報(bào)告,及時(shí)做好善事處理工作.3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室 SO 汽件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 16 頁共 70 頁十二、生物平安防護(hù)制度1、上崗工作人員應(yīng)是經(jīng)過崗前平安與技術(shù)培訓(xùn),取

34、得合格證,具有獨(dú)立工作水平的人員.2、進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室應(yīng)穿隔離衣、戴手套,必要時(shí)如對篩查陽性標(biāo)本進(jìn)行復(fù)測或檢測高危標(biāo)本要戴防護(hù)眼鏡,預(yù)防污染暴露的皮膚和衣物.3、嚴(yán)格根據(jù)操作規(guī)程操作.操作過程中,不得用戴手套的手觸摸暴露的皮膚、口唇、眼睛、耳朵和頭發(fā)等.4、操作時(shí)可能發(fā)生的觸電、失火、玻璃割傷、針頭刺傷、燒傷、不慎中毒、傳染性標(biāo)本的污染,有應(yīng)急處理的方法,有關(guān)工作人員均應(yīng)熟悉.5、操作中手套破損,應(yīng)立即丟棄,洗手后戴上新手套繼續(xù)操作,不慎發(fā)生瀉漏,應(yīng)立即根據(jù)?發(fā)生職業(yè)暴露后的處理舉措?,進(jìn)行處理.6、預(yù)防腐蝕、灼傷、中毒、火災(zāi)和爆炸等事件發(fā)生.7、實(shí)驗(yàn)操作完畢后,應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)室清理與消毒程序,進(jìn)行善后

35、處理.同時(shí)記錄相關(guān)資料與數(shù)據(jù)并存檔.8、工作結(jié)束后,應(yīng)先洗戴手套的手,然后脫去手套丟棄,再脫去工作衣,用肥皂和流動水洗手后離開實(shí)驗(yàn)室.9、注意平安,隨手關(guān)門,做好水,電,門的平安保衛(wèi)工作,防火防盜防水.十三、職業(yè)暴露的防護(hù)及處理舉措HIV 檢測實(shí)驗(yàn)室職業(yè)暴露是指檢驗(yàn)工作人員在從事檢測工作過程中意外被艾滋病病毒感染者或者艾滋病病人的血液、 體液污染了皮膚或者粘膜,或者被含有艾滋病病毒的血液、體液污染了的針頭及其他利器刺破皮膚,有可能被艾滋病病毒感染的情況.一、防護(hù)舉措：1 .醫(yī)務(wù)人員進(jìn)行有可能接觸病人血液、 體液的診療和護(hù)理操作時(shí)必須戴手套,操作完畢,脫去手套后立即洗手,必要時(shí)進(jìn)行手消毒.2 .

36、在診療、護(hù)理操作過程中,有可能發(fā)生血液、體液飛濺到醫(yī)務(wù)人員的面部時(shí),醫(yī)務(wù)人員應(yīng)當(dāng)戴手套、具有防滲透性能的口罩、防護(hù)眼鏡；有可能發(fā)生血液、體3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室 SO 汽件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 17 頁共 70 頁液大面積飛濺或者有可能污染醫(yī)務(wù)人員的身體時(shí),還應(yīng)當(dāng)穿戴具有防滲透性能的隔離衣或者圍裙.3 .醫(yī)務(wù)人員手部皮膚發(fā)生破損,在進(jìn)行有可能接觸病人血液、體液的診療和護(hù)理操作時(shí)必須戴雙層手套.4 .醫(yī)務(wù)人員在進(jìn)行侵襲性診療,護(hù)理操作過程中,要保證充足的光線,并特別注意預(yù)防被針頭、縫合針、刀片等銳器刺傷或者劃傷.5 .使用

37、后的銳器應(yīng)當(dāng)直接放入耐刺、防滲漏的利器盒,也可使用具有平安性能的注射器、輸液器等醫(yī)用銳器,以防刺傷.6 .禁止將使用后的一次性針頭重新套上針頭套.禁止用手直接接觸使用后的針頭、刀片等銳器.二、處理舉措：1 .用肥皂液和流動水清洗污染的皮膚,用生理鹽水沖洗粘膜.2 .如有傷口,應(yīng)當(dāng)在傷口旁端輕輕擠壓,盡可能擠出損傷處的血液,再用肥皂液和流動水進(jìn)行沖洗,禁止進(jìn)行傷口的局部擠壓.3 .受傷部位的傷口沖洗后,應(yīng)當(dāng)用消毒液,如 75%的酒精或者 0.5%的碘伏等進(jìn)行消毒,并包扎傷口；被暴露的粘膜,應(yīng)當(dāng)反復(fù)用生理鹽水沖洗干凈.4 .在暴露后的 0 周、第四周、第八周、第十二周及六個(gè)月時(shí)抽血進(jìn)行檢測艾滋病病

38、毒抗體.5 .預(yù)防性用藥應(yīng)當(dāng)在發(fā)生艾滋病病毒職業(yè)暴露后盡早開始,最好在四小時(shí)內(nèi)實(shí)施,最遲不得超過二十四小時(shí)；即使超過 24 小時(shí),也應(yīng)當(dāng)實(shí)施預(yù)防性用藥,連續(xù)使用 28 天.6 .發(fā)生艾滋病病毒職業(yè)暴露后立即通知院感科備案、評估.十四、篩查檢驗(yàn)程序1、篩查試劑必須是經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督治理局注冊批準(zhǔn)、批批檢合格、在有效期內(nèi)的試劑.推薦使用經(jīng)臨床質(zhì)量評估敏感性和特異性高的試劑.2、篩查方法一,膠體金法3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室 SO 汽件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 18 頁共 70 頁樣品的采集和保存1 .采集靜脈的血清、血漿樣本必須在

39、無菌條件下,并預(yù)防樣品溶血.2 .如果血清和血漿樣品收集后 7 天內(nèi)檢測,樣品須放在 2-8C 保存,如果大于 7 天那么須冷凍保存.操作步驟在使用此測試卡前必須仔細(xì)閱讀試劑的說明書,需嚴(yán)格根據(jù)試劑說明書執(zhí)行有關(guān)操作,否那么無法保證可靠的結(jié)果.1 .將待測標(biāo)本從儲存條件下取出,平衡至室溫并編號.2 .將所需數(shù)量的測試卡從包裝盒中取出平衡至室溫,翻開鋁箔包裝袋,平置于臺面上.3 .用微量加樣器取 50 口樣本血清,加到測試卡的加樣處.4 .加樣后,陽性標(biāo)本可在 130 分鐘內(nèi)檢出.經(jīng)過試驗(yàn)確證,反響時(shí)間 從加樣后計(jì)算起超過 30 分鐘將對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的觀察造成影響,因此,建議 30 分鐘再最終觀察并

40、記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果.結(jié)果判斷陽性:測試卡在檢測區(qū)和對照區(qū)位置出現(xiàn)兩條紫紅色條帶.如果檢測區(qū)的紫紅色條帶隱約可見,建議對該樣本重復(fù)試驗(yàn),并使用其他方法確認(rèn).陰性:測試卡只在對照區(qū)位置出現(xiàn)一條紫紅色條帶.失效:對照區(qū)未出現(xiàn)紫紅色條帶,說明不正確的操作過程或試劑盒已變質(zhì)損壞或者是樣本中抗體的含量過高.在此情況下,應(yīng)再次仔細(xì)閱讀說明書,并將待測樣本稀釋后用新的測試卡重新測試.注意:測試區(qū)T內(nèi)的紫紅色條帶可呈現(xiàn)顏色深淺的現(xiàn)象.但是,在規(guī)定的觀察時(shí)間內(nèi),不管該色帶顏色深淺,即使只有非常弱的色帶也應(yīng)判定為陽性結(jié)果.二,酶聯(lián)免疫法1 珠海麗珠原理及用途：本品系用純化基因工程人類免疫缺陷病毒 I 型和 H 型填HIV

41、-1/HIV-2 璘抗原合成肽或基因重組蛋白,包被的微孔板和酶標(biāo)記的HIV-1/HIV-2 抗原及其他試劑組成.應(yīng)用雙抗原夾心法原理檢測人血清或血漿中3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室 SO 汽件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 19 頁共 70 頁的 HIV-1/HIV-2 抗體.試劑盒成分 HIV 抗原包被板 12 孔 X8,HIV 酶標(biāo)記物 7m1X1 瓶,陰性對照 1mlX1 瓶,陽性對照 1mlX1 瓶,20 倍濃縮洗液 50mlX1 瓶,底物緩沖液 7mlX1 瓶,底物液 7mlX1 瓶,終止液 7mlX1 瓶,封口袋 1 個(gè),說明

42、書 1 份操作方法將試劑盒平衡至室溫,取出所需的條板,剩余的即時(shí)封存.用去離子水和蒸儲水20倍稀釋濃縮洗滌液.將所需數(shù)量的條板固定于支架按順序編號設(shè)置樣品孔、外部對照孔、陽性對照孔和陰性對照孔況每次實(shí)驗(yàn)需設(shè)外部對照 1 孔陽性對照 2 孔陰性對照 3 孔.在樣品孔中參加 50ul 待測樣品,陰性、 陽性對照及外部對照每孔參加 50ul,輕拍混勻.置 37c 溫育 60 分鐘.將孔內(nèi)液體甩干,置洗板機(jī)用洗滌液充分洗滌 5 遍,扣干.每孔參加 50ul酶標(biāo)記物,輕拍混勻,置 37c 溫育 30 分鐘.重復(fù)步驟.每孔參加 50ul 底物緩沖液和50ul 底物液,輕拍混勻,置 37c 避光溫育 30

43、分鐘.每孔參加 50ul 終止液終止顯色反響,用酶標(biāo)儀雙波長 450nm/630nm 測定各孔 A 值.結(jié)果判定臨界值況 Cutoff=0.15 十陰性對照的平均 A值 陰性對照的平均A值小于 0.08按 0.08計(jì)算,大于0.08按實(shí)際值計(jì)算 ,樣品的 A 值Cutoff 值為 HIV 抗體陽性；樣品的 ACutoff 值為 HIV 抗體陰性.2 北京萬泰試劑廠家：北京萬泰生物工程公司試劑類型：雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法儀器：a.洗板機(jī) b.酶標(biāo)儀 c.恒溫箱標(biāo)本的采集與要求1 病人的準(zhǔn)備：無特殊要求.2 標(biāo)本的類型：無溶血的血清或血漿.3 標(biāo)本準(zhǔn)備： 取無菌試管采集全血 2ml,待血液凝固后離心

44、別離血清,標(biāo)本應(yīng)無溶血現(xiàn)象.標(biāo)本采集后應(yīng)及時(shí)測定,如不能及時(shí)測定,將別離后的血泊樣本放置于 46c冰箱保存不超過 4 天,-20C 以下保存可延長一個(gè)月,-80C 一下可長期保存.不合要求的樣本按樣本拒收制度執(zhí)行.操作步驟1、配液：將 50ml 濃縮洗滌液用蒸儲水或去離子水 20 倍稀釋至 1000ml 備用.2、編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板設(shè)陰性對照 3 孔、陽性對照 I型 2 孔,外部對照 1 孔.3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室 SO 汽件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 20 頁共 70 頁3、加樣：分別在相應(yīng)孔中參加待檢中品、

45、陰陽對照、外部對照各 100 口.4、溫育：封板后 37+1C60min5、洗滌：洗板機(jī)洗 5 遍.6、加酶：每孔參加酶標(biāo)試劑 100J.7、溫育：37+1C30min8、洗滌：洗板機(jī)洗 5 遍9、顯色：各孔參加 A、B 顯色液 504,混勻,37+1C30mino10、測定：參加終止液 50 口,450nm/620nm 波長測定各孔 ODfi.結(jié)果判斷：陰性對照孔 ODfi0,80,試驗(yàn)有效.臨界值(CUTOFF 的計(jì)算臨界值=陰性對照孔 ODi值 Nc+0.12.陽性判定： 樣品 OD大于等于臨界值(CUTOFF 為 HIV 抗體陽性,樣品小于臨界值為陰性.(注意：初試陽性標(biāo)本應(yīng)重新取樣進(jìn)

46、行雙孔復(fù)試,復(fù)試陽性者應(yīng)按?全國艾滋病檢測技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)?進(jìn)行確證實(shí)驗(yàn).3,廈門英科新創(chuàng)【試劑名稱】人類免疫缺陷病毒 HIV(1+2 型)抗體診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)【漢語拼音】RENLEIMIANYIQUEXIANBINGDU(HIV1+2XING)KANGTIZHENDUANSHIJIHE(MEILIANMIANYIFA)【英文名】HIV(1+2)AntibodiesELISAKit【檢測原理】本試劑盒采用雙抗原夾心兩步法檢測人血清或血漿樣本中的(HIV1/2)型抗體.采用多種HIV-1 和 HIV-2 的特異性抗原制作預(yù)包被板及酶結(jié)合物.當(dāng)待檢樣本中存在 HIV 抗體時(shí),在反響過程中形成“周相

47、HIV抗原-HIV抗體-酶標(biāo)記HIV抗原的免疫復(fù)合物,參加底物后形成顯色反響.【適用范圍】人類免疫缺陷病毒(HIV1/2)抗體輔助診斷及獻(xiàn)血員篩查.【試劑組成】序號組分名稱數(shù)量包裝規(guī)格序號組分名稱數(shù)量包裝規(guī)格1 微孔板 1 包 8X12T6 顯色劑 A1 瓶 7ml3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室 SO 汽件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 21 頁共 70 頁2 酶標(biāo)抗原 1 瓶 14ml7 顯色劑 B1 瓶 7ml3 陽性對照 1 瓶 1ml8 終止液 1 瓶 7ml4 陰性對照 1 瓶 1ml9 說明書 1 份5 洗滌液 2 瓶 25m

48、l10 自封袋 1 個(gè)11 封板膜 3 張【樣品的采集和保存】1 .采集靜脈的血清、血漿樣本應(yīng)在無菌條件下保存,并預(yù)防樣品溶血及反復(fù)凍溶.2 .血清和血漿樣品收集后如果無法在當(dāng)天檢測,樣品須在 2-8C 保存；如果大于 7天那么須冷凍保存.【操作步驟】:在使用本檢測試劑前必須仔細(xì)閱讀使用說明書.1 .平衡:將試劑盒各組分從盒中取出,平衡至室溫18C-25C,微孔板開封后按需要取用,余者及時(shí)以自封袋封存.2 .配液:濃縮洗滌液配置前充分搖勻 如有晶體應(yīng)充分溶解,濃縮洗滌液和蒸儲水或去離子水按 1:19 稀釋后使用.3 .編號:取所需數(shù)量微孔條固定于支架,按序編號.4 .加樣:按順序分別在相應(yīng)孔參

49、加 50 仙 l 待測樣品及陰、陽性對照血清.5 .溫育:覆上封板膜,置 37c 溫育 30 分鐘.6 .洗滌:用洗滌液充分洗滌 5 次,洗滌完后扣干每次應(yīng)保持 30-60 秒的浸泡時(shí)間.7 .加酶:分別在每孔中參加酶標(biāo)抗原 100 仙 l.8 .溫育:覆上封板膜,置 37c 溫育 30 分鐘.9 .洗滌:用洗滌液充分洗滌 5 次,洗滌完后扣干每次應(yīng)保持 30-60 秒的浸泡時(shí)間.10 .顯色:每孔加底物 A、B 各 50 口,輕拍混勻,覆上封板膜,37c 暗置 20 分鐘.11 終止:每孔參加終止液 50 仙 l,混勻.12.測定:用酶標(biāo)儀單波長 450nm 或雙波長 450/630nm 測

50、定各孔 OD 值用單波長測定時(shí),需設(shè)空白對照一孔,30 分鐘內(nèi)完成測定,并記錄結(jié)果.【結(jié)果判定】|1、陽性對照均值應(yīng)大于陰性對照均值 0.60 以上且陰性對照均值小于 0.10 方可認(rèn)3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室 SO 汽件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 22 頁共 70 頁為本次實(shí)驗(yàn)有效.2、 臨界值計(jì)算：CutoffValue=0.10+陰性對照均值 假設(shè)陰性對照均值小于 0.05,以 0.05計(jì).3、 樣本 OD 值大于或等于臨界值為初篩陽性,小于臨界值為陰性.初篩陽性者重新取樣雙孔復(fù)試,復(fù)試陽性者應(yīng)根據(jù)“全國 HIV 檢測治理標(biāo)

51、準(zhǔn)送 HIV 確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn).【考前須知】1、 本檢測試劑僅用于體外診斷試驗(yàn).僅用于人血清或血漿樣本,其它體液和樣品可能得不到準(zhǔn)確的結(jié)果.2、本試劑的使用單位必須是經(jīng)當(dāng)?shù)匦l(wèi)生行政部門批準(zhǔn)的 HIV 初篩實(shí)驗(yàn)室.3、樣本的加樣建議使用微量加樣器準(zhǔn)確參加.酶標(biāo)抗原需用微量加液器加液,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性.加酶標(biāo)記抗原時(shí),注意勿使微量加液器的加樣頭接觸樣本以預(yù)防樣本間相互污染.加試劑前,應(yīng)先將試劑瓶翻轉(zhuǎn)數(shù)次,使液體混勻.4、封板膜為一次性使用,每次使用后請丟棄,重復(fù)使用將導(dǎo)致嚴(yán)重污染.5、HIV 檢測必須符合 HIV 實(shí)驗(yàn)室治理標(biāo)準(zhǔn)和生物平安守那么的規(guī)定,嚴(yán)格預(yù)防交叉感染,嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔

52、離制度.所有樣品、 洗滌液和各種廢棄物應(yīng)按傳染物處理.對于那些含有感染源和疑心含有感染源的物質(zhì)應(yīng)有適宜的生物平安保證程序,下列為有關(guān)考前須知但不僅限于此：* 帶手套處理樣本和試劑* 不要用嘴吸樣* 不可在處理這些物品時(shí)吸煙、進(jìn)食、喝飲料、美容和處理隱形眼鏡* 用消毒劑對濺出的樣本或試劑進(jìn)行消毒* 按當(dāng)?shù)氐挠嘘P(guān)條例來消毒和處理所有樣本、試劑和潛在的污染物*試劑各組份在正當(dāng)處理和保存的情況下直至效期都保持穩(wěn)定,不能使用過效期的試劑盒6、HIV 抗體檢定結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).樣本的酶標(biāo)儀讀值與樣本中抗體的滴度沒有一定的必然聯(lián)系.3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室 SO 汽件責(zé)任

53、部門檢驗(yàn)科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 23 頁共 70 頁7、任何一種測試都不能絕對保證樣本中沒有低濃度的抗體存在,所以陰性結(jié)果任何時(shí)候不能排除含有 HIV 暴露和感染的可能.8、每板建議設(shè)陰、陽性對照血清各兩孔,設(shè)空白對照時(shí),不加樣本及酶標(biāo)抗原,其余各步相同.9、 洗滌液應(yīng)先取出預(yù)先稀釋,洗滌時(shí)各孔均須加滿但應(yīng)預(yù)防溢流,預(yù)防孔口內(nèi)有游離酶未能洗凈.10、不同品名、不同批號的試劑不可混用,以免產(chǎn)生錯(cuò)誤結(jié)果.【貯藏】儲存:2-8C 避光保存【有效期】十二個(gè)月【批準(zhǔn)文號】3、復(fù)檢試驗(yàn)：對初篩呈陽性反響的樣品用原有試劑和另外一種不同原理或不同廠家的篩查試劑重復(fù)檢測.如兩

54、種試劑復(fù)測均呈陰性反響,那么報(bào)告 HIV 抗體陰性；如均呈陽性反響,或一陰一陽,需送艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確認(rèn)見圖 1.3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室 SO 汽件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 24 頁共 70 頁送確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)報(bào)告圖1HIV抗體篩查檢測流程4、初篩試驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告對 HIV 抗體篩查試驗(yàn),呈陰性反響者可出具“HIV 抗體陰性報(bào)告(可用附表 1);對初篩試驗(yàn)呈陽性反響者不能出陽性報(bào)告,可出具“HIV 抗體待復(fù)查報(bào)告(附表 1).8、初篩試驗(yàn)呈陽性反響樣品的轉(zhuǎn)送如需送上級實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行復(fù)測或確認(rèn),需要填寫“HIV 抗體復(fù)測送檢單(

55、附表2),經(jīng) 1 名檢驗(yàn)人員和 1 名具有中級以上技術(shù)職稱的人員審核簽字.送當(dāng)?shù)匕滩『Y查中央實(shí)驗(yàn)室,再轉(zhuǎn)送艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室,或在本實(shí)驗(yàn)室復(fù)檢后直接送確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室.9、對篩查陰性和陽性者,均需做好檢測后咨詢.十五、檢測結(jié)果的判定方法1、HIV 測定(膠體金法)結(jié)果的判定方法(1)、陽性：出現(xiàn)兩條或三條紅線均為陽性反響.(2)、陰性：僅出現(xiàn)質(zhì)控一條紅線,那么實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性.(3)、無效：如無紅線(或只有反響線)出現(xiàn),說明實(shí)驗(yàn)無效,須重新檢測.2、HIV 測定(ELISA 法)結(jié)果的判定方法(1)、計(jì)算臨界值 CO(cut-off)值.(2)、臨界值=陰性對照 A 均值+0.12(3)、正常情況下,

56、陰性對照孔的 OD 值 00.10 假設(shè) 1 孔陰性對照的 OD 值0.1 應(yīng)舍棄,假設(shè)有 2 孔或 2 孔以上陰性對照的 OD 值0.1,應(yīng)重復(fù)實(shí)驗(yàn).).樣品 OD 值(臨界值者為 HIV 抗體陰性.(4)、正常情況下,陽性對照孔的 OD 值0.80 假設(shè) 1 孔陽性對照的.口值3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室 SO 汽件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 25 頁共 70 頁0.8應(yīng)舍棄,假設(shè)有 2 孔或 2孔以上陽性對照的 OD 值0.8,應(yīng)重復(fù)實(shí)驗(yàn).樣品 OD值可缶界值者為 HIV 抗體陽性.十六、檢測結(jié)果報(bào)告規(guī)程1、從事 HIV 檢測

57、工作的技術(shù)人員必須接受過上崗前的培訓(xùn)和定期復(fù)訓(xùn).2、HIV 檢測工作必須在獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行.3、初篩檢測試劑必須是經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督治理局注冊批準(zhǔn)、中國藥品生物制品檢定所批批檢合格且在有效期內(nèi)的試劑.4、根據(jù)?全國艾滋病檢測技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)?的要求建立健全質(zhì)量治理制度、實(shí)驗(yàn)室平安標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程、平安防護(hù)工作等.5、檢測結(jié)果報(bào)告前應(yīng)填寫好原始實(shí)驗(yàn)記錄資料,包括試驗(yàn)日期,試驗(yàn)操作記錄,檢測樣品及空白、陰、陽對照結(jié)果,S/CO 值、臨界值、試劑廠家、批號、效期,檢測人、復(fù)核人簽名等.6、將試驗(yàn)結(jié)果存檔保存,處理試驗(yàn)廢物,擦凈實(shí)驗(yàn)臺,做好實(shí)驗(yàn)室消毒衛(wèi)生.7、結(jié)果報(bào)告：對呈陰性反響的樣品,可出具“HIV 抗體篩

58、查報(bào)告(見附表1)陰性報(bào)告；對呈陽性反響的樣品,須進(jìn)行復(fù)檢,不能出陽性報(bào)告.8、復(fù)檢試驗(yàn)：對初篩呈陽性反響的樣品用原有試劑和另外一種不同原理或不同廠家的篩查試劑重復(fù)檢測.如兩種試劑復(fù)測均呈陰性反響,那么報(bào)告“HIV 抗體篩查報(bào)告(見附表 1)陰性；如均呈陽性反響,或一陰一陽,那么應(yīng)根據(jù)?全國HIV 檢測治理標(biāo)準(zhǔn)?的要求送艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確證試驗(yàn).十七、檢測結(jié)果的判定方法1、HIV 測定(膠體金法)結(jié)果的判定方法(1)、陽性：出現(xiàn)兩條或三條紅線均為陽性反響.(2)、陰性：僅出現(xiàn)質(zhì)控一條紅線,那么實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性.(3)、無效：如無紅線(或只有反響線)出現(xiàn),說明實(shí)驗(yàn)無效,須重新檢測.2、HIV

59、測定(ELISA 法)結(jié)果的判定方法(1)、計(jì)算臨界值 CO(cut-off)值.3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗(yàn)科HIV 篩查實(shí)驗(yàn)室 SO 汽件責(zé)任部門檢驗(yàn)科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 26 頁共 70 頁2、臨界值=陰性對照 A 均值+0.123、正常情況下,陰性對照孔的 OD 值 00.10 假設(shè) 1 孔陰性對照的 OD 值0.1應(yīng)舍棄,假設(shè)有 2 孔或 2 孔以上陰性對照的 OD 值0.1,應(yīng)重復(fù)實(shí)驗(yàn).樣品 OD 值臨界值者為 HIV 抗體陰性.4、正常情況下,陽性對照孔的 OD 值0.80 假設(shè) 1 孔陽性對照的 OD 侑0.8應(yīng)舍棄,假設(shè)有 2 孔或 2 孔

60、以上陽性對照的 OD 值0.8,應(yīng)重復(fù)實(shí)驗(yàn).樣品 OD 值可缶界值者為 HIV 抗體陽性.十八、檢驗(yàn)結(jié)果的解釋HIV 抗體檢測的結(jié)果有三種,分別是陽性、陰性和不確定,絕大多數(shù)情況下都是陽性或陰性,出現(xiàn)不確定結(jié)果的情況很少.一、陽性結(jié)果的解釋1、 說明一個(gè)人感染了 HIV,具有傳播性當(dāng)一個(gè)人 HIV 抗體檢測結(jié)果為陽性,說明這個(gè)人已經(jīng)感染了 HIV,具有把 HIV 傳播給別人的可能.2、不能判斷發(fā)病與否,不能判斷疾病的進(jìn)展.HIV 抗體檢測結(jié)果只能說明一個(gè)人是否感染了 HIV,陽性結(jié)果并非就意味著一個(gè)人已經(jīng)得了艾滋病,也不能說明患者處于疾病開展的哪個(gè)階段.假設(shè)要判斷疾病的進(jìn)展,那么要做另外的實(shí)驗(yàn)