高中生物實(shí)驗(yàn)總結(jié)28447

1、【精品文檔】如有侵權(quán)，請(qǐng)聯(lián)系網(wǎng)站刪除，僅供學(xué)習(xí)與交流高中生物實(shí)驗(yàn)總結(jié)28447.精品文檔.高中生物實(shí)驗(yàn)總結(jié)實(shí)驗(yàn)一 觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布 1.實(shí)驗(yàn)原理： 利用甲基綠和吡羅紅混合染色劑將細(xì)胞染色，可以顯示DNA和RNA在細(xì)胞中的分布；甲基綠和吡羅紅對(duì)DNA和RNA的親和力不同： 甲基綠+DNA綠色吡羅紅+RNA紅色2.分布：真核生物DNA主要分布在細(xì)胞核中；線粒體和葉綠體內(nèi)也含有少量的DNA；RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì)中。 3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果: 細(xì)胞核呈綠色,細(xì)胞質(zhì)呈紅色. 4.實(shí)驗(yàn)結(jié)論：DNA主要分布在細(xì)胞核中；RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì)中；5.實(shí)驗(yàn)流程：（1）取口腔上皮細(xì)胞制片：載玻片上滴一滴質(zhì)

2、量分?jǐn)?shù)為：0.9%NaCl溶液； 漱口后，用消毒牙簽刮口腔內(nèi)壁后放在載玻片的液滴中涂抹幾下； 載玻片在酒精燈上烘干，蓋上；（2）水解：載玻片放入盛有30ml質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%的HCl的小燒杯中； 大燒杯中加入30溫水； 將小燒杯放入大燒杯中保溫5min；（3）沖洗涂片：用蒸餾水的緩水流沖洗載玻片10s;（4）染色：吸水紙吸去載玻片的水分； 滴兩滴混合染液，染色5min； 吸去多余的染液，蓋上蓋玻片；（5）觀察：先低倍后高倍；6、幾種液體在實(shí)驗(yàn)中的作用：（1）0.9%NaCl溶液：保持口腔上皮的正常形態(tài)。8%的HCl：改變細(xì)胞膜等的通透性； 使染色質(zhì)中的DNA與蛋白質(zhì)分開(kāi)。蒸餾水：配置染液；沖洗載玻

3、片。（2）混合染液需要現(xiàn)配現(xiàn)用；（3）該實(shí)驗(yàn)不宜用深色的材料，避免顏色對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾。實(shí)驗(yàn)二、 物質(zhì)鑒定 一、實(shí)驗(yàn)原理：還原糖 + 斐林試劑磚紅色沉淀（水浴加熱） 脂 肪 + 蘇丹III 橘黃色 （滴液觀察或制片顯微鏡觀察）脂 肪 + 蘇丹IV 紅色 蛋白質(zhì) + 雙縮脲試劑 紫色反應(yīng) （不加熱）1、還原糖的檢測(cè)（1）材料的選?。哼€原糖含量高，白色或近于白色，如：蘋(píng)果，梨，白蘿卜。 （2）試劑：斐林試劑（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液），現(xiàn)配現(xiàn)用。 （3）步驟：取樣液2mL于試管中加入剛配的斐林試劑1mL（斐林試劑甲液和乙液等量混合均勻后再加入）水浴加熱

4、2min左右觀察顏色變化（白色淺藍(lán)色磚紅色） 操 作 方 法注 意 問(wèn) 題解 釋1. 制備組織樣液。（去皮、切塊、研磨、過(guò)濾）蘋(píng)果或梨組織液必須臨時(shí)制備。因蘋(píng)果多酚氧化酶含量高，組織液很易被氧化成褐色，將產(chǎn)生的顏色掩蓋。2. 取1支試管，向試管內(nèi)注入2mL組織樣液。  3. 向試管內(nèi)注入1mL新制的斐林試劑，振蕩。應(yīng)將組成斐林試劑的甲液、乙液分別配制、儲(chǔ)存，使用前才將甲、乙液等量混勻成斐林試劑； 切勿將甲液、乙液分別加入蘋(píng)果組織樣液中進(jìn)行檢測(cè)。斐林試劑很不穩(wěn)定，甲、乙液混合保存時(shí)，生成的Cu ( OH ) 2在70 900C下分解成黑色CuO和水；甲、乙液分別加入

5、時(shí)可能會(huì)與組織樣液發(fā)生反應(yīng)，無(wú)Cu OH生成。4. 試管放在盛有50-650C溫水的大燒杯中，加熱約2分鐘，觀察到溶液顏色：淺藍(lán)色 棕色 磚紅色（沉淀）最好用試管夾夾住試管上部，使試管底部不觸及燒杯底部，試管口不朝向?qū)嶒?yàn)者。也可用酒精燈對(duì)試管直接加熱。防止試管內(nèi)的溶液沖出試管，造成燙傷； 縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間。模擬尿糖的檢測(cè) 1、取樣：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液 2、檢測(cè)方法：斐林試劑（水浴加熱）或班氏試劑或尿糖試紙 3、結(jié)果：試管內(nèi)發(fā)生出現(xiàn)磚紅色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出現(xiàn)磚紅色沉淀的是正常人的尿液。 4、分析：因?yàn)樘悄虿』颊叩哪蛞褐泻羞€原糖，與斐林試劑發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀，而

6、正常人尿液中無(wú)還原糖，所以沒(méi)有發(fā)生反應(yīng)。 2、脂肪的檢測(cè) （1）材料的選?。汉玖吭礁叩慕M織越好，如花生的子葉。 （2）步驟： 制作切片（切片越薄越好）將最薄的花生切片放在載玻片中央 染色（滴蘇丹染液23滴切片上23min后吸去染液滴體積分?jǐn)?shù)50%的酒精洗去浮色吸去多余的酒精） 制作裝片（滴12滴清水于材料切片上蓋上蓋玻片） 鏡檢鑒定（顯微鏡對(duì)光低倍鏡觀察高倍鏡觀察染成橘黃色的脂肪顆粒） 操 作 方 法注 意 問(wèn) 題解 釋花生種子浸泡、去皮、切下一些子葉薄片，將薄片放在載玻片的水滴中，用吸水紙吸去裝片中的水。干種子要浸泡34小時(shí)，新花生的浸泡時(shí)間可縮短。因?yàn)榻輹r(shí)間短，不易切片；浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)

7、，組織較軟，切片不易成形。切片要盡可能薄些，便于觀察。在子葉薄片上滴23滴蘇丹或蘇丹染液，染色1分鐘。染色時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)。 用吸水紙吸去薄片周圍染液，用50%酒精洗去浮色，吸去酒精。 酒精用于洗去浮色，不洗去浮色，會(huì)影響對(duì)橘黃色脂肪滴的觀察。同時(shí)，酒精是脂溶性溶劑，可將花生細(xì)胞中的脂肪顆粒溶解成油滴。用吸水紙吸去薄片周圍酒精，滴上12滴蒸餾水，蓋上蓋玻片。 滴上清水可防止蓋蓋玻片時(shí)產(chǎn)生氣泡。低倍鏡下找到花生子葉薄片的最薄處，可看到細(xì)胞中有染成橘黃色或紅色圓形小顆粒。裝片不宜久放。時(shí)間一長(zhǎng)，油滴會(huì)溶解在乙醇中。3、蛋白質(zhì)的檢測(cè) （1）試劑：雙縮脲試劑（A液：0.1g/

8、mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液） （2）步驟：試管中加樣液2mL加雙縮脲試劑A液1mL，搖勻加雙縮尿試劑B液4滴，搖勻觀察操 作 方 法注 意 問(wèn) 題解 釋制備組織樣液。（浸泡、去皮研磨、過(guò)濾。） 黃豆浸泡1至2天，容易研磨成漿，也可購(gòu)新鮮豆?jié){以節(jié)約實(shí)驗(yàn)時(shí)間。鑒定。加樣液約2ml于試管中，加入雙縮脲試劑A，搖勻；再加入雙縮脲試劑B液34滴，搖勻，溶液變紫色。A液和B液也要分開(kāi)配制，儲(chǔ)存。鑒定時(shí)先加A液后加B液。 CuSO4溶液不能多加。先加NaOH溶液，為Cu2+與蛋白質(zhì)反應(yīng)提供一個(gè)堿性的環(huán)境。A、B液混裝或同時(shí)加入，會(huì)導(dǎo)致Cu2+變成Cu (

9、OH ) 2沉淀，而失效。否則CuSO4的藍(lán)色會(huì)遮蓋反應(yīng)的真實(shí)顏色?？捎玫扒宕娑?jié){。蛋清要先稀釋。如果稀釋不夠，在實(shí)驗(yàn)中蛋清粘在試管壁，與雙縮脲試劑反應(yīng)后會(huì)粘固在試管內(nèi)壁上，使反應(yīng)不容易徹底，并且試管也不易洗干凈。附：淀粉的檢測(cè)和觀察用試管取2ml待測(cè)組織樣液，向試管內(nèi)滴加2滴碘液，觀察顏色變化。碘液不要滴太多以免影響顏色觀察4、考點(diǎn)提示： （1）常見(jiàn)還原性糖與非還原性糖有哪些？ 葡萄糖、果糖、麥芽糖都是還原性糖；淀粉、蔗糖、纖維素都是非還原（2 )還原性糖植物組織取材條件？ 含糖量較高、顏色為白色或近于白色，如：蘋(píng)果、梨、白色甘藍(lán)葉、白蘿卜等。 （3)研磨中為何要加石英砂？不加石英砂對(duì)實(shí)驗(yàn)

10、有何影響？ 是為了使研磨更充分。不加石英砂會(huì)使組織樣液中還原性糖減少，使鑒定時(shí)溶液顏色變化不明顯。 （4）斐林試劑甲、乙兩液的使用方法？混合的目的？為何要現(xiàn)混現(xiàn)用？ 斐林試劑甲和斐林試劑乙直接反應(yīng)生成酒石酸絡(luò)銅離子，酒石酸絡(luò)銅離子和可溶性還原糖在加熱條件下反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀。斐林試劑甲和斐林試劑乙混合后會(huì)因酒石酸有一定的還原性而自發(fā)地緩慢產(chǎn)生氧化亞銅沉淀，而氧化亞銅是磚紅色沉淀，這就會(huì)給實(shí)驗(yàn)帶來(lái)誤解。因此斐林試劑一般為現(xiàn)用現(xiàn)配。 （5)還原性糖中加入斐林試劑后，溶液顏色變化的順序?yàn)椋?淺藍(lán)色 棕色 磚紅色 （6）花生種子切片為何要??？ 只有很薄的切片，才能透光，而用于顯微鏡的觀察。 （7）轉(zhuǎn)動(dòng)

11、細(xì)準(zhǔn)焦螺旋時(shí)，若花生切片的細(xì)胞總有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是什么？ 切片不均勻。 （8）脂肪鑒定中乙醇作用？ 洗去浮色。 （9）雙縮脲試劑A、B兩液是否混合后用？先加A液的目的。怎樣通過(guò)對(duì)比看顏色變化？ 不能混合；先加A液的目的是使溶液呈堿性；先留出一些大豆組織樣液做對(duì)比。 實(shí)驗(yàn)三 觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)流動(dòng) 1、材料：新鮮蘚類葉、黑藻葉或菠菜葉，口腔上皮細(xì)胞臨時(shí)裝片 2、原理：葉綠體在顯微鏡下觀察，綠色,球形或橢球形。 用健那綠染液染色后的口腔上皮細(xì)胞中線粒體成藍(lán)綠色,細(xì)胞質(zhì)接近無(wú)色。 知識(shí)概要： 取材 制片 低倍觀察 高倍觀察 考點(diǎn)提示： （1)為什么可直接取用蘚類的小葉，而不能直

12、接取用菠菜葉？ 因?yàn)樘\類的小葉很薄，只有一層細(xì)胞組成，而菠菜葉由很多層細(xì)胞構(gòu)成。 （2）取用菠菜葉的下表皮時(shí)，為何要稍帶些葉肉？ 表皮細(xì)胞除保衛(wèi)細(xì)胞外，一般不含葉綠體，而葉肉細(xì)胞含較多的葉綠體。 （3)怎樣加快黑藻細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)速度？最適溫度是多少？ 進(jìn)行光照、提高水溫、切傷部分葉片；25左右。 （4）對(duì)黑藻什么部位的細(xì)胞觀察，所觀察到的細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)的現(xiàn)象最明顯？ 葉脈附近的細(xì)胞。 （5）若視野中某細(xì)胞中細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)方向?yàn)轫槙r(shí)針，則在裝片中該細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)的實(shí)際流動(dòng)方向是怎樣的？ 仍為順時(shí)針。 （6）是否一般細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)不流動(dòng)，只有黑藻等少數(shù)植物的細(xì)胞質(zhì)才流動(dòng)？ 否，活細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)都是流動(dòng)的。 （7

13、）若觀察植物根毛細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)，則對(duì)顯微鏡的視野亮度應(yīng)如何調(diào)節(jié)？ 視野應(yīng)適當(dāng)調(diào)暗一些，可用反光鏡的平面鏡來(lái)采光或縮小光圈。 （8）在強(qiáng)光照射下，葉綠體的向光面有何變化？葉綠體的受光面積較小有一面面向光源。 實(shí)驗(yàn)四、 觀察有絲分裂 1、材料：洋蔥根尖（蔥，蒜） 2、步驟：（一）洋蔥根尖的培養(yǎng) （二）裝片的制作 3、實(shí)驗(yàn)原理：（1）龍膽紫溶液能將染色體染成深色（2）有絲分裂各個(gè)時(shí)期細(xì)胞內(nèi)染色體的形態(tài)和行為變化不同，可用高倍顯微鏡根據(jù)各個(gè)時(shí)期內(nèi)染色體的變化情況，識(shí)別該細(xì)胞處于那個(gè)時(shí)期。制作流程：解離漂洗染色制片 1. 解離: 藥液: 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸,體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精(1 : 1混合液

14、). 時(shí)間: 35min .目的: 使組織中的細(xì)胞相互分離開(kāi)來(lái). 2. 漂洗: 用清水漂洗約10min. 目的: 洗去藥液,防止解離過(guò)度,并有利于染色. 3. 染色: 用質(zhì)量濃度為0.01g / mL或0.02g / mL的龍膽紫溶液(或醋酸洋紅液)染色3 5min 目的: 使染色體著色,利于觀察. 4. 制片: 將根尖放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子把根尖弄碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加一片載玻片. 然后用拇指輕輕地按壓載玻片. 目的: 使細(xì)胞分散開(kāi)來(lái),有利于觀察. 過(guò)程方 法時(shí) 間目 的 解離上午10時(shí)至下午2時(shí)，剪去洋蔥根尖2-3mm，立即放入盛入有鹽酸和酒精混合液（1：1）的玻璃皿中

15、，在溫室下解離。3-5min用藥液使組織中的細(xì)胞相互分離開(kāi)來(lái)漂洗待根尖酥軟后，用鑷子取出，放入盛入清水的玻璃皿中漂洗。約10min洗去藥液，防止解離過(guò)度染色把根尖放進(jìn)盛有質(zhì)量濃度為0.01g/ml或0.02g/ml的龍膽紫溶液（或醋酸洋紅液）的玻璃皿中染色。3-5min染料能使染色體著色。制片用鑷子將這段根尖取出來(lái)，放在載玻片上，加一滴清水，并用鑷子尖把根尖能碎，蓋上蓋玻片，在蓋玻片上再加一片載玻片。然后，用拇指輕輕的按壓載玻片。使細(xì)胞分散開(kāi)來(lái)，有利于觀察（三）觀察 1、先在低倍鏡下找到根尖分生區(qū)細(xì)胞：細(xì)胞呈正方形，排列緊密,有的細(xì)胞正在分裂。（長(zhǎng)方形：伸長(zhǎng)區(qū)） 2、換高倍鏡下觀察：分裂中期分

16、裂前、后、末期分裂間期。（注意各時(shí)期細(xì)胞內(nèi)染色體形態(tài)和分布的特點(diǎn)）。其中，處于分裂間期的細(xì)胞數(shù)目最多。 考點(diǎn)提示： （1)培養(yǎng)根尖時(shí)，為何要經(jīng)常換水？ 增加水中的氧氣，防止根進(jìn)行無(wú)氧呼吸造成根的腐爛。 （2）培養(yǎng)根尖時(shí)，應(yīng)選用老洋蔥還是新洋蔥？為什么？ 應(yīng)選用舊洋蔥，因?yàn)樾卵笫[尚在休眠，不易生根。 （3）為何每條根只能用根尖？取根尖的最佳時(shí)間是何時(shí)？為何？ 因?yàn)楦夥稚鷧^(qū)的細(xì)胞能進(jìn)行有絲分裂；上午10時(shí)到下午2時(shí)；因?yàn)榇藭r(shí)細(xì)胞分裂活躍。 （4）解離和壓片的目的分別是什么？壓片時(shí)為何要再加一塊載玻片？ 解離是為了使細(xì)胞相互分離開(kāi)來(lái)，壓片是為了使細(xì)胞相互分散開(kāi)來(lái)；再加一塊載玻片是為了受力均勻，防止

17、蓋玻片被壓破。 （5）若所觀察的組織細(xì)胞大多是破碎而不完整的，其原因是什么？ 壓片時(shí)用力過(guò)大。 （6)解離過(guò)程中鹽酸的作用是什么？丙酮可代替嗎？ 分解和溶解細(xì)胞間質(zhì)；不能，而硝酸可代替。 （7)為何要漂洗？洗去鹽酸便于染色。 （8)細(xì)胞中染色最深的結(jié)構(gòu)是什么？ 染色最深的結(jié)構(gòu)是染色質(zhì)或染色體。 （9）若所觀察的細(xì)胞各部分全是紫色，其原因是什么？染液濃度過(guò)大或染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。（10）為何要找分生區(qū)？分生區(qū)的特點(diǎn)是什么？能用高倍物鏡找分生區(qū)嗎？為什么？ 因?yàn)樵诟庵挥蟹稚鷧^(qū)的細(xì)胞能夠進(jìn)行細(xì)胞分裂；分生區(qū)的特點(diǎn)是：細(xì)胞呈正方形，排列緊密，有的細(xì)胞處于分裂狀態(tài)；不能用高倍鏡找分生區(qū)，因?yàn)楦弑剁R所觀察的實(shí)

18、際范圍很小，難以發(fā)現(xiàn)分生區(qū)。 （11）分生區(qū)細(xì)胞中，什么時(shí)期的細(xì)胞最多？為什么？ 間期；因?yàn)樵诩?xì)胞周期中，間期時(shí)間最長(zhǎng)。 （12）所觀察的細(xì)胞能從中期變化到后期嗎？為什么？ 不能，因?yàn)樗^察的細(xì)胞都是停留在某一時(shí)期的死細(xì)胞。 （13）觀察洋蔥表皮細(xì)胞能否看到染色體？為什么？ 不能，因?yàn)檠笫[表皮細(xì)胞一般不分裂。（已分化的細(xì)胞不分裂） （14）若觀察時(shí)不能看到染色體，其原因是什么？ 沒(méi)有找到分生區(qū)細(xì)胞；沒(méi)有找到處于分裂期的細(xì)胞；染液過(guò)稀；染色時(shí)間過(guò)短。 實(shí)驗(yàn)五 、比較酶和Fe3+的催化效率 考點(diǎn)提示： （1）為何要選新鮮的肝臟？因?yàn)樵诓恍迈r的肝臟中，過(guò)氧化氫酶的活性會(huì)由于細(xì)菌的破壞而降低。 （2）

19、該實(shí)驗(yàn)中所用試管應(yīng)選較粗的還是較細(xì)的？為什么？應(yīng)選用較粗的，因?yàn)樵谳^細(xì)的試管中容易形成大量的氣泡，而影響衛(wèi)生香的復(fù)燃。 （3）為何要選動(dòng)物的肝臟組織來(lái)做實(shí)驗(yàn)，其他動(dòng)植物的組織的研磨液能替代嗎？因?yàn)楦闻K組織中過(guò)氧化氫酶含量較豐富；其它動(dòng)植物組織也含有少量的過(guò)氧化氫酶，所以能夠替代。 （4）相同質(zhì)量的塊狀肝臟和肝臟研磨液，哪一個(gè)催化效果好？為什么？研磨液效果好；因?yàn)樗黾舆^(guò)氧化氫酶與過(guò)氧化氫的接觸面積。 （5）滴入肝臟研磨液和氯化鐵溶液時(shí)，可否共用下個(gè)吸管？為什么？不可共用，防止過(guò)氧化氫酶與氯化鐵混合，而影響實(shí)驗(yàn)效果。 實(shí)驗(yàn)六 色素的提取和分離 1、原理：（1）葉綠體中的色素能溶解在有機(jī)溶劑丙酮或

20、無(wú)水乙醇提取色素 （2）各色素在層析液中的溶解度不同,隨層析液在濾紙上擴(kuò)散速度不同分離色素 2、步驟： （1）稱取5g綠色葉片并剪碎 提取色素 研缽研磨漏斗過(guò)濾 （2）加入少量SiO2、CaCO3和5ml丙酮 收集到試管內(nèi)并塞緊管口 （1）將干燥的濾紙剪成6cm長(zhǎng)，1cm寬的紙條，剪去一端兩角（使層析液同時(shí)到達(dá)濾液細(xì)線）制濾紙條 （2）在距剪角一端1cm處用鉛筆畫(huà)線 （1）用毛細(xì)管吸少量的濾液沿鉛筆線處小心均勻地劃一條濾液細(xì)線濾液劃線 （2）干燥后重復(fù)劃2-3次 （1）向燒杯中倒入3ml層析液（以層析液不沒(méi)及濾液細(xì)線為準(zhǔn)）紙上層析 （2）將濾紙條尖端朝下略微斜靠燒杯內(nèi)壁，輕輕插入層析液中 （3

21、）用培養(yǎng)皿蓋蓋上燒杯觀察結(jié)果：濾紙條上出現(xiàn)四條寬度、顏色不同的彩帶（如下圖）最寬：葉綠素a；最窄：葉綠素b；相鄰色素帶最近：葉綠素a和葉綠素b；相鄰色素帶最遠(yuǎn)：胡蘿卜素和葉黃素?？键c(diǎn)提示： （1）對(duì)葉片的要求？為何要去掉葉柄和粗的時(shí)脈？綠色、最好是深綠色。因?yàn)槿~柄和葉脈中所含色素很少。 （2）二氧化硅的作用？不加二氧化硅對(duì)實(shí)驗(yàn)有何影響？ 為了使研磨充分。不加二氧化硅，會(huì)使濾液和色素帶的顏色變淺。 （3）丙酮的作用？它可用什么來(lái)替代？用水能替代嗎？ 溶解色素。它可用酒精等有機(jī)溶劑來(lái)代替，但不能用水來(lái)代替，因?yàn)樯夭蝗苡谒?（4）碳酸鈣的作用？不加碳酸鈣對(duì)實(shí)驗(yàn)有何影響？ 保護(hù)色素，防止在研磨時(shí)葉

22、綠體中的色素受到破壞。不加碳酸鈣，濾液會(huì)變成黃綠色或褐色。 （5）研磨為何要迅速？要充分？過(guò)濾時(shí)為何用布不用濾紙？ 研磨迅速，是為了防止丙酮大量揮發(fā)；只有充分研磨，才能使大量色素溶解到丙酮中來(lái)。色素不能通過(guò)濾紙，但能通過(guò)尼龍布。 （6）濾紙條為何要剪去兩角？ 防止兩側(cè)層析液擴(kuò)散過(guò)快。 （7）為何不能用鋼筆或圓珠筆畫(huà)線？ 因?yàn)殇摴P水或圓珠筆油中含有其它色素，會(huì)影響色素的分離結(jié)果。 （8） 濾液細(xì)線為何要直？為何要重畫(huà)幾次？ 防止色素帶的重疊；增加色素量，使色素帶的顏色更深一些。 （9） 濾液細(xì)線為何不能觸到層析液？ 防止色素溶解到層析液中。 （10）濾紙條上色素為何會(huì)分離？ 由于不同的色素在層析

23、液中的溶解度不同，因而它們隨層析液在濾紙條上的擴(kuò)散速度就不同。 （11）色素帶最寬的是什么色素？它在層析液中的溶解度比什么色素大一些？ 最寬的色素帶是葉綠素a，它的溶解度比葉綠素b大一些。 （12）濾紙條上相互間距最大的是哪兩種色素？ 胡蘿卜素和葉黃素。 （13)色素帶最窄的是第幾條色素帶？為何？ 第一條色素帶，因?yàn)楹}卜素在葉綠體的四種色素中含量最少。 14、擴(kuò)散最快的是胡蘿卜素（橙黃色），擴(kuò)散最慢的是葉綠素b（黃綠色）。實(shí)驗(yàn)七 觀察質(zhì)壁分離和復(fù)原 1、條件：細(xì)胞內(nèi)外溶液濃度差，活細(xì)胞，大液泡 2、材料：紫色洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞（具紫色大液泡），質(zhì)量濃度0.3g/mL的蔗糖溶液，清水等。 3

24、、步驟：制作洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞臨時(shí)裝片觀察蓋玻片一側(cè)滴蔗糖溶液,另一側(cè)用吸水紙吸引觀察(液泡由大到小,顏色由淺變深,原生質(zhì)層與細(xì)胞壁分離)蓋玻片一側(cè)滴清水, 另一側(cè)用吸水紙吸引觀察(質(zhì)壁分離復(fù)原) 4、結(jié)論: 細(xì)胞外溶液濃度 細(xì)胞內(nèi)溶液濃度，細(xì)胞失水 質(zhì)壁分離 細(xì)胞外溶液濃度 細(xì)胞內(nèi)溶液濃度，細(xì)胞吸水 質(zhì)壁分離復(fù)原 知識(shí)概要：制片 觀察 加液 觀察 加水 觀察 考點(diǎn)提示： （1）洋蔥為何要選紫色的？若紫色過(guò)淡怎么辦？ 紫色的洋蔥有紫色的大液泡，便于觀察液泡的大小變化；縮小光圈，使視野變暗些。 （2）洋蔥表皮應(yīng)撕還是削？為何？ 表皮應(yīng)撕不能削，因?yàn)橄鞯谋砥ね瘛?（3）植物細(xì)胞為何會(huì)出現(xiàn)質(zhì)

25、壁分離？ 動(dòng)物細(xì)胞會(huì)嗎？ 當(dāng)細(xì)胞失去水分時(shí)，其原生質(zhì)層的伸縮性大于細(xì)胞壁的伸縮性；動(dòng)物細(xì)胞不會(huì)發(fā)生質(zhì)壁分離，因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞壁。（細(xì)胞壁全透性：所有物質(zhì)都能通過(guò)） （4）質(zhì)壁分離時(shí)，液泡大小和顏色的變化？復(fù)原時(shí)呢？ 細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離時(shí)，液泡變小，紫色加深； 當(dāng)細(xì)胞質(zhì)壁分離復(fù)原時(shí)，液泡變大，紫色變淺。 （5）若發(fā)生質(zhì)壁分離后的細(xì)胞，不能發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原，其原因是什么？ 細(xì)胞已經(jīng)死亡（可能是外界溶液濃度過(guò)大，細(xì)胞失水過(guò)多或質(zhì)壁分離時(shí)間過(guò)長(zhǎng)） （6）放大倍數(shù)與視野中細(xì)胞大小、多少、視野明暗的關(guān)系？ 放大倍數(shù)越大，視野中細(xì)胞越大、數(shù)目越少、視野越暗。 （反之）（7） 更換目鏡，若異物消失，則異物在

26、目鏡上；更換物鏡，若異物消失，則異物在物鏡上、移動(dòng)載玻片，若異物移動(dòng)，則異物在載玻片上。 （8）怎樣利用質(zhì)壁分離現(xiàn)象來(lái)測(cè)定植物細(xì)胞液的濃度？ 配制一系列濃度從小到大的蔗糖溶液 分別用以上不同濃度的溶液制成某植物細(xì)胞的臨時(shí)裝片 用顯微鏡觀察某植物細(xì)胞是否發(fā)生質(zhì)壁分離。某植物細(xì)胞液的濃度就介于不能引起質(zhì)壁分離的濃度和能引起質(zhì)壁分離的濃度之間。 （9）具有中央大液泡的成熟植物細(xì)胞才能發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象；死細(xì)胞、動(dòng)物細(xì)胞、未成熟的植物細(xì)胞不能發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象。實(shí)驗(yàn)八 、DNA的粗提取與鑒定 考點(diǎn)提示： （1)雞血能用豬血代替嗎？為什么？ 不能，因?yàn)椴溉閯?dòng)物的紅細(xì)胞中沒(méi)有細(xì)胞核，不能提取DNA。 （2）雞

27、血中為何要加檸檬酸鈉？為何要棄去雞血細(xì)胞的上清液？ 防止血液凝固；因?yàn)樯锨逡菏茄獫{，不含細(xì)胞和DNA。 （3）脹破細(xì)胞的方法？能用生理鹽水嗎？ 向血細(xì)胞中加入蒸餾水，使細(xì)胞大量吸水而脹破；不能用生理鹽水，因?yàn)檠?xì)胞在蒸餾水中不能吸收水分。 （4）該實(shí)驗(yàn)中最好應(yīng)用玻璃燒杯還是塑料燒杯？為什么？ 最好用塑料燒杯，因?yàn)椴Ａ菀孜紻NA。 （5）前后三次過(guò)濾時(shí)，所用紗布的層數(shù)分別是多少？為什么？ 第一次用一層紗布，有利于核物質(zhì)透過(guò)紗布進(jìn)入濾液；第二次用多層紗布，能防止DNA絲狀物透過(guò)紗布進(jìn)入濾液； 第三次用兩層紗布，既有利于DNA透過(guò)紗布，又能防止其它雜質(zhì)透過(guò)紗布。 （6）若實(shí)驗(yàn)中所得黏稠物太少

28、，其原因是什么？ 第一次加蒸餾水過(guò)少，細(xì)胞未充分脹破；第二次加蒸餾水過(guò)多或過(guò)少；第一次過(guò)濾用了多層紗布；第二次過(guò)濾用了一層紗布。 （7）兩次加入蒸餾水的目的分別是什么？ 第一次是為了使血細(xì)胞吸水脹破；第二次是為了降低氯化鈉的濃度，有利于DNA有析出。 （8）實(shí)驗(yàn)中攪拌溶液時(shí)，為何總要沿一個(gè)方向攪拌？ 防止DNA分子受到損傷。 （9）兩次析出DNA的方法分別是什么？原理分別是什么？ 第一次是加蒸餾水，降低氯化鈉的濃度，促使DNA析出；第二次是加入冷酒精，因?yàn)镈NA不溶于酒精溶液。 （10)三次溶解DNA的液體分別是什么？原理分別是什么？ 第一次、第二次都是用濃度為2mol/L的氯化鈉溶液，第三次

29、用的是0.015mol/L（或2 mol/L）的氯化鈉溶液。其原理是DNA在氯化鈉中的溶解度，是隨著氯化鈉的濃度的變化而改變的。當(dāng)氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L時(shí)，DNA的溶解度最低。2mol/L的氯化鈉溶液和0。015mol/L的氯化鈉溶液對(duì)DNA的溶解度都比較高。 （11)鑒定DNA時(shí)為何要用兩支試管？其現(xiàn)象分別是什么？ 其中不加DNA的試管起對(duì)照作用。該試管溶液不變色，另一支加有DNA的試管溶液變藍(lán)色。 實(shí)驗(yàn)九 、探究酵母菌的呼吸方式 1、原理: 酵母菌在有氧條件下進(jìn)行有氧呼吸,產(chǎn)生二氧化碳和水： C6H12O6 6O2 6H2O6CO2 12H2O 能量 在無(wú)氧條件下進(jìn)行無(wú)氧

30、呼吸,產(chǎn)生酒精和少量二氧化碳： C6H12O6 2C2H5OH 2CO2 少量能量 2、裝置：（見(jiàn)課本） 3、檢測(cè)：（1）檢測(cè)CO2的產(chǎn)生：使澄清石灰水變渾濁，或使溴麝香草酚藍(lán)水溶液由藍(lán)變綠再變黃。 （2）檢測(cè)酒精的產(chǎn)生：橙色的重鉻酸鉀溶液，在酸性條件下與酒精發(fā)生反應(yīng)，變成灰綠色。 實(shí)驗(yàn)十、 觀察細(xì)胞的減數(shù)分裂 1、目的要求：通過(guò)觀察蝗蟲(chóng)精母細(xì)胞減數(shù)分裂固定裝片，識(shí)別減數(shù)分裂不同階段的染色體的形態(tài)、位置和數(shù)目，加深對(duì)減數(shù)分裂過(guò)程的理解。 2、材料用具：蝗蟲(chóng)精母細(xì)胞減數(shù)分裂固定裝片，顯微鏡。 3、方法步驟： （1）在低倍鏡下觀察蝗蟲(chóng)精母細(xì)胞減數(shù)分裂固定裝片，識(shí)別初級(jí)精母細(xì)胞、次級(jí)精母細(xì)胞和精細(xì)胞

31、。 （2）先在低倍鏡下依次找到減數(shù)第一次分裂中期、后期和減數(shù)第二次分裂中期、后期的細(xì)胞，再在高倍鏡下仔細(xì)觀察染色體的形態(tài)、位置和數(shù)目。 4、討論：（1）如何判斷視野中的一個(gè)細(xì)胞是處于減數(shù)第一次分裂還是減數(shù)第二次分裂？ （2）減數(shù)第一次分裂與減數(shù)第二次分裂相比，中期細(xì)胞中的染色體的不同點(diǎn)是什么？末期呢？ 實(shí)驗(yàn)十一 、低溫誘導(dǎo)染色體加倍 1、原理：用低溫處理植物分生組織細(xì)胞，能夠抑制紡錘體的形成，以致影響染色體被拉向兩極，細(xì)胞也不能分裂成兩個(gè)子細(xì)胞，于是，植物細(xì)胞染色體數(shù)目發(fā)生變化。 2、方法步驟： （1）洋蔥長(zhǎng)出約1cm左右的不定根時(shí)，放入冰箱的低溫室內(nèi)（4），誘導(dǎo)培養(yǎng)36h。 （2）剪取誘導(dǎo)處

32、理的根尖約0.51cm，放入卡諾氏液中浸泡0.51 h，以固定細(xì)胞的形態(tài)，然后用體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精沖洗2次。 （3）制作裝片：解離漂洗染色制片 （4）觀察，比較:視野中既有正常的二倍體細(xì)胞,也有染色體數(shù)目發(fā)生改變的細(xì)胞. 3、討論：秋水仙素與低溫都能誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍，這兩種方法在原理上有什么相似之處？ 實(shí)驗(yàn)十二 調(diào)查常見(jiàn)的人類遺傳病 1、 要求：調(diào)查的群體應(yīng)足夠大；選取群體中發(fā)病率較高的單基因遺傳病。如紅綠色盲、白化病、高度近視(600度以上)等. 2、 方法: 分組調(diào)查,匯總數(shù)據(jù),統(tǒng)一計(jì)算. 3、計(jì)算公式：某種遺傳病的發(fā)病率=×100% 4、討論: 所調(diào)查的遺傳病的遺傳方式,

33、 發(fā)病率是否與有關(guān)資料相符, 分析原因. 實(shí)驗(yàn)十三 探究植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)扦插枝條生根的作用 1、常用的生長(zhǎng)素類似物:NAA(萘乙酸), 2,4-D, IPA(苯乙酸). IBA(吲哚丁酸)等 2、方法： 浸泡法：把插條的基部浸泡在配置好的溶液中，深約3cm，處理幾小時(shí)或一天。處理完畢就可以扦插了。這種處理方法要求溶液的濃度較低，并且最好是在遮蔭和空氣濕度較高的地方進(jìn)行處理。 沾蘸法：把插條的基部在濃度較高的藥液中蘸一下（約5s），深約1.5cm即可。 3、預(yù)實(shí)驗(yàn)：先設(shè)計(jì)一組濃度梯度較大的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行探索,在此基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)細(xì)致的實(shí)驗(yàn). 4、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的幾項(xiàng)原則: 單一變量原則(只有溶液的濃度不同)；等量

34、原則(控制無(wú)關(guān)變量,即除溶液的濃度不同外,其他條件都相同)；重復(fù)原則(每一濃度處理35段枝條)；對(duì)照原則（相互對(duì)照、空白對(duì)照）；科學(xué)性原則 實(shí)驗(yàn)十四 探究培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化 1、培養(yǎng)酵母菌（溫度、氧氣、培養(yǎng)液）：可用液體培養(yǎng)基培養(yǎng) 2、計(jì)數(shù)：血球計(jì)數(shù)板(2mm×2mm方格,培養(yǎng)液厚0.1mm) 3、推導(dǎo)計(jì)算 4、討論：根據(jù)7天所統(tǒng)計(jì)的酵母菌種群數(shù)量畫(huà)出酵母菌種群數(shù)量的增長(zhǎng)曲線；推測(cè)影響影響酵母菌種群數(shù)量變化的 因素。 實(shí)驗(yàn)十五 土壤中動(dòng)物類群豐富度的研究 1、豐富度的統(tǒng)計(jì)方法通常有兩種：記名計(jì)算法和目測(cè)估計(jì)法 記名計(jì)算法：指在一定面積的樣地中，直接數(shù)出各種群的個(gè)體數(shù)目，這一

35、般用于個(gè)體較大，種群數(shù)量有限的群落。 目測(cè)估計(jì)法：按預(yù)先確定的多度等級(jí)來(lái)估計(jì)單位面積上個(gè)體數(shù)量的多少。等級(jí)的劃分和表示方法有：“非常多、多、較多、較少、少、很少”等等。 2、設(shè)計(jì)數(shù)據(jù)收集和統(tǒng)計(jì)表，分析所搜集的數(shù)據(jù)。 實(shí)驗(yàn)十六 種群密度的取樣調(diào)查 考點(diǎn)提示： (動(dòng)物：標(biāo)記重捕法，植物：樣方法)（1）什么是種群密度的取樣調(diào)查法？ 在被調(diào)查種群的生存環(huán)境內(nèi)，隨機(jī)選取若干個(gè)樣方，以所有樣方種群密度的平均值作為該種群的種群密度。 （2）為了便于調(diào)查工作的進(jìn)行，在選擇調(diào)查對(duì)象時(shí)，一般應(yīng)選單子葉植物，還是雙子葉植物？為什么？ 一般應(yīng)選雙子葉植物，因?yàn)殡p子葉植物的數(shù)量便于統(tǒng)計(jì)。 （3）在樣方中統(tǒng)計(jì)植物數(shù)目時(shí)，

36、若有植物正好長(zhǎng)在邊線上，應(yīng)如何統(tǒng)計(jì)？ 只計(jì)算該樣方相鄰的兩條邊上的植物的數(shù)目。 （4）在某地域中，第一次捕獲某種動(dòng)物M只，標(biāo)志后放回原處。第二次捕獲N只，其中含標(biāo)志個(gè)體Y只，求該地域中該種動(dòng)物的總數(shù)。 MN/Y （5）應(yīng)用上述標(biāo)志重捕法的條件有哪些？ 標(biāo)志個(gè)體在整個(gè)調(diào)查種群中均勻分布，標(biāo)志個(gè)體和未標(biāo)志個(gè)體都有同樣被捕的機(jī)會(huì)。調(diào)查期中，沒(méi)有遷入或遷出。沒(méi)有新的出生或死亡。 高中生物選修一生物技術(shù)實(shí)踐 知識(shí)點(diǎn)總結(jié)專題一 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用課題一 果酒和果醋的制作1、發(fā)酵：通過(guò)微生物技術(shù)的培養(yǎng)來(lái)生產(chǎn)大量代謝產(chǎn)物的過(guò)程。2、有氧發(fā)酵：醋酸發(fā)酵 谷氨酸發(fā)酵 ·無(wú)氧發(fā)酵：酒精發(fā)酵 乳酸發(fā)酵 3、

37、酵母菌是兼性厭氧菌型微生物真菌 ·酵母菌的生殖方式：出芽生殖(主要) 分裂生殖 孢子生殖4、在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖。 C6H12O66O26CO26H2O5、在無(wú)氧條件下，酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵。 C6H12O62C2H5OH2CO26、20左右最適宜酵母菌繁殖 酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在18-25 7、在葡萄酒自然發(fā)酵的過(guò)程中,起主要作用的是附著在葡萄皮表面的野生型酵母菌.在發(fā)酵過(guò)程中,隨著酒精濃度的提高,紅葡萄皮的色素也進(jìn)入發(fā)酵液,使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色.在缺氧 呈酸性的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長(zhǎng)繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無(wú)法適應(yīng)這一環(huán)境而受到制約。8、醋酸菌是單

38、細(xì)胞細(xì)菌(原核生物),代謝類型是異養(yǎng)需氧型,生殖方式為二分裂9、當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?2C2H5OH4O2CH3COOH6H2O10、控制發(fā)酵條件的作用醋酸菌對(duì)氧氣的含量特別敏感，當(dāng)進(jìn)行深層發(fā)酵時(shí)，即使只是短時(shí)間中斷通入氧氣，也會(huì)引起醋酸菌死亡。醋酸菌最適生長(zhǎng)溫度為3035，控制好發(fā)酵溫度，使發(fā)酵時(shí)間縮短，又減少雜菌污染的機(jī)會(huì)。有兩條途徑生成醋酸：直接氧化和以酒精為底物的氧化。11、實(shí)驗(yàn)流程：挑選葡萄沖洗榨汁酒精發(fā)酵果酒（醋酸發(fā)酵果醋）12、酒精檢驗(yàn)：果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可以用重鉻酸鉀來(lái)檢驗(yàn)。在酸性條

39、件下，重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。先在試管中加入發(fā)酵液2L，再滴入物質(zhì)的量濃度為3mol/L的H2SO43滴，振蕩混勻，最后滴加常溫下飽和的重鉻酸鉀溶液3滴，振蕩試管，觀察顏色13、充氣口是在醋酸發(fā)酵時(shí)連接充氣泵進(jìn)行充氣用的；排氣口是在酒精發(fā)酵時(shí)用來(lái)排出二氧化碳的；出料口是用來(lái)取樣的。排氣口要通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身相連接，其目的是防止空氣中微生物的污染。開(kāi)口向下的目的是有利于二氧化碳的排出。使用該裝置制酒時(shí)，應(yīng)該關(guān)閉充氣口；制醋時(shí)，應(yīng)該充氣口連接氣泵，輸入氧氣。疑難解答（1）你認(rèn)為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先除去枝梗？為什么？應(yīng)該先沖洗，然后再除去枝梗，以避免除去枝梗時(shí)引起葡萄破損，增加被雜菌

40、污染的機(jī)會(huì)。（2）你認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染？如：要先沖洗葡萄，再除去枝梗；榨汁機(jī)、發(fā)酵裝置要清洗干凈，并進(jìn)行酒精消毒；每次排氣時(shí)只需擰松瓶蓋，不要完全揭開(kāi)瓶蓋等。（3）制葡萄酒時(shí)，為什么要將溫度控制在1825？制葡萄醋時(shí)，為什么要將溫度控制在3035？溫度是酵母菌生長(zhǎng)和發(fā)酵的重要條件。20左右最適合酵母菌的繁殖。因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌，最適生長(zhǎng)溫度為3035，因此要將溫度控制在3035。課題二 腐乳的制作1、多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一種絲狀真菌。代謝類型是異養(yǎng)需氧型。生殖方式是孢子生殖。營(yíng)

41、腐生生活。2、原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。3、實(shí)驗(yàn)流程：讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制4、釀造腐乳的主要生產(chǎn)工序是將豆腐進(jìn)行前期發(fā)酵和后期發(fā)酵。前期發(fā)酵的主要作用：1.創(chuàng)造條件讓毛霉生長(zhǎng)。2.使毛酶形成菌膜包住豆腐使腐乳成型。后期發(fā)酵主要是酶與微生物協(xié)同參與生化反應(yīng)的過(guò)程。通過(guò)各種輔料與酶的緩解作用，生成腐乳的香氣。5、將豆腐切成3cm×3cm×1cm的若干塊。所用豆腐的含水量為70左右，水分過(guò)多則腐乳不易成形。*水分測(cè)定方法如下：精確稱取經(jīng)研缽研磨成糊狀的樣品510g(精確到0.0

42、2mg)，置于已知重量的蒸發(fā)皿中，均勻攤平后，在100105電熱干燥箱內(nèi)干燥4h，取出后置于干燥器內(nèi)冷卻至室溫后稱重，然后再烘30min，直至所稱重量不變?yōu)橹埂悠匪趾浚?）計(jì)算公式如下：(烘干前容器和樣品質(zhì)量-烘干后容器和樣品質(zhì)量)/烘干前樣品質(zhì)量·毛霉的生長(zhǎng)：條件：將豆腐塊平放在籠屜內(nèi)，將籠屜中的控制在1518，并保持一定的溫度。來(lái)源：1.來(lái)自空氣中的毛霉孢子，2. 直接接種優(yōu)良毛霉菌種時(shí)間：5天·加鹽腌制：將長(zhǎng)滿毛霉的豆腐塊分層整齊地?cái)[放在瓶中，同時(shí)逐層加鹽，隨著層數(shù)的加高而增加鹽量，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些。加鹽腌制的時(shí)間約為8天左右。·用鹽腌制時(shí)，

43、注意控制鹽的用量：鹽的濃度過(guò)低，不足以抑制微生物的生長(zhǎng)，可能導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì)；鹽的濃度過(guò)高會(huì)影響腐乳的口味·食鹽的作用：1.抑制微生物的生長(zhǎng)，避免腐敗變質(zhì)2.析出水分，是豆腐變硬，在后期制作過(guò)程中不易酥爛3.調(diào)味作用，給腐乳以必要的咸味4.浸提毛酶菌絲上的蛋白酶。·配制鹵湯：鹵湯直接關(guān)系到腐乳的色、香、味。鹵湯是由酒及各種香辛料配制而成的。鹵湯中酒的含量一般控制在12%左右。·酒的作用：1.防止雜菌污染以防腐2.與有機(jī)酸結(jié)合形成酯，賦予腐乳風(fēng)味3.酒精含量的高低與腐乳后期發(fā)酵時(shí)間的長(zhǎng)短有很大關(guān)系，酒精含量越高，對(duì)蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延長(zhǎng)；酒精含量過(guò)

44、低，蛋白酶的活性高，加快蛋白質(zhì)的水解，雜菌繁殖快，豆腐易腐敗，難以成塊。·香辛料的作用：1.調(diào)味作用2.殺菌防腐作用3.參與并促進(jìn)發(fā)酵過(guò)程·防止雜菌污染：用來(lái)腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干凈后要用沸水消毒。裝瓶時(shí)，操作要迅速小心。整齊地?cái)[放好豆腐、加入鹵湯后，要用膠條將瓶口密封。封瓶時(shí)，最好將瓶口通過(guò)酒精燈的火焰，防止瓶口被污染。疑難解答（1）利用所學(xué)的生物學(xué)知識(shí)，解釋豆腐長(zhǎng)白毛是怎么一回事？豆腐生長(zhǎng)的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴(yán)格地說(shuō)是直立菌絲，在豆腐中還有匍匐菌絲。（2）為什么要撒許多鹽，將長(zhǎng)毛的豆腐腌起來(lái)？鹽能防止雜菌污染，避免豆腐腐敗。（3）我們平常吃的豆腐，哪種適合用來(lái)做腐

45、乳？含水量為70%左右的豆腐適于作腐乳。用含水量高的豆腐制作腐乳，不易成形。（4）吃腐乳時(shí)，你會(huì)發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密的“皮”。這層“皮”是怎樣形成的呢？它對(duì)人體有害嗎？它的作用是什么？“皮”是前期發(fā)酵時(shí)在豆腐表面上生長(zhǎng)的菌絲（匍匐菌絲），對(duì)人體無(wú)害。它能形成腐乳的“體”，使腐乳成形。課題三 制作泡菜·制作泡菜所用微生物是乳酸菌 ，其代謝類型是異養(yǎng)厭氧 型。在無(wú)氧條件下，降糖分解為乳酸 。分裂方式是二分裂。反應(yīng)式為：C6H12O62C3H6O3+能量 含抗生素牛奶不能生產(chǎn)酸奶的原因是抗生素殺死乳酸菌。常見(jiàn)的乳酸菌有乳酸鏈球菌和乳酸桿菌。乳酸桿菌常用于生產(chǎn)酸奶。·亞硝酸鹽為白

46、色粉末，易溶于水，在食品生產(chǎn)中用作食品添加劑。·膳食中的亞硝酸鹽一般不會(huì)危害人體健康，國(guó)家規(guī)定肉制品中不超過(guò)30mg/kg，醬腌菜中不超過(guò)20mg/kg，嬰兒奶粉中不超過(guò)2mg/kg。亞硝酸鹽被吸收后隨尿液排出體外，但在適宜pH 、溫度和一定微生物作用下形成致癌物質(zhì)亞硝胺。亞硝酸鹽含量發(fā)酵時(shí)間（d）·一般在腌制 10 天后亞硝酸鹽含量開(kāi)始降低，故在10天之后食用最好*測(cè)定亞硝酸鹽含量的原理是在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與 N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料，與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)顯色液目測(cè)比較，估算泡菜中亞硝酸鹽含量。專題二 微生物的培養(yǎng)與

47、應(yīng)用課題一 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)·培養(yǎng)基：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)，是進(jìn)行微生物培養(yǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。·培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基 半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂（是從紅藻中提取的一種多糖，在配制培養(yǎng)基中用作凝固劑）后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基。微生物在固體培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)，可以形成肉眼可見(jiàn)的菌落。根據(jù)菌落的特征可以判斷是哪一種菌。液體培養(yǎng)基應(yīng)用于工業(yè)或生活生產(chǎn)，固體培養(yǎng)基應(yīng)用于微生物的分離和鑒定，半固體培養(yǎng)基則常用于觀察微生物的運(yùn)動(dòng)及菌種保藏等。·按照成分培養(yǎng)基可分為人工合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基是

48、用成分已知的化學(xué)物質(zhì)配制而成，其中成分的種類比例明確，常用于微生物的分離鑒定。天然培養(yǎng)基是用化學(xué)成分不明的天然物質(zhì)配制而成，常用于實(shí)際工業(yè)生產(chǎn)。·按照培養(yǎng)基的用途，可將培養(yǎng)基分為選擇培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是指在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物生長(zhǎng)，促進(jìn)所需要的微生物的生長(zhǎng)。鑒別培養(yǎng)基是根據(jù)微生物的特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品配制而成的，用以鑒別不同類別的微生物。·培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括 水 、 無(wú)機(jī)鹽 、 碳源 、 氮源 、生長(zhǎng)因子等。·碳源：能為微生物的代謝提供碳元素的物質(zhì)。如CO2、NaHCO3等無(wú)機(jī)碳源；糖類、石油、花生粉餅等

49、有機(jī)碳源。異養(yǎng)微生物只能利用有機(jī)碳源。單質(zhì)碳不能作為碳源。·氮源：能為微生物的代謝提供氮元素的物質(zhì)。如N2、NH3、NO3-、NH4+（無(wú)機(jī)氮源）蛋白質(zhì)、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有機(jī)氮源）等。只有固氮微生物才能利用N2。·培養(yǎng)基還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時(shí)須將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌是需要將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧型微生物是則需要提供無(wú)氧的條件·無(wú)菌技術(shù)·獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的入侵，要注意以下幾個(gè)方面：對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手，進(jìn)行

50、清潔和消毒。將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌。為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。無(wú)菌技術(shù)除了用來(lái)防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物污染外，還有什么目的？答：無(wú)菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。·消毒與滅菌的區(qū)別消毒指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。消毒方法常用煮沸消毒法，巴氏消毒法（對(duì)于一些不耐高溫的液體）還有化學(xué)藥劑（如酒精、氯氣、石炭酸等）消毒、紫外線消毒。滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微

51、生物，包括芽孢和孢子。滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。滅菌方法：接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法；玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法，所用器械是干熱滅菌箱 ； 培養(yǎng)基、無(wú)菌水等使用高壓蒸汽滅菌法，所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋 。表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法，所用器械是紫外燈 。比較項(xiàng)理化因素的作用強(qiáng)度消滅微生物的數(shù)量芽孢和孢子能否被消滅消毒較為溫和部分生活狀態(tài)的微生物不能滅菌強(qiáng)烈全部微生物能制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基（1）方法步驟：計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。（2）倒平板操作的步驟：將滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上，右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手拔出棉塞。右手拿錐形

52、瓶，將瓶口迅速通過(guò)火焰。用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開(kāi)一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基（約1020mL）倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。等待平板冷卻凝固，大約需510min。然后，將平板倒過(guò)來(lái)放置，使培養(yǎng)皿蓋在下、皿底在上。·倒平板操作的討論1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50左右時(shí)，才能用來(lái)倒平板。你用什么辦法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？提示：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺(jué)錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了。2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰？答：通過(guò)灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？答：平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)

53、水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。4.在倒平板的過(guò)程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來(lái)培養(yǎng)微生物嗎？為什么？答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。純化大腸桿菌（1）微生物接種的方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。（2）平板劃線法是通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作。將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體，這就是菌落。（3）稀釋涂布平板

54、法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。分為系列稀釋操作和涂布平板操作兩步。（4）用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種的目的是：使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落，以便于純化菌種。（5）平板劃線法操作步驟：將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅。在火焰旁冷卻接種環(huán)，并打開(kāi)棉塞。將試管口通過(guò)火焰。將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液。將試管通過(guò)火焰，并塞上棉塞。左手將皿蓋打開(kāi)一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。注意不要?jiǎng)澠婆囵B(yǎng)皿。灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第 一區(qū)域劃線

55、的末端開(kāi)始往第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)以上操作，在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將最 后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。將平板倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。·平板劃線操作的討論1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端，從而通過(guò)劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。3.在作第二