日立Chromaster液相色譜儀操作、清潔、維護(hù)、保養(yǎng)規(guī)程

1、編 號(hào)頁(yè) 數(shù)1 / 12制訂部門技質(zhì)部頒發(fā)部門技質(zhì)部安琪酵母股份有限公司藥業(yè)分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色譜液相色譜儀操作、清潔、維護(hù)、保儀操作、清潔、維護(hù)、保養(yǎng)規(guī)程養(yǎng)規(guī)程生效日期： 年 月 日文文 件件 目目 錄錄一、一、目的目的 .2 2二、二、范圍范圍 .2 2三、三、責(zé)任者責(zé)任者 .2 2四、四、內(nèi)容內(nèi)容 .2 2五、五、修訂歷史修訂歷史 .2 2六、六、相關(guān)記錄相關(guān)記錄 .3 3你的簽名表明你已清楚了解本文件及附件內(nèi)容，充分理解并認(rèn)可本文件的所有條款。部門部門簽簽 名名日日 期期起草人起草人技質(zhì)部技質(zhì)部審核人審核人技質(zhì)部技質(zhì)部審核人審核人機(jī)修車間機(jī)修

2、車間QAQA 審閱審閱技質(zhì)部技質(zhì)部批準(zhǔn)人批準(zhǔn)人質(zhì)量管理負(fù)責(zé)人質(zhì)量管理負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)人批準(zhǔn)人總經(jīng)理總經(jīng)理本文件根據(jù)需要應(yīng)分發(fā)于以下部門：技質(zhì)部生產(chǎn)部辦公室調(diào)度室制劑車間原料藥車間機(jī)修車間中心化驗(yàn)室倉(cāng)儲(chǔ)檔案室編 號(hào)安琪酵母股份有限公司藥業(yè)分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色譜儀操作、液相色譜儀操作、清潔、維護(hù)、保養(yǎng)規(guī)程清潔、維護(hù)、保養(yǎng)規(guī)程頁(yè) 數(shù)2 / 12一、一、 目的目的1、建立一個(gè)日立Chromaster液相色譜儀操作、清潔、維護(hù)、保養(yǎng)規(guī)程。二、二、 范圍范圍1、日立 Chromaster 液相色譜儀。三、三、 責(zé)任者責(zé)任者1、中心化驗(yàn)室主任，操作者。四、四、 內(nèi)容內(nèi)容

3、1、儀器型號(hào)及組成：日立 Chromaster 液相色譜儀模塊泵自動(dòng)進(jìn)樣器柱溫箱二極管陣列檢測(cè)器（DAD）熒光檢測(cè)器蒸發(fā)散射光檢測(cè)器(ELSD)型號(hào)5110521053105430544060002、工作環(huán)境溫度435，在測(cè)量期間溫度波動(dòng)5；濕度25%85%電源220V 50HZ環(huán)境無(wú)腐蝕氣體、磁場(chǎng)、陽(yáng)光直射3、操作規(guī)程3.1 使用前準(zhǔn)備a）每次開(kāi)機(jī)前先檢查電源連接情況,確保電源正確的連接。b）每次開(kāi)機(jī)前檢驗(yàn)流動(dòng)相,以保證足夠量的流動(dòng)相。3.2 開(kāi)機(jī) 確認(rèn)電源連接正確后，打開(kāi)各使用模塊電源。3.3 打開(kāi)與設(shè)備連接的電腦，在電腦桌面雙擊圖標(biāo)，使操作系統(tǒng)與設(shè)備聯(lián)機(jī)，進(jìn)入登錄窗口。3.4 第一次使用

4、儀器時(shí)應(yīng)對(duì)儀器進(jìn)行配置。選擇配置，進(jìn)入儀器配置界面3.4.1 點(diǎn)擊“增加” ，選擇連接的儀器編 號(hào)安琪酵母股份有限公司藥業(yè)分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色譜儀操作、液相色譜儀操作、清潔、維護(hù)、保養(yǎng)規(guī)程清潔、維護(hù)、保養(yǎng)規(guī)程頁(yè) 數(shù)3 / 123.4.2 打開(kāi)儀器，自動(dòng)檢測(cè)配置的儀器模塊編 號(hào)安琪酵母股份有限公司藥業(yè)分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色譜儀操作、液相色譜儀操作、清潔、維護(hù)、保養(yǎng)規(guī)程清潔、維護(hù)、保養(yǎng)規(guī)程頁(yè) 數(shù)4 / 123.4.3 確認(rèn)自動(dòng)檢測(cè)所有模塊，確認(rèn)泵的信息、自動(dòng)進(jìn)樣器的信息、柱溫箱信息（選擇control off a

5、t shutdown） 、檢測(cè)器信息（選擇 lamp off at shutdown）3.4.4 配置儀器，點(diǎn)擊向右箭頭，命名儀器名稱。3.5 輸入用戶名、密碼，選擇創(chuàng)建新工程登錄。3.6 儀器準(zhǔn)備3.6.1 排空 打開(kāi)設(shè)備監(jiān)視器，打開(kāi)排空閥，設(shè)流速為 5，流量 100%，點(diǎn)擊“清洗” ，分別將四條管路排氣泡，結(jié)束之后關(guān)閉排空閥。3.6.2 自動(dòng)進(jìn)樣器清洗 點(diǎn)擊“清洗” ，依次對(duì)柱塞、注射器進(jìn)行清洗3.7 方法設(shè)置點(diǎn)擊“新建方法” ，在“方法”下選擇“事件表”按照檢測(cè)需要對(duì)自動(dòng)進(jìn)樣器、LC 梯度、液相色譜控制、測(cè)量、采集、恒溫器、積分、計(jì)算進(jìn)行設(shè)置，設(shè)置完成后點(diǎn)擊“發(fā)送方法”3.8 基線 方法

6、發(fā)送儀器運(yùn)行穩(wěn)定之后，點(diǎn)擊“數(shù)據(jù)采集”查看基線3.9 序列設(shè)置及運(yùn)行 點(diǎn)擊“序列” ，分別對(duì)樣品起始位置“SV” 、結(jié)束位置“EV” 、樣品編 號(hào)安琪酵母股份有限公司藥業(yè)分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色譜儀操作、液相色譜儀操作、清潔、維護(hù)、保養(yǎng)規(guī)程清潔、維護(hù)、保養(yǎng)規(guī)程頁(yè) 數(shù)5 / 12ID、樣品名、進(jìn)樣量、進(jìn)樣體積、文件名、方法名、報(bào)告格式等進(jìn)行設(shè)置，設(shè)置完畢后點(diǎn)擊“序列檢查” 、 “序列保存”再“運(yùn)行” 。3.10 ELSD 檢測(cè)器操作3.10.1開(kāi)機(jī)：打開(kāi) ELSD 電源，并通過(guò)面板將 ELSD 設(shè)置為“運(yùn)行(run)”狀態(tài)。3.10.2通氣：打開(kāi)并逐步調(diào)節(jié)

7、供氣壓力至 0.5Mpa。 （注意：在使用鋼瓶氣源時(shí)，通氣前主閥與減壓閥應(yīng)處于全關(guān)狀態(tài)；擰開(kāi)減壓閥時(shí)需小心操作、將供氣壓力從小到大逐步調(diào)高至 0.5Mpa，最高壓力不得超過(guò) 0.55Mpa 或 80psi。 ）3.10.3通氣加熱平衡：根據(jù)檢測(cè)的需要設(shè)定加熱溫度和氣體流速，然后讓儀器平衡 10 分鐘。平衡后基線噪音應(yīng)小于 1mV，否則需要進(jìn)行故障排查（如氣體清潔度及光源穩(wěn)定性） 。3.10.4流動(dòng)相平衡：確保流動(dòng)相清潔無(wú)污染，不含不揮發(fā)的改性劑。將柱后流份接入 ELSD，然后平衡 5 分鐘，基線噪音應(yīng)小于 2mV，可通過(guò)調(diào)整漂移管溫度和氣流量使噪音最小化。如噪音始終很高，需要進(jìn)行故障排查（如氣

8、源、流動(dòng)相或柱后流出物是否被污染） 。3.10.5測(cè)試后清洗：如測(cè)試時(shí)使用腐蝕性的流動(dòng)相（含強(qiáng)酸或強(qiáng)堿） ，建議將 ELSD 繼續(xù)連接在柱上清洗約 30 分鐘。在使用高水含量的流動(dòng)相清洗柱和 ELSD 時(shí)，相應(yīng)調(diào)高 ELSD 漂移管加熱溫度和氣流量以利于流動(dòng)相揮發(fā)。3.10.6關(guān)機(jī)：停止通入流動(dòng)相后保持 ELSD 繼續(xù)運(yùn)行 10 分鐘?？蓪?ELSD 設(shè)置為“待機(jī)(standby)”狀態(tài)則 ELSD 會(huì)自動(dòng)關(guān)閉氣閥、光源并停止加熱，等待下次啟動(dòng)工作。或者，可以關(guān)閉供氣源 1 分鐘后，完全關(guān)閉 ELSD 電源。3.10 數(shù)據(jù)處理 點(diǎn)擊“數(shù)據(jù)處理”進(jìn)入數(shù)據(jù)處理界面，打開(kāi)需要處理的色譜圖。3.10.

9、1 單擊右鍵，選擇“基線” 、 “鎖定”編 號(hào)安琪酵母股份有限公司藥業(yè)分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色譜儀操作、液相色譜儀操作、清潔、維護(hù)、保養(yǎng)規(guī)程清潔、維護(hù)、保養(yǎng)規(guī)程頁(yè) 數(shù)6 / 123.10.2 選擇鎖定基線后，指定不需要積分的區(qū)域編 號(hào)安琪酵母股份有限公司藥業(yè)分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色譜儀操作、液相色譜儀操作、清潔、維護(hù)、保養(yǎng)規(guī)程清潔、維護(hù)、保養(yǎng)規(guī)程頁(yè) 數(shù)7 / 123.10.3 定峰，為目標(biāo)峰命名編 號(hào)安琪酵母股份有限公司藥業(yè)分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色譜儀操作、液相色譜儀操作、清

10、潔、維護(hù)、保養(yǎng)規(guī)程清潔、維護(hù)、保養(yǎng)規(guī)程頁(yè) 數(shù)8 / 123.10.4 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線 3.10.4.1 點(diǎn)擊“新建” ，創(chuàng)建一個(gè)新的標(biāo)準(zhǔn)曲線并命名。3.10.4.2 打開(kāi)校準(zhǔn)下面的“選項(xiàng)”設(shè)置校準(zhǔn)選項(xiàng)3.10.4.3 設(shè)置校準(zhǔn)選項(xiàng)編 號(hào)安琪酵母股份有限公司藥業(yè)分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色譜儀操作、液相色譜儀操作、清潔、維護(hù)、保養(yǎng)規(guī)程清潔、維護(hù)、保養(yǎng)規(guī)程頁(yè) 數(shù)9 / 123.10.4.4 打開(kāi)標(biāo)準(zhǔn)曲線的第一個(gè)標(biāo)樣色譜圖，選擇“增加峰” ，為目標(biāo)峰定峰，修改化合物名稱和峰類型，輸入含量編 號(hào)安琪酵母股份有限公司藥業(yè)分公司日立日立 ChromasterChromas

11、ter 液相色譜儀操作、液相色譜儀操作、清潔、維護(hù)、保養(yǎng)規(guī)程清潔、維護(hù)、保養(yǎng)規(guī)程頁(yè) 數(shù)10 / 123.10.4.5 打開(kāi)第二個(gè)濃度的標(biāo)樣色譜圖，選擇“增加現(xiàn)有的” ，然后輸入等級(jí) 2 的含量；打開(kāi)第三個(gè)濃度的標(biāo)樣色譜圖，輸入含量，創(chuàng)建等級(jí) 3；打開(kāi)第 4 個(gè)濃度的標(biāo)樣色譜圖，輸入含量，創(chuàng)建等級(jí) 4，所有濃度處理完后，可在左下角化合物，查看標(biāo)樣的標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.10.4.6 打開(kāi)未知樣品的色譜圖，使用得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算未知樣，單擊“設(shè)置”選擇已有的標(biāo)準(zhǔn)曲線，選擇 ESTD 外標(biāo)法，左下角查看計(jì)算結(jié)果、性能等編 號(hào)安琪酵母股份有限公司藥業(yè)分公司日立日立 ChromasterChromaster 液

12、相色譜儀操作、液相色譜儀操作、清潔、維護(hù)、保養(yǎng)規(guī)程清潔、維護(hù)、保養(yǎng)規(guī)程頁(yè) 數(shù)11 / 124、清潔維護(hù)及保養(yǎng)4.1 檢測(cè)器的維護(hù)和保養(yǎng)4.1.1 檢測(cè)器是液相色譜儀器的數(shù)據(jù)收集部分，由很多的電子和光學(xué)元件組成。禁止拆卸更動(dòng)儀器內(nèi)部元件防止損壞或影響準(zhǔn)確度。4.1.2 儀器內(nèi)部的流通池是流動(dòng)相流過(guò)的元件，樣品的干凈程度和微生物的生長(zhǎng)都可能污染流通池，導(dǎo)致無(wú)法檢測(cè)或檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)，所以在使用了一段時(shí)間以后要先用水沖洗流通池和管路再換有機(jī)溶劑沖洗。4.1.3 當(dāng)儀器檢測(cè)數(shù)據(jù)出現(xiàn)明顯波動(dòng)，基線噪音變大時(shí)要沖洗儀器管路，沖洗后如果還是沒(méi)有改善就應(yīng)該檢測(cè)氘燈能量，如果能量不足就因更換新的氘燈。4.1.4 儀

13、器在每次使用完了以后都要用水和一定濃度的有機(jī)溶劑沖洗管路，保證下次使用時(shí)管路和系統(tǒng)的清潔。4.1.5 氣源純度（氮?dú)饣蚩諝猓┍仨氝_(dá)到 99.9%，否則引起基線噪音。4.1.6 對(duì)于鋼瓶氣源，ELSD 操作結(jié)束后應(yīng)完全關(guān)閉主閥與減壓閥。要進(jìn)行 ELSD 操作時(shí)，先打開(kāi) ELSD 電源，然后依次打開(kāi)鋼瓶主閥與減壓閥，小心操作減壓閥，將供氣壓力逐漸提高到 0.5Mpa。4.2 色譜柱的維護(hù)和保養(yǎng)編 號(hào)安琪酵母股份有限公司藥業(yè)分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色譜儀操作、液相色譜儀操作、清潔、維護(hù)、保養(yǎng)規(guī)程清潔、維護(hù)、保養(yǎng)規(guī)程頁(yè) 數(shù)12 / 124.2.1 所使用的流動(dòng)相均應(yīng)為 HPLC 級(jí)或相當(dāng)于該級(jí)別的，在配置過(guò)程中所有非 HPLC 級(jí)的試劑或溶液均經(jīng) 0.45um 薄膜過(guò)濾。而且流動(dòng)相使用前都經(jīng)過(guò)超聲儀超聲脫氣后才使用。4.2.2 所使用的水必須是經(jīng)過(guò)蒸餾純化后再經(jīng)過(guò) 0.45um 水膜過(guò)濾后使用，所有試液均新用新配。并且在進(jìn)樣的樣品都必須經(jīng)過(guò) 0.45um 薄膜針筒過(guò)濾后進(jìn)樣。4.2.3 在儀器檢測(cè)完了后，均使用水：甲醇=90：10 清洗管路和色譜柱 1