氮的相關(guān)指標檢測方法

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上一、沉積物總氮測定方法：凱式定氮法1.1方法原理 凱式定氮法是測定化合物或混合物中總氮的一種常用方法，它是用濃硫酸消煮，借催化劑和增溫劑等的作用加速有機質(zhì)分解，并使有機氮轉(zhuǎn)化為氨氮而進入溶液，最后用標準酸滴定蒸餾出的氨，以氨氮的量反應(yīng)總氮含量。具體反應(yīng)式如下 2NH2(CH2)2COOH + 13H2SO4 = (NH4)2SO4 + 6CO2 + 12SO2 + 16H2O (NH4)2SO4 + 2NaOH = 2NH3 + 2 H2O + Na2SO4 2 NH3 + 4H3BO3 = (NH4)2B4O7 + 5 H2O (NH4)2B4O7 + H2SO4

2、+ 5 H2O = (NH4)2SO4 + 4H3BO3或 (NH4)2B4O7 + 2HCI+ 5 H2O = 2NH4CI+ 4H3BO3凱式定氮儀的主要工作原理是Kjeldahl蒸餾法測定氨氮含量，測氮時水樣不經(jīng)消解直接加堿調(diào)為弱堿性蒸餾，用硼酸溶液吸收，然后用電位滴定儀滴定。 硼酸溶液吸收氨后，溶液pH值上升，用硫酸溶液滴定至初始pH值，pH計控制滴定終點，當接近終點時，降低滴定速度，利用消耗硫酸的量計算氨氮含量。1.2 需要的設(shè)備與實驗條件（1）分析天平：精度0.0001g；（2）自動凱式定氮分析儀；（3）通風櫥；（4）消煮爐；（5）烘干箱；（6）pH計：精度0.01pH單位；（7）

3、沸水浴器；（8）干燥器。1.3所需試劑及操作步驟1.所需試劑（1）40NaOH：稱取400g NaOH加入1000 ml蒸餾水中，邊加邊攪動，防止黏結(jié)。（2）甲基紅-溴甲酚綠指示劑：0.1g甲基紅和0.07g溴甲酚綠溶解于100 ml乙醇中。（3）混合加速劑：硫酸鉀、硫酸銅、硒粉按100:10:1的比例混合，研磨，過80目篩。（4）0.05 mol/L的鹽酸：4.1 ml的鹽酸(HCI)定容至1000 ml，標定。（5）0.02 mol/L的碳酸鈉溶液：稱經(jīng)過250干燥4h的1.06g碳酸鈉（Na2CO3）溶解到無二氧化碳水中，定容到1000 ml 。貯存于塑料瓶中，保存不超過一周。（6）無二

4、氧化碳水：蒸餾水煮沸15 min，冷卻待用。（7）甲基橙指示劑:0.05g溶于100 ml水中。（8）硼酸-指示劑溶液：40g硼酸（H3BO3）溶解到1L水中，每升中加10ml甲基紅-溴甲酚綠指示劑，用稀的酸或者堿調(diào)節(jié)至微紅，pH為4.8。2.操作步驟（1）稱樣 稱取過100目篩干燥沉積物樣1.000g，含氮約1 mg。（2）消煮（消煮儀）把稱量好的樣品放入消煮管中，加入0.5-1.0ml無離子水，再加入2g加速劑和5ml濃硫酸，搖勻，消煮管頂部加彎頸漏斗。打開消煮儀，設(shè)置溫度。消煮完后，冷卻，待測定。消煮時做兩個空白樣，兩個標樣。（3）測定用凱式定氮儀測定總氮。1.4需要注意的要點 （1）儀

5、器準備：首先，檢查水桶里是否裝滿去離子水；再次，檢查硼酸桶里是否裝滿2的硼酸，堿桶里是否裝滿30的堿，接通電源和自來水。 （2）消煮時的溫度要求控制在360-410之間，低于360消化不容易完全，特別是雜環(huán)氮化合物不易分解，使結(jié)果偏低，高于410則容易引起氨的損失。（3）消煮過程中鹽的濃度應(yīng)控制在0.35-0.45g/ml1.5結(jié)果計算湖泊沉積物總氮含量的計算，根據(jù)測試的指標帶入以下公式 土壤全氮（g/kg）=V-V0×c×0.014×5025×100%m式中，V為滴定25ml待測液時消耗酸的體積(ml)；V0為滴定空白液時耗酸體積(ml)；c為硫酸標準

6、溶液濃度（mol/L）；m為沉積物樣品質(zhì)量（g）。專心-專注-專業(yè)二、沉積物總氮測定方法：堿性過硫酸鉀氧化紫外分光光度計法2.1方法原理土壤中的無機和有機氮化合物，在高溫加壓下經(jīng)堿性過硫酸鉀氧化后，均被轉(zhuǎn)化成硝酸鹽，然后利用紫外分光光度法進行測定。此方法具有簡便、經(jīng)濟等優(yōu)點。過硫酸鉀（K2S2O8）在60水溶液中分解，生成大量H+和O2。反應(yīng)方程式K2S2O8 + H2O2KHSO4 + 12O2KHSO4 HSO4- + K+HSO4- SO42-+ H+2.2需要的設(shè)備與實驗條件（1）分析天平：精度0.0001g；（2）紫外分光光度計；（3）高壓滅菌鍋；（4）烘箱；（5）干燥器。2.3所需

7、試劑及操作步驟1.所需試劑（1）堿性過硫酸鉀溶液：稱取40g過硫酸鉀（K2S2O8），15g氫氧化鈉（NaOH），溶于去離子水中稀釋至1000ml。溶液存放于聚乙烯瓶內(nèi)，可貯存一周。（2）（1+9）鹽酸：1體積濃鹽酸（HCI質(zhì)量分數(shù)為=36.7）混合9體積超純水。（3）硝酸鉀標準貯備液：稱取0.7218g經(jīng)105-110烘干4h的優(yōu)級純硝酸鉀（KNO3）溶于去離子水中，移至1000ml容量瓶中定容。每毫升此溶液含100g氮。在0-10暗處保存，或加入2ml三氯甲烷為保護劑，至少可穩(wěn)定6個月。（4）硝酸鉀標準使用液：將貯備液用去離子水稀釋10倍，每毫升此溶液含10g氮。2.操作步驟（1）標準曲線

8、繪制取數(shù)支25ml具塞比色管，分別加入硝酸鉀標準使用溶液0ml、0.5 ml、1.0 ml、2.0 ml、3.0 ml、5.0 ml、7.0 ml、8.0 ml，加水至10ml標線。加入5ml堿性過硫酸鉀溶液，塞緊磨口塞，用紗布及紗繩裹緊管塞，以防止濺出。將比色管在高壓消煮鍋中與121消煮30min，冷卻。加入1ml（1+9）鹽酸，定容至25ml，混勻。在220nm和275nm，以超純水作參比，測量其吸光度。校正比色值與總氮濃度作標準曲線。（2）樣品測定a.消化稱0.1g過100目篩的沉積物樣品于25ml比色管中，用H2O定容至10ml，加入5ml堿性過硫酸鉀溶液，加蓋搖勻。用紗布扎緊蓋子放入

9、高壓滅菌鍋中，121下高壓消化30min，冷卻，空白樣以10ml水代替樣品。b.定容測定加入1ml（1+9）鹽酸，定容至25ml，混勻。在220nm和275nm，以超純水作參比，測量其吸光度。2.4需要注意的要點當測定在接近監(jiān)測線時，必須控制空白試驗的吸光度A不超過0.03。超過此值，則要檢查所用水、試劑、器皿和高壓消煮鍋的壓力等因素。2.5結(jié)果計算湖泊沉積物總氮含量是根據(jù)測試的指標代入以下公式計算得到的沉積物總氮（g/kg）=c×nm式中，c為校正后的吸光度A由標準曲線得到的總氮質(zhì)量；A為校正吸光度，A=A220-2A275;m為沉積物干重；n為分取倍數(shù)。三、沉積物氮磷釋放潛能研究

10、方法 3.1方法原理 根據(jù)可交換態(tài)營養(yǎng)鹽的定義提出了定量研究沉積物釋放潛能的無限稀釋外推法（Infinite Dilution Extrapolation method，IDE法），即在一定溫度下取沉積物在一系列水土比中振蕩，使其達到吸附/解吸平衡，測定響應(yīng)營養(yǎng)鹽的平衡濃度，當水土比無限大時，不同形態(tài)營養(yǎng)鹽的最大潛能釋放量。3. 2需要的設(shè)備與實驗條件（1）分析天平：精度0.0001g；（2）紫外可見分光光度計；（3）離心機（4）恒溫振蕩器3.3 所需試劑及操作步驟 磷1. 所需試劑（1）10抗壞血酸：稱取10g抗壞血酸，用水溶解定容至100ml，貯存于棕色試劑瓶低溫保存，使用時若溶液顏色變黃

11、則需重配。（2）鉬酸鹽溶液：溶解13g鉬酸銨（四水合物）于100ml水中。溶解0.35g酒石酸銻氧鉀于100ml水中。在不斷攪拌下，將鉬酸銨溶液徐徐加到300ml(1+1)硫酸中，加酒石酸銻氧鉀溶液，并且混合均勻，貯存于棕色瓶中于4保存，至少穩(wěn)定2個月。（3）0.02mol/L KCI溶液。（4）磷酸鹽貯備液：將優(yōu)級純磷酸二氫鉀于110干燥2h，在干燥器中放冷，稱取0.2197g，溶解至1000ml容量瓶中，加（1+1）硫酸5ml，用水稀釋至標線。（5）磷酸鹽標準溶液：取10ml磷酸鹽貯備液，用水定容至250ml，此溶液每毫升含2g磷，現(xiàn)用現(xiàn)配。2.操作步驟（1）標準曲線的繪制a.取25ml比

12、色管7支，分別吸取磷酸鹽標準液0、0.5ml、1ml、1.5ml、2ml、3ml、5ml、10ml，定容至25ml。b.加入0.5ml的10%抗壞血酸，搖勻，30s后加入1ml鉬酸鹽溶液充分混勻 顯色15min，以超純水作參比，在700nm比色。用磷濃度與比色值做標準曲 線。（2）樣品測定a.按不同水土質(zhì)量比25、50、100、200、500、1000、1500、2500、5000，稱取不同質(zhì)量的沉積物干樣于100ml聚乙烯離心管中。b.向離心管中加入0.02mol/L的KCI溶液50ml。c.蓋好離心管蓋，將其置于恒溫振蕩器中（25±1，200r/min）振蕩24h。d.振蕩結(jié)束后

13、，取出離心管在5000r/min條件下離心15min，上清液用0.45m濾膜抽濾。e.取適量濾液于25ml比色管中，用蒸餾水定容至25ml，加入0.5ml的10%抗壞血酸，搖勻，30s后加入1ml鉬酸鹽溶液充分混勻，顯色15min，以超純水作比，在700nm比色。f.利用水土比與釋放量做曲線，獲得最大釋放量即釋放潛能。 氨氮1.所需試劑（1）納氏試劑：稱取16gNaOH，溶于ml水中，充分冷卻至室溫。另稱取7g碘化鉀和10g碘化汞（HgI2）溶于水，然后將此溶液在攪拌下徐徐注入NaOH溶液中，用水稀釋至100ml，貯存于聚乙烯瓶中，密塞保存。（2）酒石酸鉀鈉溶液：稱取50g酒石酸鉀鈉（KNaC

14、4H4O44H2O）溶于100ml水中，加熱煮沸以去除氨，放冷，定容至100ml。（3）銨標準貯備溶液：稱取3.8190g經(jīng)100干燥過的優(yōu)級純氯化銨（NH4CI）溶于水中，定容至1000ml（每毫升此溶液含1mg氨氮）。（4）銨標準使用溶液：取5ml銨標準貯備液，定容至500ml。（每毫升此溶液含0.01mg的氨）。（5）0.01mol/L的CaCI2或0.02mol/LKCI溶液。2.操作步驟（1）NH4+-N標線繪制a.取7支50ml比色管，分別加入0ml、0.25 ml、0.50 ml、1.50 ml、2.50 ml、3.50 ml、5.00 ml銨標準使用液，用水定容至50 ml。b

15、.加1 ml酒石酸鉀鈉，1.5 ml納氏試劑，混勻；放置10min，以超純水做參比，在420nm測吸光度；由測得的吸光度減去零濃度空白吸光度后，得到校正吸光度，繪制以氨氮含量（mg）對校正吸光度的標準曲線。（2）樣品測定1000、1500、a.將新鮮沉積物冷凍干燥后，磨碎過100目篩備用。b.按不同水土質(zhì)量比25、50、100、200、500、1000、1500、2500、5000，稱取不同質(zhì)量的沉積物干樣于100ml聚乙烯離心管中。c.向離心管中加入0.01mol/L的CaCI2溶液50ml（或0.02mol/L的KCI）。d.蓋好離心管蓋，將其置于恒溫振蕩器中（25±1，200r

16、/min）振蕩6h。e.振蕩結(jié)束后，取出離心管在5000 r/min條件下離心15min，上清液用0.45m濾膜抽濾。f.取適量的濾液于50ml比色管中，用水定容至50ml。加1ml酒石酸鉀鈉，1.5ml納氏試劑，混勻；放置10min，以超純水做參比，在420nm測吸光度。g.利用水土比與釋放量做曲線，獲得最大釋放量即釋放潛能。3.4需要注意的要點（1）根據(jù)沉積物樣品不同要適當調(diào)整水土比以達到釋放量平衡。（2）當沉積物取用量較少時，慎重選用消除干擾的方法。3.5 結(jié)果計算在無限稀釋狀態(tài)下，根據(jù)經(jīng)典Langmuir方程推導(dǎo)得到如下式子：-1qe=1qi+SKPqiqe=qe-qi=Ci-CeS式

17、中，qe為平衡時單位質(zhì)量沉積物所釋放磷酸鹽的量；qi為單位質(zhì)量沉積物在初始狀態(tài)下釋放磷酸鹽的量；S為溶液中沉積物水土質(zhì)量比：Ci為最小水土比沉積物釋放量；Ce為平衡時沉積物釋放量；kp為分配系數(shù)，kp=qe/Ce。若令Y=-qe，m=1q，X=1S，n=KP/q；則上式可變形為1Y=m+nX因此，當沉積物水土比趨向無窮大時，X趨向無窮大，Y趨向1/m，則潛在可交換性氮磷趨于某個常數(shù)。這樣，對數(shù)據(jù)進行擬合得到m，n，進而計算出qi與Kp，得到IDE-P和IDE-N四、沉積物可轉(zhuǎn)化態(tài)氮形態(tài)測定方法4.1方法原理各形態(tài)氮的釋放順序及其與沉積物結(jié)合的牢固程度是一致的，結(jié)合的越松弛，越容易釋放。利用化學(xué)

18、試劑模擬相應(yīng)環(huán)境條件，依次提取出各種形態(tài)氮，然后用比色法測定提取液中的總氮含量，即為各種形態(tài)可轉(zhuǎn)化態(tài)氮的含量。4.2需要的設(shè)備與實驗條件（1）分析天平：精度0.0001g；（2）紫外分光光度計；（3）高壓滅菌鍋；（4）烘箱；（5）干燥器；（6）離心機。4.3所需試劑及操作步驟1.所需試劑（1）提取液試劑a.1mol/L KCI溶液。b.HAc-NaAc溶液（pH=5）：將60g冰醋酸加水配制成900ml溶出，再加入26.6g氫氧化鈉，充分溶解后，再加水定容至1000ml即可。c.0.1mol/L NaOH。d.0.1mol/L 鹽酸。e.堿性過硫酸鉀氧化劑（NaOH:0.24 mol/L，K2

19、S2O8：20 g/L）。（2）硝態(tài)氮測定試劑a.鎘屑：直徑為1mm的鎘屑、鎘?；蚝＞d鎘。b.鹽酸溶液（2 mol/L）：量取83.5ml鹽酸（HCI，密度為1.18g/ml）c.硫酸銅溶液（10g/L）稱取10g硫酸銅（CuSO4.5H2O）溶于水并稀釋定容至1000ml，混勻。盛于試劑瓶中。d.硝酸鹽標準貯備溶液（100ug/ml）：稱取0.7218g硝酸鉀（KNO3，預(yù)先在110下烘干1h，置于干燥器中冷卻），溶于少量水中，用水稀釋定容至1000ml，混勻；加1ml三氯甲烷（CHCI3），混合。貯存于1000ml棕色試劑瓶中，于4冰箱中保存。此溶液1.00ml含硝酸鹽氮100ug，有效期

20、為半年。e.硝酸鹽標準使用溶液（10ug/ml）：量取10.0ml硝酸鉀標準貯備溶液，于100ml容量瓶中，加水稀釋至標線，混勻。此溶液100ml含硝酸鹽氮10.0ug/ml，臨用前配制。f.氯化銨緩沖溶液：稱取10g氯化銨（NH4CI，優(yōu)級純）溶于1000ml水，用約1.5ml氨水（NH3 .H2O，密度為0.90g/ml）調(diào)節(jié)pH至8.5。此液用量較大，可一次配制5L以上。g.磺胺溶液（10g/L）：稱取5.0g磺胺（NH2SO2C6H4NH2），溶于350ml鹽酸溶液（1+6），用水稀釋至500ml，混勻。盛于棕色試劑瓶中，有效期為2個月。h.鹽酸萘乙二胺溶液（1g/L）：稱取0.50g

21、鹽酸萘乙二胺（C10H7NHCH2NH2.2HCI），溶于500.0ml水中，混勻。盛于棕色試劑瓶中，于4冰箱內(nèi)保存，有效期為1個月。i.活化溶液：量取14ml硝酸鹽標準貯備溶液于1000ml容量瓶中，加氯化銨溶液至標線，混勻，貯存于試劑瓶中備用。（3）氨態(tài)氮測定試劑1）無銨水選擇以下兩種方法制備a.將蒸餾水通過一個長30cm，直徑為1-2cm的陽離子交換樹脂（使用前轉(zhuǎn)為氫型樹脂），收集于玻璃瓶中，塞緊瓶蓋； b.將1L蒸餾水放入蒸餾水器中，加入15ml 0.5 mol/L氫氧化鈉溶液和2.0g過硫酸鉀（K2S2O8）。先敞口煮沸10min，然后接好冷凝器，收集餾出液于聚乙烯瓶中，直至蒸餾器中

22、的水剩下150ml左右，所收集的蒸餾水即為無氨蒸餾水，蓋緊瓶塞，待用。2）氫氧化鈉溶液（密度為400g/L）稱取400g氫氧化鈉，溶于2000ml無氨蒸餾水中，蒸煮濃縮至1000ml，冷卻后，貯存于聚乙烯瓶中。3）鹽酸溶液（1+1）量取500ml濃鹽酸（密度為1.18g/ml）和500ml水混合，冷卻后貯存于試劑瓶中。4）溴酸鉀-溴化鉀溶液稱取2.8g溴酸鉀（KBrO3）和20.0g溴化鉀（KBr）溶于1000ml無銨水中，低溫保存，此溶液有效期1年。5）次溴酸鈉氧化劑溶液吸取1.0ml溴酸鉀-溴化鉀溶液于棕色試劑瓶中，加入49ml水，再加入3.0ml鹽酸溶液，迅速蓋上瓶蓋，混勻，置于暗處5m

23、in，jiaru50ml氫氧化鈉溶液，混勻，使用前配制，此溶液在35下可穩(wěn)定8h。6）對氨基苯磺酰胺溶液（密度為2.0g/L）稱取1.0g對氨基苯磺酰胺（NH2SO2C6H4NH2）溶于500ml鹽酸溶液中，貯存于棕色試劑瓶中。7）1-萘替乙二胺二鹽酸鹽溶液（密度為1.0g/L）稱取0.50g鹽酸萘乙二胺（C10H7NHCH2CH2NH2.2HCI）用少量水溶解后，稀釋至500ml水中，混勻，盛于棕色試劑瓶中，于4冰箱內(nèi)保存，如果出現(xiàn)棕色應(yīng)重配。8）銨標準貯備液（c(NH4+-N)=10.0 umol/ml）稱取0.5349g氯化銨（預(yù)先在100下烘1h，置于干燥器中冷卻到室溫），用少量水溶解

24、后，全量轉(zhuǎn)移至1000ml容量瓶中，用水稀釋至標線，加1.0ml三氯甲烷，混勻。低溫冷藏，有效期6個月。9）銨標準使用液（c(NH4+-N)=0.050 umol/ml）移取1.00ml銨標準貯備液于200ml容量瓶中，用水稀釋至標線，混勻。此溶液現(xiàn)用現(xiàn)配。2.操作步驟（1）氮形態(tài)的分離 沉積物四種可轉(zhuǎn)化態(tài)氮，分別為離子交換態(tài)氮（IEF-N）、弱酸可浸取態(tài)氮（WAEF-N）、強堿可浸取態(tài)氮（SAEF-N）和強氧化劑可浸取態(tài)氮（SOEF-N）。a. 離子交換態(tài)氮準確稱取過100目篩的沉積物樣品0.500g左右，置于50ml離心管中，加入1.0 mol/L KCI溶液20.00ml，室溫下振蕩2h

25、，然后4000r/min離心10min，分別取上層清液測定NH4+-N、NO3-N的含量，同時做空白試驗。將剩余的上清液傾去，殘渣加10ml去離子水洗滌一次 離心后烘干得殘渣a，置于干燥器備用。b. 弱酸可浸取態(tài)氮在殘渣a中加入20.00mlHAc-NaAc溶液（pH=5），室溫下振蕩6h，然后4000r/min離心10min，離心取上層清液測定NH4+-N、NO3-N的含量，同時做空白試驗。將剩余上清液傾去，殘渣加10ml去離子水洗滌一次 離心后烘干得殘渣b，置于干燥器備用。c. 強堿可浸取態(tài)氮在殘渣b中加入 0.1 mol/L NaOH20ml，室溫下振蕩17h，然后4000r/min離心

26、10min，取上層清液調(diào)pH至7左右，測定NH4+-N、NO3-N的含量，同時做空白試驗。將剩余的上清液傾去，殘渣加10ml去離子水洗滌一次 離心后烘干得殘渣c，置于干燥器備用。d.強氧化劑可浸取態(tài)氮在殘渣c中加入20ml堿性過硫酸鉀氧化劑（NaOH 0.24mol/L，K2S2O8 20g/L），振蕩3h，放入高壓滅菌鍋內(nèi)氧化1h。靜置冷卻后4000r/min離心10min，取上層清液調(diào)pH至7左右，測定NH4+-N、NO3-N的含量，同時做空白試驗。（2）硝態(tài)氮和氨氮的測定硝態(tài)氮采用鎘柱還原法測定，氨氮采用次溴酸鹽氧化法測定。a. 硝態(tài)氮的測定1）鎘柱的制備 稱取40g鎘屑（或鎘粒）于15

27、0ml錐形分液漏斗中，用2 mol/L 的鹽酸溶液洗滌，除去表面氧化層，棄去酸液，用水洗至中性，加入10g/L硫酸銅溶液100ml，振搖約3min，棄去廢液，用水洗至不含有膠體銅為止。將少許玻璃纖維塞入還原柱底部并注滿水，然后將鍍銅的鎘屑裝入還原柱中，在還原柱的上部也塞入少許玻璃纖維，已鍍銅的鎘屑要保持在水面之下以防接觸空氣，為此，柱中溶液液面在任何操作步驟中不得低于鎘屑。 用250ml活化溶液，以每分鐘7-10ml的流速通過還原柱使之活化，然后再用氯化銨緩沖溶液過柱洗滌3次，還原柱即可使用。 還原柱每次用完后，需用氯化銨緩沖溶液洗滌2次，然后注入氯化銨溶液保存。如長期不用，可注滿氯化銨溶液后

28、密封保存。2）鎘柱還原率的測定配制濃度為100ug/ml的硝酸鹽氮和亞硝酸鹽氮溶液，硝酸鹽氮參照繪制工作曲線中步驟測量其吸光度，其雙份平均吸光度記為ANO3-N。 同時測量分析空白，其雙份平均吸光度記為Ab,NO3-N。亞硝酸鹽氮的測定除了不通過還原柱外，其余各步驟均按硝酸鹽氮的測定步驟進行，其雙份平均吸光度記為ANO2N。按下式計算硝酸鹽還原率R：R=ANO3-N-Ab,NO3-NANO2-N-Ab,NO2-N×100%3）繪制工作曲線 取6個50ml量瓶，分別加入0、0.125ml、0.25ml、0.50ml、0.75ml、1.00ml硝酸鹽標準使用溶液，加水至標線，混勻。標準系

29、列溶液的硝酸鹽氮溶液分別為0、0.025mg/L、0.050 mg/L、0.100 mg/L、0.150 mg/L、0.200 mg/L，分別量取25.0ml上述各濃度溶液于相應(yīng)的50ml比色管或具塞錐形瓶中再各加25.0ml氯化銨緩沖溶液，混勻；將混合后溶液逐個倒入還原柱中約30ml，以每分鐘6-8ml的流速通過還原柱直至溶液接近鎘屑上部界面，棄去流出液。 然后再倒入剩余20ml，重復(fù)上述通過還原柱的操作，接取12.5ml流出液于25ml帶刻度具塞比色管中，用水稀釋至25.0ml，混勻；各加入0.5ml磺胺溶液，混勻，放置20min（各加入0.5ml鹽酸萘乙二胺溶液，混勻，放置20min）；

30、于543nm波長下用2cm或5cm比色皿以純水做參比，測其吸光度At和A0（標準空白）；以吸光度（At-A0）為縱坐標，濃度（mg/L）為橫坐標，繪制工作曲線。 4）水樣測定量取25.0ml已過濾的澄清水樣，于50ml比色管或具塞錐形瓶中，加入25.0ml氯化銨緩沖溶液，混勻。照上述工作曲線繪制中相應(yīng)步驟還原，顯色，測量水樣的吸光度AW。b. 氨態(tài)氮的測定1）標準工作曲線的繪制在兩組各6個50ml容量瓶中分別移入銨標準使用液0.00、0.50ml、1.00ml、2.50ml、5.00ml、8.00ml，用無銨水稀釋至標線，混勻。 此標準系列氨氮濃度依次為0、0.50 umol/L、1.00 u

31、mol/L、2.50 umol/L、5.00 umol/L、8.00 umol/L。將此標準系列分別移取25.0ml到50反應(yīng)瓶中，加入2.5ml次溴酸鈉氧化劑溶液，混勻，放置30min，加入2.5ml對氨基苯磺酰胺溶液，混勻，放置5min。 然后加入1-萘替乙二胺二鹽酸鹽溶液，充分混勻，放置15min后（顏色可穩(wěn)定4h）在分光光度計上，用5cm比色池，以無氨蒸餾水為參比，于543nm測定吸光度AS，其中空白吸光度為Ab。 以扣除空白吸光度Ab后的吸光度An為縱坐標，硝酸鹽氮的濃度CS為橫坐標繪制標準工作曲線，并用線性回歸法求出標準工作曲線截距a和斜率b。 2）水樣測定 量取25ml水樣（雙樣

32、）于50ml反應(yīng)瓶中，按照上述步驟測定水樣的吸光度AW。4.4 需要注意的點（1）得到提取液后盡快測定，避免長時間放置而使氮含量發(fā)生變化；（2）在提取液的測定過程中使用鎘柱還原法測定時提取液會有損失，應(yīng)盡量收集，防止提取液用量不夠，可以同時做兩組以使測定液量充足；（3）在提取液的測定過程中需要嚴格調(diào)節(jié)pH值，防止pH值對測定值的干擾。4.5結(jié)果計算湖泊沉積物各形態(tài)可轉(zhuǎn)化態(tài)氮測定，根據(jù)測試的指標帶入以下公式：沉積物各形態(tài)氮（g/kg）=c×nm式中，c為標準曲線得到的各形態(tài)氮的質(zhì)量；m為沉積物干重；n為分取倍數(shù)。五、沉積物氮磷吸附動力學(xué)研究方法5.1方法原理 氮磷等營養(yǎng)鹽在沉積物-水體

33、存在釋放和吸附兩種行為，當上覆水體氮磷高于沉積物間隙中氮磷濃度時，沉積物吸附上覆水體中氮磷，但不同時間段吸附量有所不同，即吸附前期快速吸附階段，隨著吸附量的增加，沉積物氮磷會向上覆水中遷移，即釋放和吸附同時進行階段，但總體以吸附為主的慢吸附階段，最后沉積物與水體氮磷的釋放和吸附達到平衡，即平衡階段。室內(nèi)模擬條件下，測定不同時間段沉積物向上覆水中吸附的氮磷量，用吸附時間和吸附量建立動力學(xué)反應(yīng)模型，即得動力學(xué)方程和動力學(xué)參數(shù)，用以描述沉積物對上覆水氮磷吸附特征。5.2需要的設(shè)備與實驗條件（1）分析天平：精度0.0001g；（2）紫外可見分光光度計；（3）離心機；（4）恒溫振蕩器。5.3所需試劑及操

34、作步驟磷（1）所需試劑 a.10%抗壞血酸：稱取10g抗壞血酸，用水溶解定容至100ml，貯存于棕色試劑瓶低溫保存，使用時若溶液顏色變黃則需重配。 b.鉬酸鹽溶液：溶解13g鉬酸銨（四水合物）于100ml水中。溶解0.35g酒石酸銻氧鉀于100ml水中。在不斷攪拌下，將鉬酸銨溶液徐徐加到300ml（1+1）硫酸中，加酒石酸銻氧鉀溶液，并且混合均勻，貯存于棕色瓶中于4保存，至少穩(wěn)定兩個月。 c.0.02 mol/LKCI溶液。d.磷酸鹽貯備液：將優(yōu)級純磷酸二氫鉀于110干燥2h，在干燥器中放冷，稱取0.2197g，溶解至1000ml容量瓶中，加（1+1）硫酸5ml，用水稀釋至標線。e.磷酸鹽標準

35、溶液：將10ml磷酸鹽貯備液，用水定容至250ml，每毫升此溶液含2g磷，現(xiàn)用現(xiàn)配。（2）操作步驟a.標準曲線的繪制SRP標準曲線1）取25ml比色管7支，分別吸取磷酸鹽標準溶液0、0.5ml、1ml、1.5ml、2ml、3ml、5ml、10m，定容至25ml。2）加入0.5ml的10%抗壞血酸，搖勻，30s后加入1ml鉬酸鹽溶液充分混勻，顯色15min，以超純水作參比，在700nm比色。用磷濃度與比色值做標準曲線。b.樣品測定1）稱取0.5g沉積物干樣（過100目篩）若干份，置于100ml離心管中，加入1mg/LKH2PO4溶液50ml，放入恒溫振蕩器中振蕩（25,200 r/min）。2）

36、每隔一定時間（5min、10min、20min、30min、1.5h、3h、5h、9h、12h、24h）取出離心管在5000 r/min條件下離心15min，取上清液過0.45m濾膜抽濾得濾液。3）取適量濾液于25ml比色管中，用蒸餾水定容至25ml，加入0.5ml的10%抗壞血酸，搖勻，30s后加入1ml鉬酸鹽溶液充分混勻，顯色15min，以超純水作參比，在700nm比色。4）分別將吸附時間和對應(yīng)的磷吸附量帶入動力學(xué)方程，計算動力學(xué)參數(shù)，繪制動力學(xué)方程。氨氮（1）所需試劑 a.納氏試劑：稱取16gNaOH，溶于50ml水中，充分冷卻至室溫。另稱取7g碘化鉀和10g碘化汞（HgI2）溶于水，然

37、后將此溶液在攪拌下徐徐注入NaOH溶液中，用水稀釋至100ml，貯存于聚乙烯瓶中，密塞保存。 b.酒石酸鉀鈉溶液：稱取50g酒石酸鉀鈉（KNaC4H4O6.4H2O）溶于100ml水中，加熱煮沸以去除氨，冷卻，定容至100ml。 c.銨標準貯備溶液：稱取3.8190g經(jīng)100干燥過的優(yōu)級純氯化銨溶于水中，定容至1000ml。（每毫升此溶液含1mg氨氮）。 d.銨標準使用溶液：取5ml銨標準貯備液，定容至500ml。（每毫升此溶液含0.01mg氨）。 e. 0.02 mol/LKCI溶液。（2）操作步驟a.NH4+-N標線繪制 1）取50ml比色管7支，分別加入0、0.25ml、0.50ml、1

38、.50ml、2.50ml、3.50ml、5.00ml銨標準使用液，用水定容至50ml。 2）加1ml酒石酸鉀鈉，1.5ml納氏試劑，混勻；放置10min，以超純水作參比，在420nm測吸光度；由測得的吸光度減去零濃度空白吸光度后，得到校正吸光度，繪制以氨氮含量（mg）對校正吸光度的標準曲線。b.樣品測定1）稱取0.5g沉積物干樣（過100目篩）8份，置于100ml離心管中，加入10mg/LNH4CI溶液50ml，放入恒溫振蕩器中振蕩（25,200 r/min）。 2）每隔一定時間（5min、10min、30min、60min、90min、120min、150min、180min）取出離心管在5

39、000 r/min條件下離心15min，取上清液過0.45m濾膜抽濾得濾液。3）取適量濾液于50ml比色管中，用蒸餾水定容至50ml，加入1ml酒石酸鉀鈉，1.5ml納氏試劑，混勻，放置10min，以超純水作參比，在420nm測吸光度。 4）分別將吸附時間和對應(yīng)的氨氮吸附量帶入動力學(xué)方程，計算動力學(xué)參數(shù)，繪制動力學(xué)方程。5.4 需要注意的點（1）為減小實驗誤差，沉積物干樣應(yīng)該充分混勻，取樣時采用四分法隨機取樣。（2）不同系列的氮磷標液要現(xiàn)用現(xiàn)配。（3）吸附氮磷溶液的濃度根據(jù)沉積物樣品的實際湖泊水體濃度做調(diào)整。（4）吸附試驗時應(yīng)做平行樣。（5）吸附平衡時間由于不同沉積物理化形狀不同吸附的間隔時間

40、可適當調(diào)整，可以根據(jù)預(yù)實驗進行調(diào)整。5.5結(jié)果計算各水樣氮磷含量，根據(jù)測試的指標帶入以下公式：水樣含量（mg/L）=c×nV式中，c為由標準曲線得到的氮、磷的質(zhì)量（mg）；V為水樣體積；n為分取倍數(shù)。根據(jù)起始濃度與平衡濃度之差，扣除空白試驗，計算沉積物吸附磷酸鹽吸附量，并利用動力學(xué)方程計算動力學(xué)參數(shù)，即一級反應(yīng)動力學(xué)模型：Inq=a+bt拋物線擴散模型：q=a+kt1/2修正的Elovich模型：q=a+bInt式中，q為沉積物吸附氨氮的量（mg/kg）；t為時間（min）；a、b和k為常數(shù)，k和b的大小標志著沉積物吸附氨氮的強度。六、沉積物溶解性有機氮提取方法6.1方法原理 目前，

41、還沒有測定DON含量的直接方法；DON值一般是由溶解性總氮（Total Dissolved Nitrogen,TDN）值差減溶解性無機氮（Dissolved Inorganic Nitrogen,DIN）值獲得，及DON=TDN-NH4+-NO3-。 TDN的測定方法為過硫酸鉀消解紫外分光光度法（PO）。氨氮采用納氏試劑比色法。硝氮采用紫外分光光度法測定。6.2 需要的設(shè)備與實驗條件（1）分析天平：精度0.0001g；（2）紫外可見分光光度計；（3）高壓蒸汽消解滅菌鍋；（4）恒溫振蕩箱；（5）離心機；（6）烘箱；（7）干燥器。6.3 所需試劑及操作步驟（1）所需試劑a.納氏試劑：納氏試劑：稱取

42、16gNaOH，溶于50ml水中，充分冷卻至室溫。另稱取7g碘化鉀和10g碘化汞（HgI2）溶于水，然后將此溶液在攪拌下徐徐注入NaOH溶液中，用水稀釋至100ml，貯存于聚乙烯瓶中，密塞保存。b.酒石酸鉀鈉溶液：稱取50g酒石酸鉀鈉（KNaC4H4O6.4H2O）溶于100ml水中，加熱煮沸以去除氨，冷卻，定容至100ml。c.銨標準貯備溶液：稱取3.8190g經(jīng)100干燥過的優(yōu)級純氯化銨溶于水中，定容至1000ml。（每毫升此溶液含1mg氨氮）。d. 銨標準使用溶液：取5ml銨標準貯備液，定容至500ml。（每毫升此溶液含0.01mg的氨）。e. 硝酸鉀標準貯備液：稱取0.7218g經(jīng)10

43、5-110烘干4h的優(yōu)級純硝酸鉀（KNO3）溶于超純水中，移至1000ml容量瓶中定容。每毫升此溶液含100g氮。在0-10暗處保存，或加入2ml三氯甲烷為保護劑，至少可穩(wěn)定6個月。f.硝酸鉀標準使用液：根據(jù)自己的用量，將貯備液用去離子水稀釋10倍，每毫升此溶液含10g氮。 g.堿性過硫酸鉀溶液：稱取40g過硫酸鉀（K2S2O8）,15gNaOH，溶于水中，定容至1000ml。存放于聚乙烯瓶內(nèi)，可貯存一周。h.（1+9）HCI:1 ml HCI（分析純）+9ml超純水。i.1 mol/L HCI：取86mlHCI（優(yōu)級純），定容至1L。j.0.8%氨基磺酸溶液：0.8g氨基磺酸，溶于100ml水中，避光保存于冰箱中。k.茚三酮溶液：2g茚三酮溶于100ml乙醇中（棕色瓶，冰箱，保質(zhì)期10天）。l.磷酸緩沖溶