儀器分析-期末復(fù)習(xí)

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上第一章 緒論1、儀器分析主要有哪些分析方法？請分別加以簡述。答：a、光學(xué)分析法b、電化學(xué)分析法c、分離分析法d、其他儀器分析方法 光學(xué)分析法：分為非光譜法和光譜法。非光譜法是不涉及物質(zhì)內(nèi)部能級躍遷的，通過測量光與物質(zhì)相互作用時(shí)其散射、折射等性質(zhì)的變化，從而建立起分析方法的一類光學(xué)測定法。光譜法是物質(zhì)與光互相作用時(shí)，物質(zhì)內(nèi)部發(fā)生量子化的能級間的躍遷，從而測定光譜的波長和強(qiáng)度而進(jìn)行分析的方法。 電化學(xué)分析法：利用溶液中待測組分的電化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行測定的一類分析方法。 分離分析法：利用樣品中共存組分間溶解能力、親和能力、吸附和解吸能力、遷移速率等方面的差異，先分離，后按順序進(jìn)行

2、測定的一類儀器分析法。 其他：其他儀器分析法和技術(shù)：利用生物學(xué)、動力學(xué)、熱學(xué)、聲學(xué)、力學(xué)等性質(zhì)進(jìn)行測定的儀器分析方法和技術(shù)。如：免疫分析、熱分析、光聲分析等。2、儀器分析的聯(lián)用技術(shù)有何顯著優(yōu)點(diǎn)？多種現(xiàn)代分析技術(shù)的聯(lián)用，優(yōu)化組合，使各自優(yōu)點(diǎn)得到充分發(fā)揮、缺點(diǎn)得到克服、分析儀器與計(jì)算機(jī)之間的聯(lián)用解決了：程序控制、計(jì)算、條件選擇等問題。3、儀器分析：是以物質(zhì)的物理或物理化學(xué)性質(zhì)為基礎(chǔ)，探求這些性質(zhì)在分析過程中所產(chǎn)生分析信號與被分析物質(zhì)組成的內(nèi)在關(guān)系和規(guī)律，進(jìn)而對其進(jìn)行定性、定量、進(jìn)行形態(tài)和結(jié)構(gòu)分析的一類測定方法。由于這類方法的測定常用到各種比較昂貴、精密的分析儀器，所以稱儀器分析。與化學(xué)分析相比：優(yōu)

3、點(diǎn)：選擇性高、重現(xiàn)性好。缺點(diǎn)：儀器復(fù)雜、昂貴，相對誤差較大。4、 檢出限：是評價(jià)一個(gè)分析方法及測試儀器性能的重要指標(biāo), 是指某一特定分析方法,在給定的顯著性水平內(nèi),可以定性地從樣品中檢出待測物質(zhì)的最小濃度或最小量。所謂“檢出”是指定性檢出, 在檢出限附近不能進(jìn)行準(zhǔn)確的定量。檢出限可分為測量方法檢出限和儀器檢出限。5、比移值：薄層色譜法中原點(diǎn)到斑點(diǎn)中心的距離與原點(diǎn)到溶劑前沿的距離的比值 。又稱Rf值，是色譜法中表示組分移動位置的一種方法的參數(shù)。定義為溶質(zhì)遷移距離與流動相遷移距離之比。在一定的色譜條件下，特定化合物的Rf值是一個(gè)常數(shù)，因此有可能根據(jù)化合物的Rf值鑒定化合物。6、精密度：指在相同條件

4、下對同一樣品進(jìn)行多次平行測定，各平行測定結(jié)果之間的符合程度。7、準(zhǔn)確度：指多次測定的平均值與真值相符合的程度，用誤差或相對誤差描述，其值越小準(zhǔn)確度越高。第二章 分析吸光分析法1、為什么分子光譜總是帶狀光譜？當(dāng)分子發(fā)生電子能級躍遷時(shí)，必伴隨著振動能級和轉(zhuǎn)動能級的躍遷，而這些振動能級和轉(zhuǎn)動能級的躍遷是疊加在電子躍遷之上的，所以是帶狀光譜。2、有機(jī)化合物分子的電子躍遷有哪幾種類型？哪些類型的躍遷能在紫外-可見光區(qū)吸收光譜中反映出來？可能有：*、*、*、*、n*和n*等六種形式，產(chǎn)生有機(jī)化合物分子光譜的電子躍遷形式有：n*、*、n*三種。3、何謂生色團(tuán)、助色團(tuán)、長移、短移、峰、吸收曲線？生色團(tuán)：分子能

5、吸收特定波長光的原子團(tuán)或化學(xué)鍵。助色團(tuán)：與生色團(tuán)和烴相連且能使吸收峰向長波方向移動，并使吸收強(qiáng)度增加的原子或原子團(tuán)，如：-OH、-NH2等。長移：某些有機(jī)物因反應(yīng)引入含有未共享電子對的基因使吸收峰向長波長移動的現(xiàn)象。短移：某些有機(jī)物因反應(yīng)引入含有未共享電子對的基因使吸收峰向短波長移動的現(xiàn)象。峰：吸收曲線的峰稱為吸收峰，其中吸收程度最大的峰稱為最大吸收峰。吸收曲線：又稱吸收光譜，通常以入射光的波長為橫坐標(biāo)，以物質(zhì)對不同波長光的吸收A為縱坐標(biāo)，在200-800nm波長范圍內(nèi)所繪制的A-曲線。4、溶劑效應(yīng)：溶劑極性的不同也會引起某些化合物的吸收峰發(fā)生紅移或藍(lán)移，這種作用稱為溶劑效應(yīng)。5、有機(jī)物分子的

6、吸收帶有哪幾種類型？產(chǎn)生的原因是什么？各有何特點(diǎn)？答：有R吸收帶、K吸收帶、B吸收帶、E吸收帶四種類型。R吸收帶：由發(fā)色團(tuán)（如-C=O、-N=O等）的n-*躍遷產(chǎn)生的。 特點(diǎn)：躍遷所需能量少，通常為200-400nm；躍遷概率小，一般100，屬于弱吸收。K吸收帶：由共軛體系的 *躍遷產(chǎn)生的。 特點(diǎn)：躍遷所需的能量較R吸收帶大；躍遷概率大；K吸收帶的波長及強(qiáng)度與共軛體系 數(shù)目、位置、取代基種類等有關(guān)。B吸收帶：由芳香族化合物的 *躍遷產(chǎn)生的。 特點(diǎn)：當(dāng)苯環(huán)上有取代基且與苯環(huán)共軛或在極性溶劑中測定時(shí)苯的精細(xì)結(jié)構(gòu)部分消失或全 部消失。E吸收帶：由芳香族化合物的 *躍遷產(chǎn)生的，可分為E1帶和E2帶。

7、特點(diǎn)：是芳香族化合物的特征吸收帶，常用來判斷是否有芳香環(huán)。6、如何選擇使用參比溶液？參比溶液的作用是什么？答：作用：用適當(dāng)?shù)膮⒈热芤涸谝欢ǖ娜肷涔獠ㄩL下調(diào)節(jié)A=0，可以消除由比色皿、顯色劑、溶劑和試劑對待測組分的干擾。選擇：a、當(dāng)顯色劑、試劑在測定波長下均無吸收時(shí)，用純?nèi)軇┳鲄⒈热芤海?b、若顯色劑和其他試劑無吸收，而試液中共存的其他離子有吸收，則用不加顯色劑 的試液為參比溶液； c、當(dāng)試劑、顯色劑有吸收而試液無色時(shí)，以不加試液的試劑、顯色劑按照操作步驟 配成參比溶液。7、何為配對池？如何正確選擇使用配對池？答：吸收池由于在使用過程中受化學(xué)腐蝕或受摩擦的程度不同，因此在相同條件下測定的本底吸光

8、度有差異，差異最小的同一規(guī)格的吸收池稱為配對池。選擇：工作時(shí)，用空氣空白或蒸餾水空白在一定波長下測吸光度值，選擇配對池投入使用，如果吸收池受污染嚴(yán)重，用適當(dāng)?shù)脑噭┨幚聿⒂谜麴s水洗凈后在進(jìn)行選擇，以提高測定的準(zhǔn)確度。8、計(jì)算化合物CH2=C C=CH2的max CH3 CH3解、 母體二烯 217nm 兩個(gè)取代基 5nm2 計(jì)算值（max） 227nm9、產(chǎn)生紅移吸收的條件是什么？答：1、輻射應(yīng)具有能滿足的物質(zhì)產(chǎn)生振動躍遷所需的能量。2、輻射與物質(zhì)間有相互偶合作用。10、進(jìn)行紅外光譜分析時(shí)，為什么要求試樣為單一組分且為純樣品？為什么試樣不能含有游離水分？答：若試樣不純，混合中各組分的光譜相互重疊

9、，給未知化合物的鑒定帶來困難，水有紅外吸收，會引起嚴(yán)重干擾，使樣品的紅外光譜失真，而且會侵蝕吸收池的窗片，使透光性變差，所以試樣中不能含游離水分。11、 產(chǎn)生紅外吸收的條件是什么？是否所有分子振動都會產(chǎn)生紅外吸收光譜？為什么？答：（1）a、.輻射光子具有的能量與發(fā)生振動躍遷所需的躍遷能量匹配； B、輻射與物質(zhì)分子之間有偶合作用，即分子振動必須伴隨偶極距的變化。（2） 不是，只有發(fā)生偶極矩的變化時(shí)才會產(chǎn)生紅外光譜，如CO2分子的振動。12. 大多數(shù)化合物在紅外光譜圖上實(shí)際出現(xiàn)的峰數(shù)為何比理論計(jì)算少得多？答：某些振動頻率相同，簡并為一個(gè)吸收峰；某些振動吸收頻率十分接近，儀器無法分辨，表現(xiàn)為一個(gè)吸收

10、峰；某些對稱振動沒有偶極矩的變化，不產(chǎn)生吸收光譜；某些振動吸收強(qiáng)度太弱，儀器靈敏度不夠，檢測不出來；某些振動吸收頻率超出了儀器的檢測范圍。 第四章 原子光譜分析法（AAS）1、共振線：原子在基態(tài)與激發(fā)態(tài)之間的相互躍遷稱為共振躍遷，產(chǎn)生的譜線稱為共振2、原子吸收法有何特點(diǎn)？它與吸光度法比較有何異同？答：特點(diǎn)：靈敏度高；精密度好；選擇性好，方法簡便；準(zhǔn)確度高，分析速度快；廣泛應(yīng)用 異：AASUV-VS法基態(tài)原子對光的吸收分子對光的吸收線狀光譜帶狀光譜空心陰極燈發(fā)出的銳線光源連續(xù)光源需原子化裝置不需定量分析定量、定性分析同：基本原理相同（朗比定律）；都屬于吸收光譜；吸收有選擇性，上機(jī)測定相均為液體3

11、、 何為銳線光源？原子吸收光線法中為什么要采用銳線光源？簡述空心陰極燈（HCL）產(chǎn)生特性銳線光源的基本原理答：銳線光源：空心陰極燈產(chǎn)生的光源 銳線光源具有：1能發(fā)射待測元素的共振線；2能發(fā)射銳線；3輻射光源強(qiáng)度大，穩(wěn)定性好待優(yōu)點(diǎn)，所以用銳線光源 原理：不在陰極和陽極間施加足夠大的直流電后，電子由陰極高速射向陽極，運(yùn)動中與內(nèi)充惰性氣體原子碰撞并使其電離。電離產(chǎn)生正離子在電場作用下高速撞擊陰極腔內(nèi)壁被測元素的原子，使其以激發(fā)態(tài)的形式濺射出來，當(dāng)它很快從激發(fā)態(tài)返回基態(tài)時(shí)，便輻射出該金屬元素的特征性共振線，這就是空心陰極燈產(chǎn)生銳線的基理4、原子吸收法主要有哪些干擾？怎樣消除或抑制？并舉例說明答：光譜干

12、擾：1非共振線干擾 通過減小單色器出射狹縫寬度的方法抑制或消除 2空心陰極燈的發(fā)射干擾 采用純度較高的單元素?zé)魷p小這種干擾 3分子光譜吸收的干擾 利用氘燈發(fā)射的連續(xù)光源作背景校正扣除 電離干擾：加消電離劑來提高分析的準(zhǔn)確度和靈敏度 化學(xué)干擾：抑制：根據(jù)具體情況加入某些試劑，例：待測元素與一些物質(zhì)形成高熔點(diǎn)， 難揮發(fā)，難離解的化合物，導(dǎo)致吸光度下降 物理干擾：消除：盡量保持試液與標(biāo)準(zhǔn)溶液的物理性質(zhì)和測定條件一致5、使譜線變寬的主要因素有哪些？它們對原子吸收法有什么影響？答：自然變寬；熱變寬；壓力變寬；譜線疊加變寬，自吸變寬。影響：主要影響原子吸收分析法的準(zhǔn)確度和靈敏度。6、什么是正常焰、富燃焰、

13、貧燃焰？為什么說原子吸收分析中一般不提倡使用燃燒速度太快的燃?xì)猓?答：正常焰：按化學(xué)計(jì)量配比。 富燃焰：燃助比大于化學(xué)計(jì)量配比值。 貧燃焰：燃助比小于化學(xué)計(jì)量配比值。 如果燃燒速率大于供氣速率，火焰可能會在燃燒器或霧化室內(nèi)燃燒，將損壞甚至可能發(fā)生爆炸，所以一般不用燃燒速率快的燃?xì)狻?、石墨原子法有何優(yōu)缺點(diǎn)？簡述還原氣化法測定As、Hg的基本原理。答：優(yōu)點(diǎn)：原子化程度高，式樣用量少，靈敏度高，安全。 缺點(diǎn)：精密度不高，裝置復(fù)雜，操作復(fù)雜，分析速率慢。基本原理：將As、Hg元素的化合物在低溫下與強(qiáng)還原劑反應(yīng)，使被測原子本身變?yōu)闅鈶B(tài)或生成氣態(tài)化合物，然后送入吸收池中或在低溫（1000）下加熱進(jìn)行原子

14、化測定。8、原子吸收定量分析方法有哪幾種？各適用于何種場合？答：（1）、標(biāo)準(zhǔn)曲線法：待定與標(biāo)準(zhǔn)溶液組成相近似的擬量試液。 （2）、標(biāo)準(zhǔn)加入法：待測元素的濃度加入標(biāo)準(zhǔn)后仍成良好線性。 （3）、濃度直讀法：儀器工作條件穩(wěn)定，試液與標(biāo)準(zhǔn)溶液的操作條件相同。 （4）、雙標(biāo)準(zhǔn)比較法：采用兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行工作，其中一個(gè)比試液稍濃，一個(gè)比試液稍稀。 （5）、內(nèi)標(biāo)法：在標(biāo)準(zhǔn)溶液和標(biāo)準(zhǔn)試液中分別加入一定量試樣中不存在的內(nèi)標(biāo)元素，同時(shí)測定分析線和內(nèi)標(biāo)線的強(qiáng)度比，并以吸光度的比值對待測元素含量繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 9、測定某樣品中的鋅，稱2.5000g用適當(dāng)方法溶解后定容為250.00ml,混合后用原子吸收法測定，現(xiàn)準(zhǔn)確吸取

15、10.00ml該溶液兩份，一份加入25ug/ml鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液100ul,然后定容為25.00ml,混勻，在原子吸收分光光度計(jì)上測得吸光度為0.033.另一份不加標(biāo)準(zhǔn)溶液，同樣定容為25.00ml,在相同條件下測得吸光度為0.022，求樣品中的鋅含量？解： Ax=0.022 Ao=0.033 Co=(25x100x0.001)/25.00 =0.100(ug/ml) 代入式 Cx=Ax/(Ao-Ax)*Co=0.022/(0.033-0.022)*0.100 =0.2(ug/ml)所以樣品中鋅的含量為 0.2/(2.5/250*10/25)=50(ug/g)第八章 色譜分析導(dǎo)論1、 色譜分析法的最

16、大特點(diǎn)是什么？它有什么類型？答：其最大特點(diǎn)為高分離效能。高檢測效能、選擇性好、高速快捷。類型：按兩相狀態(tài)分：a氣相色譜（流動相為液體）b液相色譜（流動相為液體）c超臨界流體色譜（臨界相為超臨界流體）按固定相的外形及性質(zhì)分類：a柱色譜：固定相裝在管內(nèi)的色譜法 b薄層色譜：固定相涂在玻璃板或其他平板上的色譜法按分離原理分：a吸附色譜：利用固體固定相表面對樣品中給組分吸附能力強(qiáng)弱的差異而進(jìn)行分離分析的色譜法b分配色譜：根據(jù)各組分在固定相和流動相間分配系數(shù)的不同進(jìn)行分離分析的色譜法c離子交換色譜：利用離子交換劑（固定相）對各組分的親和力的不同而進(jìn)行分離的色譜法2、 試述塔板理論與速率理論的區(qū)別和聯(lián)系答

17、：塔板理論從熱力學(xué)角度形象的描述了溶質(zhì)在色譜柱中的分配平衡和分離過程，成功的解釋了色譜峰的正態(tài)分布現(xiàn)象和濃度極大值的位置。提出了計(jì)算和評價(jià)柱效的一些參數(shù)。但由于其假設(shè)不符合實(shí)際分離過程，不能解釋造成譜帶擴(kuò)張的原因和影響柱效的各種因素，不能說明為什么在不同流速下測得的塔板數(shù)不同，應(yīng)用上受到了限制。 速率理論吸收了塔板理論中板高的概念，并充分考慮了組分在兩相間的擴(kuò)散和傳質(zhì)過程，從而在動力學(xué)基礎(chǔ)上較好的解釋了影響板高的各種因素，該理論模型對氣相，液相色譜都適用。3、 從色譜流出曲線上可以得到哪些信息？答：1、根據(jù)色譜峰的個(gè)數(shù)，可以判斷樣品中所含組分的最少個(gè)數(shù)2、根據(jù)色譜峰的保留值或位置，可以進(jìn)行定性

18、分析3、根據(jù)色譜峰下的面積或峰高，可以進(jìn)行定量分析4、色譜峰的保留值及其區(qū)域?qū)挾仁窃u價(jià)色譜柱分離效能的依據(jù)5、色譜峰兩峰間的距離是評價(jià)固定相和流動相選擇是否合適的依據(jù)4、衡量色譜柱效能的指標(biāo)是什么？衡量色譜柱選擇性的指標(biāo)是什么？答：理論塔板數(shù)，采用有效理論塔板數(shù)neff和有效塔板高Heff評價(jià)柱效能。相對保留值、分離度，相對保留值越大，相鄰兩組分的t相差越大，分離越好；值為1時(shí)，兩組分不能分離。5、對某一組分來說，在一定柱長下，色譜峰的寬窄主要取決于組分在色譜柱中的（理論塔板數(shù)）。第九章 氣相色譜法（GC）1、簡述氣相色譜儀的分離原理和流程。答: 當(dāng)流動相中樣品混合物經(jīng)過固定相時(shí)，就會與固定相

19、發(fā)生作用，由于各組分在性質(zhì)和結(jié) 構(gòu)上的差異，與固定相相互作用的類別，強(qiáng)弱也有差異，因此，在同一推動力作用下，不同組分在固定相滯留時(shí)間長短不同，從而按先后不同的次序從固定相中流出。流程：氣路系統(tǒng)-進(jìn)樣系統(tǒng)-分離系統(tǒng)-溫控系統(tǒng)-檢驗(yàn)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。2、對固定液和擔(dān)體的要求是什么？如果選擇固定液？ 答：對擔(dān)體的要求：具有足夠 大的表面積和良好的空穴結(jié)構(gòu)，使固定液與試樣的接觸面積較大，能均勻地分布成一薄膜，但載體表面積不宜太大，否則猶如吸附劑，易造成峰拖尾、表面呈化學(xué)惰性，沒有吸附性或吸附性很弱，更不能與被測物起反應(yīng)。熱穩(wěn)定性好，形狀規(guī)則，粒度均勻，具有一定機(jī)械強(qiáng)度。 對固定液的要求：a、選擇性要好；

20、b、熱穩(wěn)定性好；c、化學(xué)穩(wěn)定性好；d、對試樣各組分有適當(dāng)?shù)娜芙饽芰?；e、黏度低，凝固點(diǎn)低，以便在載體表面能均勻分布。對固定液的選擇（相似相溶原則）：（1）、分離非極性物質(zhì)：一般選用非極性固定液，這時(shí)試樣中各組分按沸點(diǎn)次序流出，沸點(diǎn)低的先流出，沸點(diǎn)高的后流出。（2）、分離極性物質(zhì)：選用極性固定液，試樣中各組分按極性次序分離，極性小的先流出，極性大的后流出。（3）、分離非極性和極性混合物：一般選用極性固定液，這時(shí)非極性組分先流出，極性組分后流出。（4）、分離能形成氫鍵的試樣：一般選用極性或氫鍵型固定液。試樣中各組分按與固定相分子間形成氫鍵能力大小先后流出，不易形成氫鍵的先流出，最易形成氫鍵最后流出

21、。（5）、復(fù)雜的難分離物質(zhì)：可選用兩種或者兩種以上的混合固定液。7、 在氣相色譜中，調(diào)整保留值實(shí)際上反映了哪幾種分子間的相互作用？答：組分與固定相。8、 判斷下列情況對色譜峰峰形的影響：樣品不是迅速注入的；樣品不能瞬間氣化；增加柱長；增加柱溫。答：樣品原始寬度大，使色譜峰擴(kuò)張；出峰時(shí)間拖長，峰形變寬，分離效果變差；保留時(shí)間增加，延長了分析時(shí)間；縮短分析時(shí)間，但選擇性較差，不利于分離。9、 在氣相色譜分析中，為了測定下列組分，宜選用哪種檢測器？農(nóng)作物中含氯農(nóng)藥的殘留量；酒中水的含量；啤酒中微量硫化物；苯和二甲苯的異構(gòu)體。答：ECD；TCD；FPD；FID。10、在某色譜條件下，分析只含有二氯乙烷

22、；二溴乙烷及四乙基鉛三組分的樣品，結(jié)果如下： 組分 二氯乙烷 二溴乙烷 四乙基鉛 F 1.00 1.65 1.75 峰面積/cm2 1.50 1.01 2.82 試用歸一化法求各組分的百分含量。 解： Xi = Aifi/(A1f1+A2f2+-+Anfn)100 X二氯乙烷 = （1.001.50）/（1.001.50+1.651.01+1.752.80）10 =18.5X 二溴乙烷 = （1.651.01）/（1.001.50+1.651.01+1.752.82）100 = 20.6 X四乙基鉛 = （1.752.82）/（1.001.50+1.651.01+1.752.82）100 =

23、60.9 11、 在一根1m長的色譜柱上，測得兩組分的分離度為0.75，要使它們完全分離，應(yīng)選擇多長的色譜柱？答：L2=L1（R2/R1）=1m（1.5/0.75）=4m12、朗伯-比爾定律：A=bc（為摩爾吸光系數(shù)，單位L/mol/cm）(b為液層厚度)（c為被測組分濃度）13、什么叫程序升溫？溫度選擇的原則？檢驗(yàn)器的應(yīng)用？ 答 ：程序升溫：指在一個(gè)分析周期內(nèi)柱溫隨時(shí)間由低到高作線性和非線性變化，這樣能兼顧高低沸點(diǎn)組分的分離效果和分析時(shí)間，使不同沸點(diǎn)的組分由低沸點(diǎn)到高沸點(diǎn)依次分離出來，從而達(dá)到用最短時(shí)間獲得最佳的費(fèi)率效果的目的。 溫度選擇的原則：是最難分離的組分盡可能好的分離前提下，采取適當(dāng)

24、低的柱溫，但應(yīng)以保留時(shí)間為宜，峰形不拖尾為度，同時(shí)柱溫不能超過固定液的最高使用溫度，以免造成固定液流失 檢測器的應(yīng)用：熱導(dǎo)檢測器(TCO)：是氣相色譜常用的檢測器；機(jī)構(gòu)簡單、性能穩(wěn)定、對有機(jī)物無機(jī)物都有響應(yīng)。線性范圍寬且不破壞樣品但靈敏度較低（氫）火焰離子化檢測器（FIO)：氣相色譜常用檢測器，機(jī)構(gòu)簡單、靈敏度高、死體積小、響應(yīng)快、線性范圍寬、穩(wěn)定性好，對含碳有機(jī)物有很高的靈敏度，但FIO屬于選擇性檢測器，只對有機(jī)化合物產(chǎn)生信號，不能檢測永久氣體H2S CO CO2氮氧化物、等物質(zhì)第10章 高效液相色譜法及超臨界液體色譜法1、影響高效液相色譜峰展寬的因素有哪些？（1）固定相，流體相和停滯流動相

25、的傳質(zhì)阻力系數(shù)，當(dāng)填料一定時(shí)間為定值；（2）組分在流動相和固定相中的擴(kuò)散系數(shù)；（3）固定相的厚度；（4）固定相的平均顆粒直徑；（5）流動相線速率此外，柱外效應(yīng)也是一個(gè)重要的影響因素柱前峰展寬：由于進(jìn)樣器和進(jìn)樣器到色譜柱連接管的死體積以及進(jìn)樣時(shí)液體擾動引起的擴(kuò)散都會一起色譜峰的展寬和不對稱柱后峰展寬：主要是由檢測器流通池體積和連接管引起的。2、 高效液相色譜儀一般分為哪幾部分？試比較氣相色譜和液相色譜的異同點(diǎn)？ 答：有四個(gè)主要部分：高壓輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)，此外還配有梯度淋洗、自動進(jìn)樣及處理等輔助系統(tǒng).高效液相色譜法的基本原理與氣相色譜法相似，其區(qū)別主要體現(xiàn)在以下三個(gè)方面（1）

26、氣相色譜法只能分析氣體和沸點(diǎn)較低的化合物，可分析的有機(jī)化合物僅占有機(jī)物總數(shù)的20%，對于那些沸點(diǎn)高，熱穩(wěn)定性差，相對分子量大的有機(jī)物，主要采用高效液相色譜法進(jìn)行分離和分析；（2）氣相色譜法的流動相是惰性氣體，僅起運(yùn)載作用；高效液相色譜法中的流動相可以選擇不同極性的液體，與固定相相競爭對組合的作用；（3）氣相色譜法一般都在較高溫度下進(jìn)行分離和測定，其應(yīng)用范圍受到較大的限制，高效液相色譜法一般在室溫下進(jìn)行分離和分析，不受樣品揮發(fā)性和高溫下穩(wěn)定性的限制3、什么叫梯度洗脫？有什么優(yōu)點(diǎn)？答：高效液相色譜法中的梯度洗脫相當(dāng)于氣相色譜法中的程序升溫。梯度洗脫：指在一個(gè)分析周期中，按一定的程序連續(xù)改變流動相中

27、溶劑組成（乳溶劑的 極性、離子強(qiáng)度、PH值等）和配比，使樣品中各個(gè)組分都能在適宜的條件下得到分離。它的優(yōu)點(diǎn)：梯度洗脫可以改善封形，提高柱效，減少分離時(shí)間，使強(qiáng)保留成分不易殘留在柱 上，而且保持與柱子的良好性能.4、 提高柱效的途徑有哪些?其中最有效的途徑是什么? 答：液相色譜中提高柱效的途徑主要有： （1）提高柱內(nèi)填料裝填的均勻性； （2）改進(jìn)固定相； （3）粒度； 選擇薄殼形擔(dān)體；選用低粘度的流動相； （4）適當(dāng)提高柱溫。 其中，減小粒度是最有效的途徑。5、 高效液相色譜法有哪些分離模式？怎樣進(jìn)行選擇？答：高效液相色譜法按組分在兩相間分離機(jī)理的不同主要可分為：液固吸附色譜法，液液分配色譜法，

28、化學(xué)鍵合相色譜法，離子交換色譜法和凝膠色譜法(體積排阻色譜法)。各類型的分離原理以及應(yīng)用如下： （1）液固吸附色譜，利用組分在固定相上的吸附能力不同而分離，采用非極性或弱極性流動相，保留值取決于官能團(tuán)的類型和數(shù)目。應(yīng)用于分離幾何異構(gòu)體，不同族化合物以及用于純化制備。 （2）液液分配色譜，根據(jù)物質(zhì)在兩種互不相溶(或部分互溶)的液體中溶解度的不同，有不同的分配，從而實(shí)現(xiàn)分離的方法。分配系數(shù)較大的組分保留值也較大，最適合同系物組分的分離。 （3）正相鍵合相色譜，利用組分在極性鍵合固定相與弱極性或非極性流動相之間分配系數(shù)不同而分離，流動相極性增大，保留值降低分離中等極性化合物。 （4）反相鍵合相色譜，采用非極性鍵合固定相和以水為底溶劑的極性流動相，利用非極性基團(tuán)的疏水作用和極性基團(tuán)在流動相中的二次化學(xué)平衡，如形成離子對、手性包絡(luò)物、酸堿平衡等進(jìn)行分離?？煞蛛x極性較小的樣品，若利用二次化學(xué)平衡，可分離離子、離子型化合物，包括強(qiáng)酸強(qiáng)堿。 （5）離子交換色譜及離子色譜，組分離子與固定相平衡離子進(jìn)行