第八章細(xì)菌和噬菌體的重組和連鎖

1、第八章細(xì)菌和噬菌體的重組和連鎖1、細(xì)菌細(xì)胞、細(xì)菌細(xì)胞 單細(xì)胞原核生物，細(xì)胞比較小單細(xì)胞原核生物，細(xì)胞比較小（約（約1-2m長(zhǎng)，長(zhǎng)，0.5m寬），寬），無(wú)核膜，無(wú)真正的細(xì)胞核，無(wú)核膜，無(wú)真正的細(xì)胞核，只在菌體中央有一個(gè)遺傳物質(zhì)集中區(qū)只在菌體中央有一個(gè)遺傳物質(zhì)集中區(qū)稱(chēng)擬核。稱(chēng)擬核。 無(wú)性繁殖（裂殖法增殖），無(wú)性繁殖（裂殖法增殖），生長(zhǎng)速度快，周期短，生長(zhǎng)速度快，周期短，2020分鐘一個(gè)世代分鐘一個(gè)世代。易突變。易突變。 2、細(xì)菌染色體、細(xì)菌染色體（1 1）結(jié)構(gòu)）結(jié)構(gòu): : 單倍體，為單倍體，為環(huán)狀裸露雙鏈環(huán)狀裸露雙鏈DNA(基因帶或主染色體基因帶或主染色體)，以折疊或螺旋狀態(tài)存在；以折疊或螺旋狀態(tài)

2、存在；無(wú)蛋白質(zhì)結(jié)合，無(wú)蛋白質(zhì)結(jié)合，也不形成核小體，所以其染色體的顯著特點(diǎn)是：易于接受帶有相同或不同物種的基因或也不形成核小體，所以其染色體的顯著特點(diǎn)是：易于接受帶有相同或不同物種的基因或DNA片片段的插入。段的插入。（2 2）大小：長(zhǎng)約）大?。洪L(zhǎng)約25-35000 m(未螺旋未螺旋) )；（3 3）復(fù)制方式：著膜復(fù)制；）復(fù)制方式：著膜復(fù)制； 分裂特點(diǎn)：均等分裂，無(wú)基因重組。分裂特點(diǎn)：均等分裂，無(wú)基因重組。3 3、質(zhì)粒：、質(zhì)粒： 1n個(gè)獨(dú)立于染色體存在，并能獨(dú)立自我復(fù)制和決定某些性狀的環(huán)狀個(gè)獨(dú)立于染色體存在，并能獨(dú)立自我復(fù)制和決定某些性狀的環(huán)狀DNA。附加體：有些質(zhì)粒能整合到細(xì)菌染色體中，在染色

3、體的控制下隨染色體附加體：有些質(zhì)粒能整合到細(xì)菌染色體中，在染色體的控制下隨染色體一起復(fù)制，這類(lèi)質(zhì)粒稱(chēng)為附加體。一起復(fù)制，這類(lèi)質(zhì)粒稱(chēng)為附加體。4 4、菌落：、菌落： 單個(gè)微生物生長(zhǎng)繁殖到一定程度可以形成肉眼可見(jiàn)的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)單個(gè)微生物生長(zhǎng)繁殖到一定程度可以形成肉眼可見(jiàn)的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞生長(zhǎng)群體。的子細(xì)胞生長(zhǎng)群體。2 2、分解代謝功能的突變型（碳源突變型）：、分解代謝功能的突變型（碳源突變型）： 野生型細(xì)菌能利用復(fù)雜的不同碳源，也能把復(fù)雜分子如氨基酸或脂肪酸野生型細(xì)菌能利用復(fù)雜的不同碳源，也能把復(fù)雜分子如氨基酸或脂肪酸降解為乙酸或三羧酸循環(huán)的中間產(chǎn)物。這些降解功能稱(chēng)分解代謝功能。降解為

4、乙酸或三羧酸循環(huán)的中間產(chǎn)物。這些降解功能稱(chēng)分解代謝功能。 一系列降解功能的實(shí)現(xiàn)也需要許多基因的表達(dá)，其中任何一個(gè)基因突變一系列降解功能的實(shí)現(xiàn)也需要許多基因的表達(dá)，其中任何一個(gè)基因突變都會(huì)影響降解功能的實(shí)現(xiàn)。都會(huì)影響降解功能的實(shí)現(xiàn)。 突變體不能利用特定的物質(zhì)或碳元素作為能量來(lái)源。突變體不能利用特定的物質(zhì)或碳元素作為能量來(lái)源。 lac 乳糖突變型乳糖突變型 lac gal半乳糖突變型半乳糖突變型 gal 3 3、抗藥性突變型（抗生素抗性突變型）、抗藥性突變型（抗生素抗性突變型）: :敏感型：對(duì)某種藥物缺乏耐受能力的類(lèi)型（敏感型：對(duì)某種藥物缺乏耐受能力的類(lèi)型（sensitive） 。抗性型：對(duì)某種藥

5、物有耐受能力的類(lèi)型（抗性型：對(duì)某種藥物有耐受能力的類(lèi)型（resistance）。）。 青霉素青霉素: : Penicillin penr, pens 鏈霉素：鏈霉素：Streptomycin strr, strs4 4、抗噬菌體突變型：、抗噬菌體突變型： T1噬菌體噬菌體 Tonr Tons T2噬菌體噬菌體 Ttor Ttos1 1、選擇培養(yǎng)法：、選擇培養(yǎng)法： 選擇培養(yǎng)法是根據(jù)菌株在基本培養(yǎng)基和營(yíng)養(yǎng)（補(bǔ)充）培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)表現(xiàn)將菌株分為原養(yǎng)型選擇培養(yǎng)法是根據(jù)菌株在基本培養(yǎng)基和營(yíng)養(yǎng)（補(bǔ)充）培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)表現(xiàn)將菌株分為原養(yǎng)型( (也也稱(chēng)為原生營(yíng)養(yǎng)型稱(chēng)為原生營(yíng)養(yǎng)型) )與營(yíng)養(yǎng)缺陷型與營(yíng)養(yǎng)缺陷型( (

6、在基本培養(yǎng)基上不能正常生長(zhǎng)，只能在相應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基上生在基本培養(yǎng)基上不能正常生長(zhǎng)，只能在相應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)長(zhǎng)) )。 其它突變類(lèi)型的篩選、鑒定：其它突變類(lèi)型的篩選、鑒定： 對(duì)于其它的突變類(lèi)型對(duì)于其它的突變類(lèi)型( (如溫度敏感型如溫度敏感型) )，也可以通過(guò)培養(yǎng)條件的選擇培養(yǎng)來(lái)篩選與鑒定。，也可以通過(guò)培養(yǎng)條件的選擇培養(yǎng)來(lái)篩選與鑒定。培養(yǎng)基的類(lèi)型：培養(yǎng)基的類(lèi)型：l 基本培養(yǎng)基：凡能滿(mǎn)足某一菌種野生型菌株?duì)I養(yǎng)要求的最低成分的基本培養(yǎng)基：凡能滿(mǎn)足某一菌種野生型菌株?duì)I養(yǎng)要求的最低成分的 組合培養(yǎng)基。組合培養(yǎng)基。l完全培養(yǎng)基：在基本培養(yǎng)基中加入一些富含生長(zhǎng)因子的物質(zhì)，以滿(mǎn)完全培養(yǎng)基：在基本培養(yǎng)基中加入

7、一些富含生長(zhǎng)因子的物質(zhì)，以滿(mǎn) 足該菌種各種突變型的需要。足該菌種各種突變型的需要。l補(bǔ)充培養(yǎng)基：在基本培養(yǎng)基中有針對(duì)性地加上某一種或幾種其自身補(bǔ)充培養(yǎng)基：在基本培養(yǎng)基中有針對(duì)性地加上某一種或幾種其自身 不能合成的成分，以滿(mǎn)足相應(yīng)突變型生長(zhǎng)需要的培養(yǎng)不能合成的成分，以滿(mǎn)足相應(yīng)突變型生長(zhǎng)需要的培養(yǎng) 基。基。2 2、影印培養(yǎng)法：、影印培養(yǎng)法：為高效檢測(cè)、分離混和群體中不為高效檢測(cè)、分離混和群體中不同突變型，黎德伯格夫婦設(shè)計(jì)了同突變型，黎德伯格夫婦設(shè)計(jì)了影印培養(yǎng)法；影印培養(yǎng)法；該方法原理與選擇培養(yǎng)法一該方法原理與選擇培養(yǎng)法一致，但是采用影印法將在完致，但是采用影印法將在完全培養(yǎng)基上單菌落同時(shí)接種全培養(yǎng)

8、基上單菌落同時(shí)接種到不同選擇培養(yǎng)基上，同時(shí)到不同選擇培養(yǎng)基上，同時(shí)對(duì)所有菌落進(jìn)行選擇培養(yǎng)，對(duì)所有菌落進(jìn)行選擇培養(yǎng)，鑒定效率大大提高。鑒定效率大大提高。 v 建立純系的方法純培養(yǎng) 純系：由單個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的菌落稱(chēng)為純系。 菌種純：采用平板表面涂布法或劃線法獲得單株菌落。這種方法獲得的純系，稱(chēng)為“菌種純”。 菌株純：利用顯微操縱器進(jìn)行菌絲尖端切割等方法獲得單個(gè)細(xì)胞，并直接培養(yǎng)建立純系，這種方法獲得的純系稱(chēng)為“菌株純”。病毒根據(jù)宿主劃分：病毒根據(jù)宿主劃分：植物病毒植物病毒動(dòng)物病毒動(dòng)物病毒 細(xì)菌病毒一般稱(chēng)為噬菌體細(xì)菌病毒一般稱(chēng)為噬菌體. .l 根據(jù)噬菌體與宿主細(xì)胞的相互關(guān)系，可分為：根據(jù)噬菌體與宿主細(xì)

9、胞的相互關(guān)系，可分為：（一）烈性噬菌體（一）烈性噬菌體（virulent phagevirulent phage）：僅有裂解周期。）：僅有裂解周期。侵入宿主細(xì)胞后，利用宿主細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)進(jìn)行自身遺傳物質(zhì)和蛋白質(zhì)的侵入宿主細(xì)胞后，利用宿主細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)進(jìn)行自身遺傳物質(zhì)和蛋白質(zhì)的合成，組裝出子噬菌體，使宿主細(xì)胞裂解而釋放子噬菌體，這類(lèi)噬菌體合成，組裝出子噬菌體，使宿主細(xì)胞裂解而釋放子噬菌體，這類(lèi)噬菌體稱(chēng)為烈性噬菌體。稱(chēng)為烈性噬菌體。 如如T噬菌體系列（噬菌體系列（T1T7）（二）溫和性噬菌體：既有裂解周期，又有溶原周期。（二）溫和性噬菌體：既有裂解周期，又有溶原周期。 侵入后侵入后并不使并不使細(xì)菌裂解

10、，其細(xì)菌裂解，其DNADNA不整合到細(xì)菌的染色體上，不整合到細(xì)菌的染色體上，而是以而是以 質(zhì)粒的形式獨(dú)立存在于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。如質(zhì)粒的形式獨(dú)立存在于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。如P1噬菌體；噬菌體；某些噬菌體侵染細(xì)菌后，其某些噬菌體侵染細(xì)菌后，其DNADNA整合到宿主染色體中，這種處于整合狀態(tài)的噬菌體整合到宿主染色體中，這種處于整合狀態(tài)的噬菌體稱(chēng)為原噬菌體。稱(chēng)為原噬菌體。 如如噬菌體。噬菌體。T4噬菌體從噬菌體從大腸桿菌中釋放大腸桿菌中釋放 塔特姆塔特姆 （19091975） 萊德伯格（萊德伯格（1925） 1958年年諾貝爾獎(jiǎng)諾貝爾獎(jiǎng)微孔濾板微孔濾板: 大分子大分子(DNA)可通過(guò)，細(xì)菌可通過(guò)，細(xì)菌不能通過(guò)。不能通

11、過(guò)。l經(jīng)過(guò)上述分析可以認(rèn)為：經(jīng)過(guò)上述分析可以認(rèn)為：l在在LederberyLederbery和和TatumTatum的試驗(yàn)中，發(fā)生了一種不同于轉(zhuǎn)化的遺傳重組方式，稱(chēng)之為接合。的試驗(yàn)中，發(fā)生了一種不同于轉(zhuǎn)化的遺傳重組方式，稱(chēng)之為接合。遺傳物質(zhì)從供體轉(zhuǎn)移到受體是否為單向轉(zhuǎn)移呢？遺傳物質(zhì)從供體轉(zhuǎn)移到受體是否為單向轉(zhuǎn)移呢？觀點(diǎn)：細(xì)菌接合是同宗配合觀點(diǎn)：細(xì)菌接合是同宗配合認(rèn)為：細(xì)菌接合是異宗配合認(rèn)為：細(xì)菌接合是異宗配合A A品系在交配后被殺死并不影響雜交結(jié)果，表明它是一種品系在交配后被殺死并不影響雜交結(jié)果，表明它是一種供體，可以將遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移給受體供體，可以將遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移給受體B B，而，而B(niǎo) B未受鏈

12、霉素處理，未受鏈霉素處理，接受接受A A的基因后，可以分裂并在基本培養(yǎng)基中形成菌落。的基因后，可以分裂并在基本培養(yǎng)基中形成菌落。 A A像雄性動(dòng)物一樣，交配后被殺死，不會(huì)影響后代。像雄性動(dòng)物一樣，交配后被殺死，不會(huì)影響后代。B B品系像是一種品系像是一種受體，其可以接受受體，其可以接受A A的基因，但是的基因，但是B B受鏈霉素受鏈霉素處理后不能分裂，所以在培養(yǎng)基上不能形成菌落，同時(shí)可以處理后不能分裂，所以在培養(yǎng)基上不能形成菌落，同時(shí)可以看到，看到，B B沒(méi)有遺傳物質(zhì)給沒(méi)有遺傳物質(zhì)給A A，A A不能在基本培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。不能在基本培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。 B B和雌性動(dòng)物一樣，受孕后被殺死的話(huà)，就無(wú)法產(chǎn)

13、生后代。和雌性動(dòng)物一樣，受孕后被殺死的話(huà)，就無(wú)法產(chǎn)生后代。說(shuō)明遺傳說(shuō)明遺傳物質(zhì)的交物質(zhì)的交換不是相換不是相互的，而互的，而是單方向是單方向的。的。從從A B Hayes Hayes等進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)菌菌株之間的差異是由細(xì)胞內(nèi)一種致育因等進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)菌菌株之間的差異是由細(xì)胞內(nèi)一種致育因子子(fertility factor, F(fertility factor, F因子；因子；sex factor, sex factor, 性因子；致育因子性因子；致育因子) )控控制的。制的。F F因子存在的狀態(tài)：以大腸桿菌為例因子存在的狀態(tài)：以大腸桿菌為例不含有不含有F F因子的細(xì)菌，記為因子的細(xì)菌

14、，記為F F （雌性）（雌性） ；含有含有F F因子的細(xì)菌，因子的細(xì)菌，F(xiàn) F因子游離于宿主染色體外，記為因子游離于宿主染色體外，記為F F+ + （雄（雄性）性） ；F因子：是可以轉(zhuǎn)移的，能獨(dú)立增殖的環(huán)狀因子：是可以轉(zhuǎn)移的，能獨(dú)立增殖的環(huán)狀DNA分子，供體細(xì)胞含有分子，供體細(xì)胞含有F因子，記作因子，記作F+。 F+的表面有稱(chēng)作性傘毛的細(xì)長(zhǎng)纖毛，由此與的表面有稱(chēng)作性傘毛的細(xì)長(zhǎng)纖毛，由此與F-接合。一旦接合。一旦F+與與F- 接觸后，性傘毛發(fā)生改變，成為接觸后，性傘毛發(fā)生改變，成為兩細(xì)胞間的原生質(zhì)通道，稱(chēng)為結(jié)合管。兩細(xì)胞間的原生質(zhì)通道，稱(chēng)為結(jié)合管。F因子具有形成性傘毛的基因，因此因子具有形成性傘

15、毛的基因，因此F因子還可改變細(xì)胞因子還可改變細(xì)胞表面的構(gòu)造，以防止表面的構(gòu)造，以防止F+細(xì)菌間的接合。因此，接合只發(fā)生在細(xì)菌間的接合。因此，接合只發(fā)生在F+與與F-之間，而之間，而F+與與F+間以及間以及F-與與F-間是不會(huì)發(fā)生的。間是不會(huì)發(fā)生的。結(jié)合管的形成結(jié)合管的形成F F+ +細(xì)菌通過(guò)纖毛與細(xì)菌通過(guò)纖毛與F F- - 細(xì)菌細(xì)菌接觸并發(fā)生相互作用形成接觸并發(fā)生相互作用形成接合管。接合管。F F因子出現(xiàn)缺口，雙鏈之一因子出現(xiàn)缺口，雙鏈之一從原點(diǎn)斷裂，以原點(diǎn)為先導(dǎo)，從原點(diǎn)斷裂，以原點(diǎn)為先導(dǎo)，從斷端轉(zhuǎn)移從斷端轉(zhuǎn)移F F因子的一條鏈到因子的一條鏈到F F- - 細(xì)菌中。細(xì)菌中。在在F F+ +和和

16、F F- -細(xì)胞中，細(xì)胞中，F(xiàn) F因子因子邊轉(zhuǎn)邊轉(zhuǎn)移邊進(jìn)行兩條鏈的復(fù)制（滾移邊進(jìn)行兩條鏈的復(fù)制（滾環(huán)復(fù)制）。環(huán)復(fù)制）。接合過(guò)程：接合過(guò)程：F F因子通過(guò)接合管轉(zhuǎn)移因子通過(guò)接合管轉(zhuǎn)移完畢，完畢，DNADNA的合成也的合成也完成。完成。接合管消失，細(xì)胞分開(kāi)，接合管消失，細(xì)胞分開(kāi)，F(xiàn) F- - 細(xì)菌變成細(xì)菌變成 F F+ + 。 F細(xì)菌可以把F因子傳給后代。 F細(xì)菌經(jīng)吖黃素處理F因子丟失，丟失后不再出現(xiàn)。 F可以和F雜交，而不能和F雜交。 F和F雜交后代皆為F，而且可以以107頻率獲得重組體后代。 在菌株在菌株A中發(fā)現(xiàn)一個(gè)新的菌株，跟菌株中發(fā)現(xiàn)一個(gè)新的菌株，跟菌株B（F-）雜交時(shí)，出現(xiàn)重組子的頻率很

17、高，幾乎比雜交時(shí)，出現(xiàn)重組子的頻率很高，幾乎比F+XF-雜交高雜交高1000倍。此菌株含有倍。此菌株含有F因子，并因子，并且且F因子通過(guò)交換整合到宿主染色體中的菌株因子通過(guò)交換整合到宿主染色體中的菌株,簡(jiǎn)稱(chēng)簡(jiǎn)稱(chēng)Hfr菌株（高頻重組菌株）。菌株（高頻重組菌株）。 1957 1957年，沃爾曼（年，沃爾曼（Wollman.EWollman.E）和雅各布（）和雅各布（Jacob.EJacob.E）設(shè)計(jì)了著名的中斷雜交試）設(shè)計(jì)了著名的中斷雜交試驗(yàn)，驗(yàn)，他們采用的菌株基因型為：他們采用的菌株基因型為： 蘇氨酸蘇氨酸 亮氨酸亮氨酸 疊氮化鈉疊氮化鈉 噬菌體噬菌體 乳糖乳糖 半乳糖半乳糖 鏈霉素鏈霉素 Hf

18、rHfr： thrthr+ + leu leu+ + azi azir r ton tonr r lac lac+ + gal gal+ + str strs s F F- - ：thrthr- - leu leu- - azi azis s ton tons s lac lac- - gal gal- - str strr r中斷雜交技術(shù)：基因從中斷雜交技術(shù)：基因從Hfr Hfr 細(xì)胞按次序轉(zhuǎn)入細(xì)胞按次序轉(zhuǎn)入F F- - 細(xì)胞，根據(jù)供體基因進(jìn)入受體細(xì)胞，根據(jù)供體基因進(jìn)入受體 細(xì)胞的順序和時(shí)間繪制連鎖圖的技術(shù)。細(xì)胞的順序和時(shí)間繪制連鎖圖的技術(shù)。不同時(shí)間取樣不同時(shí)間取樣攪拌振蕩，中斷雜交攪拌振蕩

19、，中斷雜交稀釋菌液，防止其再度結(jié)合稀釋菌液，防止其再度結(jié)合 含鏈霉素的完全培養(yǎng)基含鏈霉素的完全培養(yǎng)基 殺死殺死HfrHfr細(xì)菌細(xì)菌Strr 細(xì)菌菌落細(xì)菌菌落影印培養(yǎng)法：影印到只添加影印培養(yǎng)法：影印到只添加azi、gal等不同選擇性培養(yǎng)基上培養(yǎng)，等不同選擇性培養(yǎng)基上培養(yǎng)， 鑒定各基因轉(zhuǎn)移的時(shí)間。鑒定各基因轉(zhuǎn)移的時(shí)間。將將HfrHfr與與F F- -同時(shí)加入裝有完全培養(yǎng)基的大試管中混合培養(yǎng)同時(shí)加入裝有完全培養(yǎng)基的大試管中混合培養(yǎng) 結(jié)果如下結(jié)果如下: :該方法主要根據(jù)基因轉(zhuǎn)移的先后該方法主要根據(jù)基因轉(zhuǎn)移的先后次序，以時(shí)間（次序，以時(shí)間（min）為單位，）為單位，求基因間的遺傳距離。求基因間的遺傳距離

20、。Hfr菌株的基因是按一定的菌株的基因是按一定的線性線性順序順序從原點(diǎn)依次進(jìn)入從原點(diǎn)依次進(jìn)入F菌株的，菌株的，不同基因在不同基因在F中出現(xiàn)的時(shí)間和中出現(xiàn)的時(shí)間和達(dá)到的穩(wěn)定轉(zhuǎn)移頻率不同，達(dá)到的穩(wěn)定轉(zhuǎn)移頻率不同，基基因位點(diǎn)離原點(diǎn)（基因位于染色體上，染因位點(diǎn)離原點(diǎn)（基因位于染色體上，染色體從一端開(kāi)始，稱(chēng)為原點(diǎn)或色體從一端開(kāi)始，稱(chēng)為原點(diǎn)或O，以，以線性方式進(jìn)入線性方式進(jìn)入F-細(xì)胞）愈近，進(jìn)入細(xì)胞）愈近，進(jìn)入F細(xì)胞愈早，反之則晚。細(xì)胞愈早，反之則晚。 thr+ leu+ azir tonr lac+ gal+ 8min + 8.5min + + 9min + + + 11min + + + + 18mi

21、n + + + + + 25min + + + + + +隨時(shí)間的推遲，某個(gè)隨時(shí)間的推遲，某個(gè)基因的重組率（出現(xiàn)基因的重組率（出現(xiàn)頻率）增加；頻率）增加；一定程度后，重組率一定程度后，重組率便不再增加。便不再增加。 ii具有具有Hfr菌菌株標(biāo)記株標(biāo)記基因的基因的菌落數(shù)菌落數(shù)%F因子插入的位置及方向因子插入的位置及方向大腸桿菌的大腸桿菌的4種種Hfr菌株的基因轉(zhuǎn)移順序很不相同菌株的基因轉(zhuǎn)移順序很不相同重組區(qū)：重組區(qū)：4 4個(gè)插入序列（個(gè)插入序列（insertion sequence, ISinsertion sequence, IS），插入整合有極性。插入整合有極性。自主復(fù)制區(qū)：自主復(fù)制區(qū)：轉(zhuǎn)移

22、的起點(diǎn)（原點(diǎn)，轉(zhuǎn)移的起點(diǎn)（原點(diǎn)，O O）；）；2 2個(gè)復(fù)制起點(diǎn)（個(gè)復(fù)制起點(diǎn)（Ori TOri T；Ori VOri V）；Ori T是在染色體轉(zhuǎn)移時(shí)進(jìn)行滾環(huán)復(fù)制時(shí)的復(fù)制起點(diǎn)，也是轉(zhuǎn)移起點(diǎn)。Ori V是在營(yíng)養(yǎng)時(shí)期，即游離在細(xì)胞質(zhì)中獨(dú)立復(fù)制時(shí)的復(fù)制起點(diǎn)。DNA復(fù)制酶基因；復(fù)制酶基因； 接合轉(zhuǎn)移區(qū)：長(zhǎng)接合轉(zhuǎn)移區(qū)：長(zhǎng)33 Kb33 Kb，性傘毛基因群。，性傘毛基因群。F F因子：因子：是一種質(zhì)粒，由共價(jià)環(huán)狀閉合雙鏈?zhǔn)且环N質(zhì)粒，由共價(jià)環(huán)狀閉合雙鏈DNA構(gòu)成，全長(zhǎng)構(gòu)成，全長(zhǎng)94.5 Kb94.5 Kb，主要包括：，主要包括：F F因子的插入與因子的插入與HfrHfr染色體的極性染色體的極性 同一個(gè)同一個(gè)H

23、frHfr菌株的轉(zhuǎn)移起始點(diǎn)以及轉(zhuǎn)移順序在不同實(shí)驗(yàn)中都是相同的，但菌株的轉(zhuǎn)移起始點(diǎn)以及轉(zhuǎn)移順序在不同實(shí)驗(yàn)中都是相同的，但一個(gè)一個(gè)F F+ +品系可產(chǎn)生許多品系可產(chǎn)生許多HfrHfr品系。品系。 這是因?yàn)檫@是因?yàn)镕 F因子因子與細(xì)菌主染色體交換整合時(shí)，與細(xì)菌主染色體交換整合時(shí)，F(xiàn)因子的因子的IS與主染色體的與主染色體的IS配對(duì)。由于配對(duì)。由于 主染色體的主染色體的IS有多個(gè)，有多個(gè)，F(xiàn)因子的因子的IS與主染色體的哪個(gè)與主染色體的哪個(gè)IS配對(duì)；配對(duì)； F因子的因子的IS插入取向如何插入取向如何 就導(dǎo)致產(chǎn)生的就導(dǎo)致產(chǎn)生的Hfr的轉(zhuǎn)移起點(diǎn)、基因轉(zhuǎn)移順序以及轉(zhuǎn)移方向都不相同。即的轉(zhuǎn)移起點(diǎn)、基因轉(zhuǎn)移順序以及轉(zhuǎn)移方向都不相同。即由于由于F因子的插入，使主染色體具有了極性。因子的插入，使主染色體具有了極性。HfrHfr細(xì)胞和細(xì)胞和F F- -細(xì)胞之間的接合管常會(huì)自發(fā)斷裂，進(jìn)入的細(xì)胞之間的接合管常會(huì)自發(fā)斷裂，進(jìn)入的HfrHfr染色體也隨之?dāng)嗳旧w也隨之?dāng)嗔?，一般說(shuō)很少有整條裂，一般說(shuō)很少有整條HfrHfr染色體轉(zhuǎn)入染色體轉(zhuǎn)入F F- -細(xì)胞的，轉(zhuǎn)移到受體的部分只是細(xì)胞的，轉(zhuǎn)移到受體的部分只是靠近原點(diǎn)的一部分，靠近原點(diǎn)的一部分，F(xiàn) F因子的主要部份在最后進(jìn)入受體，所以大部分因子的主要部份