血細(xì)胞分析原理及白細(xì)胞散點圖臨床意義

1、血細(xì)胞分析儀原理及散點圖臨床血細(xì)胞分析儀原理及散點圖臨床應(yīng)用應(yīng)用一、血細(xì)胞各通道分析原理及散點圖分析 二、散點圖案例分析一、血細(xì)胞各通道分析原理及散點圖分析一、血細(xì)胞各通道分析原理及散點圖分析血細(xì)胞分析儀提供了大量的警示信息和可供參考的研究血細(xì)胞分析儀提供了大量的警示信息和可供參考的研究 參數(shù)，如直方圖，參數(shù)，如直方圖，DIFFDIFF散點圖，散點圖， NRBCNRBC散點圖等。實驗散點圖等。實驗人員可根據(jù)這些信息從大量的標(biāo)本中挑出需要重點關(guān)注人員可根據(jù)這些信息從大量的標(biāo)本中挑出需要重點關(guān)注的的, ,進行涂片復(fù)檢確認(rèn)，提高工作效率，減少漏診率。進行涂片復(fù)檢確認(rèn)，提高工作效率，減少漏診率。DIF

2、FWBC/BASONRBC半導(dǎo)體激光熒光染色（聚次甲基+噁嗪 ）主要原理FSC前向散射光：細(xì)胞大小SSC側(cè)向散射光：復(fù)雜程度（細(xì)胞的顆粒 和細(xì)胞核等內(nèi)含物的信息）SFL側(cè)向熒光：核酸含量（DNA 、RNA)DIFF通道分析原理4DL(陰離子表面活性劑）完全溶解RBCPLT 在WBC膜上打孔溶血素中加入有機酸，與嗜酸粒細(xì)胞內(nèi)的堿 性蛋白粘附，使Eo顆粒的復(fù)雜程度增加，在SSC顯示復(fù)雜程度是最大的。4DS對核酸染色縱坐標(biāo)：側(cè)向熒光（SFL）反映核酸含量橫坐標(biāo)：側(cè)向散射光（SSC）反映細(xì)胞內(nèi)部復(fù)雜程度化學(xué)粘附化學(xué)粘附大分子有機酸與嗜酸 粒細(xì)胞中的堿性顆粒 發(fā)生化學(xué)粘附嗜酸粒細(xì)胞大分子有機酸RNA/D

3、NA熒光染色原理成熟白細(xì)胞：高熒光特性網(wǎng)織紅細(xì)胞：弱熒光特性血小板：成熟RBC：原始細(xì)胞：幼稚細(xì)胞：微弱熒光特性 無熒光特性 極高熒光特性 極高熒光特性熒光染色WBC分類的優(yōu)勢檢測異常細(xì)胞提供幼稚粒細(xì)胞信息（IG）提供原始細(xì)胞信息（Other）10SFB溶血劑 （酸性，低滲）溶解RBCPLT除嗜堿性粒細(xì)胞以外的白細(xì)胞處理成 裸核形態(tài)Baso保持原狀縱坐標(biāo)：前向散射光（縱坐標(biāo)：前向散射光（FSC） 反反映細(xì)胞大小映細(xì)胞大小橫坐標(biāo)：側(cè)向散射光（橫坐標(biāo)：側(cè)向散射光（SSC）反映細(xì)胞內(nèi)部復(fù)雜程度反映細(xì)胞內(nèi)部復(fù)雜程度嗜堿其它有 核細(xì)胞嗜堿粒細(xì)胞溶血素為酸性低滲溶液，Baso內(nèi)的蛋白為酸性蛋白，因此在該溶

4、液中受到保護，而其他有核細(xì)胞則被 溶解成裸核WBC/BASO 通道分析原理NRBC通道分析原理NR溶血劑完全溶解RBC，PLTWBC保持原狀NRBC溶解為裸核NR染液對核酸染色縱坐標(biāo)：前向散射光（FSC）反映細(xì)胞大小橫坐標(biāo)：側(cè)向熒光（SFL）反映核酸含量NRBC% = NRBC# / NRBC_WBC#出現(xiàn)有核紅時WBC的修正紅系增生活躍時，外周血易見較多的紅系增生活躍時，外周血易見較多的NRBC，在，在WBC 計數(shù)時不被溶解，常被計入淋巴細(xì)胞中。計數(shù)時不被溶解，常被計入淋巴細(xì)胞中。WBC增多對增多對RBC計數(shù)的干擾計數(shù)的干擾RBC：阻抗法RBC值含WBCWBC100*109/L時，需校正紅系

5、統(tǒng)參數(shù)貧血越嚴(yán)重，對RBC影響越大血紅蛋白通道光電比色法光電比色法SLS（十二烷基磺酸鈉）：無氰無毒（十二烷基磺酸鈉）：無氰無毒二、散點圖案例分析二、散點圖案例分析嗜堿性粒細(xì)胞增多癥在BASO散點圖上，嗜堿區(qū) 域出現(xiàn)大量散點，另外DIFF散點圖上，中性區(qū)域的左下方也為嗜堿區(qū)域， 也出現(xiàn)了大量的散點。BASO%：儀器13.4%鏡檢13.5%AML-M1(例1)不可信不可信DIFF散點圖顯示淋巴與單核之 間融合，有分類結(jié)果，但不可 信。IMI散點圖也提示大量原始細(xì) 胞。鏡檢發(fā)現(xiàn)有77.5%的原始細(xì)胞。細(xì)胞表面標(biāo)志CD13和CD33陽 性，CD36陰性；為急性髓細(xì) 胞性白血病。AML-M2DIFF散

6、點圖顯示白細(xì)胞完全融合 且不分類。IMI散點圖顯示大量原始細(xì)胞和幼 稚粒細(xì)胞。NRBC散點圖：紅色散點鏡檢發(fā)現(xiàn)有90%的原始細(xì)胞、3% 的早幼粒細(xì)胞哦、1%中幼粒細(xì)胞。流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示細(xì)胞表 面標(biāo)志CD13和CD33陽性，為髓 細(xì)胞性白血病。AML-M3DIFF散點圖顯示白細(xì)胞完全融合且不分 類。IMI散點圖也顯示大量原始細(xì)胞和幼稚粒 細(xì)胞。NRBC散點圖：紅色散點鏡檢發(fā)現(xiàn)3%的原始細(xì)胞，91%的早幼粒 細(xì)胞、3.5%的中幼粒細(xì)胞，0.5%晚幼 粒細(xì)胞。AML-M4DIFF散點圖，白細(xì)胞區(qū)域出現(xiàn)大量灰白色散點，完全融合，不分類。 大致分成兩群，一群為原始細(xì)胞， 一群為幼稚粒細(xì)胞。IMI散

7、點圖也顯示大量原始細(xì)胞和幼 稚粒細(xì)胞。AML-M5bDIFF散點圖淋巴與單核 融為一體，不分類，IMI散點圖顯示大量原始細(xì)胞 和幼稚粒細(xì)胞。鏡檢發(fā)現(xiàn)59%的原始細(xì)胞，0.5%的早幼粒細(xì)胞，單 核細(xì)胞24.5%。慢粒危象DIFF散點圖OTHER區(qū)域出現(xiàn)大 量散點，中性粒細(xì)胞上方也有少 量散點，IMI散點圖也出現(xiàn)大量紅色散點，儀器報警提示有大量 原始細(xì)胞和幼稚粒細(xì)胞。NRBC散點圖：紅色散點鏡檢發(fā)現(xiàn)38.5%的原始細(xì)胞，幼 稚粒細(xì)胞和幼稚的單核細(xì)胞。酯 酶染色陰性或弱陽性，可被氟化 鈉抑制。這是一例慢粒急單變。MDSDIFF：淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞之間界限不清，提示出現(xiàn)原 始細(xì)胞。中性粒細(xì)胞散點向 左

8、下方延伸到嗜堿區(qū)域。IMI：少量紅點NRBC：幼紅鏡檢：原始：1%，BASO：5%，NRBC：2.5/100WBC范*，女，67y。2016.11，診 斷為MDS伴原始細(xì)胞增多（10%）DIFF散點圖淋巴與單核區(qū)域融 合，提示出現(xiàn)原始細(xì)胞報警提示異常淋巴細(xì)胞/原始細(xì) 胞，異淋？鏡檢：47%原始淋巴細(xì)胞，未見 異淋。血片POX（-）。2018.4.MDS急淋變MDS急淋變急性T淋巴細(xì)胞白血病DIFF散點圖淋巴與單核完 全融合，IMI散點圖幾乎沒有紅色散點，儀器提示異 常淋巴/原始淋巴細(xì)胞。鏡檢發(fā)現(xiàn)有59.5%的異常淋 巴細(xì)胞。本例被診為ATL。CLL淋巴與單核區(qū)域分界不 清，儀器提示淋巴細(xì)胞 增

9、多/原始淋巴。鏡檢：L：86.5%，幼淋2.0%異型淋巴細(xì)胞異型淋巴細(xì)胞增高與 多種病毒感染及變態(tài) 反應(yīng)有關(guān)。常見有：傳染性單核 細(xì)胞增多癥、病毒性 肺炎、病毒性肝炎、 腎綜合征出血熱等病 毒性感染。特點：胞體增大，胞 質(zhì)增多、嗜堿性增強，細(xì)胞核母細(xì)胞化， 熒光強度最強。散點圖特點：嗜酸性粒細(xì)胞群向中性粒細(xì)胞靠攏，間距小。散點圖特點：嗜酸性粒細(xì)胞群向中性粒細(xì)胞靠攏，間距小。原因：瘧原蟲裂殖體破裂，瘧色素從感染的血細(xì)胞中釋放出來，繼而被白細(xì)胞吞噬，吞噬原因：瘧原蟲裂殖體破裂，瘧色素從感染的血細(xì)胞中釋放出來，繼而被白細(xì)胞吞噬，吞噬 了瘧色素的白細(xì)胞側(cè)向散射光強度改變，顯示在散點圖靠近中性粒細(xì)胞一側(cè)

10、，但也被儀器了瘧色素的白細(xì)胞側(cè)向散射光強度改變，顯示在散點圖靠近中性粒細(xì)胞一側(cè)，但也被儀器 以以EoEo特有的紅色標(biāo)示出來。特有的紅色標(biāo)示出來。張時民等張時民等. .血細(xì)胞分析儀測定瘧原蟲感染患者特征二例血細(xì)胞分析儀測定瘧原蟲感染患者特征二例. .中華臨床醫(yī)師雜志，中華臨床醫(yī)師雜志，2011,52011,5（2 2）:633-635:633-635瘧原蟲感染的散點圖（一）瘧原蟲感染的散點圖（一）從儀器從儀器報警報警EOEO增高增高或或無無EOEO分類分類結(jié)果的結(jié)果的1 5011 501份份標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)有標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)有9 9份份瘧瘧 原蟲標(biāo)原蟲標(biāo)本，本，6 6份份散點圖表現(xiàn)為散點圖表現(xiàn)為EOEO與與NEGNEG之間之間間距縮小間距縮小( (圖圖1) 1) ，3 3份份報警白細(xì)胞散報警白細(xì)胞散 點圖點圖異常異常, ,且散點圖顯示且散點圖顯示EOEO與與NEGNEG之間無間距之間無間距( (圖圖2)2)。其他其他1 4921 492份散點圖基本正常。因為是真性份散點圖基本正常。因為是真性E