微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)(人教版)

1、2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組 專題專題2 2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 課題課題1 1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)需要為微生物提供合適的營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境條件需要為微生物提供合適的營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境條件 需要無(wú)菌操作需要無(wú)菌操作 2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組課題目標(biāo)：課題目標(biāo)：1.1.了解了解有關(guān)微生物種類、培養(yǎng)方法和培養(yǎng)基有關(guān)微生物種類、培養(yǎng)方法和培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識(shí)。的基礎(chǔ)知識(shí)。2 2進(jìn)行進(jìn)行無(wú)菌技術(shù)的操作。無(wú)菌技術(shù)的操作。3 3進(jìn)行微生物的培養(yǎng)。進(jìn)行微生物的培養(yǎng)。

2、2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組生物技術(shù)實(shí)踐：生物技術(shù)實(shí)踐：微生物培養(yǎng)與利用：微生物培養(yǎng)與利用： 利用微生物進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)特定的產(chǎn)物。利用微生物進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)特定的產(chǎn)物。生物學(xué)研究中的科學(xué)思想和一般方法：生物學(xué)研究中的科學(xué)思想和一般方法： 設(shè)計(jì)可行的實(shí)驗(yàn)方案和實(shí)驗(yàn)裝置設(shè)計(jì)可行的實(shí)驗(yàn)方案和實(shí)驗(yàn)裝置 對(duì)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)方案做出恰當(dāng)?shù)脑u(píng)價(jià)和修訂對(duì)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)方案做出恰當(dāng)?shù)脑u(píng)價(jià)和修訂考試說(shuō)明考試說(shuō)明從近年情況看，這部分知識(shí)在各區(qū)的模從近年情況看，這部分知識(shí)在各區(qū)的模擬考查中多次涉及！尤其是關(guān)于擬考查中多次涉及！尤其是關(guān)于滅菌方法滅菌方法和和接種方法接種方法

3、的選擇是高頻考點(diǎn)的選擇是高頻考點(diǎn)2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組（一）微生物的類群（一）微生物的類群（1 1）原核生物界：例如細(xì)菌、藍(lán)藻）原核生物界：例如細(xì)菌、藍(lán)藻（2 2）真菌界：例如酵母菌）真菌界：例如酵母菌（3 3）原生生物界：例如草履蟲、變形蟲、）原生生物界：例如草履蟲、變形蟲、 衣藻衣藻（4 4）病毒：例如艾滋病病毒、）病毒：例如艾滋病病毒、SARSSARS病毒病毒目前已經(jīng)知道的微生物約有目前已經(jīng)知道的微生物約有1010萬(wàn)種，分布在萬(wàn)種，分布在以下各界中：以下各界中：一、基礎(chǔ)知識(shí)一、基礎(chǔ)知識(shí)2011201220112012學(xué)年

4、學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組n（學(xué)案）生物分類填空（學(xué)案）生物分類填空生物生物細(xì)胞細(xì)胞生物生物非細(xì)胞生物非細(xì)胞生物病毒病毒真核真核生物生物原核原核生物生物細(xì)菌細(xì)菌動(dòng)物動(dòng)物植物植物真菌真菌藍(lán)藻藍(lán)藻微微生生物物其他其他原生生物原生生物 2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組 知識(shí)梳理：細(xì)菌知識(shí)梳理：細(xì)菌大腸桿菌大腸桿菌淋病球菌淋病球菌肉毒梭菌肉毒梭菌霍亂弧菌霍亂弧菌（單單細(xì)胞細(xì)胞原核原核生物）生物）1.1.細(xì)菌的形態(tài)細(xì)菌的形態(tài)（球、球、 桿、桿、 弧、弧、 旋旋）2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)

5、高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組2.2.細(xì)菌的結(jié)構(gòu)細(xì)菌的結(jié)構(gòu) 知識(shí)梳理：細(xì)菌知識(shí)梳理：細(xì)菌2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組材料一：如果將桿菌接入濃度為材料一：如果將桿菌接入濃度為0.2mol/L0.2mol/L的蔗糖的蔗糖等滲溶液和盛有玻璃珠的三角瓶中加以搖動(dòng)，可等滲溶液和盛有玻璃珠的三角瓶中加以搖動(dòng)，可以使細(xì)胞壁破裂，細(xì)胞內(nèi)含物流出，這樣就可以以使細(xì)胞壁破裂，細(xì)胞內(nèi)含物流出，這樣就可以得到細(xì)胞壁的空殼。空殼成桿狀，而細(xì)胞內(nèi)含物得到細(xì)胞壁的空殼?？諝こ蓷U狀，而細(xì)胞內(nèi)含物卻是圓的。卻是圓的。材料二：如果將細(xì)菌用材料二：如果將細(xì)菌用溶菌酶溶

6、菌酶處理，除去細(xì)胞壁，處理，除去細(xì)胞壁，并接入到低滲溶液中，這時(shí)沒(méi)有細(xì)胞壁的細(xì)胞膜并接入到低滲溶液中，這時(shí)沒(méi)有細(xì)胞壁的細(xì)胞膜就會(huì)破裂，原因是細(xì)胞過(guò)度吸水膨脹使細(xì)胞膜脹就會(huì)破裂，原因是細(xì)胞過(guò)度吸水膨脹使細(xì)胞膜脹裂。用纖維素酶和果膠酶處理則無(wú)此現(xiàn)象。裂。用纖維素酶和果膠酶處理則無(wú)此現(xiàn)象。（1 1）細(xì)菌的細(xì)胞壁）細(xì)菌的細(xì)胞壁2.2.細(xì)菌的結(jié)構(gòu)細(xì)菌的結(jié)構(gòu) 知識(shí)梳理：細(xì)菌知識(shí)梳理：細(xì)菌2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組由材料分析細(xì)胞壁的功能？由材料分析細(xì)胞壁的功能？細(xì)菌細(xì)胞壁的主要功能：細(xì)菌細(xì)胞壁的主要功能：保護(hù)和維持細(xì)胞保護(hù)和維持細(xì)胞形狀形狀細(xì)菌

7、細(xì)胞壁的主要成分：細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成分：肽聚糖肽聚糖（1 1）細(xì)菌的細(xì)胞壁）細(xì)菌的細(xì)胞壁2.2.細(xì)菌的結(jié)構(gòu)細(xì)菌的結(jié)構(gòu) 知識(shí)梳理：細(xì)菌知識(shí)梳理：細(xì)菌2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組（2 2）細(xì)胞膜）細(xì)胞膜成分：成分：脂質(zhì)脂質(zhì)和和蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)功能特性：功能特性：選擇性透過(guò)性選擇性透過(guò)性膜上含有膜上含有呼吸作用呼吸作用等能量代謝的酶系統(tǒng)，等能量代謝的酶系統(tǒng)，是細(xì)胞的產(chǎn)能場(chǎng)所，如可發(fā)生是細(xì)胞的產(chǎn)能場(chǎng)所，如可發(fā)生有氧呼吸有氧呼吸。(3)(3)擬核擬核( (無(wú)成形的細(xì)胞核無(wú)成形的細(xì)胞核) )含有含有一個(gè)一個(gè)DNADNA分子，分子，DNADNA分子不

8、纏繞組蛋分子不纏繞組蛋白，白，不形成染色體不形成染色體2.2.細(xì)菌的結(jié)構(gòu)細(xì)菌的結(jié)構(gòu) 知識(shí)梳理：細(xì)菌知識(shí)梳理：細(xì)菌2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組2.2.細(xì)菌的結(jié)構(gòu)細(xì)菌的結(jié)構(gòu) 知識(shí)梳理：細(xì)菌知識(shí)梳理：細(xì)菌（4 4）細(xì)胞質(zhì)）細(xì)胞質(zhì)核糖體核糖體：蛋白質(zhì)合成場(chǎng)所：蛋白質(zhì)合成場(chǎng)所質(zhì)粒質(zhì)粒：小型環(huán)型：小型環(huán)型DNADNA，含有，含有抗藥性抗藥性基因、基因、固氮固氮基因、基因、抗生素抗生素 生成生成基因基因貯藏性顆粒貯藏性顆粒：淀粉粒、：淀粉粒、 硫粒硫粒2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組2.2

9、.細(xì)菌的結(jié)構(gòu)細(xì)菌的結(jié)構(gòu) 知識(shí)梳理：細(xì)菌知識(shí)梳理：細(xì)菌（5 5）莢膜）莢膜作用：作用：防止細(xì)菌丟失水分；防止細(xì)菌丟失水分；防止被真核生物吞防止被真核生物吞噬；噬；防止噬菌體的侵襲。防止噬菌體的侵襲。 成分：主要為水分、成分：主要為水分、多糖多糖、多肽、多肽2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組2.2.細(xì)菌的結(jié)構(gòu)細(xì)菌的結(jié)構(gòu) 知識(shí)梳理：細(xì)菌知識(shí)梳理：細(xì)菌 某些細(xì)菌在其生長(zhǎng)發(fā)育后期，在細(xì)胞內(nèi)某些細(xì)菌在其生長(zhǎng)發(fā)育后期，在細(xì)胞內(nèi)形成一個(gè)圓形或橢圓形、形成一個(gè)圓形或橢圓形、厚壁厚壁、含水量極低含水量極低、抗逆性極強(qiáng)抗逆性極強(qiáng)的的休眠體休眠體，稱為芽孢，稱為

10、芽孢( (內(nèi)生孢內(nèi)生孢子）。子）。能夠使細(xì)菌度過(guò)不良的環(huán)境。能夠使細(xì)菌度過(guò)不良的環(huán)境。每一個(gè)每一個(gè)細(xì)菌形成一個(gè)芽孢，所以其細(xì)菌形成一個(gè)芽孢，所以其沒(méi)有沒(méi)有繁殖功能。繁殖功能。（6 6）芽孢）芽孢2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組 知識(shí)梳理：細(xì)菌知識(shí)梳理：細(xì)菌2.2.細(xì)菌的結(jié)構(gòu)細(xì)菌的結(jié)構(gòu)（6 6）芽孢）芽孢2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組 知識(shí)梳理：細(xì)菌知識(shí)梳理：細(xì)菌2.2.細(xì)菌的結(jié)構(gòu)細(xì)菌的結(jié)構(gòu)（7 7）鞭毛）鞭毛參與某些細(xì)菌運(yùn)動(dòng)參與某些細(xì)菌運(yùn)動(dòng)u莢膜、芽孢等莢膜、芽孢等不是不是細(xì)胞

11、生活的必要結(jié)構(gòu)，細(xì)胞生活的必要結(jié)構(gòu)，但它對(duì)細(xì)菌在環(huán)境中的生存但它對(duì)細(xì)菌在環(huán)境中的生存有利有利。2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組 知識(shí)梳理：細(xì)菌知識(shí)梳理：細(xì)菌3 3、細(xì)菌的繁殖：、細(xì)菌的繁殖： 細(xì)菌的主要繁殖方式：細(xì)菌的主要繁殖方式：分裂生殖（二分裂）分裂生殖（二分裂）分裂中的鏈球菌分裂中的鏈球菌分裂中的大腸桿菌分裂中的大腸桿菌過(guò)程包括：過(guò)程包括：1 1、細(xì)胞增大、伸長(zhǎng)、細(xì)胞增大、伸長(zhǎng)2 2、DNADNA分子復(fù)制分子復(fù)制3 3、細(xì)胞中部的細(xì)胞膜、細(xì)胞中部的細(xì)胞膜和細(xì)胞壁向內(nèi)生長(zhǎng)形成和細(xì)胞壁向內(nèi)生長(zhǎng)形成隔膜，細(xì)胞質(zhì)一分為二，隔膜，細(xì)胞質(zhì)一分

12、為二，形成二個(gè)子細(xì)胞形成二個(gè)子細(xì)胞2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組4.4.菌落菌落（高三考查較多）（高三考查較多）（1 1）定義：是）定義：是單個(gè)或少數(shù)細(xì)菌單個(gè)或少數(shù)細(xì)菌在在固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基上大量繁殖，形成肉眼可見具有一定形態(tài)結(jié)上大量繁殖，形成肉眼可見具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的構(gòu)的子細(xì)胞群體子細(xì)胞群體。舉例：有莢膜細(xì)菌：菌落光滑。舉例：有莢膜細(xì)菌：菌落光滑。S S型型 無(wú)莢膜細(xì)菌：菌落粗糙。無(wú)莢膜細(xì)菌：菌落粗糙。R R型型（2 2）特征：表現(xiàn)在菌落的）特征：表現(xiàn)在菌落的大小、形狀、光澤大小、形狀、光澤度、顏色、硬度透明度度、顏色、硬度透明度

13、等方面。等方面。（3 3）功能：菌落特征是）功能：菌落特征是鑒別菌種鑒別菌種的重要依據(jù)的重要依據(jù) 知識(shí)梳理：細(xì)菌知識(shí)梳理：細(xì)菌2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組p如何培養(yǎng)細(xì)胞微生物（大腸桿菌）？如何培養(yǎng)細(xì)胞微生物（大腸桿菌）？p如何培養(yǎng)病毒（噬菌體）？如何培養(yǎng)病毒（噬菌體）？u思考：思考：用特定的培養(yǎng)基用特定的培養(yǎng)基用特定的活宿主細(xì)胞用特定的活宿主細(xì)胞標(biāo)記標(biāo)記3

14、535S S的噬菌體的噬菌體用含用含3535S S培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌用用3535S S物質(zhì)配制培養(yǎng)基物質(zhì)配制培養(yǎng)基用噬菌體侵染含用噬菌體侵染含3535S S的細(xì)菌的細(xì)菌3232P P3232P P3232P P3232P P2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組u細(xì)胞微生物細(xì)胞微生物要利用要利用培養(yǎng)基培養(yǎng)基可以培養(yǎng)，但由可以培養(yǎng)，但由于于病毒病毒（非細(xì)胞微生物）是營(yíng)專性寄生生活（非細(xì)胞微生物）是營(yíng)專性寄生生活的生物，只能利用的生物，只能利用活細(xì)胞培養(yǎng)活細(xì)胞培養(yǎng)。u由于病毒對(duì)寄主的選擇有專一性，因此在由于病毒對(duì)寄主的選擇有專一性，因此

15、在培養(yǎng)不同的病毒時(shí)，所利用的活細(xì)胞類型要培養(yǎng)不同的病毒時(shí)，所利用的活細(xì)胞類型要不同。不同。u植物病毒要用植物細(xì)胞培養(yǎng)，噬菌體就要植物病毒要用植物細(xì)胞培養(yǎng)，噬菌體就要用細(xì)菌培養(yǎng)，而流感病毒（動(dòng)物病毒）一般用細(xì)菌培養(yǎng)，而流感病毒（動(dòng)物病毒）一般都用雞胚細(xì)胞培養(yǎng)。都用雞胚細(xì)胞培養(yǎng)。2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組( (二二) )微生物培養(yǎng)基微生物培養(yǎng)基1.1.培養(yǎng)基概念：培養(yǎng)基概念：人工配制人工配制的用于培養(yǎng)微生物（或動(dòng)物、植的用于培養(yǎng)微生物（或動(dòng)物、植物的細(xì)胞、組織）的物的細(xì)胞、組織）的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。2.2.培養(yǎng)基的成分：培養(yǎng)基的成分：

16、微生物的元素組成：微生物的元素組成：C C、H H、O O、N N、P P、S S營(yíng)養(yǎng)來(lái)源：自然界中的無(wú)機(jī)物、有機(jī)物營(yíng)養(yǎng)來(lái)源：自然界中的無(wú)機(jī)物、有機(jī)物微生物生長(zhǎng)需要的物質(zhì)微生物生長(zhǎng)需要的物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)要素營(yíng)養(yǎng)要素 ( (碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、水碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、水) )2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組( (二二) )微生物培養(yǎng)基微生物培養(yǎng)基2.2.培養(yǎng)基的成分：培養(yǎng)基的成分：（1 1）碳源）碳源n概念：能為微生物提供所需碳元素的營(yíng)養(yǎng)概念：能為微生物提供所需碳元素的營(yíng)養(yǎng) 物質(zhì)，需要量物質(zhì)，需要量最大最大。n種類：種類：無(wú)機(jī)碳源無(wú)機(jī)碳源 COCO

17、2 2、NaHCONaHCO3 3 有機(jī)碳源有機(jī)碳源( (有機(jī)物有機(jī)物) ) 糖類糖類、脂肪酸等、脂肪酸等 有機(jī)物；有機(jī)物；( (天然成分混合物天然成分混合物) )花生粉餅花生粉餅 石油等石油等l常用的碳源：常用的碳源：糖類（尤其是糖類（尤其是葡萄糖葡萄糖）2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組( (二二) )微生物培養(yǎng)基微生物培養(yǎng)基2.2.培養(yǎng)基的成分：培養(yǎng)基的成分：（1 1）碳源）碳源n功能：功能：構(gòu)成微生物的細(xì)胞質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物；構(gòu)成微生物的細(xì)胞質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物； 異養(yǎng)微生物異養(yǎng)微生物主要能源物質(zhì)主要能源物質(zhì)20112012201120

18、12學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組u思考：思考：糖類（葡萄糖）；花生粉餅等糖類（葡萄糖）；花生粉餅等1.1.大腸桿菌，硝化細(xì)菌，藍(lán)細(xì)菌，乳酸菌分大腸桿菌，硝化細(xì)菌，藍(lán)細(xì)菌，乳酸菌分別選用哪種碳源？別選用哪種碳源？2.2.實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物和工業(yè)生產(chǎn)微生物代謝實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物和工業(yè)生產(chǎn)微生物代謝產(chǎn)物時(shí)，分別選用哪種碳源？產(chǎn)物時(shí)，分別選用哪種碳源？糖類，二氧化碳，二氧化碳，糖類糖類，二氧化碳，二氧化碳，糖類2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組( (二二) )微生物培養(yǎng)基微生物培養(yǎng)基2.2.培養(yǎng)基的成分：培養(yǎng)基的成分：（

19、2 2）氮源）氮源n概念：能為微生物提供所需氮元素的營(yíng)養(yǎng)概念：能為微生物提供所需氮元素的營(yíng)養(yǎng) 物質(zhì)物質(zhì)n種類：種類：無(wú)機(jī)氮源：無(wú)機(jī)氮源：N N2 2、NHNH3 3、銨鹽、硝酸鹽、銨鹽、硝酸鹽、 尿素；尿素； 有機(jī)氮源：有機(jī)氮源：牛肉膏、蛋白胨牛肉膏、蛋白胨2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組l常用的氮源：常用的氮源：銨鹽、硝酸鹽銨鹽、硝酸鹽自養(yǎng)型自養(yǎng)型生物生物-綠色植物綠色植物( (銨鹽、硝酸鹽銨鹽、硝酸鹽) )異養(yǎng)型異養(yǎng)型生物生物-動(dòng)物、大量異養(yǎng)微生物動(dòng)物、大量異養(yǎng)微生物 （“含含C C、H H、O O、N”N”的有機(jī)物常是的有機(jī)物常是

20、異養(yǎng)異養(yǎng)微生物微生物的的能源、碳源兼氮源能源、碳源兼氮源）( (二二) )微生物培養(yǎng)基微生物培養(yǎng)基2.2.培養(yǎng)基的成分：培養(yǎng)基的成分：（2 2）氮源）氮源n功能：合成功能：合成蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)、核酸核酸以及含氮的代謝以及含氮的代謝 產(chǎn)物產(chǎn)物2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組p培養(yǎng)根瘤菌、大腸桿菌、硝化細(xì)菌時(shí)分培養(yǎng)根瘤菌、大腸桿菌、硝化細(xì)菌時(shí)分別需要哪一類氮源？別需要哪一類氮源？u思考：思考：N N2 2，銨鹽或硝酸鹽，銨鹽或硝酸鹽，NHNH3 32011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組( (二

21、二) )微生物培養(yǎng)基微生物培養(yǎng)基2.2.培養(yǎng)基的成分：培養(yǎng)基的成分：u注意：關(guān)于能源物質(zhì)注意：關(guān)于能源物質(zhì)自養(yǎng)型：自養(yǎng)型： 光能自養(yǎng)：太陽(yáng)光光能自養(yǎng)：太陽(yáng)光 化能自養(yǎng)：無(wú)機(jī)物（氧化放能）化能自養(yǎng)：無(wú)機(jī)物（氧化放能）【例例】硝化細(xì)菌硝化細(xì)菌 氨的氧化氨的氧化異養(yǎng)型：異養(yǎng)型：有機(jī)物（氧化分解放能）有機(jī)物（氧化分解放能）（3 3）水）水（4 4）無(wú)機(jī)鹽）無(wú)機(jī)鹽2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組u思考思考p若乳酸菌、根瘤菌、固氮藍(lán)藻、硝化細(xì)菌若乳酸菌、根瘤菌、固氮藍(lán)藻、硝化細(xì)菌混合在一起，我們配制什么樣的培養(yǎng)基可混合在一起，我們配制什么樣的培養(yǎng)基

22、可以將三種微生物分離？以將三種微生物分離？碳源碳源氮源氮源能源能源( (物質(zhì)物質(zhì)) )乳酸菌乳酸菌根瘤菌根瘤菌固氮藍(lán)藻固氮藍(lán)藻硝化細(xì)菌硝化細(xì)菌光能光能糖類等含糖類等含碳有機(jī)物碳有機(jī)物N N2 2有機(jī)物有機(jī)物 COCO2 2銨鹽、硝酸鹽、銨鹽、硝酸鹽、有機(jī)氮有機(jī)氮糖類等含糖類等含碳有機(jī)物碳有機(jī)物有機(jī)物有機(jī)物氨氨氨氨COCO2 2N N2 22011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組( (二二) )微生物培養(yǎng)基微生物培養(yǎng)基3.3.滿足微生物生長(zhǎng)的條件：滿足微生物生長(zhǎng)的條件：培養(yǎng)基除培養(yǎng)基除要提供上述幾種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，要提供上述幾種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還

23、還滿足微生物生長(zhǎng)的滿足微生物生長(zhǎng)的 pH pH 、 特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 和和氧氣氧氣 等要求。等要求。pHpH：真菌：真菌 5.06.0 細(xì)菌細(xì)菌 6.57.5 放線菌放線菌 7.58.52011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組( (二二) )微生物培養(yǎng)基微生物培養(yǎng)基3.3.滿足微生物生長(zhǎng)的條件：滿足微生物生長(zhǎng)的條件：特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) n概念：微生物生長(zhǎng)不可缺少的概念：微生物生長(zhǎng)不可缺少的微量有機(jī)物微量有機(jī)物 n添加原因添加原因：微生物自身：微生物自身缺乏合成這些物質(zhì)缺乏合成這些物質(zhì)的酶的酶或或合成能力有限合成能力有限n種類：各種

24、種類：各種維生素維生素、氨基酸氨基酸、堿基堿基等等n功能：功能：酶酶、核酸核酸的組成成分的組成成分n例如：培養(yǎng)乳酸菌時(shí)需要添加例如：培養(yǎng)乳酸菌時(shí)需要添加維生素維生素n但不是所有的微生物培養(yǎng)時(shí)都需要外源添但不是所有的微生物培養(yǎng)時(shí)都需要外源添加。加。生長(zhǎng)因子生長(zhǎng)因子2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組( (二二) )微生物培養(yǎng)基微生物培養(yǎng)基4.4.培養(yǎng)基的配制培養(yǎng)基的配制原則：原則：（1 1）目的明確選材料（代謝特征、用途）目的明確選材料（代謝特征、用途）（2 2）營(yíng)養(yǎng)協(xié)調(diào)）營(yíng)養(yǎng)協(xié)調(diào) （注意營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的（注意營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度濃度和和比例比例）（3

25、3）pHpH適宜適宜2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組( (二二) )微生物培養(yǎng)基微生物培養(yǎng)基（1 1）按物理性質(zhì)劃分：）按物理性質(zhì)劃分：5.5.培養(yǎng)基的種類：培養(yǎng)基的種類：u（固體、半固體培養(yǎng)基需添加（固體、半固體培養(yǎng)基需添加凝固劑凝固劑，如如瓊脂瓊脂；兩者的差別是添加量的；兩者的差別是添加量的多、少多、少）液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體半固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基（用于工業(yè)生產(chǎn)）（用于工業(yè)生產(chǎn)）（用于觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、（用于觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、鑒定菌種）鑒定菌種）（用于微生物的（用于微生物的分離、計(jì)數(shù)分離、計(jì)數(shù)）微生物在其表面生長(zhǎng)

26、可形成菌落微生物在其表面生長(zhǎng)可形成菌落2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組( (二二) )微生物培養(yǎng)基微生物培養(yǎng)基5.5.培養(yǎng)基的種類：培養(yǎng)基的種類：（2 2）按化學(xué)成分劃分：）按化學(xué)成分劃分： 合成合成培養(yǎng)基培養(yǎng)基 天然天然培養(yǎng)基培養(yǎng)基用化學(xué)成分已知的化合物用化學(xué)成分已知的化合物配制配制含化學(xué)成分不明的天然物含化學(xué)成分不明的天然物質(zhì)，如酵母膏質(zhì)，如酵母膏前者前者常用于實(shí)驗(yàn)室中對(duì)微生物的常用于實(shí)驗(yàn)室中對(duì)微生物的分類、鑒分類、鑒別；別；后者后者常用于常用于大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)。2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)

27、高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組進(jìn)行選擇培養(yǎng)可以進(jìn)行選擇培養(yǎng)可以增增加所需目的菌的濃度加所需目的菌的濃度( (二二) )微生物培養(yǎng)基微生物培養(yǎng)基5.5.培養(yǎng)基的種類：培養(yǎng)基的種類：選擇培養(yǎng)基：選擇培養(yǎng)基：鑒別培養(yǎng)基：鑒別培養(yǎng)基：加入加入某化學(xué)物質(zhì)某化學(xué)物質(zhì)，以，以抑制抑制不需要的微生物不需要的微生物的生長(zhǎng)，的生長(zhǎng)，促進(jìn)促進(jìn)所需要微生物的生長(zhǎng)。所需要微生物的生長(zhǎng)。加入某種加入某種指示劑或化學(xué)藥品指示劑或化學(xué)藥品配制而成的，配制而成的，用以用以鑒定鑒定不同種類的微生物。不同種類的微生物。特定菌種顯色，特定菌種顯色，其他菌種其他菌種不受抑制不受抑制、但不顯色。、但不顯色。（3 3）按用途劃分：）按用

28、途劃分：（作用：（作用：分離微生物、分離微生物、進(jìn)行選擇培養(yǎng)進(jìn)行選擇培養(yǎng)） （作用：（作用：鑒別微生物鑒別微生物） 2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組青霉素青霉素抗青霉素基因抗青霉素基因選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基在基因工程中，對(duì)導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌的篩選在基因工程中，對(duì)導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌的篩選2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組伊紅美藍(lán)伊紅美藍(lán)鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基大腸桿菌大腸桿菌在在伊紅美藍(lán)伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上菌落呈現(xiàn)培養(yǎng)基上菌落呈現(xiàn)黑色黑色 2011201220112012學(xué)年學(xué)年 17

29、1171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組u常見的選擇培養(yǎng)基舉例：常見的選擇培養(yǎng)基舉例：（1 1）添加：）添加：青霉素青霉素 ：抑制細(xì)菌、放線菌抑制細(xì)菌、放線菌保留（分離）真菌，如霉菌、酵母菌保留（分離）真菌，如霉菌、酵母菌高濃度高濃度NaClNaCl：抑制多種細(xì)菌，：抑制多種細(xì)菌，分離分離金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌( (二二) )微生物培養(yǎng)基微生物培養(yǎng)基5.5.培養(yǎng)基的種類：培養(yǎng)基的種類：（3 3）按用途劃分：）按用途劃分：2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組u常見的選擇培養(yǎng)基舉例：常見的選擇培養(yǎng)基舉例：（2 2）缺少：）缺少：培養(yǎng)基

30、培養(yǎng)基缺少有機(jī)碳源缺少有機(jī)碳源分離分離自養(yǎng)型微生物自養(yǎng)型微生物（利用（利用COCO2 2 ）培養(yǎng)基培養(yǎng)基缺少氮源缺少氮源分離分離固氮微生物固氮微生物（利用（利用N N2 2 ）( (二二) )微生物培養(yǎng)基微生物培養(yǎng)基5.5.培養(yǎng)基的種類：培養(yǎng)基的種類：（3 3）按用途劃分：）按用途劃分：2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組（三）無(wú)菌技術(shù)（三）無(wú)菌技術(shù)1.1.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵( (目的）是目的）是 防止外防止外來(lái)雜菌的入侵來(lái)雜菌的入侵 。2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生

31、物備課組（三）無(wú)菌技術(shù)（三）無(wú)菌技術(shù)2.2.無(wú)菌技術(shù)包括：無(wú)菌技術(shù)包括：（1 1）對(duì)實(shí)驗(yàn)操作空間、操作者的衣著和手）對(duì)實(shí)驗(yàn)操作空間、操作者的衣著和手進(jìn)行進(jìn)行 清潔和消毒清潔和消毒 ；（2 2）將培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器）將培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行具進(jìn)行 滅菌滅菌 ；（3 3）為避免周圍微生物污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)）為避免周圍微生物污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在在 酒精燈火焰附近酒精燈火焰附近 旁進(jìn)行；旁進(jìn)行；（4 4）避免已滅菌處理的材料用具與）避免已滅菌處理的材料用具與 周圍物周圍物品品 相接觸。相接觸。2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課

32、組u思考思考p無(wú)菌技術(shù)除了防止培養(yǎng)物被污染外，還具無(wú)菌技術(shù)除了防止培養(yǎng)物被污染外，還具有什么目的？有什么目的？有效避免操作者自身被微生物感染有效避免操作者自身被微生物感染u思考：思考：p消毒和滅菌的區(qū)別？哪一個(gè)更徹底？消毒和滅菌的區(qū)別？哪一個(gè)更徹底？p什么時(shí)候需要消毒，什么時(shí)候需要滅菌？什么時(shí)候需要消毒，什么時(shí)候需要滅菌？2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組消毒消毒是指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法是指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部的僅殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物營(yíng)養(yǎng)體部分微生物營(yíng)養(yǎng)體（不包括（不包括芽孢和孢子芽孢和孢子）

33、。）。滅菌滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外外所有的微生物所有的微生物，包括芽孢和孢子。，包括芽孢和孢子。滅菌滅菌效果更徹底，用于各種效果更徹底，用于各種金屬、金屬、 玻璃器玻璃器具具。消毒消毒用于各種用于各種實(shí)驗(yàn)操作空間、操作者的實(shí)驗(yàn)操作空間、操作者的衣衣著和手著和手。（三）無(wú)菌技術(shù)（三）無(wú)菌技術(shù)2.2.無(wú)菌技術(shù)包括：無(wú)菌技術(shù)包括：2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組（三）無(wú)菌技術(shù)（三）無(wú)菌技術(shù)3.3.消毒方法：消毒方法：（1 1）日常生活經(jīng)常用到的是）日常生活經(jīng)常用到的是 煮沸煮沸 消毒法；消毒法；（

34、2 2）對(duì)一些不耐高溫的液體，則使用）對(duì)一些不耐高溫的液體，則使用 巴氏巴氏 消毒法，如牛奶。消毒法，如牛奶。（3 3）對(duì)接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)首先噴）對(duì)接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)首先噴灑灑 石炭酸或煤酚皂石炭酸或煤酚皂 等溶液以增強(qiáng)消毒效等溶液以增強(qiáng)消毒效果，然后使用果，然后使用 紫外線紫外線 進(jìn)行物理消毒。進(jìn)行物理消毒。（4 4）實(shí)驗(yàn)操作者的雙手使用）實(shí)驗(yàn)操作者的雙手使用70%70%酒精酒精 進(jìn)行消進(jìn)行消毒。毒。（5 5）飲水水源用）飲水水源用 氯氣氯氣 進(jìn)行消毒。進(jìn)行消毒。2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組（三）無(wú)菌技術(shù)（三）無(wú)

35、菌技術(shù)4.4.滅菌方法：滅菌方法：（1 1）灼燒灼燒滅菌法：用于金屬用具（滅菌法：用于金屬用具（接種環(huán)接種環(huán)、接種針、接種針）、）、試管口和瓶口試管口和瓶口的滅菌；的滅菌；2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組（三）無(wú)菌技術(shù)（三）無(wú)菌技術(shù)4.4.滅菌方法：滅菌方法：（2 2）干熱干熱滅菌法：用于玻璃器皿、金屬用具滅菌法：用于玻璃器皿、金屬用具的滅菌的滅菌 ，所用設(shè)備是，所用設(shè)備是 干熱滅菌箱干熱滅菌箱 ；160170 ，12小時(shí)小時(shí)2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組（三）無(wú)菌技術(shù)（三）無(wú)

36、菌技術(shù)4.4.滅菌方法：滅菌方法：（3 3）高壓蒸汽高壓蒸汽滅菌法：用于滅菌法：用于培養(yǎng)基、無(wú)菌水培養(yǎng)基、無(wú)菌水、玻璃器皿等的滅菌玻璃器皿等的滅菌 ，所用設(shè)備是，所用設(shè)備是 高壓高壓蒸汽滅菌鍋蒸汽滅菌鍋 。高壓滅菌鍋高壓滅菌鍋121121，100kPa100kPa，15-3015-30分鐘分鐘2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組【補(bǔ)充補(bǔ)充】消毒和滅菌的比較（見消毒和滅菌的比較（見5+35+3P.263P.263表）表）2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組二、實(shí)驗(yàn)操作二、實(shí)驗(yàn)操作（一）制備

37、牛肉膏蛋白胨（一）制備牛肉膏蛋白胨固體固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基1.1.計(jì)算：計(jì)算：2.2.稱量：稱量：3.3.溶化：溶化： 加水定容，調(diào)加水定容，調(diào)pHpH4.4.滅菌：滅菌：5.5.倒平板：（或擱置斜面）倒平板：（或擱置斜面）包好再高壓蒸汽滅菌（包好再高壓蒸汽滅菌（121121，100100kPakPa，15-3015-30分鐘）。分鐘）。斜面培養(yǎng)基需先斜面培養(yǎng)基需先分裝分裝，加，加棉塞棉塞，再包好、滅菌。，再包好、滅菌。培養(yǎng)基冷卻到培養(yǎng)基冷卻到5050 ，酒精燈火焰酒精燈火焰旁操作。旁操作。2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組稱量稱量20112

38、01220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組調(diào)調(diào)pHpH2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組培養(yǎng)基分裝培養(yǎng)基分裝2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組1/51/52011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組加棉塞加棉塞2/32/32011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組包

39、扎包扎滅菌滅菌2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組擱置斜面擱置斜面斜面不超過(guò)試管總長(zhǎng)的斜面不超過(guò)試管總長(zhǎng)的1/21/22011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組倒平板倒平板夾夾倒倒灼灼倒倒2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組u思考：思考：（1 1）培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到）培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到5050左右時(shí)，左右時(shí)，才能用來(lái)倒平板。可用才能用來(lái)倒平板。可用_的辦法估計(jì)培養(yǎng)基的溫度。的辦法估計(jì)培養(yǎng)基的溫度。（2 2）為什么需要使錐形瓶的瓶

40、口通過(guò)火焰？）為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰？ 灼燒滅菌，防止瓶口被微生物污染。灼燒滅菌，防止瓶口被微生物污染。 感覺(jué)盛有培養(yǎng)基感覺(jué)盛有培養(yǎng)基的錐形瓶不燙手的錐形瓶不燙手2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組(3)(3)平板冷凝后，為什么要將平板倒置？平板冷凝后，為什么要將平板倒置？平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也較高，將平板倒后的培養(yǎng)基表面的濕度也較高，將平板倒置，置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，發(fā)，又可以防

41、止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。造成污染。u思考：思考：2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組u思考：思考：(4)(4)在倒平板的過(guò)程中，如果不小心將培養(yǎng)基在倒平板的過(guò)程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來(lái)培養(yǎng)微生物嗎？為什么？用來(lái)培養(yǎng)微生物嗎？為什么？不能；空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底不能；空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生。之間的培養(yǎng)基上滋生。2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組【提醒關(guān)于斜面培養(yǎng)的問(wèn)

42、題提醒關(guān)于斜面培養(yǎng)的問(wèn)題】l配制斜面培養(yǎng)基中，試管要加塞棉塞的配制斜面培養(yǎng)基中，試管要加塞棉塞的目的是目的是保持通氣并防止雜菌感染保持通氣并防止雜菌感染。l試管培養(yǎng)基形成斜面的作用是試管培養(yǎng)基形成斜面的作用是增大接種增大接種面積面積。2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組（二）純化大腸桿菌：（二）純化大腸桿菌：1.1.純化培養(yǎng)技術(shù)：純化培養(yǎng)技術(shù)：自然環(huán)境中，微生物混在一起生長(zhǎng)，要想自然環(huán)境中，微生物混在一起生長(zhǎng)，要想純培養(yǎng)，首先要純培養(yǎng)，首先要將單個(gè)細(xì)胞與其他細(xì)胞分離將單個(gè)細(xì)胞與其他細(xì)胞分離開，進(jìn)而培養(yǎng)成可見的群體（即菌落）開，進(jìn)而培養(yǎng)成可見

43、的群體（即菌落）。2.2.常見接種方法：常見接種方法：（高頻考點(diǎn)）（高頻考點(diǎn)）平板劃線法平板劃線法：主要用于純化培養(yǎng)主要用于純化培養(yǎng)稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法：主要用于分離菌種并計(jì)數(shù)主要用于分離菌種并計(jì)數(shù)2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組（二）純化大腸桿菌：（二）純化大腸桿菌：其他接種方法：其他接種方法：斜面接種、穿刺接種斜面接種、穿刺接種這些技術(shù)的操作方法各不相同，但其這些技術(shù)的操作方法各不相同，但其核心都是：核心都是：_防止雜菌污染，保證培養(yǎng)物的純度防止雜菌污染，保證培養(yǎng)物的純度2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171

44、中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組（二）純化大腸桿菌：（二）純化大腸桿菌：2.2.常見接種方法：常見接種方法：(1)(1)平板劃線法：平板劃線法：通過(guò)接種環(huán)在通過(guò)接種環(huán)在固體固體培養(yǎng)基表面培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線連續(xù)劃線操操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在表面。在數(shù)次劃線數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可分離到由后培養(yǎng)，可分離到由一個(gè)一個(gè)細(xì)胞細(xì)胞繁殖而來(lái)的菌落。繁殖而來(lái)的菌落。此法此法主要用于主要用于純化培養(yǎng)純化培養(yǎng)接種環(huán)接種環(huán)2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組模擬平板劃線：模擬平板劃線：201120122

45、0112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組 平板劃線平板劃線2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組（二）純化大腸桿菌：（二）純化大腸桿菌：2.2.常見接種方法：常見接種方法：(1)(1)平板劃線法：平板劃線法：p接種過(guò)程中哪些步驟保證了無(wú)菌操作？接種過(guò)程中哪些步驟保證了無(wú)菌操作？對(duì)接種環(huán)、瓶對(duì)接種環(huán)、瓶( (皿皿) )口及時(shí)進(jìn)行灼燒滅菌；口及時(shí)進(jìn)行灼燒滅菌；迅速進(jìn)行操作；迅速進(jìn)行操作；將劃線后的平板倒置。將劃線后的平板倒置。

46、2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組u思考思考為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？接種環(huán)嗎？為什么？第一步灼燒：第一步灼燒：消滅接種環(huán)上的微生物避免污染培消滅接種環(huán)上的微生物避免污染培養(yǎng)物；養(yǎng)物；每次劃線前灼燒：每次劃線前灼燒：為了殺死上一次劃線結(jié)束后，為了殺死上一次劃線結(jié)束后，接種環(huán)殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上接種環(huán)殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端，從而

47、通過(guò)劃的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端，從而通過(guò)劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。少，以便得到菌落。操作結(jié)束后灼燒：操作結(jié)束后灼燒：殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境及感染操作者。免細(xì)菌污染環(huán)境及感染操作者。2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組u思考思考在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？再進(jìn)行劃線？避免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種避免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種在作第二次及其后的劃線操作時(shí)，為什么在作

48、第二次及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？總是從上一次劃線的末端開始劃線？劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。少，最終得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。2011201220112012學(xué)年學(xué)年 171171中學(xué)高三生物備課組中學(xué)高三生物備課組（二）純化大腸桿菌：（二）純化大腸桿菌：2.2.常見接種方法：常見接種方法：(2)(2)稀釋涂布平板法：稀釋涂布平板法：將將菌液菌液進(jìn)行進(jìn)行一系列的梯度稀釋一系列的梯度稀釋后，分別涂后，分別涂布到布到固體固體培養(yǎng)基表面。稀釋度足夠高時(shí)，能培養(yǎng)基表面。稀釋度足夠高時(shí)，能