黃曲霉M1檢測方案2

1、黃曲霉毒素M1檢測方案方案一、免疫親和層析凈化高效液相色譜法（GB 5413.37-2010第二法）一、原理：親和柱內(nèi)含有的黃曲霉毒素M1特異性單克隆抗體交聯(lián)在固體支持物上，當(dāng)試樣通過親和柱時，抗體選擇性的與黃曲霉毒素M1(抗原)鍵合，形成抗體抗原復(fù)合體。用水洗柱除去柱內(nèi)雜質(zhì)，然后用洗脫劑洗脫吸附在柱上的黃曲霉毒素M1，收集洗脫液。用帶有熒光檢測器的高效液相色譜儀測定洗脫液中黃曲霉毒素M1含量。二、所需儀器 1、高效液相色譜儀（配熒光檢測器具有365 nm激發(fā)波長、435 nm發(fā)射波長，在適當(dāng)?shù)纳V條件下能夠測定0.02 ng的黃曲霉毒素M1(相當(dāng)于5倍噪音)） 2、離心機（轉(zhuǎn)容50ml角轉(zhuǎn)子

2、，轉(zhuǎn)速10000r/min） 3、氮吹儀 4、固相萃取裝置（帶真空系統(tǒng)） 5、水浴鍋（溫控30±2，50±2；溫范2560） 6、天平：感量為0.01 g 7、PH計：精度0.01 8、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（奶油樣品制備） 9、紫外分光光度計（標(biāo)液濃度的校正，波長范圍為200nm400nm）三、試劑及耗材1、黃曲霉毒素M1免疫親和柱2、黃曲霉毒素M1標(biāo)準(zhǔn)品3、反相色譜柱 C18 4.6*250 加有反相色譜材料的保護柱5、移液管：1ml, 2ml, 50ml6、燒 杯：50ml, 250ml7、分液漏斗：250ml（干酪和奶油樣品制備）8、容量瓶：100ml9、一次性注射器：10ml

3、, 50ml10、針式過濾器（水系）0.22um，1311、乙腈(CH3CN)：色譜醇12、甲醇：分析醇13、三氯甲烷：分析醇14、石油醚：分析醇15、帶刻度的磨口錐形玻璃試管：5 mL、10 mL、20 mL16、離心管：50ml四、操作方法依據(jù)GB 5413.37-2010第二法五、供應(yīng)產(chǎn)品明細(xì)品名規(guī)格報價品牌備注高效液相色譜儀熒光檢測器黃曲霉毒素M1免疫親和柱25支/盒5130.00德國R-Biopharm可供選擇25支/盒3900.00agela離心機天平方案二、酶聯(lián)免疫吸附法（可定性、定量檢測牛乳及其他乳制品等樣本中的黃曲霉毒素M1）一、原理標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品試液加入各自板孔，游離的黃曲

4、霉毒素M1與微孔中包被的黃曲霉毒素M1抗體結(jié)合，沒有結(jié)合的物質(zhì)在洗滌中被清除。再加入黃曲霉毒素M1酶標(biāo)記物，將沒有結(jié)合的抗體位點全部覆蓋，結(jié)合的酶標(biāo)記物通過顯色液顯示出來。最后加入終止液，用酶標(biāo)儀在450nm測定吸光度值，吸光度值與樣品中的黃曲霉毒素M1含量成反比。二、所需儀器和耗材1、微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm 2、冷凍離心機（轉(zhuǎn)容10ml角轉(zhuǎn)子和50ml角轉(zhuǎn)子，轉(zhuǎn)速不低與3500轉(zhuǎn)/ min） 3、天平：感量為0.01 g 4、微量移液器：單道20ml200ml、200ml1000ml、多道250ml 5、振蕩器 6、刻度移液管：25ml 7、洗耳球8、三角瓶：100ml9、聚苯乙

5、烯離心管：10ml/50ml10、去離子水三、操作方法詳情見黃曲霉毒素M1酶聯(lián)免疫試劑盒說明書四、供應(yīng)產(chǎn)品明細(xì)品名規(guī)格報價品牌備注微孔板酶標(biāo)儀35000.00德國R-Biopharm黃曲霉毒素M1酶聯(lián)免疫試劑盒96孔4950.00德國R-Biopharm可供選擇96孔3000.00博納艾杰爾48孔1800.00博納艾杰爾微量移液器20ml200ml1650.00美國 Thermo微量移液器吸頭20ml200ml 1000支/包40.00國產(chǎn)Thermo配套價格：150.00,可選擇微量移液器吸頭盒20ml200ml15.00國產(chǎn)微量移液器200ml1000ml600.00美國 Thermo微量

6、移液器吸頭200ml1000ml500支/包40.00國產(chǎn)Thermo配套價格：150.00,可選擇微量移液器吸頭盒200ml1000ml15.00國產(chǎn)微量移液器多道250ml2600.00美國 Thermo8道微量移液器吸頭多道250ml 1000支/包40.00國產(chǎn)微量移液器吸頭盒多道250ml15.00國產(chǎn)方案三、雙流向酶聯(lián)免疫法（GB 5413.37-2010第四法）一、原理利用酶聯(lián)免疫競爭原理，樣品中殘留的黃曲霉毒素M1與定量特異性酶標(biāo)抗體反應(yīng)，多余的游離酶標(biāo)抗體則與酶標(biāo)板內(nèi)的包被抗原結(jié)合，通過流動洗滌，加入酶顯色底物顯色后，與標(biāo)準(zhǔn)點比較定性。二、所需儀器和耗材1、黃曲霉毒素M1雙流向酶聯(lián)免疫試劑盒，2 7 保存2、酶聯(lián)免疫檢測加熱器，40±5四、操作方法依