第二章蛋白質(zhì)-ppt課件

1、第二章第二章 蛋白質(zhì)根本單位蛋白質(zhì)根本單位氨基酸氨基酸 氨基酸的分類(lèi)氨基酸的分類(lèi) 氨基酸的化學(xué)性質(zhì)氨基酸的化學(xué)性質(zhì) 氨基酸的光學(xué)性質(zhì)氨基酸的光學(xué)性質(zhì) 蛋白質(zhì)根本單位蛋白質(zhì)根本單位氨基酸氨基酸 氨基酸的分類(lèi)氨基酸的分類(lèi) 氨基酸的化學(xué)性質(zhì)氨基酸的化學(xué)性質(zhì) 氨基酸的光學(xué)性質(zhì)氨基酸的光學(xué)性質(zhì)4OCNH Gly，Phe，Leu，Asp，Lys， 生物體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的氨基酸有生物體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的氨基酸有180多種，多種，組成蛋白質(zhì)分子的氨基酸只需組成蛋白質(zhì)分子的氨基酸只需20種。種。人類(lèi)是如何知道數(shù)以萬(wàn)計(jì)的蛋白質(zhì)人類(lèi)是如何知道數(shù)以萬(wàn)計(jì)的蛋白質(zhì)僅由僅由20種常見(jiàn)氨基酸構(gòu)成的呢？種常見(jiàn)氨基酸構(gòu)成的呢？5蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)Glu

2、，Tyr，Arg，Cys，酸水解酸水解堿水解堿水解酶水解酶水解肽段肽段水解水解酸、堿水解酸、堿水解部分水解產(chǎn)物部分水解產(chǎn)物完全水解產(chǎn)物完全水解產(chǎn)物6 部分水解：部分水解： 蛋白質(zhì)被水解為大小不等的肽段和氨基酸蛋白質(zhì)被水解為大小不等的肽段和氨基酸混合物，叫做部分水解，又稱(chēng)不完全水解。混合物，叫做部分水解，又稱(chēng)不完全水解。 完全水解：完全水解： 蛋白質(zhì)被徹底水解為氨基酸混合物，叫蛋白質(zhì)被徹底水解為氨基酸混合物，叫做完全水解，又稱(chēng)徹底水解。做完全水解，又稱(chēng)徹底水解。 7 1.酸水解 所用酸：6 mol/L HCl 或 4 mol/L H2SO4 ,回 流20hr。 產(chǎn) 物：L-氨基酸混合物，Trp完

3、全被破壞， 部分Ser和Thr(含-OH)被分解，Asn 和Gln的酰胺基被水解。 優(yōu) 點(diǎn)：不引起消旋8 2. 堿水解堿水解 所用堿：所用堿：5 mol/L NaOH, 回流回流10-20hr。 產(chǎn)產(chǎn) 物：物：Trp穩(wěn)定，但多數(shù)氨基酸被破穩(wěn)定，但多數(shù)氨基酸被破壞，壞， 產(chǎn)物消旋。產(chǎn)物消旋。 堿水解是酸水解的補(bǔ)充，由堿水解堿水解是酸水解的補(bǔ)充，由堿水解可可 知蛋白質(zhì)中能否存在知蛋白質(zhì)中能否存在Trp及其含量及其含量93. 酶水解 所用酶：蛋白質(zhì)水解酶 產(chǎn) 物：小的肽段 優(yōu) 點(diǎn)：不消旋，不破壞氨基酸構(gòu)造 缺 點(diǎn)：時(shí)間長(zhǎng)，經(jīng)常需求幾種酶結(jié)合水解10 組成蛋白質(zhì)的常見(jiàn)氨基酸有組成蛋白質(zhì)的常見(jiàn)氨基酸有2

4、0種，種，其中其中1種是亞氨基酸，一切氨基酸都是種是亞氨基酸，一切氨基酸都是-氨基酸，即氨基酸，即: -COOH 的的-位上位上有一個(gè)有一個(gè) -NH2，氨基酸構(gòu)造的變化僅，氨基酸構(gòu)造的變化僅在于側(cè)鏈在于側(cè)鏈R基的不同基的不同COO-H3N+HCCHRCOO-H3N+R透視式投影式11-氨基酸的構(gòu)造通式氨基酸的構(gòu)造通式12 1. 在生理?xiàng)l件下氨基酸以帶電荷的在生理?xiàng)l件下氨基酸以帶電荷的-COO-和和-NH3+ 離子方式存在離子方式存在2. 除除Gly外，其他一切氨基酸都具有旋光性，并且外，其他一切氨基酸都具有旋光性，并且 都是都是L構(gòu)型構(gòu)型3. 氨基酸是白色晶體，熔點(diǎn)高，氨基酸是白色晶體，熔點(diǎn)高

5、，2004. 氨基酸有特殊的結(jié)晶外形氨基酸有特殊的結(jié)晶外形5. 大多數(shù)氨基酸溶于水大多數(shù)氨基酸溶于水氨基酸的性質(zhì)氨基酸的性質(zhì) 蛋白質(zhì)根本單位蛋白質(zhì)根本單位氨基酸氨基酸 氨基酸的分類(lèi)氨基酸的分類(lèi) 氨基酸的化學(xué)性質(zhì)氨基酸的化學(xué)性質(zhì) 氨基酸的光學(xué)性質(zhì)氨基酸的光學(xué)性質(zhì)14200種種 氨基酸氨基酸蛋白質(zhì)氨基酸蛋白質(zhì)氨基酸非蛋白氨基酸非蛋白氨基酸常見(jiàn)蛋白質(zhì)氨基酸常見(jiàn)蛋白質(zhì)氨基酸不常見(jiàn)蛋白質(zhì)氨基酸不常見(jiàn)蛋白質(zhì)氨基酸根本氨基酸根本氨基酸15名稱(chēng)名稱(chēng)三字母符號(hào)三字母符號(hào)單字母符號(hào)單字母符號(hào)名稱(chēng)名稱(chēng)三字母符號(hào)三字母符號(hào)單字母符號(hào)單字母符號(hào)丙氨酸丙氨酸 (alanine)AlaA亮氨酸亮氨酸 (leucine)Le

6、uL精氨酸精氨酸 (arginine)ArgR賴(lài)氨酸賴(lài)氨酸 (lysine)LysK天冬酰胺天冬酰胺 (asparagine)AsnN甲硫氨酸甲硫氨酸(methionine)MetM天冬氨酸天冬氨酸 (aspartic acid)AspD苯丙氨酸苯丙氨酸(phenylalanine)PheFAsn和和/或或AspB半胱氨酸半胱氨酸 (cysteine)CysC脯氨酸脯氨酸 (proline)ProP谷氨酰胺谷氨酰胺 (glutamine)GlnQ絲氨酸絲氨酸( serine)SerS谷氨酸谷氨酸 (glutamic acid)GluE蘇氨酸蘇氨酸 (threonine)ThrTGln 和和/或

7、或GluZ甘氨酸（甘氨酸（glycine）GlyG色氨酸色氨酸 (tryptophan)TrpW組氨酸組氨酸 (histidine)HisH酪氨酸酪氨酸 (tyrosine)TyrY異亮氨酸異亮氨酸 (isoleucine)IleI纈氨酸纈氨酸 (valine)ValV16 氨基酸構(gòu)造的區(qū)別在于側(cè)鏈氨基酸構(gòu)造的區(qū)別在于側(cè)鏈R基的不基的不同，所以可以根據(jù)同，所以可以根據(jù)R基團(tuán)的化學(xué)構(gòu)造、極基團(tuán)的化學(xué)構(gòu)造、極性大小和所帶電荷的不同分類(lèi)性大小和所帶電荷的不同分類(lèi)COO-H3N+HCCHRCOO-H3N+R透視式投影式171、脂肪族氨基酸、脂肪族氨基酸15個(gè)個(gè) 中性氨基酸中性氨基酸5：Gly, Ala

8、, Val, Leu, Ile Gly無(wú)旋光性無(wú)旋光性按構(gòu)造分類(lèi)按構(gòu)造分類(lèi)18 酸性氨基酸4：Asp, Glu, Asn, Gln 生理?xiàng)l件下Asn, Gln的酰胺基不被 質(zhì)子化，所以側(cè)鏈不帶電荷19 堿性氨基酸堿性氨基酸2：Lys, Arg Arg是動(dòng)物體內(nèi)尿素構(gòu)成的中間物。是動(dòng)物體內(nèi)尿素構(gòu)成的中間物。賴(lài)氨酸Lys，K堿性氨基酸堿性氨基酸COO-CCH2+H3NHCH2CH2CH2NH3+COO-CCH2+H3NHCH2CH2NHCNH2+H2N精氨酸Arg，R20 含含-OH或或-SH的氨基酸的氨基酸 (4) : Ser, Thr, Cys, Met Cys常以氧化方式存在，而常以氧化方式

9、存在，而Met是體內(nèi)代是體內(nèi)代謝謝 中甲基的供體。中甲基的供體。21 2、芳香族氨基酸：、芳香族氨基酸：3個(gè)個(gè) Phe, Tyr, Trp22 3、雜環(huán)族：、雜環(huán)族：2個(gè)個(gè) His, Pro Pro沒(méi)有沒(méi)有-NH2，是，是-亞氨基酸亞氨基酸 COO-C+H3NHCH2CHC+HNCHNH組氨酸His，HCOO-C+H2NHCH2H2CCH2脯氨酸Pro，P雜環(huán)氨基酸雜環(huán)氨基酸231、非極性、非極性R基氨基酸基氨基酸8個(gè)個(gè) Ala, Val, Leu, Ile, Phe, Trp, Met, Pro 性質(zhì)：在水中溶解度小，性質(zhì)：在水中溶解度小，Ala疏水性最小疏水性最小2、不帶電荷的極性、不帶電

10、荷的極性R基氨基酸基氨基酸7個(gè)個(gè) Ser, Thr, Tyr, Asn, Gln, Cys, Gly 性質(zhì)：比非極性性質(zhì)：比非極性R基氨基酸易溶于水?；被嵋兹苡谒?。Gly的的R基基 是是H，介于極性與非極性之間。，介于極性與非極性之間。Cys和和Tyr 極性最強(qiáng)。極性最強(qiáng)。 按極性分類(lèi)按極性分類(lèi)243、 R基帶正電荷的氨基酸基帶正電荷的氨基酸3個(gè)個(gè) Lys, Arg, His 性質(zhì)：性質(zhì)：pH 7 時(shí)帶正電荷。時(shí)帶正電荷。His 在在pH 6.0 時(shí)，時(shí)，50 % 以上質(zhì)子化，以上質(zhì)子化，pH 7 時(shí)，質(zhì)子化程度時(shí)，質(zhì)子化程度10 % ， 是獨(dú)一的是獨(dú)一的pKa 7 的氨基酸的氨基酸4、

11、R基帶負(fù)電荷的氨基酸基帶負(fù)電荷的氨基酸2個(gè)個(gè) Asp, Glu 性質(zhì)：性質(zhì)：pH 7 時(shí)完全解離，所以分子帶負(fù)電荷時(shí)完全解離，所以分子帶負(fù)電荷25 有些蛋白質(zhì)含有個(gè)別特殊氨基酸，由根本氨基酸 修飾而來(lái) 5-羥賴(lài)氨酸和羥賴(lài)氨酸和4-羥脯氨酸是結(jié)締組織膠原蛋白中的成分羥脯氨酸是結(jié)締組織膠原蛋白中的成分COO-CH+H3NCH2CH2CHOHCH2NH3+H2NH2CCCH2CHOHCOO-H26 -羧基谷氨酸羧基谷氨酸存在于凝血酶原和其它存在于凝血酶原和其它與血液凝固有關(guān)的蛋白與血液凝固有關(guān)的蛋白COO-CH+H3NCH2CH-OOCCOO- 焦谷氨酸焦谷氨酸 存在于細(xì)菌視紫紅質(zhì)中存在于細(xì)菌視紫紅

12、質(zhì)中光驅(qū)動(dòng)的質(zhì)子泵蛋白光驅(qū)動(dòng)的質(zhì)子泵蛋白質(zhì)質(zhì)HNCCH2CH2CHOCOO-27 絲氨酸磷酸酯絲氨酸磷酸酯發(fā)現(xiàn)于涉及細(xì)胞生長(zhǎng)和調(diào)理的蛋白質(zhì)中發(fā)現(xiàn)于涉及細(xì)胞生長(zhǎng)和調(diào)理的蛋白質(zhì)中 COO-CH+H3NCH2OPO32-28 非蛋白氨基酸：生物體內(nèi)不參與蛋非蛋白氨基酸：生物體內(nèi)不參與蛋 白質(zhì)組成的氨基酸白質(zhì)組成的氨基酸 1、L-型型-氨基酸衍生物氨基酸衍生物 肌氨酸肌氨酸N-甲基甘氨甲基甘氨酸，酸， 一碳單位代謝中間物。一碳單位代謝中間物。 瓜氨酸、鳥(niǎo)氨酸、高絲氨瓜氨酸、鳥(niǎo)氨酸、高絲氨酸酸 COO-CHHNH2+CH3 2、-、-、-氨基酸氨基酸 -丙氨酸丙氨酸 H3N+CH2CH2COO- -氨基

13、丁酸氨基丁酸 H3N+CH2CH2CH2COO- 神經(jīng)遞質(zhì)，傳送神神經(jīng)遞質(zhì)，傳送神經(jīng)激動(dòng)的化學(xué)介質(zhì)經(jīng)激動(dòng)的化學(xué)介質(zhì) 蛋白質(zhì)根本單位蛋白質(zhì)根本單位氨基酸氨基酸 氨基酸的分類(lèi)氨基酸的分類(lèi) 氨基酸的化學(xué)性質(zhì)氨基酸的化學(xué)性質(zhì) 氨基酸的光學(xué)性質(zhì)氨基酸的光學(xué)性質(zhì)31一氨基酸的兩性解離一氨基酸的兩性解離氨基酸氨基酸酸性？酸性？堿性？堿性？中性？中性？3233 氨基酸完全質(zhì)子化時(shí)，可以視為二元酸 酸性氨基酸和堿性氨基酸可視為三元酸 3401aAHKA20aAHKA解離常數(shù)解離常數(shù)35B BA ApKa2 = 9.6pI = 5.97pKa1 = 2.3436 對(duì)于對(duì)于R基不解離的氨基酸，滴定曲線(xiàn)基不解離的氨基

14、酸，滴定曲線(xiàn)與與Gly類(lèi)似，類(lèi)似，pKa1的范圍為的范圍為2.0 - 3.0，pKa2的范圍為的范圍為9.0 10.0 對(duì)于類(lèi)似于三元酸的酸性或堿性氨基對(duì)于類(lèi)似于三元酸的酸性或堿性氨基酸，會(huì)出現(xiàn)三個(gè)酸，會(huì)出現(xiàn)三個(gè)pKa，pKa1，pKa2，pKa3，滴定曲線(xiàn)會(huì)復(fù)雜些。由于，滴定曲線(xiàn)會(huì)復(fù)雜些。由于pKa值接近，值接近，A、B 段或段或 B、C 段會(huì)重疊段會(huì)重疊 3738表表33 氨基酸的解離常數(shù)和等電點(diǎn)氨基酸的解離常數(shù)和等電點(diǎn)氨基酸氨基酸-COOH pKa+NH3 pKaR基基pKapIGly2.349.605.97Ala2.349.696.02Leu2.369.605.98Thr2.6310.

15、436.53Asp2.099.823.86（COOH）2.97Lys2.188.9510.5(+NH3）9.74His1.829.176.00（咪唑基）（咪唑基）7.59Phe1.839.135.4839 氨基酸在氨基酸在pKa值附近會(huì)有緩沖容值附近會(huì)有緩沖容量，量，His的的pKa為為6.0，恰處在生理，恰處在生理 pH附近，所以附近，所以His在生理?xiàng)l件下有在生理?xiàng)l件下有明顯的緩沖作用明顯的緩沖作用His的特殊性的特殊性40 在溶液在溶液pH值等于值等于pI時(shí)，氨基酸在電場(chǎng)中不挪時(shí)，氨基酸在電場(chǎng)中不挪動(dòng)，所以溶液的動(dòng)，所以溶液的 pH 值會(huì)改動(dòng)氨基酸攜帶的電荷值會(huì)改動(dòng)氨基酸攜帶的電荷量。普

16、通來(lái)說(shuō)，處于量。普通來(lái)說(shuō)，處于pI時(shí)，氨基酸為兼性離子形時(shí)，氨基酸為兼性離子形狀兩性電解質(zhì)，電中性的氨基酸分子極少。狀兩性電解質(zhì)，電中性的氨基酸分子極少。等電點(diǎn)等電點(diǎn)isoelectric pointpI 氨基酸或帶電顆粒處于凈電荷為氨基酸或帶電顆粒處于凈電荷為0的兼性離子形狀時(shí)的兼性離子形狀時(shí), 介質(zhì)的介質(zhì)的pH值稱(chēng)等值稱(chēng)等電點(diǎn)，用電點(diǎn)，用pI表示表示, 也叫作等電也叫作等電pH41以以Gly為例計(jì)算氨基酸的為例計(jì)算氨基酸的pI01AHKaA20AHKaA 兩式相乘兩式相乘 02120AHAHAHKa KaAAA A+Ka1A0A-Ka242AA2212Ka KaHI122pKapKapI1

17、21 2pIpKapKa1211(2.349.60)5.9722pIpKapKa 等電點(diǎn)時(shí)等電點(diǎn)時(shí) 所以所以 兩邊取對(duì)數(shù) 整理整理 Gly的等電點(diǎn)的等電點(diǎn) 所以，pI是氨基酸 pKa1和pKa2的平均值43表表33 氨基酸的解離常數(shù)和等電點(diǎn)氨基酸的解離常數(shù)和等電點(diǎn)氨基酸氨基酸-COOH pKa+NH3 pKaR基基pKapIGly2.349.605.97Ala2.349.696.02Leu2.369.605.98Thr2.6310.436.53Asp2.099.823.86（COOH）2.98Lys2.188.9510.53(+NH3）9.74His1.829.176.00（咪唑基）（咪唑基）

18、7.59Phe1.839.135.4844231()2pIpKapKa 酸性或堿性氨基酸有三個(gè)酸性或堿性氨基酸有三個(gè)pKa，pI為與凈為與凈電荷為零的兼性離子相關(guān)的兩個(gè)電荷為零的兼性離子相關(guān)的兩個(gè)pKa之和的算之和的算術(shù)平均值術(shù)平均值堿性氨基酸堿性氨基酸如如Lys2311(8.95 10.53)9.7422LyspIpKapKaA2+Ka1A+A0A-Ka3Ka245121 2pIpKapKa酸性氨基酸酸性氨基酸如如 Asp1211(2.093.86)2.9822AsppIpKapKaA+Ka1A0A-A2-Ka3Ka2 蛋白質(zhì)根本單位蛋白質(zhì)根本單位氨基酸氨基酸 氨基酸的分類(lèi)氨基酸的分類(lèi) 氨基

19、酸的化學(xué)性質(zhì)氨基酸的化學(xué)性質(zhì) 氨基酸的光學(xué)性質(zhì)氨基酸的光學(xué)性質(zhì)47 在在20個(gè)根本氨基酸中，除個(gè)根本氨基酸中，除Gly 沒(méi)有沒(méi)有旋光外，其他旋光外，其他19個(gè)都有手性，并且都是個(gè)都有手性，并且都是L-構(gòu)型構(gòu)型由于由于-C的不對(duì)稱(chēng)性，氨基酸是手性分子的不對(duì)稱(chēng)性，氨基酸是手性分子 Thr，Ile含二個(gè)手性含二個(gè)手性C，有四種光學(xué)異構(gòu)體有四種光學(xué)異構(gòu)體4849 胱氨酸也是一個(gè)特殊的氨基酸，它胱氨酸也是一個(gè)特殊的氨基酸，它 由由2個(gè)個(gè)Cys組成，可以有組成，可以有3種異構(gòu)體種異構(gòu)體50氨基酸氨基酸D(H2O)D(5 mol/L HCl)氨基酸氨基酸D(H2O)D(5 mol/L HCl)GlyArg+

20、12.5+27.6Ala+1.8+14.6Lys+13.5+26.0Val+5.6+28.3His-38.5+11.8Leu-11.0+16.0胱氨酸胱氨酸-232Ile+12.4+39.5Cys-16.5+6.5Ser-7.5+15.1Met-10.0+23.2Thr-28.5-15.0Phe-34.5-4.5Asp+5.0+25.4Tyr-10.0Asn-5.30+33.2(3 mol/L HCl)Trp-33.7+2.8(1 mol/L HCl)Glu+12.0+31.8Pro-86.2-60.4Gln+6.3.+31.8(1mol/L HCl)羥脯氨酸羥脯氨酸-76.0-50.5蛋白質(zhì)

21、中常見(jiàn)蛋白質(zhì)中常見(jiàn)L型氨基酸的比旋型氨基酸的比旋51 氨基酸在紅外和遠(yuǎn)紫外區(qū)都有光吸氨基酸在紅外和遠(yuǎn)紫外區(qū)都有光吸收，但在收，但在200-400nm的近紫外區(qū)，只需的近紫外區(qū)，只需芳香氨基酸有吸收芳香氨基酸有吸收 (波長(zhǎng)) 摩爾消光系數(shù) Phe 257nm 2.0 102 mol-1/L-1 Tyr 275nm 1.4 103 mol-1/L-1 Trp 280nm 5.61 103 mol-1/L-152 蛋白質(zhì)在近紫外區(qū)也有吸收才干。蛋白質(zhì)在近紫外區(qū)也有吸收才干。普通蛋白質(zhì)的最大吸收波長(zhǎng)為普通蛋白質(zhì)的最大吸收波長(zhǎng)為280 nm。 可利用可利用280nm波長(zhǎng)的光吸收值檢測(cè)波長(zhǎng)的光吸收值檢測(cè)蛋

22、白質(zhì)純度和區(qū)別蛋白質(zhì)與核酸蛋白質(zhì)純度和區(qū)別蛋白質(zhì)與核酸 肽和肽鏈的構(gòu)造肽和肽鏈的構(gòu)造 肽的物理化學(xué)性質(zhì)肽的物理化學(xué)性質(zhì) 活性多肽活性多肽 肽和肽鏈的構(gòu)造肽和肽鏈的構(gòu)造 肽的物理化學(xué)性質(zhì)肽的物理化學(xué)性質(zhì) 活性多肽活性多肽55 肽經(jīng)過(guò)肽鍵由氨基酸線(xiàn)性聚合而成。肽鍵與酰胺鍵類(lèi)似。最簡(jiǎn)單的肽是二肽，含幾個(gè)氨基酸的肽可稱(chēng)為幾肽，如八肽、十肽56 少于少于20個(gè)個(gè)氨基酸殘基氨基酸殘基的肽稱(chēng)為寡的肽稱(chēng)為寡肽，多于肽，多于20個(gè)氨基酸殘個(gè)氨基酸殘基的肽叫多基的肽叫多肽。肽。 為什么是為什么是氨基酸殘基氨基酸殘基而不是氨基而不是氨基酸？酸？57肽的命名肽的命名規(guī)定從規(guī)定從N-NH2端開(kāi)場(chǎng)到端開(kāi)場(chǎng)到C-COOH端

23、，氨基酸順序從左向右端，氨基酸順序從左向右 Ser-Gly-Phe，絲氨酰甘氨酰苯丙氨酸，絲氨酰甘氨酰苯丙氨酸 Phe-Gly-Ser，苯丙氨酰甘氨酰絲氨酸，苯丙氨酰甘氨酰絲氨酸 58H2NCH CCH2OOHNHCH CHONHCH CCH2OHOSer-Gly-PheNHCH CCH2OHOOHNHCH CHOH2NCH CCH2OPhe-Gly-Ser59 一切肽的主鏈構(gòu)造都一樣。主鏈由一切肽的主鏈構(gòu)造都一樣。主鏈由N-C-CN-C-C序列反復(fù)陳列，只是側(cè)鏈序列反復(fù)陳列，只是側(cè)鏈R R不同不同肽鏈的構(gòu)造通式肽鏈的構(gòu)造通式NHHCCONHHCCOR3R2COHCR1H2N 肽和肽鏈的構(gòu)造肽

24、和肽鏈的構(gòu)造 肽的物理化學(xué)性質(zhì)肽的物理化學(xué)性質(zhì) 活性多肽活性多肽611、熔點(diǎn)高 偶極離子 酸堿性：末端的-氨基和-羧基， 以及側(cè)鏈R基上的可解離基團(tuán)622、滴定曲線(xiàn)：與氨基酸類(lèi)似，但更復(fù)雜多價(jià)離子等電點(diǎn)63肽肽COOH pKaNH3+ pKaR基基pKapIGlyAsp2.818.604.453.63GlyGly3.068.135.59AlaGly3.178.245.70GlyAla3.267.915.58GlyGlyGly3.267.915.68AlaAlaAlaAla3.427.945.68AlaAlaLysAla3.588.0110.589.30表表45 某些肽的某些肽的pKa64Gly

25、-Glu-Lys-Ala四肽甘氨酰谷氨酰賴(lài)氨酰丙氨酸的酸堿性質(zhì)分析四肽甘氨酰谷氨酰賴(lài)氨酰丙氨酸的酸堿性質(zhì)分析溶液的溶液的pH官能團(tuán)解離帶電情況官能團(tuán)解離帶電情況占優(yōu)勢(shì)占優(yōu)勢(shì)離子的離子的凈電荷凈電荷COOH側(cè)鏈側(cè)鏈COOHNH2NH2 3.5COOHCOOHNH3+NH3+23.7-4.5COOCOOHNH3+NH3+14.5-7.8COOCOONH3+NH3+07.8-10.2COOCOONH2NH3+-110.2COOCOONH2NH2-2653、化學(xué)反響、化學(xué)反響生成有色物質(zhì)，肽的定性或定量測(cè)定生成有色物質(zhì)，肽的定性或定量測(cè)定茚三酮反響茚三酮反響OOOHOH+H2NRHCOOHOOHOH+RCHO+NH3CO2+OOHOHOOHOHO+2NH3+ONH4ONOO+3H2O 含兩個(gè)或兩個(gè)以上肽鍵的含兩個(gè)或兩個(gè)以上肽鍵的化合物與化合物與CuSO4在堿性在堿性溶液中反響，生成藍(lán)紫溶液中反響，生成藍(lán)紫色復(fù)合物色復(fù)合物雙縮脲反響雙縮脲反響67利用該反響利用該反響可定性了解可定性了解蛋白質(zhì)水解蛋白質(zhì)水解程度，測(cè)定程度，測(cè)定蛋白質(zhì)含量蛋白質(zhì)含量二肽和氨基酸無(wú)此反響二肽