葉綠素含量的測定

1、植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)報告實(shí)驗(yàn)題目：葉綠素含量的測定姓名 班級 學(xué)號 1、 實(shí)驗(yàn)原理和目的根據(jù)朗伯一比爾定律，某有色溶液的吸光度A與其中溶質(zhì)濃度C和液層厚度L成正比。葉綠素（丙酮）在652nm。昆合）、663nm 645nmW最大吸收峰。葉綠素（95%乙醇）在665nm 649nm類胡蘿卜素在470nm有最大吸收峰，根據(jù)在分光光度計下測定的吸光度，求得葉綠素的含量2、 實(shí)驗(yàn)器具和步驟植物材料：女貞實(shí)驗(yàn)器具：分光光度計；電子天平；研缽；試管； 小漏斗；濾紙；吸水紙；移液管；量筒；剪刀試劑：95 %乙醇（或80%丙酮）；石英砂；碳酸鈣粉步驟：1.稱取剪碎的新鮮樣品0.1g左右，放入研缽中，加少量石英砂和碳

2、酸鈣粉及35ml95%乙醇，研成均漿，繼續(xù)研磨至組織變白。靜置 35min2. 取濾紙1張，置漏斗中，用乙醇濕潤，沿玻棒把提取液倒入漏斗中，過濾到 10ml試管中，用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘渣數(shù)次，最后連同殘渣一起倒入漏斗中。3. 用滴管吸取乙醇，將濾紙上的葉綠體色素全部洗入漏斗中。直至濾紙和殘渣中無綠色為止。最后用乙醇定容至10 ml ，搖勻4. 把葉綠體色素提取液倒入光徑 1cm 的比色杯內(nèi)。以95乙醇為空白，在波長665nm、649nmn 470nm下測定吸光度5. 計算公式：葉綠素的含量（mg/g）=（濃度X提取液體積X稀釋倍數(shù)）/樣品鮮重。Ca=13.95A665 6.88A 64

3、9；Cb=24.96A649 7.32A 665C 類=（1000A47h2.05Ca-114.8Cb）/245單位：mg/L3、 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和作業(yè)2、計算葉綠素含量計算公式：葉綠素的含量（mg/g）=（濃度x提取液體積x稀釋倍數(shù)）/樣品鮮重。Ca=13.95A665 6.88A649 ；Cb=24.96A649 7.32A665C 類=(1000A470-2.05Ca-114.8Cb)/245 單位： mg/L由上面的公式進(jìn)行代入計算，有：Ca=13.95*1.820-6.88*0.953=18.83236Cb=24.96*0.953-7.32*1.820=10.46448C類=(1000*1.948-2.05*18.83236-114.8*10.46448) /245=2.8901則：葉綠素含量=(29.29684*10*0.001*1 ) /0.1=2.92974、 數(shù)據(jù)分析實(shí)驗(yàn)中可能清洗研缽和濾紙不是特別干凈可能造成誤差5、 思考題為什么提取葉綠素時干材料一定要用 80 的丙酮，而新鮮的材料可以用無水丙酮提取？答：因?yàn)槿~綠素存