基因工程藥物概述

1、第一章、基因工程藥第一章、基因工程藥物概述物概述 提提 綱綱n發(fā)展歷史發(fā)展歷史n應用現(xiàn)狀應用現(xiàn)狀n今后研發(fā)方向今后研發(fā)方向第一節(jié)、基因工程藥第一節(jié)、基因工程藥物發(fā)展歷史物發(fā)展歷史主要參考資料：湯仲明.生物技術藥物（第1版）.北京：化學工業(yè)出版社，2008.1953年，Watson和Crick揭示了DNA雙螺旋結構1966年，遺傳密碼被破譯1970年，發(fā)現(xiàn)了限制性內切酶1973年，Cohen和Boyer用限制性內切酶第一次完成了DNA的切割與連接1977年，Genentech公司在大腸桿菌表達第一個人蛋白生長抑素，隨后又成功表達了rhGH。1978年， Genentech公司基因重組人胰島素在大

2、腸桿菌中成功表達1979年，年，F(xiàn)DA批準了第一個基因重組藥物批準了第一個基因重組藥物-人胰人胰島素島素Humulin上市（ Genentech公司）1982年，第一個用酵母表達的基因重組胰島素年，第一個用酵母表達的基因重組胰島素-Novolin上市上市1983年，PCR技術出現(xiàn)1984年，嵌合抗體技術創(chuàng)立1986年，人源化抗體技術創(chuàng)立1986年，第一個重組抗腫瘤藥物年，第一個重組抗腫瘤藥物-IFN上市上市1987年，第一個用動物細胞年，第一個用動物細胞（中國倉鼠卵巢細胞CHO）表達的基因工程產(chǎn)品表達的基因工程產(chǎn)品t-PA（組織型纖溶酶原激活物）上上市市1988年，第一個基因重組疫苗上市（乙肝

3、疫苗，年，第一個基因重組疫苗上市（乙肝疫苗，Recombivax-HB）1990年，噬菌體展示人源抗體制備技術創(chuàng)立1994年，第一個基因重組嵌合抗體年，第一個基因重組嵌合抗體ReoPro上市上市1997年，F(xiàn)DA批準第一個腫瘤治療性抗體Rituxan上市（IDEC和Genentech公司）（CHO表達，抗CD20）2002年，年，EMEA批準第一個治療性人源抗體批準第一個治療性人源抗體Humira上市上市（Abbott公司，抗TNF-抗體，治療類風濕關節(jié)炎）2004年，中國批準了第一個基因治療藥物P53腺病毒注射液腺病毒注射液2006年，F(xiàn)DA批準第一個基因重組腫瘤疫苗腫瘤疫苗Gardasil

4、（佳達修，加德西）上市（用于預防HPV感染誘發(fā)的宮頸癌）2011年，F(xiàn)DA批準第一個抗體藥物偶聯(lián)物（抗體藥物偶聯(lián)物（ADCs）抗CD30-毒素偶聯(lián)物上市（用于霍奇金淋巴瘤的治療）用于霍奇金淋巴瘤的治療）第二節(jié)、基因工程藥第二節(jié)、基因工程藥物的種類及應用現(xiàn)狀物的種類及應用現(xiàn)狀參考文獻： 美國食品藥物管理局網(wǎng)站：DragsFDA： 中國國家食品藥品監(jiān)督管理局（SFDA）網(wǎng)站胡顯文在“基因工程藥物與抗體藥物研發(fā)與質量控制關鍵技術研討會”上的報告。 基因重組多肽及蛋白藥物基因重組多肽及蛋白藥物 核酸類重組藥物核酸類重組藥物 重組活載體藥物重組活載體藥物是將具有藥物活性的多肽及蛋白的編碼基因與載體DNA

5、重組后轉入受體細胞表達并分離純化生產(chǎn)的藥物。常用種類：常用種類：蛋白多肽類激素、細胞因子、抗體、酶、可溶性受體、亞單位疫苗、血漿蛋白等 由機體多種細胞分泌的具有調控細胞生長分化、調節(jié)免疫功能等生理活性并參與病理反應的小分子蛋白質。免疫系統(tǒng)在抗原刺激下，由B淋巴細胞增殖分化為漿細胞所產(chǎn)生的、可與相應抗原發(fā)生特異性結合、具有免疫功能的蛋白質。蛋白質。組成主要為組成主要為球蛋白，也稱為免疫球蛋白（球蛋白，也稱為免疫球蛋白（為膜表面受體的胞外部分，由于呈游離可溶狀為膜表面受體的胞外部分，由于呈游離可溶狀態(tài)，被稱為可溶性受體。態(tài)，被稱為可溶性受體。外源治療性可溶性受體可與相應的膜受體競爭配體而起到抑制作

6、用，借此發(fā)揮治療作用。 用病原體上能夠誘發(fā)保護性反應的蛋白（而非完整病原體）生產(chǎn)的疫苗。傳統(tǒng)疫苗：完整病原體制備的滅活疫苗（死疫苗）、減毒活疫苗（弱毒疫苗）和細菌外毒素經(jīng)一定濃度甲醛處理后生產(chǎn)的類毒素（toxiod)疫苗。 利用重組核酸進行疾病防治的藥物。利用重組核酸進行疾病防治的藥物。DNA疫苗（ DNA vaccine ）：是把編碼病原體保護性抗原的基因連接到真核表達載體上，用重組載體制成的疫苗。又稱為基因疫苗（genetic vaccine）、核酸疫苗（nucleic acid immunizaiton）等。將編碼病原體有效抗原有效抗原的基因插入無致病性的活病毒（如痘病毒皰疹病毒、腺病毒

7、等) 或細菌（沙門氏菌、結核桿菌)基因組，利用重組病毒或重組細菌制成的疫苗。也稱為重組活疫苗。（一）（一）FDA激素類上市產(chǎn)品激素類上市產(chǎn)品胰島素及各種突變體：治療糖尿病甲狀旁腺激素：調節(jié)鈣磷代謝，治療絕經(jīng)期婦女的骨質疏松人生長激素：治療生長激素缺乏性矮小癥胰高血糖素：治療胰島素使用過量的低血糖癥人絨毛膜促性腺激素（HCG）：促進女性排卵，治療不育癥促卵泡激素（ FSH ）：促進卵泡發(fā)育和排卵，治療不育癥促黃體素（LH）：治療嚴重缺乏LH和FSH的不育癥患者。鮭魚降鈣素：預防骨質疏松癥及骨折、Paget疾病、惡性高鈣血癥。治療疾病：糖尿病、不育癥、矮小癥、骨質疏松國產(chǎn)：胰島素及各種突變體、人生

8、長激素（rhGF）。進口：瑞士、蛋白、韓國產(chǎn)生長激素生長激素；瑞士產(chǎn)人人促黃體激素促黃體激素；瑞士和荷蘭產(chǎn)人促卵泡激素人促卵泡激素；意大利產(chǎn)人絨毛膜促性腺激素人絨毛膜促性腺激素。治療疾?。禾悄虿?、矮小癥、不育癥（一）細胞因子分類白細胞介素（interleukin， IL）干擾素（interferon， IFN）腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor ，TNF）集落刺激因子（colony stimulating factor，CSF）生長因子（growth factor， GF）趨化性細胞因子（chemokine）定義：由白細胞產(chǎn)生并主要介導白細胞間相互作用的細胞因子命名為白細

9、胞介素白細胞介素（interleukin， IL）。已發(fā)現(xiàn)33種，IL-1IL-33。功能：刺激免疫細胞增殖、免疫調節(jié)（抑制或增強）、促進炎癥等作用。定義：定義：具有干擾病毒感染和復制的低分子可溶性糖蛋白。分類：根據(jù)穩(wěn)定性（耐熱耐酸性）、天然來源細胞、氨基酸組成和序列差異，分為不同的型（ 型和型）、類（、）、亞類（ 1 25、 1 4、 1 4）及次亞類（如 2a 2c） 。生物活性：不同種類IFN生物活性相似，具有抗病毒和免疫調節(jié)活性（干擾病毒復制、增強細胞免疫、抑制體液免疫）。型（主要為和類）穩(wěn)定性較好。整理ppt定義：定義：一種能使腫瘤組織發(fā)生出血壞死的細胞因子。分類： TNF- 和TN

10、F-功能：抗腫瘤作用（引起腫瘤細胞凋亡、腫瘤組織壞死）、免疫調節(jié)作用、炎癥介質。定義：定義：能夠刺激造血干細胞和不同發(fā)育分化階段的造血祖細胞增殖分化、在半固體培養(yǎng)基上形成相應細胞集落的細胞因子。又稱為造血刺激因子造血刺激因子或造血調節(jié)因子造血調節(jié)因子。粒細胞集落刺激因子（granulocyte CSF，G-CSF）粒細胞、巨噬細胞集落刺激因子（ granulocytemacrophage CSF，GM-CSF）巨噬細胞集落刺激因子（ macrophage CSF，M-CSF）干細胞因子（stem cell factor，SCF）紅細胞生成素（erythropoietin，EPO血小板生成素（t

11、hrombopoietin，TPO）定義：定義：具有刺激細胞生長作用的細胞因子。種類：種類： 表皮生長因子（epidermal growth factor，EGF）； 成纖維細胞生長因子（fibroblast growth factor， FGF）；血管內皮細胞生長因子（vascular endothelial growth factor， VEGF）；神經(jīng)生長因子（nerve growth factor， NGF）；血小板衍生的生長因子（platelet derived growth factor，PDGF）；肝細胞生長因子（hepatic growthfactor，HGF ） 定義定義：對

12、多種白細胞（單核細胞、嗜中性粒細胞、淋巴細胞）具有趨化作用和激活活性的小分子蛋白質。趨化作用（chemotaxis） ：是指化學刺激物（趨化因子）刺激細胞沿濃度上升梯度向著化學刺激物定向移動的作用（移動的速度為每min520m）IL-2：腫瘤。IL-11：血小板減少癥。各種類型干擾素（IFN）：治療腫瘤、炎癥、自身免疫治療腫瘤、炎癥、自身免疫性疾病性疾病。EPO：腎性貧血。TPO：血小板減少性紫癜。rhG-CSF： 白細胞減少癥 IL-2：T細胞生長因子，刺激T細胞增殖。IL-11：血小板刺激因子，促進血小板產(chǎn)生。血小板源性生長因子（PDGF）：促進創(chuàng)傷愈合，治療糖尿病足潰瘍。骨成型蛋白2（B

13、MP-2）：促進骨質形成，治療脊骨退行性融合。角化細胞生長因子-1（KGF-1）：促進上皮細胞移行及再生，用于治療化療引起的重度口腔黏膜炎。胰島素樣生長因子-1（IGF-1）：兒童IGF缺乏性生長不良 IL-2相關產(chǎn)品相關產(chǎn)品IL-11相關產(chǎn)品相關產(chǎn)品各種類型各種類型IFNTNF：注射用重組改構人腫瘤壞死因子（天恩福） EPOTPOrhG-CSFrhGM-CSFrEGF（重組表皮生長因子）及（重組表皮生長因子）及rFGF（重組成纖維細胞生長因子） ：創(chuàng)傷、燒傷、眼科疾病等。rhIFN 2arhIFN 2a注射液：注射液：羅蕘愫，Roferon-A：瑞士瑞士。PEGPEG化化rhIFN rhIF

14、N -2-2a a注射液：注射液：派羅欣，Pegasys，瑞士瑞士。PEGPEG化化rhIFN -2brhIFN -2b注射劑：注射劑：佩樂能，Peg-Intron，新加新加坡坡。rhIFN-1brhIFN-1b：倍泰龍，Betaferon， 美國rhIFN-1arhIFN-1a注射液：注射液：利比，Rebif，意大利。rhEPOrhEPO注射液：注射液：利血寶，ESPO，日本；日本；阿司伯根，Espogen，韓國；韓國；羅可曼，Recormon，瑞士。瑞士。rhG-CSFrhG-CSF：惠爾血，GRAN，日本；日本；格拉諾賽特，Granocyte，日本。（一）抗體基本結構：按同一方向排列的4

15、條肽鏈（兩條相同的長鏈稱之為重鏈，兩條相同的短鏈稱為輕鏈）經(jīng)二硫鍵連接組成的形態(tài)呈“Y”的單體。（二）分類：5類，IgG、IgM、IgA、IgD、IgE。其中在血液中含量最高、功能最全的為IgG。1、抗原結合位點：位于N段可變區(qū)。2、補體結合位點： 位于IgG分子Fc段的CH2，可與補體結合。3、Fc受體結合位點：位于IgG分子Fc段的CH3，可與IgG的FcR結合。4、母體胎盤結合位點：位于IgG分子Fc段的CH2，可與母體胎盤滋養(yǎng)層細胞上的受體結合，介導IgG從母體一側穿過胎盤到達胎兒。整理pptIgG尚有母體胎盤結合位點；IgA有1、識別和結合抗原產(chǎn)生中和、封閉等作用。2、活化補體，產(chǎn)生

16、溶菌、溶細胞作用及補體的調理作用。3、結合Fc受體（IgG和IgE），介導抗體的調理作用（IgG）、 ADCC作用（IgG）等。4、通過胎盤（IgG）：參與胎兒及初生兒被動免疫整理ppt中和作用：抗體與病原微生物和毒素病原微生物和毒素等有害抗原物質結合，阻止其與細胞受體結合而保護細胞免受危害的作用。具有中和作用的抗體稱為中和抗體。封閉作用：抗體與功能細胞表面抗原或可溶性抗功能細胞表面抗原或可溶性抗原原結合阻止其發(fā)揮效應的作用。這類抗體被稱為封閉抗體 。CVB3：柯薩奇B3病毒 中和抗體結合位點兩個思考題：1、能與病原表面抗原結合的抗體是否都是中和抗體？2、用來制備中和抗體的抗原應具備什么基本條

17、件？由抗體的Fc段及吞噬細胞表面的相應受體結合介導的促進吞噬細胞吞噬細菌等顆粒性抗原作用。一些細菌的莢膜具有抗吞噬作用整理pptADCC即antibody dependent cell-mediated cytotoxicity的縮寫，中文含義是：抗體依賴的細胞介導的細胞毒作用。指表達Fc受體的細胞毒性效應細胞效應細胞通過識別抗體Fc段殺傷被抗體包被的靶靶細胞細胞的作用。整理pptM ：巨噬細胞（ macrophage ）；Mo：單核細胞（ monocytes） ；Eo：嗜酸性粒細胞（ eosinophilic granulocytes ，Eo）；PMN：中性粒細胞（polymorphonuc

18、lear neutrophil，PMN）；NK：自然殺傷細胞。重組抗體的意義：重組抗體的意義： 減少單克隆抗體的鼠源部分，降低其免疫原性； 減小抗體分子量，提高其作為導向抗體的靶向滲透性?？贵w免疫原性的主要來源：抗體分子恒定區(qū)抗體免疫原性的主要來源：抗體分子恒定區(qū) 完整抗體完整抗體：人鼠嵌合抗體；人源化抗體（改型抗體）、人源抗體 抗體片段：抗體片段：Fab抗體抗體（Fab片斷）；Fv抗抗體體；ScFv 抗體（單鏈抗體可變區(qū)片段，Single Chain Antibody Variable Region Fragments ，ScFv），簡稱單鏈抗體。 抗體融合蛋白抗體融合蛋白 整理ppt人整理

19、ppt人鼠嵌合抗體（人鼠嵌合抗體（Chimeric antibodiesChimeric antibodies） 用人的恒定區(qū)基因片段代替鼠的恒定區(qū)基因，所得到的抗體同時含有人和鼠抗體的部分，稱為人鼠嵌合抗體。人整理ppt人源化抗體（Humanized Antibodies) 用鼠單克隆抗體的CDR替換人抗體的CDR所產(chǎn)生的抗體。 其編碼基因大約包含95的人DNA和5的鼠DNA。人源化抗體也稱為改型抗體（reshaped antibody）免疫原性更低complimentarity determining regions ，互補決定區(qū)。是Ig分子上與抗原表位互補結合的區(qū)域。也是可變區(qū)中氨基酸組

20、成和排列順序在不同Ig分子中變化更大的區(qū)域，又稱為高變區(qū)（hypervariable region，HVR）或超變區(qū)。整理ppt 只含抗體重鏈VH 、 CH1和輕鏈VL、CL的抗體。如果恒定區(qū)片段是人源性的，稱之為重組Fab。滲透性增強，免疫原性小半衰期縮短（比全IgG1縮短10倍）用于腫瘤成像診斷準確性達95%以上Fab段：即抗原結合片段（fragment of antigen binding，F(xiàn)ab）。整理pptScFv 抗體 是由抗體輕鏈和重鏈可變區(qū)基因（VH、VL）通過一段編碼連接肽基因拼接后表達形成的單鏈重組抗體。VH連接肽VL 是具有抗原結合能力的最小抗體片段。滲透性更強，半衰期縮

21、短（比全IgG1縮短10倍）對實體瘤顯像明顯強于傳統(tǒng)單克隆抗體和Fab片段缺點是抗原親和力降低?？贵w基因片段與其他有治療功能的蛋白基因的融合表達產(chǎn)物?？梢栽黾又委熕幬锏陌邢蛐?。例：抗體-細胞因子融合蛋白重組抗體藥物是基因重組藥物的主體和生物制重組抗體藥物是基因重組藥物的主體和生物制藥業(yè)的支柱！藥業(yè)的支柱！截止截止2012年底，美國年底，美國FDA已批準上市已批準上市40多種多種治療性抗體藥物，種類占上市基因重組藥物的治療性抗體藥物，種類占上市基因重組藥物的1/3。整理ppt整理ppt續(xù)上表整理ppt商品名商品名批準時間批準時間說明說明適應癥適應癥公司公司Simponi (golimumab)2

22、009-4-24NS0表達的表達的anti-TNF- 人源抗人源抗體體類風濕關節(jié)炎，強直性脊柱類風濕關節(jié)炎，強直性脊柱炎，銀屑病炎，銀屑病CentocorIlaris (canakinumab)2009-6-17SP2/0表達的表達的anti-IL-1人源抗人源抗體體家族冷因性自體發(fā)炎癥候和家族冷因性自體發(fā)炎癥候和穆穆-韋二氏綜合征韋二氏綜合征(CAPS)NovartisStelara (ustekinumab)2009-9-25NS0表達的表達的anti-P40(IL-12和和IL-23的亞基的亞基)人源抗體人源抗體銀屑病銀屑病CentocorArzerra (ofatumumab)2009

23、-10-26NS0表達的表達的anti-CD20的人源抗的人源抗體體慢性淋巴細胞白血病慢性淋巴細胞白血病GlaxoSmithKlineActemra (tocilizumab)2010-1-8CHO表達的表達的anti-IL6R人源化抗人源化抗體體類風濕關節(jié)炎類風濕關節(jié)炎Genentech/Roche2009年1月-2013年1月FDA批準上市的治療性抗體-1整理ppt商品名商品名批準時間批準時間說明說明適應癥適應癥公司公司Prolia (denosumab)2010-6-1CHO表達的表達的anti- RANKL 人源人源抗體抗體女性絕經(jīng)后的骨質疏松女性絕經(jīng)后的骨質疏松AmgenBenlys

24、ta (belimumab)2011-3-10動物細胞表達的動物細胞表達的anti- BlyS人源人源抗體抗體systemic lupus erythematosus (SLE)Human Genome Sciences and GSKXgeva (denosumab)2010-11-18CHO表達的表達的anti- RANKL 人源人源抗體抗體Osteolytic Bone Metastases of Solid TumorsAmgenYervoy (ipilimumab)2011-3-25CHO表達的表達的anti-CTLA-4人源抗人源抗體體Melanoma - MetastaticBr

25、istol-Myers SquibbNulojix (belatacept) Injection2011-6-15CHO(CTLA4-Ig )突變體突變體 (L104 to E; A29 to Y)，F(xiàn)c融合蛋白融合蛋白抗移植排斥抗移植排斥Bristol-Myers SquibbAdcetris (brentuximab vedotin) Injection2011-8-19anti-CD30的抗體，與毒素偶聯(lián)的抗體，與毒素偶聯(lián)主要用于霍奇金淋巴瘤的主要用于霍奇金淋巴瘤的治療治療Seattle Genetics, Inc.2009年1月-2013年1月FDA批準上市的治療性抗體-2整理ppt商

26、品名商品名批準時間批準時間說明說明適應癥適應癥公司公司Adcetris (brentuximab vedotin) Injection2011-8-19anti-CD30的抗體，與毒素偶聯(lián)的抗體，與毒素偶聯(lián)主要用于霍奇金淋巴瘤的主要用于霍奇金淋巴瘤的治療治療Seattle Genetics, Inc.Eylea (aflibercept) Injection 2011-11-18CHO表達的表達的VEGFR-Fc融合蛋融合蛋白，相當于白，相當于anti-VEGF抗體抗體用于黃斑變性，與用于黃斑變性，與Lucentis相似相似Regeneron/BayerPerjeta (pertuzumab)

27、2012-6-8CHO表達的另一種表達的另一種anti-Her2的的產(chǎn)品，與產(chǎn)品，與Herceptin聯(lián)用聯(lián)用治療乳腺癌治療乳腺癌GenentechZaltrap (ziv-aflibercept) Injection2012-8-3和和Eylea (aflibercept) Injection是同一種產(chǎn)品是同一種產(chǎn)品用于治療結直腸癌用于治療結直腸癌Regeneron/sanofiABthrax， 2012-12-14anti-PA抗體抗體炭疽防治炭疽防治GlaxoSmithKline2009年1月-2013年1月FDA批準上市的治療性抗體-3尼妥珠單抗注射液：尼妥珠單抗注射液：泰欣生，百泰生

28、物藥業(yè)有限公司。為人源化抗人表皮生長因子受體（抗人表皮生長因子受體（EGFR）單克隆抗體，用于EGFR陽性表達的/期鼻咽癌。碘碘131I腫瘤細胞核人鼠嵌合單克隆抗體注射液：腫瘤細胞核人鼠嵌合單克隆抗體注射液：唯美生，上海美恩生物技術有限公司。為131I標記的重組抗腫瘤細胞核人鼠嵌合單克隆抗體，用于晚期肺癌的放射免疫治療。重組抗重組抗CD25人源化單克隆抗體注射液人源化單克隆抗體注射液：健尼哌，上海中信國健藥業(yè)股份有限公司。用于預防腎移植急性排斥反應的發(fā)生。為我國為我國自主研發(fā)的創(chuàng)新產(chǎn)品。自主研發(fā)的創(chuàng)新產(chǎn)品。種類有限，主要依賴進口托珠單抗注射液：托珠單抗注射液：雅美羅，Actemra，日本日本。

29、為。為重組人源化抗抗IL-6抗體抗體。AR治療。貝伐珠單抗注射液：貝伐珠單抗注射液：安維汀，Avastin，瑞士瑞士。人源化抗抗-VEGF 。雷珠單抗注射液：雷珠單抗注射液：諾適得，Lucentis，瑞士瑞士。重組人源化抗抗VEGFR單克隆抗體。老年濕性黃斑變性。利妥昔單抗注射液：利妥昔單抗注射液：美羅華，MabThera，瑞士瑞士。重組鼠人嵌合抗抗CD20抗體抗體。注射用英夫利西單抗：注射用英夫利西單抗：類克，Remicade，荷蘭荷蘭。重組鼠人嵌合抗抗TNF-抗體抗體。阿達木單抗注射液：阿達木單抗注射液：修美樂，HUMIRA，英國英國。重組人源抗抗TNF-抗體抗體。西妥昔單抗注射液：西妥昔

30、單抗注射液：愛必妥，Erbitux，德國德國?？箍笶GFR人鼠嵌合單克隆抗體，抗腫瘤。注射用曲妥珠單抗：注射用曲妥珠單抗：赫賽汀，Herceptin，瑞士瑞士?？笻ER2人源化單抗，乳腺癌。CD3、CD11a、CD20、CD25、CD30、CD33、CD52IL-1R、IL1-、IL-6、IL-6R、P40（IL-12和IL-23的亞基）TNF、TNFRVEGF、 VEGFR、EGFR、HER2（ Human epidermal growth factor receptor2，人表皮生長因子受體人表皮生長因子受體2）CTLA-4、LFA-3、C5、IgE、RANKL（ Receptor Act

31、ivator for Nuclear Factor- B Ligand，核因子 B受體活化因子配體） 、Blys（ B lymphocyte stimulator， B 淋巴細胞刺激因子）、PA、TPO、呼吸道合胞病毒F蛋白、4-integrin（整合素）作業(yè)：查閱上述治療靶點的生物學意義及與對應抗體作業(yè)：查閱上述治療靶點的生物學意義及與對應抗體所治療疾病的關系。所治療疾病的關系。用于治療酶作用底物積累酶作用底物積累或酶促產(chǎn)物缺乏酶促產(chǎn)物缺乏導致的疾病。戈謝?。℅auchers?。?葡萄糖腦苷脂酶活性異常引起葡萄糖腦苷脂在組織巨噬細胞內蓄積而引發(fā)的疾病。常見癥狀：肝、脾、骨髓中出現(xiàn)Gauch

32、ers細胞（飽含葡萄糖腦苷脂的細胞），引發(fā)進行性肝、脾腫大、嚴重貧血和血小板減少等癥狀。囊性纖維化：是一種威脅生命的遺傳病，是由跨膜調節(jié)因子CFTR蛋白的功能障礙性纖維化引起的疾病。氣管中有含高濃度DNA的黏稠膿性分泌物，降低了肺功能并增加了感染機會。纖溶酶缺乏纖溶酶缺乏：凝血與溶血過程失衡，血纖維蛋白凝塊堵塞血管引起的腦梗和心肌梗死等疾病。組織型纖溶酶原激活物（組織型纖溶酶原激活物（tPAtPA）及其突變體：）及其突變體：用于急性心梗溶栓DNADNA酶（酶（dornase alfadornase alfa）：囊性纖維化。葡糖腦苷脂酶（葡糖腦苷脂酶（ImigluceraseImiglucera

33、se）：Gauchers?。ǜ曛x病，高歇病）尿酸水解酶（尿酸水解酶（rasburicaserasburicase）：血漿尿酸癥粘多糖粘多糖- - -L-L-艾杜糖醛酸水解酶艾杜糖醛酸水解酶（laronidase）： 粘多糖貯積病半乳糖苷酶半乳糖苷酶- - （Algasidase betaAlgasidase beta）：Febry病，法布里病。葡萄糖苷酶：葡萄糖苷酶：龐培氏病，糖元病或糖元貯積癥。心肌糖元貯積。凝血酶（凝血酶（rhThrombinrhThrombin）：外科止血。其他：注射用重組鏈激酶：注射用重組鏈激酶：斯凱通，上海凱茂生物醫(yī)藥有限公司；國大欣通，青島國大生物制藥股份有限公司。

34、溶栓注射用重組葡激酶：注射用重組葡激酶：依力通，成都地奧九泓制藥廠；施愛克，通化玉金藥業(yè)股份有限公司。溶栓注射用重組人尿激酶原：注射用重組人尿激酶原：普佑克，上海天士力藥業(yè)有限公司；我國自行研制，擁有自主知識產(chǎn)權。溶栓重組人組織型纖溶酶原激酶衍生物重組人組織型纖溶酶原激酶衍生物：瑞通立，山東阿華生物藥業(yè)有限公司。溶栓產(chǎn)品種類少，適應癥少（僅限于溶栓）血栓性疾病是由于凝血與溶血過程失衡所致血纖維蛋白凝塊堵塞血管引起的疾病。凝血：血纖維蛋白原（溶解度很大）血纖維蛋白單體（溶解度很低）血纖維（血栓，溶解度更低）。溶血:纖溶酶水解纖維蛋白 激活無活性的血漿纖溶酶原，形成有活性的纖溶酶，后者催化血栓主要

35、基質纖維蛋白水解，使血栓溶解，血管再通。纖溶酶原（plasminogen，Plg）纖溶酶（plasmin，Plm） 纖維蛋白水解血栓溶解mucopolysaccharidoses ，MPS。是一種因先天性粘多糖酶缺乏、粘多糖貯積而累及多臟器的新陳代謝異常性疾病。根據(jù)主要傷及的器官，分為肝型、心臟型、骨骼肌型等，引起肝肥大、心臟肥大、骨骼肌無力等癥狀。為遺傳性半乳糖苷酶活性降低引起糖鞘脂在人體重要器官聚集誘發(fā)的疾病。該病主要累及腎臟及心臟。 無。問題：除了血栓性疾病，F(xiàn)DA用酶治療的一些代謝性疾病在我國是否發(fā)生？我國臨床對這些疾病是如何治療的？我國我國CFDA2013年年9月登記在案的國產(chǎn)可溶性

36、受體上市產(chǎn)月登記在案的國產(chǎn)可溶性受體上市產(chǎn)品：品：注射用重組人注射用重組人型腫瘤壞死因子受體型腫瘤壞死因子受體-抗體融合蛋白抗體融合蛋白（益賽普，上海中信國健藥業(yè)股份有限公司，2012）用于治療類風濕性關節(jié)炎、銀屑病、強直性脊柱炎。機制：TNF-水平異常增高增加了這幾種疾病的水平異常增高增加了這幾種疾病的嚴重程度。嚴重程度。是一種以關節(jié)滑膜病變?yōu)橹鞯穆且环N以關節(jié)滑膜病變?yōu)橹鞯穆?、全身性的炎性自身免疫病性、全身性的炎性自身免疫病病因尚未完全明確。但目前認為，最終引起病理變化的主要機制是：自身變性IgG與其誘發(fā)的IgM類抗體（類風濕因子，類風濕因子，RF）形成的復合物沉積于小關節(jié)處引起機體損傷

37、。是一種以骶髂關節(jié)、椎間是一種以骶髂關節(jié)、椎間關節(jié)病變?yōu)橹鞯穆匝仔躁P節(jié)病變?yōu)橹鞯穆匝仔约膊?，疾病，臨床主要表現(xiàn)為腰背頸臀髖部疼痛以及關節(jié)腫痛，嚴重者可發(fā)生脊柱脊柱畸形和強直畸形和強直。是一種慢性、炎癥性皮膚病，以角質形成細胞（是一種慢性、炎癥性皮膚病，以角質形成細胞（ KC）高度增生和炎癥反應為特征。）高度增生和炎癥反應為特征。俗稱牛皮癬。病因尚未完全明了，但眾多研究表明，免疫因病因尚未完全明了，但眾多研究表明，免疫因素與銀屑病的發(fā)生及病理生理有密切關系。素與銀屑病的發(fā)生及病理生理有密切關系。FDA 批準上市的疫苗（截止批準上市的疫苗（截止2013年年1月）月）酵母表達乙肝疫苗酵母表達乙肝

38、疫苗(1986)(1986)。酵母表達酵母表達HPV（人乳頭瘤病毒）疫苗（ Gardasil）：預防宮頸癌。昆蟲細胞表達昆蟲細胞表達HPV雙價疫苗：雙價疫苗：Cervarix，用于預，用于預防宮頸癌。防宮頸癌。昆蟲細胞表達流感疫苗：昆蟲細胞表達流感疫苗：Flublok （influenza vaccine）：預防季節(jié)性流感。）：預防季節(jié)性流感。宮頸癌是全球第二大婦女常見惡性腫瘤。上世紀70年代，德國科學家哈拉爾德楚爾豪森(Harald zur Hausen)發(fā)現(xiàn)，感染人類乳頭瘤病毒(HPV)是誘發(fā)宮頸癌的主要病因。HPV病毒有200多型，約70%的宮頸癌病例由HPV16型和HPV18型病毒引起

39、。中文名“加衛(wèi)苗 ”、“佳達修”等， 是FDA批準的唯一一種預防子宮頸癌的疫苗?？深A防由6、11、16、18型HPV引起的宮頸癌、癌前病變或不典型增生病變以及生殖器疣。接種對象： 9歲女性。中文名“卉研康”，為葛蘭素史克（GSK）研發(fā)生產(chǎn)的二價（ 16、18型HPV）宮頸癌疫苗。獲FDA、歐盟、臺灣、香港等批準上市。接種對象： 9歲女性。重組乙肝疫苗：重組乙肝疫苗：釀酒酵母表達，釀酒酵母表達，深圳康泰生物制品股份有限公司、北京天壇生物制品股份有限公司；漢遜酵母表達，漢遜酵母表達，華蘭生物疫苗有限公司，大連漢信生物制藥有限公司；CHO表達，表達，北京華爾盾生物技術有限公司、成都生物制品研究所有限

40、責任公司、華北制藥金坦生物技術股份有限公司、蘭州生物制品研究所有限責任公司。重組重組B亞單位亞單位/菌體霍亂疫苗（腸溶膠囊）：菌體霍亂疫苗（腸溶膠囊）：可唯適，上海聯(lián)合賽爾生物工程有限公司。重組戊型肝炎疫苗重組戊型肝炎疫苗益可寧：大腸埃希菌表達，大腸埃希菌表達，廈門萬泰滄海生物技術有限公司。戊型肝炎是一種易發(fā)于青壯年和孕婦的病毒性肝炎戊型肝炎是一種易發(fā)于青壯年和孕婦的病毒性肝炎，通過食物、糞便污染的水源、接觸和血液傳染。臨床表現(xiàn)和甲肝類似，主要以乏力、厭油、惡心、食欲不振，并伴有肝區(qū)疼痛，皮膚、小便發(fā)黃等癥狀為主。接種對象： 16歲的易感人群。如畜牧養(yǎng)殖者、餐飲業(yè)人員、學生或部隊官兵、育齡期婦

41、女、疫區(qū)旅行者等。流行性感冒病毒亞單位疫苗流行性感冒病毒亞單位疫苗（ Influenza vaccine（Sub-unit）（愛閣力保，Agrippal）：意大利意大利， 2009-09-30至2014-09-29。流感病毒亞單位疫苗（流感病毒亞單位疫苗（類病毒體）（ Polyvalent Virosomal Influenza Vaccine）（因福舒，Inflexal V）：瑞士瑞士， 2012-07-17至2017-07-16。流感病毒亞單位疫苗流感病毒亞單位疫苗（ Influenza vaccine, surface antigen, inactivated）（英伏可，Influvac

42、）：荷蘭荷蘭， 2013-06-25至2018-06-24。重組乙型肝炎疫苗重組乙型肝炎疫苗（釀酒酵母）（安在時，Engerix B）：比利時比利時， 2010-07-07至2015-04-06。主要為各種凝血因子。用于治療血友病。主要為各種凝血因子。用于治療血友病。血友病為一種X性聯(lián)陰性遺傳的凝血功能障礙所致的性聯(lián)陰性遺傳的凝血功能障礙所致的出血性疾病。出血性疾病。發(fā)生于男孩，總發(fā)病率1.52/萬。發(fā)病機制：某些種類的凝血酶缺乏導致發(fā)病機制：某些種類的凝血酶缺乏導致凝血時間延長。血友病A：凝血因子缺乏，占血友病人總數(shù)的85%血友病B：凝血因子缺乏，占血友病人總數(shù)的15%。凝血因子a (Nov

43、oSeven、BHK表達)：血友病A或B凝血因子(Bioclate）, 哺乳動物細胞表達；Helixate, BHK表達； Recombinate rAHF, CHO表達； ReFacto，CHO表達)：血友病A凝血因子IX (BeneFix , CHO表達)：血友病B凝血因子a：在凝血酶鏈式瀑布中不存在，但促進凝血因子和IX的活化，用于治療對因子和IX產(chǎn)生抑制物的A型或B型血友病人的自發(fā)性和手術后出血。注射用重組人凝血因子注射用重組人凝血因子（任捷，Xyntha）：美國美國，2012-08-16至2017-08-15。注射用重組人凝血因子注射用重組人凝血因子（百因止，ADVATE）：瑞士瑞士

44、， 2012-04-28至2017-04-27。注射用重組人凝血因子注射用重組人凝血因子IX（貝賦，BeneFIX）：西班牙西班牙，2012-07-10至2017-07-09。注射用重組人凝血因子注射用重組人凝血因子VIIa（諾其，NovoSeven）：丹丹麥麥諾和諾德公司，2010-05-19至2015-05-18。無國產(chǎn)重組產(chǎn)品。優(yōu)優(yōu) 點點免疫效應期長?？赏瑫r誘發(fā)體液免疫和細胞免疫。熱穩(wěn)定性好。易于大量生產(chǎn)。表達效果及免疫原性不確切。DNA整合的風險。誘導產(chǎn)生抗DNA抗體，并有可能誘發(fā)自身免疫性疾病。缺缺 點點尚無上市產(chǎn)品。尚無上市產(chǎn)品。 但自1997年以來，已有超過70種針對各種傳染病（

45、如HBsAg核酸疫苗、HIV9P160核酸疫苗、 SARS相關冠狀病毒S2DNA疫苗）和癌癥的DNA疫苗在臨床前和臨床研究中。對人：無對動物：1、禽流感新城疫重組二聯(lián)活疫苗：、禽流感新城疫重組二聯(lián)活疫苗：2005年12月24日，農(nóng)業(yè)部在北京宣布，我國已成功研制出雞雞痘病毒作為載體的禽流感新城疫重組二聯(lián)活疫痘病毒作為載體的禽流感新城疫重組二聯(lián)活疫苗苗，并正式批準生產(chǎn)。 2、禽流感重組雞痘病毒載體活疫苗（、禽流感重組雞痘病毒載體活疫苗（H5） 第三節(jié)、基因工程藥第三節(jié)、基因工程藥物今后的研發(fā)方向物今后的研發(fā)方向 提提 綱綱1、利用后基因組時代的成果尋找新的藥物靶標2、對原有重組藥物產(chǎn)品進行遺傳改造

46、和化學修飾，以改善藥物性能。3、研究基因工程藥物新劑型新劑型及新的給藥途徑給藥途徑。（一）后基因組時代指功能基因組時代。獲得了大量基因的功能信息。（二）藥物靶標：指藥物在體內的作用結合靶點，包括受體、酶、離子通道、核酸等生物大分子。（三）作為理想藥物靶點的主要條件：特異性。即與特定疾病關系密切并與其在正常細胞中的功能明顯區(qū)別.可藥性。能夠與藥物發(fā)生相互作用又能引起藥物效應的基因或其產(chǎn)物。分析正常組織與病理組織、藥物干預前后功能基因表達的差異，是發(fā)現(xiàn)藥靶的重要手段之一。疾病模型（人、動物、細胞）基因轉錄及表達差異分析藥靶鑒定基因芯片蛋白雙向電泳聯(lián)合質譜分析生物信息學酵母雙雜交及三雜交藥靶確證RNA干擾技術基因過表達技術轉基因動物基因敲除動物（一）遺傳改造包括基因突變、融合表達等改變（一）遺傳改造包括基因突變、融合表達