尿液干化學(xué)分析儀

1、實驗七 尿液干化學(xué)分析儀Urinary Chemical Analyzer實驗原理1儀器工作原理 多聯(lián)試帶模塊與尿樣中相應(yīng)成分發(fā)生特異性呈色反應(yīng)，顏色深淺與相應(yīng)物質(zhì)濃度成正比。光源掃描各模塊產(chǎn)生的反射光，經(jīng)球面積分儀的濾光片得到單色光，照射光電二極管轉(zhuǎn)化為電信號。微處理系統(tǒng)結(jié)合參考系統(tǒng)將電信號校正為測定值，以定性或半定量方式打印出結(jié)果。2試帶基本結(jié)構(gòu) 如圖5-3，碘酸鹽層可破壞尿中維生素C等還原性物質(zhì)，消除干擾；無此層的試帶含一個檢測維生素C的模塊，以便進行有關(guān)項目的校正。塑料底層吸水層試劑層碘酸鹽層尼龍膜圖5-3 尿液干化學(xué)分析儀試劑塊組成示意圖3試帶模塊反應(yīng)原理 各模塊反應(yīng)的原理、參考范圍

2、、常見干擾項目等見表5-10。表5-10 尿液干化學(xué)分析儀檢查項目、原理、參考范圍及主要干擾因素檢測項目反應(yīng)原理靈敏度參考范圍干擾因素假陽性假陰性酸堿度 (pH)酸堿指示劑法4.59.057標本久置后，細菌繁殖或CO2丟失，pH 試帶浸尿時間過長，pH 蛋白(PRO)pH指示劑蛋白質(zhì)誤差法對白蛋白敏感(70100mg/L)，對球蛋白、粘蛋白、本周蛋白敏感性差陰性pH8，奎寧、磺胺嘧啶、聚乙烯吡咯酮等藥物，季銨類消毒劑pH3，高濃度青霉素，高鹽，球蛋白、本周蛋白等非電解質(zhì)蛋白葡萄糖 (GLU)葡萄糖氧化酶法250mg/L陰性過氧化物、強氧化劑污染高VitC、乙酰乙酸，L-多巴代謝物，高比密低pH

3、尿酮體(KET)亞硝基鐵氰化鈉法乙酰乙酸: 50 100mg/L；丙酮: 400700mg/L；與-羥丁酸不反應(yīng)陰性苯丙酮、L-多巴代謝物、酮體以-羥丁酸為主，陳舊尿隱血(BLD)過氧化物酶法Hb0.30.5mg/L；RBC10/l陰性肌紅蛋白、易熱性觸酶、氧化劑和菌尿 VitC、蛋白尿、糖尿膽紅素 (BIL)偶氮法5mg/L陰性吩噻嗪類藥物VitC、亞硝酸鹽、光照尿膽原(UBG)偶氮法或Ehrich反應(yīng)10mg/L陰性或弱陽性吩噻嗪類藥物、膽色素原、膽紅素、吲哚亞硝酸鹽、光照、重氮藥物亞硝酸鹽 (NIT)偶氮法0.50.6mg/L陰性陳舊尿、亞硝酸鹽或偶氮試劑污染、食物硝酸鹽含量豐富pH5、

4、尿量過多、食物硝酸鹽含量過低、尿在膀胱內(nèi)停留4h、非含硝酸鹽還原酶細菌感染、VitC、亞硝酸鹽白細胞(LEU/WBC)中性粒細胞酯酶法25/l陰性甲醛、氧化劑、膽紅素、呋喃類藥以淋巴或單核細胞為主、蛋白、慶大霉素比密(SG)多聚電解質(zhì)中H+解離量與離子濃度相關(guān)1.0101.0301.0151.025電解質(zhì)性尿蛋白致SG堿性尿致SG維生素C(VitC)酸性環(huán)境中還原染料50 mg/L陰性巰基化合物、胱氨酸、內(nèi)源性酚堿性尿儀器組成1機械系統(tǒng) 將試帶傳送至預(yù)定檢測區(qū)，檢測完成后送到廢物盒。2光學(xué)系統(tǒng) 光線照射到試帶表面產(chǎn)生反射光，反射光強度與反應(yīng)顏色成正比。不同強度的反射光經(jīng)光電轉(zhuǎn)換為電信號進行處理

5、。（1）光源：提供特定波長的光源如發(fā)光二極管(1ight emitting diode，LED)。（2）單色裝置：球面積分儀使模塊表面的反射光轉(zhuǎn)變成單色光。（3）光電檢測器：將反射光信號轉(zhuǎn)換為電信號，如電荷耦合器件（charge coupled device, CCD）。3電路系統(tǒng) 將電信號放大，經(jīng)模/數(shù)轉(zhuǎn)換后送微處理器（computer unit, CPU）處理，計算最終檢測結(jié)果。然后將結(jié)果輸出到屏幕顯示并打印。4微處理器 除了與參照系統(tǒng)比較，處理和校正檢測信號外，還控制整個儀器運作。尿干化學(xué)分析儀結(jié)構(gòu)見圖5-4。光源檢測器光電轉(zhuǎn)換器微處理器打印輸出模塊掃描結(jié)構(gòu)（可移動）試帶進樣結(jié)構(gòu)尿多聯(lián)試

6、帶（位置固定）圖5-4 尿干化學(xué)分析儀結(jié)構(gòu)示意圖試劑器材1試劑 人工尿質(zhì)控液低濃度和高濃度各l份。2器材 尿液干化學(xué)分析儀、尿干化學(xué)試帶。操作步驟1開機 打開電源開關(guān)，等待儀器自檢完成后，進入主菜單。2檢測質(zhì)控試帶 將質(zhì)控試帶置于檢測槽內(nèi)，啟動儀器運行鍵，自動檢測。待儀器打印出質(zhì)控結(jié)果，顯示“正?！焙?，取回質(zhì)控帶保存。3浸漬試帶 將試帶完全浸入尿樣中12s，取出，吸干試帶多余的尿樣。4標本檢測 同步驟2，直到儀器自行打印報告或?qū)?shù)據(jù)輸出。性能評價目前各醫(yī)院使用的尿液分析儀的廠家、種類不一，型號各異，但其性能評價及儀器的校正均應(yīng)包括以下5個方面。1校正儀器（1）按儀器制造商規(guī)定的要求，調(diào)正儀器使

7、其處于最佳工作狀態(tài)，包括儀器安裝的位置、工作室溫度和濕度、檢測速度、打印顯示功能是否在規(guī)定范圍之內(nèi)。避免陽光等其他光源的直接照射、外源性振動、外源性電源干擾等。（2）檢查儀器檢測系統(tǒng)：用標準試帶校正條對儀器進行檢測，觀察其是否在規(guī)定的范圍內(nèi)。2檢查儀器和多聯(lián)試帶的準確性 按儀器規(guī)定的測定范圍配制一定濃度的標準物，在嚴格操作的前提下，每份標準物重復(fù)檢測3次，觀察其符合程度。3檢查儀器和多聯(lián)試帶的精確性 取人工尿質(zhì)控液（低濃度和高濃度各1份）和自然尿標本（正常尿和異常尿各1份），連續(xù)檢測20次，觀察每份標本每次檢測是否在靶值允許的范圍內(nèi)（一般每次檢測最多相差一個定性等級）。4評價敏感性（S）和特異

8、性（Sp） 將尿液干化學(xué)分析儀和傳統(tǒng)顯微鏡及尿液理化檢查結(jié)果進行對比，以傳統(tǒng)法為基準，計算儀器檢測的S和Sp。5建立儀器檢測參數(shù)的參考范圍 以傳統(tǒng)法為基準，結(jié)合多聯(lián)試帶檢測范圍，建立符合本實驗室尿分析儀的參考范圍。質(zhì)量控制尿液干化學(xué)分析存在的局限性和影響因素較多，容易產(chǎn)生假陽性或假陰性。因此，必須十分重視尿干化學(xué)分析儀和多聯(lián)試帶質(zhì)量控制。使用尿干化學(xué)分析儀應(yīng)以傳統(tǒng)法為基準，結(jié)合多聯(lián)試帶檢測范圍，建立符合本實驗室尿液分析儀的參考范圍。其質(zhì)量控制的主要環(huán)節(jié)如下：1分析前的質(zhì)量控制（1）尿樣收集：告知病人正確留取尿樣的方法。根據(jù)檢測內(nèi)容留取適當(dāng)?shù)臉吮?，防止非尿液成分（如陰道分泌物等）混入。要使?次

9、性尿杯，有明顯的標簽，含患者姓名、病歷號、收集時間和檢驗項目等。（2）了解患者可能影響尿化學(xué)檢測的進食及使用藥物的情況。（3）尿樣保存：尿樣收集后應(yīng)在2h之內(nèi)完成檢測，否則選用適當(dāng)?shù)姆栏瘎┎⒗洳乇４?。注意準確有效地標記尿標本。2分析中的質(zhì)量控制 包括儀器和試帶的準確性、試帶的有效期、儀器操作正確程度和儀器的校正等方面。（1）嚴格按操作步驟進行檢測。（2）使用質(zhì)控尿液，根據(jù)尿化學(xué)質(zhì)控液的期望值判斷尿液分析儀的工作狀態(tài)是否正常。自制人工尿質(zhì)控液對尿葡萄糖、蛋白質(zhì)、血紅蛋白基本能滿足要求，但尿膽紅素、尿膽原結(jié)果不能令人滿意，尿酮體也有問題。國外公司的商品質(zhì)控液效果較好，如Bio-Rad公司的Rout

10、ine Urine Chemistry Control。（3）質(zhì)控步驟：在對分析儀全面鑒定和定期校正的基礎(chǔ)上，每日對儀器和試帶按圖5-3程序進行檢查。每次使用“正?！焙汀爱惓！眱煞N濃度的質(zhì)控物進行檢查：同1天內(nèi)最好使用同l份質(zhì)控物標本；質(zhì)控物任一膜塊的測定結(jié)果與“靶值”允許有1個定性等級的差異（靶值的±），超過此范圍或結(jié)果由“正常”變成 “異常”或由“異?！弊兂伞罢！本鶓?yīng)視為失控。尿液分析中質(zhì)量控制程序見圖5-5。圖5-5 尿液分析中質(zhì)量控制程序用質(zhì)控物進行質(zhì)控質(zhì)控允許范圍內(nèi)超出質(zhì)控允許范圍標本測定檢查質(zhì)控物是否失效 No Yes 重復(fù)試驗 重新試驗使用新質(zhì)控物質(zhì)控允許范圍內(nèi) 質(zhì)控

11、允許范圍外 繼續(xù)標本測定 配制新質(zhì)控物質(zhì)控允許范圍內(nèi)質(zhì)控允許范圍外標本測定重新試驗另一批號新試帶新試帶廢棄失效試帶質(zhì)控允許范圍內(nèi) 質(zhì)控允許范圍外標本測定檢修或校正儀器新批號試帶廢棄全部失效試帶質(zhì)控允許范圍外質(zhì)控允許范圍內(nèi)啟用同一批號試帶 繼續(xù)標本測定使用新質(zhì)控物廢棄舊質(zhì)控物3分析后的質(zhì)量控制 包括試驗結(jié)果與顯微鏡檢結(jié)果的相關(guān)性、是否受藥物或病理物質(zhì)的干擾、參考范圍的認可、報告單書寫是否規(guī)范和報告單回報時間是否及時等方面。（1）化學(xué)分析結(jié)果與顯微鏡檢結(jié)果之間的關(guān)聯(lián)性：如出現(xiàn)表5-11情況表示尿化學(xué)檢測結(jié)果可疑，應(yīng)進一步查明原因。表5-11 尿干化學(xué)結(jié)果可疑情況化學(xué)分析顯微鏡檢查隱血（）大量紅細胞

12、亞硝酸鹽（）白細胞（）蛋白質(zhì)（）紅細胞、白細胞和管型增多（2）綜合考慮患者的病史：特別是腎臟疾病患者，尿蛋白定性應(yīng)當(dāng)用磺基水楊酸法。如尿化學(xué)分析結(jié)果與鏡檢不一致，應(yīng)進一步查明原因。（3）參考范圍的認可：尿干化學(xué)分析儀檢測白細胞、紅細胞出現(xiàn)“假陰性”時，應(yīng)以鏡檢為準；但當(dāng)“假陽性”時，儀器的結(jié)果可能正確。這種情況見于白細胞：當(dāng)尿在膀胱貯存時間長，白細胞破壞，中性粒細胞酯酶釋放到尿中，導(dǎo)致儀器分析（），鏡檢反而（）；紅細胞：腎病患者尿中紅細胞常破壞而釋出血紅蛋白或某些病人尿中有高活性不耐熱的觸酶時均可導(dǎo)致儀器分析（），鏡檢卻為（）。尿液煮沸冷卻后再測試可排除不耐熱的觸酶造成的假陽性。其他情況要結(jié)合臨床實踐，不能一概否定或肯定儀器檢測結(jié)果，更不能隨意調(diào)節(jié)改