尿理學(xué)及濕化學(xué)檢驗

1、尿理學(xué)及濕化學(xué)檢驗?zāi)蚶韺W(xué)及濕化學(xué)檢驗醫(yī)學(xué)檢驗系醫(yī)學(xué)檢驗系尿液尿液pH測定測定l原理 PH試紙是多種指示劑適當(dāng)配合的試帶，顯色范圍為棕紅至深黑l器材 潔凈試管或尿杯。l試劑 pH廣泛試紙1套(包括試帶和標(biāo)準(zhǔn)色板)。l標(biāo)本 新鮮尿液。 操作操作l將手洗凈擦干或配戴手套，取試紙1條，將其一端浸入尿液約0.5s取出自然光線下與標(biāo)準(zhǔn)色板比色讀取尿液pH。 注意事項注意事項l1試帶應(yīng)密封、避光、干燥保存，遠(yuǎn)離酸性和堿性物質(zhì)以防失效。l2在規(guī)定時間內(nèi)比色，1min內(nèi)。 l3標(biāo)本應(yīng)新鮮，放置過久會因細(xì)菌繁殖或喪失揮發(fā)性酸而使pH增高。尿比密測定（折射儀法）尿比密測定（折射儀法）目的 熟悉折射儀的工作原理、使用

2、及校正方法。原理 折射率與媒質(zhì)的密度有關(guān)，密度越高，折射率越大；其次也與光的波長及溫度有關(guān)。 經(jīng)過大批量尿標(biāo)本的研究，已經(jīng)建立了折射率、比密和總固體量的經(jīng)驗公式，并將數(shù)字列成線圖刻在目鏡系列的適當(dāng)位置中，測量時直接讀數(shù)即可。 器材 臨床折射計，尿杯、吸水紙、滴管、鑷子。 標(biāo)本 新鮮尿液。 操作操作 零點校準(zhǔn) 每次測試前必須用純凈水進(jìn)行零點校準(zhǔn)：向標(biāo)本室中加入足夠的蒸餾水，輕微調(diào)節(jié)旋轉(zhuǎn)螺絲使邊界線重合在1.000刻線上。 標(biāo)本測定程序 拭干標(biāo)本室和標(biāo)本蓋上的蒸餾水，在標(biāo)本室內(nèi)滴入足夠的尿液，通過接目鏡讀取數(shù)值或查表得出結(jié)果。 注意事項注意事項l1用過的濾紙、棉球等應(yīng)及時焚毀，以免污染環(huán)境。l2尿

3、酸鹽所致的渾濁可影響結(jié)果，需要加溫溶解后再測定，切不可棄去。l3細(xì)胞等有形成分增多時，應(yīng)離心后測定上清液，測試完畢后用純凈蒸餾水擦拭干凈。尿蛋白測定（磺基水楊酸法）尿蛋白測定（磺基水楊酸法）目的 掌握尿蛋白定性的磺基水楊酸法原理及 操作原理 在酸性條件下，磺基水楊酸的磺酸根離子 與蛋白質(zhì)氨基酸陽離子結(jié)合，形成不容性 的蛋白鹽沉淀，沉淀的程度可反映蛋白質(zhì) 含量。 l器材 小試管、滴管、吸管l試劑 200g/l磺基水楊酸溶液l標(biāo)本 人工蛋白尿操作操作1加尿液 取小試管2支，各加清晰尿液lml。2加試劑 于第1支試管內(nèi)滴加磺基水楊酸溶 液2滴，輕輕混勻；另1支試管不加 試劑作空白對照，1min內(nèi)觀察

4、結(jié)果。3判斷結(jié)果 按P70表2-2判斷陽性程度及蛋白 質(zhì)的含量 注意事項注意事項1該法靈敏，極輕微反應(yīng)無意義。判斷結(jié)果應(yīng)及時，否則會使陽性增高。2尿液偏堿時(pH9)，磺基水楊酸法可呈假陰性；尿液偏酸(pH3)也會引起蛋白定性假陰性。應(yīng)先將尿液PH值調(diào)到56。3含碘造影劑、大劑量青霉素等也可使反應(yīng)呈假陽性，但其反應(yīng)與蛋白尿不同，應(yīng)仔細(xì)觀察并結(jié)合用藥情況綜合分析。4盡量指導(dǎo)患者采集中段尿，或離心后測定。l原理：根據(jù)葡萄糖氧化酶法反應(yīng)原理，葡萄糖氧化酶特異性氧化葡萄糖，生成葡萄糖醛酸和過氧化氫，過氧化氫在過氧化物酶的作用下，使指示劑氧化而呈現(xiàn)顏色變化。l標(biāo)本：新鮮尿l器材：一次性尿杯、尿糖試紙尿葡

5、萄糖定性檢查尿葡萄糖定性檢查 （一）尿糖試紙法（一）尿糖試紙法操作操作l、將試紙的試墊區(qū)浸入樣本中約秒鐘，并將其取出l、讓試紙的邊緣沿著樣本容器口輕輕撩拭，以去除殘余的尿液l、橫握試紙，在秒內(nèi)與瓶簽上的比色圖譜比較，記錄結(jié)果。試紙與標(biāo)準(zhǔn)色版相同顏色即為尿樣的尿糖值，如反應(yīng)顏色在兩個標(biāo)準(zhǔn)色版顏色之間，則該尿樣的尿糖值也介于兩者之間。注意事項注意事項l、用清潔干燥的容器收集新鮮尿液并盡快檢測，尿樣在室溫下的放置時間不可超過小時，否則應(yīng)將尿樣保存在冰箱中并在小時內(nèi)檢測，不要在尿樣中加防腐劑，尿樣不可離心，測試前要將尿樣混勻。注意事項注意事項l、溫度越低，反應(yīng)所需要的時間要相應(yīng)延長l、尿糖濃度時通過試

6、紙由藍(lán)色棕色的顏色變化來指示，藍(lán)色為無尿糖，棕色越深，尿糖越高。l（二）班氏法班氏法（講解）l目的 掌握班氏法原理方法l原理 葡萄糖或其他還原性的糖的醛基在熱鹼性溶液中，能將班氏試劑的蘭色硫酸銅還原為黃色的氫氧化銅，進(jìn)而形成紅色氧化亞銅沉淀l器材 試管架、中試管、滴管、試管夾、酒精燈l試劑 班氏試劑操作操作1鑒定班氏試劑質(zhì)量 取中號試管1支，加入班氏試劑2.0ml，搖動試管徐徐加熱至沸騰，觀察試劑有無顏色及性狀變化，若試劑仍為透明藍(lán)色，可進(jìn)行以下實驗。2加尿液 向班氏試劑中加離心后的尿液0.2ml(約4滴)，混勻。3加熱煮沸 繼續(xù)煮沸12min，或置沸水浴5min，自然冷卻。4判斷結(jié)果 注意事

7、項注意事項 1試劑與尿液的比例為10：1。 2煮沸時應(yīng)不時搖動試管以防爆沸噴出，也可在沸水浴中實驗。 3檢驗糖尿病患者尿液中葡萄糖，應(yīng)空腹或餐后2h留取尿標(biāo)本。 目的目的 掌握改良Rothera法尿酮體定性的方法。 原理原理 亞硝基鐵氫化鈉Na2Fe(CN)52H2O遇尿分解為Na4Fe(CN)6、NaNO2、Fe(OH)3和Fe(CN)53- 如尿中存在可檢出量的酮體(丙酮、乙酰乙酸)，在堿性環(huán)境中即與試劑作用生成異硝基(HOON=)或異硝基胺(NH2OON=)，后者與Fe(CN)53-生成紫紅色化合物。 器材器材 試管或載玻片、藥匙、滴管。 試劑試劑 Rothera試劑。 標(biāo)本標(biāo)本 新鮮尿液。尿酮體測定（改良Fe(CN)53-法）l操作操作l1加入酮體粉 于載玻片上(或試管內(nèi))，加入1小勺酮體粉。l2加尿液 滴加尿液于酮體粉上，至完全將酮體粉浸