新藥開發(fā)中藥物相互作用研究-終

1、LOGOLOGODrug Interaction StudiesFDAFDA要求：試驗(yàn)性新藥與要求：試驗(yàn)性新藥與其他藥物之間的相互作其他藥物之間的相互作用研究應(yīng)該在藥物開發(fā)用研究應(yīng)該在藥物開發(fā)過程中過程中進(jìn)行，其作為藥進(jìn)行，其作為藥物物有效性和安全性評(píng)價(jià)有效性和安全性評(píng)價(jià)的一部分。的一部分。 LOGO目的：判定試驗(yàn)性新藥與其他藥物之間是否存在潛在的相互作用： 若存在，是否表明要采取劑量調(diào)整、額外的治療監(jiān)測、聯(lián)用禁忌或者其他降低危險(xiǎn)的措施。內(nèi)容：鑒別其主要消除路徑； 藥物分布中酶和轉(zhuǎn)運(yùn)體的作用程度； 描述藥物-藥物相互作用的機(jī)制。LOGOLOGO一般策略LOGO體外研究 1.1.藥物代謝酶的鑒別

2、藥物代謝酶的鑒別 體外實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)體外實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)重組重組P450P450酶酶肝微粒體肝微粒體肝細(xì)胞肝細(xì)胞LOGO 代謝酶介導(dǎo)的代謝酶介導(dǎo)的主要消除途徑主要消除途徑可依據(jù)決策樹進(jìn)行可依據(jù)決策樹進(jìn)行確證和進(jìn)一步研究。確證和進(jìn)一步研究。 但特定條件下代謝酶介導(dǎo)的但特定條件下代謝酶介導(dǎo)的次要消除途徑次要消除途徑也需也需要進(jìn)一步研究，在一些特殊群體中，這些酶會(huì)要進(jìn)一步研究，在一些特殊群體中，這些酶會(huì)產(chǎn)生重要影響產(chǎn)生重要影響 例如：腎臟功能障礙的患者服用主要通過腎臟消例如：腎臟功能障礙的患者服用主要通過腎臟消除的藥物；某酶的慢代謝型人服用由該酶代謝的藥除的藥物；某酶的慢代謝型人服用由該酶代謝的藥物；患者在同時(shí)服

3、用介導(dǎo)次要消除途徑的代謝酶的物；患者在同時(shí)服用介導(dǎo)次要消除途徑的代謝酶的強(qiáng)烈抑制劑。強(qiáng)烈抑制劑。LOGO 在確定藥物是否會(huì)抑制某一特定在確定藥物是否會(huì)抑制某一特定 CYP 酶的體外試驗(yàn)中，酶的體外試驗(yàn)中，可將藥物與該酶的探針底物共孵育可將藥物與該酶的探針底物共孵育 對(duì)于可逆性抑制劑，當(dāng)抑制劑在酶活性位點(diǎn)的濃度接近或?qū)τ诳赡嫘砸种苿?dāng)抑制劑在酶活性位點(diǎn)的濃度接近或超過超過KiKi值時(shí)，就會(huì)產(chǎn)生明顯的抑制作用。值時(shí)，就會(huì)產(chǎn)生明顯的抑制作用。 I/KiI/Ki值值預(yù)測體內(nèi)相互作用是否存在預(yù)測體內(nèi)相互作用是否存在n 若若I/KiI/Ki比值越大，相互作用的可能性越大。若比值越大，相互作用的可能性越大

4、。若I/KiI/Ki值值大于大于0.10.1, , 則有可能存在相互作用，有必要作進(jìn)一步的體內(nèi)研究。則有可能存在相互作用，有必要作進(jìn)一步的體內(nèi)研究。 ICIC5050：酶催化反應(yīng)被抑制達(dá)到：酶催化反應(yīng)被抑制達(dá)到50%50%最大抑制作用時(shí)抑制劑的最大抑制作用時(shí)抑制劑的濃度濃度2.確認(rèn)受試藥物是否是代謝酶的抑制劑或誘導(dǎo)劑LOGOn 對(duì)于機(jī)制性抑制劑，由于其抑制作用具有時(shí)間依對(duì)于機(jī)制性抑制劑，由于其抑制作用具有時(shí)間依賴性，要在加入底物前，對(duì)抑制劑預(yù)孵育賴性，要在加入底物前，對(duì)抑制劑預(yù)孵育30min30min。n 若產(chǎn)物生成率既有時(shí)間依賴性又有濃度依賴性，若產(chǎn)物生成率既有時(shí)間依賴性又有濃度依賴性，則說

5、明該抑制劑為機(jī)制性抑制劑。則說明該抑制劑為機(jī)制性抑制劑。n 若體外研究發(fā)現(xiàn)某抑制劑的抑制作用具有時(shí)間依若體外研究發(fā)現(xiàn)某抑制劑的抑制作用具有時(shí)間依賴性，則需要進(jìn)行進(jìn)一步的體內(nèi)研究賴性，則需要進(jìn)行進(jìn)一步的體內(nèi)研究。LOGO體外誘導(dǎo)試驗(yàn)的模型體外誘導(dǎo)試驗(yàn)的模型- -原代原代肝細(xì)胞肝細(xì)胞。 在評(píng)價(jià)藥物是否能誘導(dǎo)某一在評(píng)價(jià)藥物是否能誘導(dǎo)某一 P450P450酶時(shí)，酶時(shí)，需要需要陰性對(duì)照陰性對(duì)照和和陽性對(duì)照陽性對(duì)照。 陽性對(duì)照：使用陽性對(duì)照：使用有效的誘導(dǎo)劑有效的誘導(dǎo)劑（即濃度（即濃度 500mol/L500mol/L時(shí)，能使催化活性增加時(shí)，能使催化活性增加2 2倍以上的倍以上的誘導(dǎo)劑），可判斷來源于不同

6、個(gè)體的肝細(xì)胞誘導(dǎo)劑），可判斷來源于不同個(gè)體的肝細(xì)胞酶活性是否存在差異。酶活性是否存在差異。 2.確認(rèn)受試藥物是否是代謝酶的抑制劑或誘導(dǎo)劑LOGO 試驗(yàn)藥引起酶活性的改變與陽性對(duì)照相比試驗(yàn)藥引起酶活性的改變與陽性對(duì)照相比40%40%時(shí)，可視時(shí)，可視為酶誘導(dǎo)劑。為酶誘導(dǎo)劑。 ECEC5050值：產(chǎn)生值：產(chǎn)生50%50%最大誘導(dǎo)作用時(shí)的有效藥物濃度。最大誘導(dǎo)作用時(shí)的有效藥物濃度。 其他一些體外鑒定酶誘導(dǎo)作用的實(shí)驗(yàn)方法，如：用其他一些體外鑒定酶誘導(dǎo)作用的實(shí)驗(yàn)方法，如：用WesternWestern免疫印跡法或免疫沉淀法來測定酶蛋白含量的變免疫印跡法或免疫沉淀法來測定酶蛋白含量的變化，用化，用RT-PC

7、RRT-PCR在在mRNAmRNA水平測定酶含量的變化，或者進(jìn)水平測定酶含量的變化，或者進(jìn)行受體基因試驗(yàn)。行受體基因試驗(yàn)。但是這些試驗(yàn)只能提供支持性的資料，但是這些試驗(yàn)只能提供支持性的資料，并不一定能體現(xiàn)酶活性。并不一定能體現(xiàn)酶活性。實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)方法%LOGO 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 研究群體 底物和作用藥物的選擇 給藥途徑 給藥劑量 研究終點(diǎn) 統(tǒng)計(jì)方面的考慮3.體內(nèi)研究體內(nèi)研究LOGO 3.3.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)根據(jù)試驗(yàn)?zāi)康模刹捎靡韵聨追N設(shè)計(jì)方法：根據(jù)試驗(yàn)?zāi)康?，可采用以下幾種設(shè)計(jì)方法： 隨機(jī)交叉法（如先服用隨機(jī)交叉法（如先服用S S后服用后服用S+IS+I組和先組和先服用服用S+IS+I后服用后服用S S組）

8、；組）； 同種序貫交叉法同種序貫交叉法 （總是先服用（總是先服用S S后服用后服用S+I,S+I,或者相反）；或者相反）； 平行設(shè)計(jì)（一組服用平行設(shè)計(jì)（一組服用S S，另一組服用，另一組服用S+IS+I）。）。LOGO 如果實(shí)驗(yàn)需要達(dá)到穩(wěn)態(tài)血藥濃度而底物或作用藥物如果實(shí)驗(yàn)需要達(dá)到穩(wěn)態(tài)血藥濃度而底物或作用藥物和（或）其代謝物的半衰期較長，此時(shí)可以給予和（或）其代謝物的半衰期較長，此時(shí)可以給予負(fù)荷劑量負(fù)荷劑量以以迅速達(dá)到穩(wěn)態(tài)，也可以考慮特殊的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，比如選擇同種迅速達(dá)到穩(wěn)態(tài)，也可以考慮特殊的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，比如選擇同種序貫交叉法或者平行設(shè)計(jì)法，而不是隨機(jī)交叉法；序貫交叉法或者平行設(shè)計(jì)法，而不是隨機(jī)交叉

9、法； 對(duì)于一個(gè)快速可逆的抑制劑，其服用時(shí)間應(yīng)該在測定當(dāng)對(duì)于一個(gè)快速可逆的抑制劑，其服用時(shí)間應(yīng)該在測定當(dāng)天服用底物前或同時(shí)服用，這樣才能增加其敏感性。天服用底物前或同時(shí)服用，這樣才能增加其敏感性。 如果對(duì)聯(lián)合用藥方案中的兩種藥物彼此相互作用效應(yīng)進(jìn)如果對(duì)聯(lián)合用藥方案中的兩種藥物彼此相互作用效應(yīng)進(jìn)行評(píng)估，可以在兩個(gè)獨(dú)立試驗(yàn)進(jìn)行，也可以在同一個(gè)試驗(yàn)中行評(píng)估，可以在兩個(gè)獨(dú)立試驗(yàn)進(jìn)行，也可以在同一個(gè)試驗(yàn)中進(jìn)行，試驗(yàn)可設(shè)計(jì)為隨機(jī)三階段交叉、平行分組和同種序貫進(jìn)行，試驗(yàn)可設(shè)計(jì)為隨機(jī)三階段交叉、平行分組和同種序貫交叉。交叉。 設(shè)計(jì)方案時(shí)注意：設(shè)計(jì)方案時(shí)注意：LOGO 當(dāng)涉及共同抑制或誘導(dǎo)時(shí)，當(dāng)涉及共同抑制或誘導(dǎo)

10、時(shí)，給藥時(shí)間給藥時(shí)間至關(guān)重要。例至關(guān)重要。例如，如果受試藥物為代謝酶和如，如果受試藥物為代謝酶和OATPOATP（有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)多（有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)多肽）共有底物，以利福平作（肽）共有底物，以利福平作（OATPOATP抑制劑）為酶的誘導(dǎo)抑制劑）為酶的誘導(dǎo)劑時(shí)，受試藥物和利福平同時(shí)給藥可能會(huì)造成對(duì)誘導(dǎo)作劑時(shí)，受試藥物和利福平同時(shí)給藥可能會(huì)造成對(duì)誘導(dǎo)作用的低估，因此推薦底物受試藥物推遲給藥，但推遲的用的低估，因此推薦底物受試藥物推遲給藥，但推遲的最佳時(shí)間需要試驗(yàn)確定。另外，在撤掉相互作用藥物之最佳時(shí)間需要試驗(yàn)確定。另外，在撤掉相互作用藥物之后，考察其對(duì)底物的影響作用也是很重要的。后，考察其對(duì)底物的影

11、響作用也是很重要的。為避免試驗(yàn)中不確定因素對(duì)結(jié)果的影響，必須嚴(yán)為避免試驗(yàn)中不確定因素對(duì)結(jié)果的影響，必須嚴(yán)格控制飲食。格控制飲食。在涉及到代謝酶的遺傳藥理學(xué)（在涉及到代謝酶的遺傳藥理學(xué)（基因多態(tài)性基因多態(tài)性）的）的不同基因亞型上的藥物相互作用可能有所不同，應(yīng)在適不同基因亞型上的藥物相互作用可能有所不同，應(yīng)在適當(dāng)時(shí)機(jī)進(jìn)行針對(duì)性研究。當(dāng)時(shí)機(jī)進(jìn)行針對(duì)性研究。LOGO 選擇健康受試者，研究結(jié)果可以推論到患選擇健康受試者，研究結(jié)果可以推論到患者群體。者群體。 基于安全性考慮，有時(shí)不能采用健康受試基于安全性考慮，有時(shí)不能采用健康受試者進(jìn)行試驗(yàn)。者進(jìn)行試驗(yàn)。 當(dāng)需要使用藥效學(xué)終點(diǎn)時(shí)，需要采用受試當(dāng)需要使用藥效

12、學(xué)終點(diǎn)時(shí)，需要采用受試藥物擬用患者進(jìn)行試驗(yàn)。藥物擬用患者進(jìn)行試驗(yàn)。 當(dāng)實(shí)驗(yàn)涉及具有顯著當(dāng)實(shí)驗(yàn)涉及具有顯著基因多態(tài)性基因多態(tài)性的的P450P450酶酶（CYP2D6CYP2D6、2C92C9、2C192C19）時(shí)，要考慮藥物在）時(shí)，要考慮藥物在不同代謝類型人群中可能存在的差異。不同代謝類型人群中可能存在的差異。 3.2 實(shí)驗(yàn)群體LOGO3.3 底物和作用藥物的選擇受試藥物作為受試藥物作為CYPCYP酶的酶的底物底物在研究受試藥物的代謝可能受到抑制或誘導(dǎo)在研究受試藥物的代謝可能受到抑制或誘導(dǎo)（即作為底物）時(shí)，相互作用藥物應(yīng)首先選用所研究（即作為底物）時(shí)，相互作用藥物應(yīng)首先選用所研究途徑的途徑的強(qiáng)抑

13、制劑或誘導(dǎo)劑強(qiáng)抑制劑或誘導(dǎo)劑作為相互作用藥物。作為相互作用藥物。 例如，若受試藥物被例如，若受試藥物被CYP3ACYP3A代謝，則可選擇酮康唑代謝，則可選擇酮康唑和利福平分別作為抑制劑和誘導(dǎo)劑。如果試驗(yàn)結(jié)果是和利福平分別作為抑制劑和誘導(dǎo)劑。如果試驗(yàn)結(jié)果是陰性，則可認(rèn)為對(duì)于這一代謝途徑不存在具有臨床重陰性，則可認(rèn)為對(duì)于這一代謝途徑不存在具有臨床重要性的藥物要性的藥物- -藥物相互作用；若結(jié)果為陽性，則需選用藥物相互作用；若結(jié)果為陽性，則需選用其他較弱的抑制劑或誘導(dǎo)劑進(jìn)一步研究。其他較弱的抑制劑或誘導(dǎo)劑進(jìn)一步研究。 若受試藥物經(jīng)具有若受試藥物經(jīng)具有多態(tài)性多態(tài)性的酶代謝，則受試藥物在的酶代謝，則受試

14、藥物在慢代謝型人群和快代謝型人群中藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的對(duì)慢代謝型人群和快代謝型人群中藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的對(duì)比可以替代這一代謝途徑的研究。比可以替代這一代謝途徑的研究。LOGO受試藥物作為受試藥物作為CYPCYP酶的酶的抑制劑或誘導(dǎo)劑抑制劑或誘導(dǎo)劑一般應(yīng)選用一般應(yīng)選用敏感底物敏感底物，以觀察到受試藥物最大的影響作用。，以觀察到受試藥物最大的影響作用。如如CYP3ACYP3A：咪達(dá)唑侖；：咪達(dá)唑侖；CYP1A2CYP1A2：茶堿；：茶堿；CYP2B6CYP2B6：安：安非他酮；非他酮；CYP2C8CYP2C8：瑞格列奈；：瑞格列奈；CYP2C9CYP2C9：華法林；：華法林；CYP2C19CYP2C19：

15、奧美拉唑；：奧美拉唑；CYP2D6CYP2D6：地昔帕明。：地昔帕明。如果最初階段的研究表明受試藥物可以抑制或誘導(dǎo)敏感如果最初階段的研究表明受試藥物可以抑制或誘導(dǎo)敏感底物的代謝，可根據(jù)合并使用的可能性選取其他底物做進(jìn)底物的代謝，可根據(jù)合并使用的可能性選取其他底物做進(jìn)一步研究；一步研究；如果試驗(yàn)結(jié)果為陰性，則可推斷受試藥物對(duì)次敏感底物如果試驗(yàn)結(jié)果為陰性，則可推斷受試藥物對(duì)次敏感底物的代謝沒有影響。的代謝沒有影響。a. 3.3 底物和作用藥物的選擇LOGOn 受試藥物為受試藥物為CYPCYP酶的酶的抑制劑抑制劑，可依據(jù)其對(duì)敏感底物，可依據(jù)其對(duì)敏感底物代謝的抑制程度進(jìn)行分類。以代謝的抑制程度進(jìn)行分類

16、。以CYP3ACYP3A酶抑制劑為例：酶抑制劑為例：如果受試藥物使口服咪達(dá)唑侖或其他底物的如果受試藥物使口服咪達(dá)唑侖或其他底物的AUCAUC升升高大于等于高大于等于5 5倍，則屬強(qiáng)抑制劑；如果倍，則屬強(qiáng)抑制劑；如果AUCAUC升高在升高在2 25 5倍間，則為中等強(qiáng)度抑制劑；如果倍間，則為中等強(qiáng)度抑制劑；如果AUCAUC升高在升高在1.251.252 2倍間倍間, ,則為弱抑制劑。則為弱抑制劑。n 受試藥物受試藥物既是某既是某CYPCYP酶的抑制劑又是其誘導(dǎo)劑酶的抑制劑又是其誘導(dǎo)劑（如（如利托那韋對(duì)于利托那韋對(duì)于CYP3ACYP3A），則需警告由該藥引起的相），則需警告由該藥引起的相互作用具有

17、不確定性?；プ饔镁哂胁淮_定性。3.底物和作用藥物的選擇LOGO在一個(gè)實(shí)驗(yàn)中受試者同時(shí)服用多種在一個(gè)實(shí)驗(yàn)中受試者同時(shí)服用多種CYPCYP酶底物酶底物（即雞尾酒模式）（即雞尾酒模式） 考慮到下列因素：考慮到下列因素： 一種特定酶的底物對(duì)該酶具有較高的選擇性；一種特定酶的底物對(duì)該酶具有較高的選擇性； 底物之間沒有相互作用發(fā)生；底物之間沒有相互作用發(fā)生；a.a.受試者的數(shù)量達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。受試者的數(shù)量達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。這種雞尾酒實(shí)驗(yàn)的陰性結(jié)果可以免除對(duì)其中某這種雞尾酒實(shí)驗(yàn)的陰性結(jié)果可以免除對(duì)其中某個(gè)具體酶的進(jìn)一步評(píng)價(jià)，然而陽性結(jié)果則需要個(gè)具體酶的進(jìn)一步評(píng)價(jià)，然而陽性結(jié)果則需要進(jìn)一步的體內(nèi)研究。進(jìn)一步的體

18、內(nèi)研究?！半u尾酒”（cocktail）法LOGO3.4 給藥途徑 對(duì)于受試藥物，給藥途徑一般與對(duì)于受試藥物，給藥途徑一般與擬臨床擬臨床應(yīng)用應(yīng)用的給藥方式一致。的給藥方式一致。 如果正開發(fā)多種給藥途徑，則是否有必要針如果正開發(fā)多種給藥途徑，則是否有必要針對(duì)所有途徑進(jìn)行研究應(yīng)取決于預(yù)期的相互作用機(jī)對(duì)所有途徑進(jìn)行研究應(yīng)取決于預(yù)期的相互作用機(jī)制以及相應(yīng)的原形藥物和代謝物濃度制以及相應(yīng)的原形藥物和代謝物濃度- -時(shí)間曲線的時(shí)間曲線的相似性。相似性。LOGO3.5 給藥劑量對(duì)于底物和作用藥物來說，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)該盡可對(duì)于底物和作用藥物來說，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)該盡可能將相互作用的結(jié)果能將相互作用的結(jié)果最大化最大化。 作

19、用藥物（抑制劑或誘導(dǎo)劑）使用作用藥物（抑制劑或誘導(dǎo)劑）使用最大安全劑最大安全劑量量和和最短給藥間隔最短給藥間隔。 考慮到底物血藥濃度升高的安全性問題而使用考慮到底物血藥濃度升高的安全性問題而使用低于臨床常用劑量的給藥方案時(shí)，體內(nèi)藥物相互作低于臨床常用劑量的給藥方案時(shí)，體內(nèi)藥物相互作用研究方案應(yīng)在結(jié)果報(bào)告中進(jìn)行討論。用研究方案應(yīng)在結(jié)果報(bào)告中進(jìn)行討論。LOGO3.6 研究終點(diǎn) 藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的變化通常被用來評(píng)估藥藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的變化通常被用來評(píng)估藥物物- -藥物相互作用的臨床重要性。調(diào)查結(jié)果的藥物相互作用的臨床重要性。調(diào)查結(jié)果的解釋取決于在普通人群或特定人群中，解釋取決于在普通人群或特定人群中，劑

20、量劑量/ /濃度濃度和和濃度濃度/ /響應(yīng)響應(yīng)關(guān)系的一個(gè)很好的理解。關(guān)系的一個(gè)很好的理解。 在某些情況下，在藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)基礎(chǔ)上，在某些情況下，在藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)基礎(chǔ)上，依賴于藥效學(xué)終點(diǎn)可能是有效的，包括依賴于藥效學(xué)終點(diǎn)可能是有效的，包括INRINR測測量或量或QTQT間期的測量。間期的測量。LOGOn 底物的暴露指標(biāo)底物的暴露指標(biāo)（AUCAUC、CmaxCmax、達(dá)峰時(shí)間、達(dá)峰時(shí)間TmaxTmax等）普遍應(yīng)用于相互作用研究，計(jì)算得藥動(dòng)等）普遍應(yīng)用于相互作用研究，計(jì)算得藥動(dòng)學(xué)參數(shù)（清除率、分布容積和半衰期等）有助于學(xué)參數(shù)（清除率、分布容積和半衰期等）有助于理解試驗(yàn)結(jié)果。理解試驗(yàn)結(jié)果。n 在某些情

21、況下，在某些情況下，抑制劑或誘導(dǎo)劑抑制劑或誘導(dǎo)劑的這些指標(biāo)的這些指標(biāo)也可能有價(jià)值，尤其是在評(píng)估兩種試驗(yàn)藥物彼此也可能有價(jià)值，尤其是在評(píng)估兩種試驗(yàn)藥物彼此之間可能的相互作用時(shí)。之間可能的相互作用時(shí)。3.6 研究終點(diǎn)LOGOn 在某些情況下，對(duì)于劑量、血藥濃度水平和在某些情況下，對(duì)于劑量、血藥濃度水平和效應(yīng)之間相互關(guān)系的理解可能造成某些藥動(dòng)效應(yīng)之間相互關(guān)系的理解可能造成某些藥動(dòng)學(xué)指標(biāo)和學(xué)指標(biāo)和/ /或參數(shù)更受關(guān)注?；騾?shù)更受關(guān)注。 例如：例如： 如果某種臨床結(jié)果（如使用擬交感神經(jīng)藥物如果某種臨床結(jié)果（如使用擬交感神經(jīng)藥物造成的心動(dòng)過速）與峰濃度緊密相關(guān)，那么造成的心動(dòng)過速）與峰濃度緊密相關(guān)，那么C

22、maxCmax或其他早期暴露指標(biāo)更為適用；或其他早期暴露指標(biāo)更為適用； 相反，如果臨床結(jié)果與吸收程度關(guān)系密切，相反，如果臨床結(jié)果與吸收程度關(guān)系密切，則應(yīng)選擇則應(yīng)選擇AUCAUC。 3.6 研究終點(diǎn)LOGOn 采樣的頻率采樣的頻率應(yīng)足以準(zhǔn)確測定原形藥物及其代謝物應(yīng)足以準(zhǔn)確測定原形藥物及其代謝物的相關(guān)指標(biāo)和的相關(guān)指標(biāo)和/ /或參數(shù)?；騾?shù)。 n 對(duì)于底物，對(duì)其相關(guān)對(duì)于底物，對(duì)其相關(guān)代謝產(chǎn)物代謝產(chǎn)物進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)行進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)行為的研究非常重要。對(duì)于這些代謝產(chǎn)物的研究有為的研究非常重要。對(duì)于這些代謝產(chǎn)物的研究有助于區(qū)分抑制劑或誘導(dǎo)劑對(duì)不同助于區(qū)分抑制劑或誘導(dǎo)劑對(duì)不同CYPCYP酶介導(dǎo)的代酶介導(dǎo)的代

23、謝途徑的影響。謝途徑的影響。3.6 研究終點(diǎn)LOGO藥動(dòng)學(xué)終點(diǎn)指標(biāo)一般足以進(jìn)行代謝性藥物藥動(dòng)學(xué)終點(diǎn)指標(biāo)一般足以進(jìn)行代謝性藥物- -藥物相互作用研究。藥物相互作用研究。 不過，在受關(guān)注的底物研究終點(diǎn)的藥動(dòng)學(xué)不過，在受關(guān)注的底物研究終點(diǎn)的藥動(dòng)學(xué)/ /藥效學(xué)關(guān)系尚未建立，或者藥效學(xué)變化不僅僅藥效學(xué)關(guān)系尚未建立，或者藥效學(xué)變化不僅僅由藥動(dòng)學(xué)相互作用導(dǎo)致（如奎寧丁和三環(huán)類抗由藥動(dòng)學(xué)相互作用導(dǎo)致（如奎寧丁和三環(huán)類抗抑郁藥的心血管累加效應(yīng)）時(shí)，藥效學(xué)指標(biāo)有抑郁藥的心血管累加效應(yīng)）時(shí)，藥效學(xué)指標(biāo)有時(shí)可以提供其他有價(jià)值的信息。時(shí)可以提供其他有價(jià)值的信息。3.6 研究終點(diǎn)LOGO3.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方面的考慮n研究的結(jié)

24、果應(yīng)以有相互作用藥物（研究的結(jié)果應(yīng)以有相互作用藥物（S+IS+I）和沒）和沒有相互作用藥物（有相互作用藥物（S S）情況下得到的藥動(dòng)學(xué)指標(biāo)）情況下得到的藥動(dòng)學(xué)指標(biāo)的幾何均數(shù)比值的的幾何均數(shù)比值的90%90%置信區(qū)間置信區(qū)間進(jìn)行報(bào)告。進(jìn)行報(bào)告。n置信區(qū)間是對(duì)（置信區(qū)間是對(duì)（S+IS+I）和（）和（S S）情況下系統(tǒng)暴露）情況下系統(tǒng)暴露指標(biāo)比值的分布的估計(jì)，并表明相互作用強(qiáng)度指標(biāo)比值的分布的估計(jì)，并表明相互作用強(qiáng)度的概率估計(jì)。的概率估計(jì)。n相比之下，這些研究相比之下，這些研究不適于進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)不適于進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，這是由于較小的、持續(xù)出現(xiàn)的暴露差異在統(tǒng)計(jì)這是由于較小的、持續(xù)出現(xiàn)的暴露差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)

25、上可能具有顯著差異（學(xué)上可能具有顯著差異（p0.05），但卻沒有），但卻沒有臨床相關(guān)性。臨床相關(guān)性。LOGO分析方法分析方法 研究過程涉及到實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)或生物樣品中底物研究過程涉及到實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)或生物樣品中底物含量的測定，最常用的方法為含量的測定，最常用的方法為LC-MS/MSLC-MS/MS（尤其（尤其是在雞尾酒法中，要同時(shí)測定多個(gè)底物探針的是在雞尾酒法中，要同時(shí)測定多個(gè)底物探針的含量），其次為含量），其次為HPLCHPLC。 也可以用電化學(xué)方法進(jìn)行測定，如：將也可以用電化學(xué)方法進(jìn)行測定，如：將CYP3A4CYP3A4酶固定在玻碳電極上，在陽離子聚合電酶固定在玻碳電極上，在陽離子聚合電解質(zhì)背景下以計(jì)

26、時(shí)安培分析法測紅霉素（底物）解質(zhì)背景下以計(jì)時(shí)安培分析法測紅霉素（底物）濃度變化，以表征抑制劑的抑制作用。濃度變化，以表征抑制劑的抑制作用。LOGO例例 1: 1:體內(nèi)試驗(yàn)體內(nèi)試驗(yàn) Effects of Ketoconazole and Rifampicin on the Pharmacokinetics of Gemigliptin, a Dipeptidyl Peptidase-IV Inhibitor: A Crossover DrugDrug Interaction Study in Healthy Male Korean Volunteers 酮康唑和利福平對(duì)吉格列?。ǘ幕拿竿颠?/p>

27、和利福平對(duì)吉格列?。ǘ幕拿?IV-IV的抑的抑制劑）藥動(dòng)學(xué)的影響：以韓國健康男性為受試者制劑）藥動(dòng)學(xué)的影響：以韓國健康男性為受試者的交叉藥物的交叉藥物- -藥物相互作用研究藥物相互作用研究 Noh Y H, Lim H S, Jin S J, et al. J. Clinical therapeutics, 2012, 34(5): 1182-1194. LOGOLOGO 目的：多次口服酮康唑或利福平對(duì)單次口服吉目的：多次口服酮康唑或利福平對(duì)單次口服吉格列汀藥代動(dòng)力學(xué)，在韓國健康空腹男性中的格列汀藥代動(dòng)力學(xué)，在韓國健康空腹男性中的影響。影響。 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：single-center

28、, open-label, 2-part, 3-single-center, open-label, 2-part, 3-treatment, 1-sequence, 2-period, crossover drug treatment, 1-sequence, 2-period, crossover drug drug interaction studydrug interaction study采用開放標(biāo)簽，采用開放標(biāo)簽，2 2 個(gè)部分，個(gè)部分，3 3種處理方式，種處理方式，1 1序列，序列，2 2周期交叉的研究方法。周期交叉的研究方法。LOGOA A、B B兩部分各兩部分各12 12名受

29、試者名受試者LOGO分析方法：LC-MS/MS內(nèi)標(biāo)：內(nèi)標(biāo)：1313C4-C4-吉格列汀、吉格列汀、1313C4-LC15-0516 C4-LC15-0516 乙腈混合溶液（含乙腈混合溶液（含2%2%甲酸）甲酸）(20/10ng/mL)(20/10ng/mL)色譜柱：色譜柱：C8 column (3m, 30C8 column (3m, 30* *2.0 mm)2.0 mm)流動(dòng)相：二元梯度洗脫流動(dòng)相：二元梯度洗脫 A A：乙腈：乙腈：10-mM 10-mM 乙酸乙酸 （10:9010:90） （含（含0.1%0.1%甲酸）甲酸） B B：乙腈：甲醇：乙腈：甲醇：10-mM 10-mM 醋酸銨（

30、醋酸銨（45:45:1045:45:10）（含（含0.1%0.1%甲酸）甲酸）檢測模式：陽離子檢測模式：陽離子 多反應(yīng)選擇監(jiān)測（多反應(yīng)選擇監(jiān)測（MRMMRM） 吉格列?。杭窳型。?90.1 (M490.1 (MH H)338.1 m/z)338.1 m/z LC15-0516 LC15-0516：506.28175.1 m/z506.28175.1 m/zLOGO結(jié)果與討論結(jié)果與討論P(yáng)art ALOGOLOGO合用酮康唑后吉格列汀的合用酮康唑后吉格列汀的CmaxCmax和和AUCAUC分別增分別增大到原來的大到原來的2.402.40倍和倍和2.362.36倍倍LOGOPart BLOGOLO

31、GO合用利福平后吉格列汀的合用利福平后吉格列汀的CmaxCmax和和AUCAUC分別降分別降低為原來的低為原來的41%41%和和20%20%。LOGO 值得注意的是，合用利福平之后代謝產(chǎn)物值得注意的是，合用利福平之后代謝產(chǎn)物L(fēng)C15-0636LC15-0636的暴露量降低了的暴露量降低了36%36%，這可能與利，這可能與利福平影響了膜轉(zhuǎn)運(yùn)體有關(guān)。但這并不影響利福平影響了膜轉(zhuǎn)運(yùn)體有關(guān)。但這并不影響利福平誘導(dǎo)了吉格列汀代謝結(jié)論的得出，因?yàn)楦Ｆ秸T導(dǎo)了吉格列汀代謝結(jié)論的得出，因?yàn)長C15-0636LC15-0636的的CmaxCmax增大了；吉格列汀的增大了；吉格列汀的半衰期由半衰期由21.8621.

32、86小時(shí)縮短到小時(shí)縮短到7.597.59小時(shí)。小時(shí)。LOGOLOGO例例 2 2：體外實(shí)驗(yàn)：體外實(shí)驗(yàn) Potent inhibition of cytochrome P450 2B6 by sibutramine in human liver microsomes 西布曲明對(duì)人肝微粒體中西布曲明對(duì)人肝微粒體中CYP2B6CYP2B6酶的強(qiáng)效抑制作酶的強(qiáng)效抑制作用用 Bae S H, Kwon M J, Choi E J, et al. J. Chemico-biological interactions, 2013. LOGO 過去認(rèn)為過去認(rèn)為CYP2B6CYP2B6僅占人肝微粒體僅占人肝微粒體P450P450酶的酶的1%1%，不過也有近期的研究表明不過也有近期的研究表明CYP2B6CYP2B6占肝臟占肝臟P450P450酶的酶的5-6%5-6%，其也廣泛分布于腦、肺、鼻粘膜、氣管等，其也廣泛分布于腦、肺、鼻粘膜、氣管等部位。另外，部位。另外，CYP2B6CYP2B6的個(gè)體差異性很大，且易受的個(gè)體差異性很大，且易受環(huán)境因素（例如抑制劑和誘導(dǎo)劑）影響。環(huán)境因素（例如抑制劑和誘導(dǎo)劑）影響。目前還沒有明確的目前還沒有明確的CYP2B6CY