食品生物應(yīng)用技術(shù)節(jié)動(dòng)物細(xì)胞工程植物細(xì)胞工程及應(yīng)用

1、會(huì)計(jì)學(xué)1食品生物應(yīng)用技術(shù)節(jié)動(dòng)物細(xì)胞工程植物食品生物應(yīng)用技術(shù)節(jié)動(dòng)物細(xì)胞工程植物細(xì)胞工程及應(yīng)用細(xì)胞工程及應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合單克隆抗體技術(shù)單克隆抗體技術(shù)核移植核移植動(dòng)物動(dòng)物細(xì)胞細(xì)胞工程工程常用常用技術(shù)技術(shù) 皮膚燒傷，如果創(chuàng)面很?。ú淮笥谟矌牛┲灰３智鍧崳踔辽疃葻齻?，也可能自愈。如果下層真皮受損面積較大，常常需要植皮。植皮需要的健康皮片。植皮需要的健康皮片，可以取自燒傷病人自身未燒傷的部位（自體植皮），也可取自其他活人或尸體（異體植皮）等。自體植皮是永久性的，取自其他人或動(dòng)物的植皮是暫時(shí)性的，是在創(chuàng)面愈合過(guò)程中為保護(hù)創(chuàng)面而采取的措施，1014天后就要被身體排斥。

2、如果一個(gè)大面積燒傷的病人來(lái)說(shuō)，自體皮膚有限，其他渠道的皮膚來(lái)源不足。如何才能獲得大量的自體健康皮膚？人耳鼠“人耳鼠”再出風(fēng)頭 2001年，一只特別的活老鼠在北京引起轟動(dòng)這是有著一對(duì)紅眼睛的、尾巴長(zhǎng)長(zhǎng)的、渾身沒(méi)毛的小白鼠。值得一提的是，這只小白鼠的背上，竟長(zhǎng)著一只幾乎與身子一般大小的“人耳”。這只老鼠背上的“人耳”是由上海市第九人民醫(yī)院副院長(zhǎng)、整復(fù)外科主任曹誼林教授利用組織工程技術(shù)復(fù)制出來(lái)的。 在京展出的數(shù)天，盡管門票高達(dá)20元，但還是有將近20萬(wàn)人，心甘情愿地掏錢一睹“人耳鼠”的風(fēng)采。 人耳鼠的出現(xiàn)，透露了怎樣的信息？一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 1. 1.發(fā)展歷史發(fā)展歷史: : 20 2

3、0世紀(jì)初，人們不知道神經(jīng)纖維是由神經(jīng)細(xì)胞的細(xì)世紀(jì)初，人們不知道神經(jīng)纖維是由神經(jīng)細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)向外突出形成的，還是由神經(jīng)細(xì)胞周圍的其他細(xì)胞質(zhì)向外突出形成的，還是由神經(jīng)細(xì)胞周圍的其他細(xì)胞融合而成的。生物學(xué)家們就這個(gè)問(wèn)題展開(kāi)了激烈的胞融合而成的。生物學(xué)家們就這個(gè)問(wèn)題展開(kāi)了激烈的爭(zhēng)論。爭(zhēng)論。19071907年，美國(guó)生物學(xué)家哈里森年，美國(guó)生物學(xué)家哈里森(Harrison)(Harrison)從蝌從蝌蚪的脊索中分離出神經(jīng)組織，把它放在青蛙的凝固的蚪的脊索中分離出神經(jīng)組織，把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培養(yǎng)。蝌蚪的神經(jīng)組織存活了好幾周，并且淋巴液中培養(yǎng)。蝌蚪的神經(jīng)組織存活了好幾周，并且從神經(jīng)細(xì)胞中長(zhǎng)出了神經(jīng)纖維

4、。哈里森的實(shí)驗(yàn)不僅解從神經(jīng)細(xì)胞中長(zhǎng)出了神經(jīng)纖維。哈里森的實(shí)驗(yàn)不僅解決了神經(jīng)纖維的起源問(wèn)題，而且開(kāi)創(chuàng)了動(dòng)物組織培養(yǎng)決了神經(jīng)纖維的起源問(wèn)題，而且開(kāi)創(chuàng)了動(dòng)物組織培養(yǎng)的先河。此后，在許多科學(xué)家的不懈努力下，動(dòng)物組的先河。此后，在許多科學(xué)家的不懈努力下，動(dòng)物組織培養(yǎng)不斷改進(jìn)并逐漸發(fā)展成為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)?？椗囵B(yǎng)不斷改進(jìn)并逐漸發(fā)展成為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用和概念：、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用和概念： 動(dòng)物細(xì)胞培動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物有養(yǎng)就是從動(dòng)物有機(jī)體中取出相關(guān)機(jī)體中取出相關(guān)的組織的組織,將它分散將它分散成單個(gè)細(xì)胞成單個(gè)細(xì)胞,然后然后,放在適宜的培養(yǎng)放在適宜的培養(yǎng)基中基中,讓這些細(xì)胞讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖

5、生長(zhǎng)和增殖.幼齡動(dòng)物取動(dòng)物器官和組織剪碎組織胰蛋白酶處理細(xì)胞培養(yǎng)養(yǎng)單個(gè)細(xì)胞剪碎組織剪碎組織的目的？的目的？胰蛋白酶處胰蛋白酶處理的目的？理的目的？3、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程：、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程：動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官物的組織、器官細(xì)胞懸浮液細(xì)胞懸浮液胰蛋白酶胰蛋白酶10代細(xì)胞代細(xì)胞原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)50代細(xì)胞代細(xì)胞傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞株細(xì)胞株無(wú)限傳代無(wú)限傳代細(xì)胞系細(xì)胞系單個(gè)細(xì)胞單個(gè)細(xì)胞加培養(yǎng)液加培養(yǎng)液遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)未改變未改變遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)已改變已改變動(dòng)物組織細(xì)胞間隙中動(dòng)物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的彈性纖含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì)，將細(xì)胞維等蛋白質(zhì)，將細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)起來(lái)形成具有

6、一網(wǎng)絡(luò)起來(lái)形成具有一定彈性和韌性的組織定彈性和韌性的組織和器官。和器官。（分解彈性纖維）（分解彈性纖維）細(xì)胞株：細(xì)胞株：傳代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至傳代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左代左右細(xì)胞生長(zhǎng)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡，少數(shù)右細(xì)胞生長(zhǎng)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡，少數(shù)細(xì)胞存活到細(xì)胞存活到4050代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞株代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞株。 細(xì)胞系：細(xì)胞系：細(xì)胞株傳代至細(xì)胞株傳代至50代后又出現(xiàn)細(xì)胞代后又出現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)停滯狀態(tài)，只有部分細(xì)胞由于遺傳物質(zhì)的生長(zhǎng)停滯狀態(tài)，只有部分細(xì)胞由于遺傳物質(zhì)的改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無(wú)限制傳代，這改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無(wú)限制傳代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞系。種傳代細(xì)胞為

7、細(xì)胞系。 細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別： 細(xì)胞系的遺傳細(xì)胞系的遺傳物質(zhì)改變，具有癌細(xì)胞的特點(diǎn)，失去接觸抑制物質(zhì)改變，具有癌細(xì)胞的特點(diǎn)，失去接觸抑制，容易傳代培養(yǎng)。，容易傳代培養(yǎng)。細(xì)胞培養(yǎng)以玻璃器皿為主。細(xì)胞培養(yǎng)以玻璃器皿為主。器皿應(yīng)選擇透明度好、無(wú)毒、器皿應(yīng)選擇透明度好、無(wú)毒、中性硬度玻璃制品。中性硬度玻璃制品。準(zhǔn)備室風(fēng)淋3.培養(yǎng)室培養(yǎng)室風(fēng)淋室風(fēng)淋室： 風(fēng)淋室是生物潔凈室的理想配套設(shè)備，它不僅可以清除人體和物品表面附著的塵埃，減少帶入潔凈室的灰塵量，而且兼有氣閘室的功能，可防止非潔凈空氣的侵入。風(fēng)淋室的板壁采用輕質(zhì)隔熱夾芯鋼板，吹淋板采用進(jìn)口不銹鋼制作，吹淋口方向可調(diào)，風(fēng)淋時(shí)間可在

8、30-99秒間的調(diào)整。風(fēng)淋室可以配合加熱器，冬天可以加熱，溫度可調(diào)，一般控制溫度在30-35較為適宜。n也稱凈化工作臺(tái)，分也稱凈化工作臺(tái)，分為側(cè)流式、直流式和為側(cè)流式、直流式和外流式三大類。外流式三大類。3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 的條件的條件1.無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境2.營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)3.溫度和溫度和pH4.氣體環(huán)境氣體環(huán)境 應(yīng)該加入哪些物質(zhì)？這應(yīng)該加入哪些物質(zhì)？這些物質(zhì)如何調(diào)配？些物質(zhì)如何調(diào)配？在使用合成培養(yǎng)基時(shí)通常在使用合成培養(yǎng)基時(shí)通常需加入血清、血漿等天然需加入血清、血漿等天然成分，目的是什么？成分，目的是什么？4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用 蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)蛋

9、白質(zhì)生物制品的生產(chǎn) 如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體 健康細(xì)胞培養(yǎng)健康細(xì)胞培養(yǎng) 培養(yǎng)健康細(xì)胞用于燒傷病人皮膚移植培養(yǎng)健康細(xì)胞用于燒傷病人皮膚移植 細(xì)胞的生理、藥理、病理研究細(xì)胞的生理、藥理、病理研究 用于篩選抗癌藥物用于篩選抗癌藥物 比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理原理培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)目的培養(yǎng)目的細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基蔗糖蔗糖 植物激素植物激素 葡萄糖葡萄糖 動(dòng)物血清動(dòng)物血清植物體植物體細(xì)胞株、細(xì)胞系細(xì)胞株、細(xì)胞系快速繁殖

10、、培育無(wú)快速繁殖、培育無(wú)病毒植株病毒植株獲得細(xì)胞或細(xì)胞分獲得細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白泌蛋白思考：思考：2、為什么選用動(dòng)物胚胎或幼齡個(gè)體的器官或組織做動(dòng)物細(xì)胞、為什么選用動(dòng)物胚胎或幼齡個(gè)體的器官或組織做動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)材料？培養(yǎng)材料？1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？較植物組培培養(yǎng)基、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？較植物組培培養(yǎng)基有何獨(dú)特之處？有何獨(dú)特之處？3、為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞？、為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞？4、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個(gè)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個(gè)體？體？主要成分：葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)

11、物血清等。主要成分：葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等。獨(dú)特之處有：獨(dú)特之處有：1、液體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基 2、成分中有動(dòng)物血清等、成分中有動(dòng)物血清等因?yàn)檫@些組織或器官上的細(xì)胞生命力旺盛，分裂能力強(qiáng)因?yàn)檫@些組織或器官上的細(xì)胞生命力旺盛，分裂能力強(qiáng)成塊組織不利培養(yǎng)，分散了做成細(xì)胞懸浮液利于培養(yǎng)成塊組織不利培養(yǎng)，分散了做成細(xì)胞懸浮液利于培養(yǎng)不能，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的不能，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的動(dòng)物個(gè)體動(dòng)物個(gè)體一、動(dòng)物細(xì)胞融合一、動(dòng)物細(xì)胞融合 細(xì)胞融合是正常的生命活動(dòng)兩個(gè)細(xì)胞正在融合兩個(gè)細(xì)胞正在融合 受精作用受精作用細(xì)胞細(xì)胞A細(xì)胞細(xì)胞B雜種細(xì)

12、胞雜種細(xì)胞滅活的病毒滅活的病毒物理法物理法化學(xué)法化學(xué)法仙臺(tái)病毒仙臺(tái)病毒皰疹病毒皰疹病毒新城雞瘟病毒新城雞瘟病毒用滅活的病毒誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程用滅活的病毒誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程細(xì)胞核細(xì)胞核病毒顆粒病毒顆粒細(xì)胞核細(xì)胞核什么是抗體？什么是抗體？ 抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。有免疫功能的球蛋白。B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體。淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體。B淋巴細(xì)胞受抗原刺激后，可以淋巴細(xì)胞受抗原刺激后，可以產(chǎn)生抗體。產(chǎn)生抗體。動(dòng)物體內(nèi)的動(dòng)物體內(nèi)的B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生百萬(wàn)種以上的抗體，每種抗體對(duì)特定的

13、抗百萬(wàn)種以上的抗體，每種抗體對(duì)特定的抗原具有特異性免疫作用。原具有特異性免疫作用。每一個(gè)淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗每一個(gè)淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體。體。 由單個(gè)由單個(gè)B淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)無(wú)性繁殖（淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)無(wú)性繁殖（克?。?，形成基因型相同的細(xì)胞群，這克?。纬苫蛐拖嗤募?xì)胞群，這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體稱為性強(qiáng)的抗體稱為單克隆抗體。單克隆抗體。 特點(diǎn)：特點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高特異性強(qiáng)、靈敏度高 單克隆抗體制備過(guò)程單克隆抗體制備過(guò)程 注射抗原注射抗原B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培

14、養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群特定抗體的細(xì)胞群體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔注射到小鼠腹腔單克隆抗體單克隆抗體思考：思考：1、本過(guò)程利用了哪些原理？、本過(guò)程利用了哪些原理？免疫原理，細(xì)胞融合原理和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理免疫原理，細(xì)胞融合原理和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理2、為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與、為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B細(xì)胞融合？細(xì)胞融合？這樣融合成的雜交瘤細(xì)胞，繼承了雙親細(xì)胞的遺傳這樣融合成的雜交瘤細(xì)胞，繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，不僅具有物質(zhì)，不僅具有B細(xì)胞分泌抗體的能力，而且還有細(xì)胞分泌抗體的能力，而且還有無(wú)限增殖的本領(lǐng)，因而可以獲得大量單克隆抗體

15、無(wú)限增殖的本領(lǐng)，因而可以獲得大量單克隆抗體單克隆抗體的應(yīng)用單克隆抗體的應(yīng)用與常規(guī)抗體相比，單克隆抗體產(chǎn)量高，特異性強(qiáng)，與常規(guī)抗體相比，單克隆抗體產(chǎn)量高，特異性強(qiáng)，靈敏度高，優(yōu)越性十分明顯靈敏度高，優(yōu)越性十分明顯。應(yīng)用主要有：應(yīng)用主要有：1、臨床診斷、臨床診斷2、作為載體，運(yùn)載抗癌藥物，形成、作為載體，運(yùn)載抗癌藥物，形成“生物導(dǎo)彈生物導(dǎo)彈”治療腫治療腫瘤瘤資料資料：目前世界各國(guó)已經(jīng)研制出數(shù)以百計(jì)的單克隆抗目前世界各國(guó)已經(jīng)研制出數(shù)以百計(jì)的單克隆抗體。許多缺乏良好診斷手段的傳染病、免疫性疾病、血液病體。許多缺乏良好診斷手段的傳染病、免疫性疾病、血液病、內(nèi)分泌疾病和遺傳病，用單克隆抗體作為診斷手段，是

16、一、內(nèi)分泌疾病和遺傳病，用單克隆抗體作為診斷手段，是一個(gè)必然趨勢(shì)。另外，用單克隆抗體做體內(nèi)診斷，借以鑒別和個(gè)必然趨勢(shì)。另外，用單克隆抗體做體內(nèi)診斷，借以鑒別和定位體內(nèi)定位體內(nèi)“病灶病灶”也引起人們的注意，目前，主要用于腫瘤也引起人們的注意，目前，主要用于腫瘤追蹤及心肌梗塞的診斷。追蹤及心肌梗塞的診斷。比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞融合原理細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞融合的方法細(xì)胞融合的方法 去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合原生質(zhì)體融合使細(xì)胞分散后誘使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合導(dǎo)細(xì)胞融合誘導(dǎo)方法誘導(dǎo)方法

17、物理（離心、振蕩、物理（離心、振蕩、電刺激）電刺激）化學(xué)（聚乙二醇）化學(xué)（聚乙二醇）物理、化學(xué)方法物理、化學(xué)方法（同左）（同左）滅活的病毒滅活的病毒用途用途獲得雜種植株獲得雜種植株制備單克隆抗體制備單克隆抗體動(dòng)物的胚胎移植動(dòng)物的胚胎移植 解決某些妊解決某些妊娠時(shí)間長(zhǎng)、每胎娠時(shí)間長(zhǎng)、每胎產(chǎn)子數(shù)量少的優(yōu)產(chǎn)子數(shù)量少的優(yōu)良種畜的繁殖速良種畜的繁殖速度問(wèn)題。度問(wèn)題。胚胎移植技術(shù)胚胎移植技術(shù)試管動(dòng)物（嬰兒）培養(yǎng)過(guò)程試管動(dòng)物（嬰兒）培養(yǎng)過(guò)程卵細(xì)胞卵細(xì)胞精子精子體外受精體外受精受精卵受精卵胚胎胚胎新個(gè)體新個(gè)體母體子宮內(nèi)母體子宮內(nèi)孕育、產(chǎn)出孕育、產(chǎn)出一、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物一、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克

18、隆動(dòng)物1、動(dòng)物細(xì)胞全能性的表現(xiàn)程度不同、動(dòng)物細(xì)胞全能性的表現(xiàn)程度不同受精卵受精卵 胚胎干細(xì)胞胚胎干細(xì)胞 多能干細(xì)胞多能干細(xì)胞 單能干細(xì)胞單能干細(xì)胞 體細(xì)胞體細(xì)胞核移植核移植胚胎細(xì)胞核移植胚胎細(xì)胞核移植體細(xì)胞核移植體細(xì)胞核移植（難度高）（難度高） 2、動(dòng)物體細(xì)胞核移植動(dòng)物體細(xì)胞核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核細(xì)胞核,移如入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞移如入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中中.使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎,這個(gè)新的胚這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。3.培育過(guò)程培育過(guò)程去核卵細(xì)胞去核卵細(xì)胞體細(xì)胞核體細(xì)胞核細(xì)胞核移植細(xì)

19、胞核移植重組細(xì)胞重組細(xì)胞電脈沖刺激電脈沖刺激早期胚胎早期胚胎(或重組胚胎或重組胚胎）胚胎移植胚胎移植母體子宮母體子宮妊娠、出生妊娠、出生 個(gè)體個(gè)體4、原理、原理動(dòng)物體細(xì)胞核具有全能性動(dòng)物體細(xì)胞核具有全能性卵細(xì)胞卵細(xì)胞母綿羊母綿羊母綿羊母綿羊乳腺細(xì)胞乳腺細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核細(xì)胞核細(xì)胞核移植細(xì)胞核移植早期胚胎早期胚胎卵裂卵裂C母綿羊子宮母綿羊子宮胚胎移植胚胎移植多莉羊多莉羊分娩分娩妊娠妊娠多莉羊的培育過(guò)程多莉羊的培育過(guò)程融合后的卵細(xì)胞融合后的卵細(xì)胞克隆羊的成功證明了什么？克隆羊的成功證明了什么？1、動(dòng)物體細(xì)胞核具有全能性；、動(dòng)物體細(xì)胞核具有全能性；2、細(xì)胞質(zhì)具有調(diào)控細(xì)胞核發(fā)育的作用。、細(xì)胞質(zhì)具有

20、調(diào)控細(xì)胞核發(fā)育的作用。動(dòng)物體細(xì)胞核移植是一種無(wú)性繁殖技術(shù)，動(dòng)物體細(xì)胞核移植是一種無(wú)性繁殖技術(shù)，用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物。其意義：其意義：1、有利于遺傳疾病的治療，優(yōu)良品種的培育、有利于遺傳疾病的治療，優(yōu)良品種的培育2、對(duì)物種的優(yōu)化、瀕危動(dòng)物的保護(hù)和轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的擴(kuò)、對(duì)物種的優(yōu)化、瀕危動(dòng)物的保護(hù)和轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的擴(kuò)群有重要意義群有重要意義3、降低畜牧業(yè)的成本，縮短育種年限，提高生產(chǎn)效率、降低畜牧業(yè)的成本，縮短育種年限，提高生產(chǎn)效率體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題：體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題：許多克隆動(dòng)物表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷，許多克隆動(dòng)物表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷，如

21、體型過(guò)大，異常肥胖，發(fā)育困難，臟如體型過(guò)大，異常肥胖，發(fā)育困難，臟器缺陷，免疫失調(diào)等。器缺陷，免疫失調(diào)等。利用動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)利用動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù) 用核移植的方法得到的動(dòng)物。用核移植的方法得到的動(dòng)物?？寺?dòng)物：卵細(xì)胞卵細(xì)胞C母綿羊子宮母綿羊子宮母綿羊母綿羊母綿羊母綿羊乳腺細(xì)胞乳腺細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核細(xì)胞核細(xì)胞核移植細(xì)胞核移植胚胎移植胚胎移植早期胚胎早期胚胎多莉羊多莉羊分娩分娩卵裂卵裂融合后的卵細(xì)胞融合后的卵細(xì)胞細(xì)胞拆合技術(shù)細(xì)胞拆合技術(shù)妊娠妊娠多莉羊的培育過(guò)程多莉羊的培育過(guò)程2.體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景克隆動(dòng)物的研究意義克隆動(dòng)物的研究意義1.克隆動(dòng)物作為生物

22、反應(yīng)器，生產(chǎn)醫(yī)用蛋白克隆動(dòng)物作為生物反應(yīng)器，生產(chǎn)醫(yī)用蛋白2.改良動(dòng)物品種改良動(dòng)物品種 3.治療人類疾病，作為供體治療人類疾病，作為供體4.保護(hù)瀕危動(dòng)物保護(hù)瀕危動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題1.許多克隆動(dòng)物表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷，如體型過(guò)許多克隆動(dòng)物表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷，如體型過(guò)大，異常肥胖，發(fā)育困難，免疫失調(diào)等。大，異常肥胖，發(fā)育困難，免疫失調(diào)等。2.成功率非常低及克隆動(dòng)物食品的安全性問(wèn)題。成功率非常低及克隆動(dòng)物食品的安全性問(wèn)題。小結(jié)小結(jié)兩個(gè)過(guò)程兩個(gè)過(guò)程動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程單克隆抗體制備過(guò)程單克隆抗體制備過(guò)程三個(gè)三個(gè)“一一”一個(gè)誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法一個(gè)誘導(dǎo)細(xì)

23、胞融合的新方法 滅活病毒滅活病毒一個(gè)新細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞一個(gè)新細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞一個(gè)優(yōu)勢(shì)單克隆抗體特異性一個(gè)優(yōu)勢(shì)單克隆抗體特異性 強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)勢(shì)強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)勢(shì)植物細(xì)胞工程的理論基礎(chǔ)是：植物細(xì)胞工程的理論基礎(chǔ)是： 植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞工程常用的技術(shù)是植物細(xì)胞工程常用的技術(shù)是 植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交概念：概念：細(xì)胞的全能性是指生物體的細(xì)胞具有細(xì)胞的全能性是指生物體的細(xì)胞具有使后代細(xì)胞形成完整個(gè)體的潛能。使后代細(xì)胞形成完整個(gè)體的潛能。原因：原因：是生物體的每一個(gè)細(xì)胞都含有該物種是生物體的每一個(gè)細(xì)胞都含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)及發(fā)育為完整所特有的全

24、套遺傳物質(zhì)及發(fā)育為完整個(gè)體所必需的全部基因。個(gè)體所必需的全部基因。 當(dāng)植物細(xì)胞脫離了原來(lái)所在植物體的器官或組織而處當(dāng)植物細(xì)胞脫離了原來(lái)所在植物體的器官或組織而處于離體狀態(tài)時(shí)，在一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他外界條件于離體狀態(tài)時(shí)，在一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他外界條件的作用下，就可能表現(xiàn)出全能性，發(fā)育成完整的植株。的作用下，就可能表現(xiàn)出全能性，發(fā)育成完整的植株。 在生物的個(gè)體發(fā)育中，由于基因在特定時(shí)間和空間在生物的個(gè)體發(fā)育中，由于基因在特定時(shí)間和空間下選擇性地表達(dá)而形成不同器官，因此，要實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的下選擇性地表達(dá)而形成不同器官，因此，要實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的全能性，首先必須使生物體的細(xì)胞處于離體狀態(tài)。全能性，首先必

25、須使生物體的細(xì)胞處于離體狀態(tài)。 受精卵的全能性最高；受精卵的全能性最高；其次是生殖細(xì)胞（尤其是卵細(xì)胞）；其次是生殖細(xì)胞（尤其是卵細(xì)胞）；體細(xì)胞的全能性比生殖細(xì)胞低得多。體細(xì)胞的全能性比生殖細(xì)胞低得多。 植物組織培養(yǎng)就是在無(wú)菌和人工控制條件下植物組織培養(yǎng)就是在無(wú)菌和人工控制條件下，將離體的植物器官、組織、細(xì)胞，培養(yǎng)在人工，將離體的植物器官、組織、細(xì)胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株。產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株。離體的植物器官、組織或細(xì)胞離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化（又叫去分化）脫

26、分化（又叫去分化）愈傷組織愈傷組織（排列疏松而無(wú)規(guī)則，高度液泡（排列疏松而無(wú)規(guī)則，高度液泡化的呈無(wú)定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞）化的呈無(wú)定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞）再分化再分化根或芽等器官根或芽等器官植物體植物體植物組織培養(yǎng)的條件：植物組織培養(yǎng)的條件： 適宜的養(yǎng)料和激素，適宜的適宜的養(yǎng)料和激素，適宜的溫度和無(wú)菌條件溫度和無(wú)菌條件離體的植物離體的植物器官、組織器官、組織或細(xì)胞或細(xì)胞愈愈傷傷組組織織根根芽芽植植物物體體脫分化脫分化再分化再分化由高度分化的植物器官、組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈由高度分化的植物器官、組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過(guò)程，稱為植物細(xì)胞的脫分化。傷組織的過(guò)程，稱為植物細(xì)胞的脫分化。脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行

27、培養(yǎng)又可以重脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)又可以重新分化成根或芽等器官，這一過(guò)程稱為植物細(xì)新分化成根或芽等器官，這一過(guò)程稱為植物細(xì)胞的再分化。胞的再分化。1 1、在植物組培過(guò)程中，為、在植物組培過(guò)程中，為什么要進(jìn)行一系列的消什么要進(jìn)行一系列的消毒，滅菌，并且要求無(wú)毒，滅菌，并且要求無(wú)菌操作？菌操作？2 2、為什么切取胡蘿卜根的、為什么切取胡蘿卜根的形成層，其他部分也能形成層，其他部分也能培養(yǎng)成小植株嗎？培養(yǎng)成小植株嗎？ 將不同種植物的體細(xì)胞，在一將不同種植物的體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)。種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)。 （不同種生物之間存在著生殖隔離（不同種生物之間存在著生殖隔離，所以用傳統(tǒng)的有性雜交方法是不，所以用傳統(tǒng)的有性雜交方法是不可能做到這一點(diǎn)的）可能做到這一點(diǎn)的）（1）要想讓兩個(gè)來(lái)自不同植物的體細(xì)胞融合）要想讓兩個(gè)來(lái)自不同植物的體細(xì)胞融合在一起，遇到的第一個(gè)障礙是什么？在一起，遇到的第一個(gè)障礙是什么？（2）有沒(méi)有一種溫和的去細(xì)胞壁的方法？）有沒(méi)有一種溫和的去細(xì)胞壁的方法？（3）為什