浙江省20某年四次選考生物試卷試題分類匯編：選一第一、二章大腸桿菌的培養(yǎng)和分離【含答案及解析】

1、浙江省2019年四次選考生物試卷分類匯編：選一第一、二章大腸桿菌的培養(yǎng)和分離【含答案及解析】姓名_ 班級_ 分?jǐn)?shù)_題號一總分得分一、綜合題1. 請回答從土壤中分離產(chǎn)脲酶細(xì)菌和脲酶固定化實(shí)驗(yàn)的有關(guān)問題 （1）LB固體培養(yǎng)基：取適量的蛋白胨、酵母提取物、NaCl，加入一定量的蒸餾水溶解，再加 _ ，滅菌備用。 （2）尿素固體培養(yǎng)基：先將適宜濃度的尿素溶液用 _ 滅菌過的G 6 玻璃砂漏斗過濾，因?yàn)镚 6 玻璃砂漏斗 _ ，故用于過濾細(xì)菌。然后將尿素溶液加入到已經(jīng)滅菌的含有酚紅的培養(yǎng)基中，備用。 （3）取適量含產(chǎn)脲酶細(xì)菌的10 -4 、10 -5 兩種土壤稀釋液，分別涂布接種到LB固體培養(yǎng)基和尿素固

2、體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)48h，推測固體培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)最少的是 _ （A. 10 -5 稀釋液+尿素固體培養(yǎng)基 B. 10 -5 稀釋液+LB固體培養(yǎng)基 C. 10 -4 稀釋液+尿素固體培養(yǎng)基 D. 10 -4 稀釋液+LB固體培養(yǎng)基）。在尿素固體培養(yǎng)基上產(chǎn)脲酶細(xì)菌菌落周圍出現(xiàn) _ ，其原因是細(xì)菌產(chǎn)生的脲酶催化尿素分解產(chǎn)生 _ 所致。 （4）制備固定化脲酶時(shí)，用石英砂吸附脲酶，裝柱。再用蒸餾水洗滌固定化酶柱，其作用是 _ 。 2. 生活飲用水的微生物安全性日常檢測是很重要的。請回答下列問題： （1）培養(yǎng)大腸桿菌所用的LB培養(yǎng)基一般用 _ 法滅菌。檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí)，通常將水樣用 _ 進(jìn)行一系

3、列的梯度稀釋。 （2）將稀釋后的水樣分別用玻璃刮刀 _ 到LB固體培養(yǎng)基， _ 于恒溫培養(yǎng)箱，在 _ 條件進(jìn)行培養(yǎng)。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí) _ （填需要或不需要）設(shè)置對照組。 （3）下圖表示培養(yǎng)和純化大腸桿菌的部分操作步驟，下列相關(guān)敘述正確的是 _ 。 A步驟倒平板操作時(shí)，倒好后應(yīng)立即將其倒過來放置 B步驟接種環(huán)火焰上灼燒后迅速蘸取菌液后劃線 C步驟多個(gè)方向劃線，使接種物逐漸稀釋，培養(yǎng)后出現(xiàn)單個(gè)菌落 D.步驟恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)后可用來對大腸桿菌進(jìn)行計(jì)數(shù) 3. 在“分離以尿素為氮源的微生物”的實(shí)驗(yàn)中，配制好的尿素固體培養(yǎng)基加上封口膜后用 _ 方法滅菌，冷卻后加入用G6玻璃紗漏斗過濾的尿素溶液。玻璃

4、紗漏斗角后需用適宜濃度的 _ 浸泡，再用 _ 沖洗，干燥后保存。 4. 隨著社會的發(fā)展，石油產(chǎn)品的使用越來越多，石油烴污染也越來越嚴(yán)重。為了篩選出分解石油烴能力強(qiáng)的微生物，人們不斷地進(jìn)行研究。下圖為獲取能分離出分解石油烴的微生物的土壤樣品后的研究過程，請回答有關(guān)問題： (1)獲取土壤樣品的取樣地點(diǎn)最好選在 _ 。為了能有效地分離出分解石油烴的微生物,過程所用的選擇培養(yǎng)基只能以石油烴作為唯一碳源，其原因是 _ 。 (2)根據(jù)平板上生長的菌落，對進(jìn)行接種采用的方法是 _ ,若發(fā)現(xiàn)在中無法區(qū)分菌落，可以將圖中取出的菌液 _ 。 (3)純化菌株時(shí)，通常使用的劃線工具是 _ 。采用 _ 方法對其進(jìn)行滅菌

5、。劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后,第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌落,第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤是 _ (寫出一點(diǎn)即可)。 5. 脲酶是催化尿素分解的特異性水解酶。該酶主要從刀豆等豆科植物提取，現(xiàn)被廣泛應(yīng)用于尿素廢水的凈化過程。請分析回答以下問題： (1)脲酶可以催化尿素分解為 _ ，其中堿性物質(zhì)可以能使酚紅指示劑變?yōu)?_ 。 (2)為了提高脲酶的利用效率，可以釆用固定化酶技術(shù)將其固定。酶的固定化方法有：吸附法、共價(jià)偶聯(lián)法、包埋法和 _ 。 (3)實(shí)驗(yàn)室中可以采用吸附法將該酶制成固定化酶柱，讓尿素廢水過柱前，先用10倍體積的蒸餾水洗滌酶柱，目

6、的是 _ 。 (4)脲酶除了從植物獲取外，還可以來源于土壤中的微生物。為了從土壤中分離得到隊(duì)尿素為氮源的微生物,采用的分離方法操作最簡便的是 _ 。下列有關(guān)該分離方法的操作敘述錯(cuò)誤的是 _ 。 A.必須使用固體培養(yǎng)基 B.必須在酒精燈火焰旁接種 C.必須將接種后的培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng) D.必須將接種前的培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、土壤懸浮液等進(jìn)行滅菌處理 6. 漆酶屬于木質(zhì)降解酶類，在環(huán)境修復(fù)、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域有著廣泛用途。下圖是分離、純化和保存漆酶菌株的過程。 (1)在步驟中，用 _ 稀釋制成不同濃度的樣品懸液。 (2)步驟中將保存在70%酒精中的 _ 放在酒精燈火焰上，待火焰熄滅，將菌液涂布到整個(gè)平面，將培養(yǎng)

7、皿 _ 在37C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2448小時(shí)，觀察菌落數(shù)。 (3)步驟應(yīng)選擇挑取涂布平板上長出的 _ ，再通過劃線進(jìn)一步 _ 。 (4)步驟中，將菌種接種在 _ 培養(yǎng)基中，在37C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后，置于 _ 冰箱中保存。 (5)若該漆酶大量應(yīng)用于環(huán)境修復(fù)，可先用石英砂對漆酶進(jìn)行 _ (A.包埋B.共價(jià)偶聯(lián)C.吸附D.交聯(lián))法固定，再進(jìn)行工業(yè)化使用。 7. 下表是用于從土壤中分離純化細(xì)菌的培養(yǎng)基配方。 請回答： （1）培養(yǎng)基的類型很多，按照“細(xì)菌喜 _ ，霉菌喜 _ ”的原則配制上述 培養(yǎng)基后，一般還要調(diào)節(jié) pH 并對培養(yǎng)基進(jìn)行 _ 處理。 （2）分離純化微生物最常使用的劃線分離法中，接種環(huán)在菌液中蘸菌液 _ （A一 B二 C三 D四）次；若用涂布分離法，則制備細(xì)菌懸液時(shí)，一般需進(jìn) 行 _ 處理，為確保操作過程不被雜菌污染，接