紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(2015)

1、第二章第二章/ /第一節(jié)紅細(xì)胞檢查第一節(jié)紅細(xì)胞檢查臨檢教研室臨檢教研室陳亞芹陳亞芹 第二章第二章/ /第一節(jié)紅細(xì)胞檢查第一節(jié)紅細(xì)胞檢查一、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)一、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)二、血紅蛋白測定二、血紅蛋白測定RBCRBCRBC思考思考r 出生后造血，紅細(xì)胞生成部位出生后造血，紅細(xì)胞生成部位 ，紅細(xì)胞破壞部位紅細(xì)胞破壞部位 。r 正常情況下，成人外周血中是否存在有核正常情況下，成人外周血中是否存在有核紅細(xì)胞？紅細(xì)胞？r 網(wǎng)織紅細(xì)胞只存在于骨髓中。網(wǎng)織紅細(xì)胞只存在于骨髓中。 r 成熟紅細(xì)胞只存在于外周血中。成熟紅細(xì)胞只存在于外周血中。正常情況下，紅細(xì)胞生成與破壞保持動(dòng)態(tài)平衡正常情況下，紅細(xì)胞生成與破壞保持動(dòng)態(tài)平

2、衡，血液中紅細(xì)胞，血液中紅細(xì)胞數(shù)量數(shù)量保持在相對恒定的范圍。保持在相對恒定的范圍。如何獲得血液中如何獲得血液中紅細(xì)胞數(shù)量？紅細(xì)胞數(shù)量？RBC紅細(xì)胞計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（red blood cell count, RBCred blood cell count, RBC） n測定單位體積血液中紅細(xì)胞的數(shù)量測定單位體積血液中紅細(xì)胞的數(shù)量n診斷貧血及紅細(xì)胞增多的指標(biāo)之一診斷貧血及紅細(xì)胞增多的指標(biāo)之一n紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法 n顯微鏡計(jì)數(shù)法顯微鏡計(jì)數(shù)法 n血液分析儀法血液分析儀法RBCn稀釋血液稀釋血液n計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)紅細(xì)胞n數(shù)據(jù)換算數(shù)據(jù)換算顯微鏡計(jì)數(shù)法顯微鏡計(jì)數(shù)法 RBCr計(jì)數(shù)紅細(xì)胞時(shí)，為何使用

3、等滲稀釋液？計(jì)數(shù)紅細(xì)胞時(shí)，為何使用等滲稀釋液？r在計(jì)數(shù)紅細(xì)胞時(shí)，還能看到哪些細(xì)胞？在計(jì)數(shù)紅細(xì)胞時(shí)，還能看到哪些細(xì)胞？r這些細(xì)胞是否會(huì)對紅細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果產(chǎn)生這些細(xì)胞是否會(huì)對紅細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果產(chǎn)生影響？影響？思考題思考題RBC顯微鏡計(jì)數(shù)法顯微鏡計(jì)數(shù)法n 紅細(xì)胞保持其形態(tài)特征紅細(xì)胞保持其形態(tài)特征，依據(jù)形態(tài)特點(diǎn)計(jì)數(shù)，依據(jù)形態(tài)特點(diǎn)計(jì)數(shù)，計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性高。計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性高。n未破壞白細(xì)胞，未排除白細(xì)胞數(shù)量的影未破壞白細(xì)胞，未排除白細(xì)胞數(shù)量的影響。響。 n人工操作，影響環(huán)節(jié)多，誤差大，精密人工操作，影響環(huán)節(jié)多，誤差大，精密度低。度低。 RBC血液分析儀法血液分析儀法n采用電阻抗法或激光散射法采用電阻抗法或激光散射法RBC

4、r儀器法計(jì)數(shù)紅細(xì)胞時(shí)，是否真正認(rèn)識(shí)儀器法計(jì)數(shù)紅細(xì)胞時(shí)，是否真正認(rèn)識(shí)紅細(xì)胞而計(jì)數(shù)？紅細(xì)胞而計(jì)數(shù)？思考思考 小紅細(xì)胞導(dǎo)致儀器法紅細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果假性降低小紅細(xì)胞導(dǎo)致儀器法紅細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果假性降低方法學(xué)評價(jià)方法學(xué)評價(jià)方法方法 優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn) 缺點(diǎn)缺點(diǎn) 適用范圍適用范圍 顯微鏡顯微鏡計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)法 傳統(tǒng)方法，設(shè)傳統(tǒng)方法，設(shè)備簡單，廉價(jià)備簡單，廉價(jià) 費(fèi)時(shí)費(fèi)力，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，精密度低精密度低 參考方法；分析參考方法；分析儀異常結(jié)果復(fù)核儀異常結(jié)果復(fù)核 血液分血液分析儀法析儀法操作便捷，操作便捷，易于標(biāo)準(zhǔn)化，易于標(biāo)準(zhǔn)化，精密度高精密度高 價(jià)貴；環(huán)境價(jià)貴；環(huán)境要求較高要求較高 健康人群普查；健康人群普查；大批量標(biāo)本篩檢大批量標(biāo)本

5、篩檢 RBC質(zhì)量保證（顯微鏡法）質(zhì)量保證（顯微鏡法）n技術(shù)誤差技術(shù)誤差n儀器誤差儀器誤差n分布誤差分布誤差n顯微鏡法紅細(xì)胞計(jì)數(shù)誤差來源有三個(gè)顯微鏡法紅細(xì)胞計(jì)數(shù)誤差來源有三個(gè)RBCRBC皮膚采血皮膚采血 靜脈采血靜脈采血 靜脈采血靜脈采血 RBC參考區(qū)間參考區(qū)間n 成年男性成年男性：（：（4.05.5）1012/Ln 成年女性：（成年女性：（3.55.0）1012/Ln 新生兒：（新生兒：（6.07.0）1012/LRBC存在年齡存在年齡與性別的差異與性別的差異李某，李某，RBC 3.681012/L，是否貧血？，是否貧血？RBC臨床意義臨床意義RBC參考區(qū)間上限，參考區(qū)間上限，RBC增增多多

6、RBC參考區(qū)間下限，即貧血參考區(qū)間下限，即貧血生理性生理性變化變化病理性病理性變化變化RBC生理性增多生理性增多 生理性缺氧引起生理性缺氧引起RBC6個(gè)月-2歲嬰兒RBCn相對性增多相對性增多：見于嘔吐、高熱等引起暫時(shí)性：見于嘔吐、高熱等引起暫時(shí)性血液濃縮。血液濃縮。通過補(bǔ)液，血容量恢復(fù)正常，紅細(xì)胞通過補(bǔ)液，血容量恢復(fù)正常，紅細(xì)胞增多即消失。增多即消失。n絕對性增多絕對性增多：繼發(fā)性增多，由繼發(fā)性增多，由EPOEPO代償性或非代償性增高引起。代償性或非代償性增高引起。原發(fā)性增多，紅細(xì)胞系統(tǒng)異常增殖性疾病。原發(fā)性增多，紅細(xì)胞系統(tǒng)異常增殖性疾病。病理性增多病理性增多 RBCRBCRBC3 13 2

7、3 3生成減少生成減少 破壞過多破壞過多 血管丟失血管丟失 概念：紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測定或血細(xì)胞比容概念：紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測定或血細(xì)胞比容低于相同性別、相同年齡組參考區(qū)間下限。低于相同性別、相同年齡組參考區(qū)間下限。病因?qū)W分類病因?qū)W分類RBC 紅細(xì)胞生成減少紅細(xì)胞生成減少 n骨髓造血功能減退或衰竭：再生障礙骨髓造血功能減退或衰竭：再生障礙性貧血。性貧血。 n造血物質(zhì)缺乏或利用障礙：腎性貧血、造血物質(zhì)缺乏或利用障礙：腎性貧血、缺鐵性貧血，巨幼細(xì)胞性貧血。缺鐵性貧血，巨幼細(xì)胞性貧血。RBCn 細(xì)胞內(nèi)在缺陷（遺傳性缺陷）細(xì)胞內(nèi)在缺陷（遺傳性缺陷） 膜缺陷、酶缺陷、血紅蛋白異常致紅細(xì)胞壽膜缺陷、酶

8、缺陷、血紅蛋白異常致紅細(xì)胞壽命縮短。命縮短。n 細(xì)胞外在異常（獲得性因素）細(xì)胞外在異常（獲得性因素） 免疫性因素：輸血血型不合、新生兒溶血病免疫性因素：輸血血型不合、新生兒溶血病等。等。 非免疫性因素：機(jī)械損傷、寄生蟲、細(xì)菌及非免疫性因素：機(jī)械損傷、寄生蟲、細(xì)菌及脾亢等。脾亢等。紅細(xì)胞破壞過多紅細(xì)胞破壞過多 血液丟失：血液丟失：急性或慢性失血引發(fā)急性或慢性失血引發(fā)的貧血的貧血RBC血紅蛋白（血紅蛋白（hemoglobinhemoglobin，Hb Hb ） n 在有核紅細(xì)胞及網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)合成的。在有核紅細(xì)胞及網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)合成的。n 是紅細(xì)胞內(nèi)與氧氣結(jié)合的運(yùn)輸?shù)鞍?。是紅細(xì)胞內(nèi)與氧氣結(jié)合的運(yùn)輸?shù)鞍?/p>

9、。n HbHb在成熟紅細(xì)胞內(nèi)分布特點(diǎn)（近胞膜處在成熟紅細(xì)胞內(nèi)分布特點(diǎn)（近胞膜處多，中心部少）決定了紅細(xì)胞的雙凹圓多，中心部少）決定了紅細(xì)胞的雙凹圓盤形狀。盤形狀。n 合成速度受促紅細(xì)胞生成素（合成速度受促紅細(xì)胞生成素（EPOEPO）與雄）與雄激素調(diào)節(jié)。激素調(diào)節(jié)。RBC與與Hb測定用于貧血診斷測定用于貧血診斷紅細(xì)胞紅細(xì)胞A紅細(xì)胞紅細(xì)胞BRBC Hb（四聚體）（四聚體）珠蛋白珠蛋白血紅素血紅素2條條鏈鏈2條非條非鏈鏈原卟啉原卟啉鐵原子鐵原子血紅蛋白組成血紅蛋白組成 血液中血紅蛋白的存在形式血液中血紅蛋白的存在形式 存在形式存在形式 所占比例所占比例還原血紅蛋白（還原血紅蛋白（FeFe2+ 2+ ）

10、 正常成人正常成人99%99%氧合血紅蛋白氧合血紅蛋白碳氧血紅蛋白碳氧血紅蛋白硫化血紅蛋白硫化血紅蛋白高鐵血紅蛋白（高鐵血紅蛋白（FeFe3+ 3+ ） 1%1%HbHb測定即測定血液中測定即測定血液中各種血紅蛋白各種血紅蛋白的總濃度。的總濃度。 RBCn 血液的物理特性：比重法，折射儀法血液的物理特性：比重法，折射儀法n HbHb的分子組成：全血鐵法的分子組成：全血鐵法n HbHb與與O O2 2可逆性結(jié)合：血?dú)夥治龇赡嫘越Y(jié)合：血?dú)夥治龇╪ HbHb衍生物光譜特點(diǎn)：衍生物光譜特點(diǎn)：HiCNHiCN，SDS-HbSDS-Hb等等HbHb檢測原理檢測原理 RBCHiCN法檢測原理法檢測原理Hb

11、( Fe2+ )K3Fe(CN)6Hi (Fe3+)CN -HiCNRBC HiCN測定測定法法n計(jì)算計(jì)算n直接計(jì)算（符合直接計(jì)算（符合WHOWHO標(biāo)準(zhǔn)的分光光度計(jì)）標(biāo)準(zhǔn)的分光光度計(jì)） Hb Hb A A64458644584400044000251251A A367.7367.7n以以 HiCNHiCN參考液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，利用吸光參考液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，利用吸光 度度A A在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出HbHb濃度濃度RBC方法學(xué)評價(jià)方法學(xué)評價(jià)n缺點(diǎn)：試劑有毒、高缺點(diǎn)：試劑有毒、高WBCWBC造成試劑混濁、造成試劑混濁、HbCO HbCO 轉(zhuǎn)化慢、不能測轉(zhuǎn)化慢、不能測SHbSHb。 HiCN測

12、定法測定法（參考方法）（參考方法） n優(yōu)點(diǎn)：操作簡單，反應(yīng)速度快，產(chǎn)物穩(wěn)優(yōu)點(diǎn)：操作簡單，反應(yīng)速度快，產(chǎn)物穩(wěn)定，便于質(zhì)控。定，便于質(zhì)控。RBC方法學(xué)評價(jià)方法學(xué)評價(jià)n優(yōu)點(diǎn)：操作簡單，優(yōu)點(diǎn)：操作簡單，試劑無毒試劑無毒，結(jié)果準(zhǔn)確，結(jié)果準(zhǔn)確，重復(fù)性好。重復(fù)性好。n缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：SDSSDS質(zhì)量差異大；消光系數(shù)未定，質(zhì)量差異大；消光系數(shù)未定，不能直接計(jì)算不能直接計(jì)算HbHb濃度濃度；不能測定；不能測定SHbSHb；SDSSDS破壞白細(xì)胞破壞白細(xì)胞。 SDS-HbSDS-Hb測定法測定法（HiCNHiCN替代方法）替代方法） RBC質(zhì)量保證（比色法）質(zhì)量保證（比色法） n 標(biāo)本：引起血清濁度增加的因素致標(biāo)本：

13、引起血清濁度增加的因素致HbHb假性假性增高。增高。n 器材及試劑：定期校準(zhǔn)儀器，選用合格的器材及試劑：定期校準(zhǔn)儀器，選用合格的微量采血管和刻度吸管，保證試劑質(zhì)量。微量采血管和刻度吸管，保證試劑質(zhì)量。n 技術(shù)操作：控制技術(shù)誤差。技術(shù)操作：控制技術(shù)誤差。n 廢棄物：妥善處理廢液。廢棄物：妥善處理廢液。RBC參考區(qū)間參考區(qū)間n 成年男性：成年男性：120120160 g/L160 g/Ln 成年女性：成年女性：110 110 150 g/L150 g/Ln 新生兒：新生兒：170170200 g/L200 g/LHb存在年齡存在年齡與性別的差異與性別的差異RBC臨床意義（同紅細(xì)胞計(jì)數(shù)臨床意義（同紅細(xì)胞計(jì)數(shù)）n 判斷貧血程度優(yōu)于紅細(xì)胞計(jì)數(shù)判斷貧血程度優(yōu)于紅細(xì)胞計(jì)數(shù)n 臨床應(yīng)用注意事項(xiàng)臨床應(yīng)用注意事項(xiàng) n HbHb和和RBCRBC不一定正確反應(yīng)全身紅細(xì)胞總?cè)萘康牟灰欢ㄕ_反應(yīng)全身紅細(xì)胞總?cè)萘康淖兓?。變化。n 某些貧血，某些貧血， HbHb和和RBCRBC減少程度可不一致，同時(shí)減少程度可不一致，同時(shí)測定測定HbHb和和RBCRBC，對診斷更有意義。，對診斷更有意義。貧血程度的判定貧血程度的判定分度分度 Hb含量含量 癥狀癥狀 輕度：輕度： 91g/L