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文檔簡介
1、此文檔收集于網絡,如有侵權,請聯系網站刪除2 .簡述血沉測定的方法學評價。手工法包括魏氏法、潘氏法等:魏氏法簡便實用,ICSH推薦為血沉測定的參比方法;潘氏法與魏氏法測定相關性較好,采用手指采血,用血量少,尤其適用于兒童,但易混入組織液,目前已很少使 用。手工法只能測定血沉某個時刻的最終結果,特異性差,其應用有很大的局限性。血沉儀可動態(tài)記錄整個血沉過 程的變化,描繪出紅細胞沉降的曲線,反映了不同疾病或疾病不同階段,血沉3個沉降階段所存在的差異,為臨床分析血沉測定結果提供了新的手段。3 .白細胞分類計數質量控制中應注意哪些影響因素?影響白細胞分類計數準確性的因素:主要是細胞在涂片中的分布不均和觀
2、察者對細胞辨認的差異。影響白細胞分類計數精確性的因素。影響涂片染色效果的因素。白細胞分 類計數的參考方法:EDTAK2抗凝靜脈血,人工制成血涂片,以 Romanowsky液進行染色,使用“城墻式”移動法, 油鏡下分類計數 200個白細胞。當其他分類法與此法作為標準進行比較時,需要 4個熟練檢驗人員對同一張涂片各計 數200個白細胞(即總數為800個細胞)后,求出平均值來作為各類白細胞的靶值。4 .嗜酸性粒細胞升高的臨床意義是什么?嗜酸性粒細胞增多指成人外周血嗜酸性粒細胞>0. 5X109/L。引起嗜酸性粒細胞增多的原因包括:寄生蟲病是最常見的病因。變態(tài)反應性疾病是僅次于寄生蟲病的另一主要
3、病因,見于支氣 管哮喘、壞死性血管炎、藥物過敏反應等。皮膚病,如濕疹等。血液病,如慢性粒細胞白血病、真性紅細胞增多 癥、多發(fā)性骨髓瘤、脾切除術后、嗜酸性粒細胞白血病、霍奇金病。某些惡性腫瘤,如肺癌。某些傳染病,如猩 紅熱急性期。其他,如風濕性疾病、腦垂體前葉功能減低癥等。高嗜酸性粒細胞綜合征。5 .電阻抗法血液分析儀進行血細胞計數的檢測原理是什么?根據血細胞相對非導電的性質,懸浮在電解質溶液中的血細胞顆粒在通過計數小孔時可引起電阻的變化,于是瞬間引起了電壓變化而出現一個脈沖信號。脈沖信號變化的程度 取決于非導電性細胞體積的大小,細胞體積越大產生的脈沖振幅越高,記錄脈沖的數量就可測定細胞的數量。
4、這些脈 沖信號經過放大、閾值調節(jié)、甄別、整形、計數及自動控制保護系統(tǒng),最終可打印出數據報告6 .試述血紅蛋白測定的主要方法及其方法學評價。氧化高鐵血紅蛋白測定法 (HiCN)為國際標準參考方法。 操作簡單、顯色快且結果穩(wěn)定可靠,可檢測除SHb外的各種血紅蛋白。KCN有劇毒,且存在高白細胞和高球蛋白血癥可致試劑混 濁,以及HbCO轉化較慢等問題。十二烷基硫酸鈉(SDS)血紅蛋白測定法可替代 HiCN法。SDS與Hb作用(除SHb外),生成SDSHb棕紅色化合物,其吸收峰在 538nm, SDS可用HiCN法定的抗凝血或溶血液,制備標準工作曲線。本法操作簡單,呈色穩(wěn)定,準確性和精確性符合要求,且無
5、公害,為次選方法。SDS本身質量差異較大,且破壞白細胞,不適用于同時有白細胞計數和 Hb測定的血細胞分析儀上使用。疊氮高鐵血紅蛋白 (HiN3)測定法具有與 HiCN測 定法相似的優(yōu)點,顯色快而穩(wěn)定,試劑毒T生僅為HiCN的1/7,但仍存在公害問題。 堿羥血紅蛋白(AHD575)測定法, 試劑簡單,不含有毒劑,呈色穩(wěn)定,可用氯化血紅素作標準品。但此法在血液分析儀中的應用受限。多參數血液分析儀測Hb已逐步取代手工法,操作簡單、快速,同時可以獲得多項紅細胞的參數。其測定原理多采用HiCN法,但由于各型號儀器使用的溶血劑不同,形成Hb的衍生物不同。儀器要經過 HiCN標準液校正后,才能進行 Hb測定
6、。7 .網織紅細胞檢測的臨床意義是什么?網織紅細胞計數(Ret)是反映骨髓造血功能的重要指標。(1)判斷骨髓增生能力,判斷貧血類型:網織紅細胞增多,表示骨髓造血功能旺盛。常見于溶血性貧血(尤其急性溶血卜急性失血;造血恢復期可見Ret短暫和迅速增高,是骨髓功能恢復較敏感的指標;網織紅細胞減少,表示骨髓造血功能低下,見于再生障礙性貧血、溶血性貧血、自身免疫性溶血性貧血危象。典型再生障礙性貧血,網織紅細胞計數常低于0. 005,網織紅細胞絕對值低于 15X109/L,為其診斷標準之一。(2)評價療效,判斷病情變化:Ret是貧血患者隨訪檢查的項目之一。(3)骨髓移植后監(jiān)測骨髓造血恢復8 .血沂變化的臨
7、床意義是什么 ?(1)生理性增快:女性高于男性。婦女月經期、妊娠 3個月以上,以及老年人血沉常增 快。(2)病理性增快可見于:各種炎癥:感染是血沉加快最常見的原因,如急性細菌性感染;結核病、結締組織炎癥、 風濕熱等慢性炎癥于活動期血沉增快,病情好轉時血沉減慢,故血沉(ESR)可動態(tài)觀察病情變化。組織損傷及壞死:見于較大范圍組織損傷或手術創(chuàng)傷。心肌梗死時血沉增快,而心絞痛時血沉多正常,可作為兩者鑒別指標。惡性腫 瘤血沉增快,而良性腫瘤血沉多正常。高球蛋白血癥。貧血。高膽固醇血癥。(3)血沉減慢:臨床意義較小,主要見于紅細胞明顯增多、纖維蛋白原含量嚴重減低時。血沉是較為常用而缺乏特異性的指標,血沉
8、常作為疾病是否活 動的監(jiān)測指標9 .試述中性粒細胞病理變化的臨床意義。中性粒細胞增多指分葉核粒細胞超過70%,絕對值>7X109/L。急性感染或炎癥是最常見的原因,以中性粒細胞為主。尤其是化膿性球菌感染。其增高程度與病原體種類、感染部位和程度 以及機體的反應性等有關。廣泛組織損傷或壞死和急性溶血,如嚴重燒傷、心肌梗死等均可見白細胞增多,以中性 粒細胞為主。急性失血,白細胞迅速增多,以中性粒細胞為主。急性中毒。惡性腫瘤、白血病,急性白血病以精品文檔此文檔收集于網絡,如有侵權,請聯系網站刪除幼稚白血病細胞增多為主。慢性白血病以成熟的白血病細胞增高為主10 .為什么血細胞分析儀對白細胞的分類結
9、果只能作為篩檢試驗? (1)三分群血液分析儀用阻抗法的原理,依據白細胞的體積的大小,人為地將白細胞分成三群,這種分類不夠準確。(2)五分類的血細胞分析儀聯合應用光學和電學等技術的儀器,檢測同一血細胞的體積、細胞核形狀及胞質中顆粒,在綜合分析后作出白細胞分類,這種檢測分類法雖然較 電阻抗法高,但仍不能滿足臨床檢出異常細胞的需要。(3)各類型的血液分析儀尚不具有識別紅細胞、白細胞核、血小板的能力,仍不能檢出白細胞形態(tài)的病理性變化,特別是對幼稚細胞的檢測。而顯微鏡能根據血細胞與染色液特異性 的結合,根據血涂片上細胞的體積、細胞核形狀及胞質中顆粒等著色情況,進行綜合分析并能識別異常和幼稚細胞, 因此,
10、血細胞分析儀只能作為健康人血液一般檢驗的篩檢之用11 .試述尿液常規(guī)分析的臨床價值。(1)泌尿系統(tǒng)疾病的診斷與療效觀察。泌尿系統(tǒng)的炎癥、結石、腫瘤、血管病變及腎移植術后發(fā)生排異反應時,各種病變產物直接進入尿中,引起尿液成分變化,因此尿液分析是泌尿系統(tǒng)疾病診斷與 療效觀察的首選項目。(2)其他系統(tǒng)疾病的診斷。尿液來自血液,其成分又與機體代謝有密切關系,故任何系統(tǒng)疾病的 病變影響血液成分改變時,均能引起尿液成分的變化,因此可通過尿液分析協(xié)助臨床診斷。(3)安全用藥的監(jiān)護。某些藥物如慶大霉素、卡那霉素、多黏菌素B與磺胺類藥等??梢鹉I損害,故用藥前及用藥過程中需觀察尿液的變化,以確保用藥安全。(4)
11、職業(yè)病的輔助診斷。鉛、鎘、州、汞等均可引起腎損害,尿中此類重金屬排出量增多,對職業(yè)病 的診斷及預防有一定意義(5)對人體健康狀態(tài)的評估。對人群進行尿液分析,可篩查有無腎、肝、膽疾病和糖尿病,以 達早期診斷及預防疾病的目的12 .試述糞便隱血試驗的臨床意義。糞便隱血檢查對消化道出血的診斷有重要價值。消化性潰瘍、藥物致胃黏膜損傷(如服用阿司匹林、口引喋美辛、糖皮質激素等卜腸結核、Crohn病、潰瘍性結腸炎、結腸息肉、鉤蟲病及胃癌、結腸癌等消化道腫瘤時,糞便隱血試驗均常為陽性。故須結合臨床其他資料進行鑒別診斷。在消化性潰瘍時,陽性率為40%70%,呈間斷性陽性。消化性潰瘍治療后當糞便外觀正常時,隱血
12、試驗陽性仍可持續(xù)57天,此后如出血完全停止,隱血試驗即可轉陰。消化道癌癥時,陽性率可達95%,呈持續(xù)陽性,故糞便隱血試驗常作為消化道惡性腫瘤診斷的一個篩選指標。尤其對中老年人早期發(fā)現消化道惡性腫瘤有重要價值。此外在流行性出血熱患者的糞便中隱血試驗也有 84%的陽性率,可作為該病的重要佐證。13 .試述尿HCG金標法測試原理。 在纖維素膜的特定位置,分別包被單抗鼠 IgG抗體(對照線),單抗人HCG抗體(測 定線),呈上下排列,另外,試帶上還含有均勻分布的膠體金標記人3-HCG單抗、膠體金標記的鼠IgG抗原。檢測時因層吸作用尿液中的 HCG與膠體金標記的人3 -HCG單抗結合,移至測定線,形成金
13、標記3 -HCG單抗一3 -HCG抗原 一單抗人HCG抗體的雙抗體夾心式復合物, 測試線呈現紫紅色。同時,金標記鼠IgG抗原隨尿上行至單抗鼠IgG抗體, 形成金標記鼠IgG抗原與單抗鼠IgG抗體復合物,對照線呈紫紅色。1 .簡述血細胞發(fā)育過程中的形態(tài)演變規(guī)律。胞體由大到小.但原始細胞比早幼粒細胞小,巨核細胞由小到大,核漿比例由大到??;胞核由大到小,成熟紅細胞胞核消失;核形由圓到凹陷到分葉,有的細胞可不分葉;核染色質結構由細 致疏松到粗糙緊密,核染色質顏色由淡紫色到深紫色;核膜由不明顯到明顯;核仁由顯著可見到無,胞質量由少到多, 胞質顏色由藍到紅或由深藍到淺藍;胞質顆粒由無到有;紅細胞在成熟過程
14、中,胞質不會出現顆粒。2 .簡述再障的骨髓病理學特點。骨髓增生減退,造血組織與脂肪組織的容積百分比降低,脂肪細胞與基質增多。粒細胞、紅細胞、巨核細胞均減少,淋巴細胞增多。間質內漿細胞、肥大細胞、網狀細胞等非造血細胞增多,并可有間質 水腫、出血甚至液性脂肪壞死3 .再障的診斷標準是什么 ?全血細胞減少,網織紅細胞絕對值減少;一般無肝脾腫大;骨髓至少1個部位增生減低或重度減低,骨髓小粒非造血細胞增多;除外引起全血細胞減少的其他疾病,如PNH、MDS-RA急性造血功能停滯等;一般抗貧血藥物治療無效。4 .簡述溶血性貧血的共性改變。一般貧血實驗室表現:正常細胞性貧血,網織紅細胞一般增高,血片中有特殊形
15、態(tài)的紅細胞,類白血病反應。骨髓有核細胞顯著增多,粒紅比例倒置。血紅蛋白的釋放。膽紅素代謝異常。紅細 胞壽命縮短。6 .簡述凝血過程的三個階段。第一階段為血液凝血活酶的形成,第二階段為凝血酶的形成,第三階段為纖維蛋白的形 成。第一階段有內源性和外源性凝血系統(tǒng)兩個途徑。外源性凝血系統(tǒng)是由于血管壁或組織損傷后釋放因子出,因子口、 鈣離子形成復合物,促使因子X活化,然后形成凝血活酶。內源性凝血系統(tǒng)是通過固相和液相激活因子刈,然后是IX-vrn-Ca-PF3復合物形成,從而促使因子X活化,形成凝血活酶7 .如何早期診斷DIC。存在可引起 DIC的病因,如感染、創(chuàng)傷、腫瘤等。有兩種以上的下列臨床表現:反復
16、、 精品文檔此文檔收集于網絡,如有侵權,請 聯系網站刪除嚴重或廣泛的出血;不明原因或難以糾正的休克;出現反映肺、腦、肝、腎等器官栓塞的癥狀和體征;原來疾病不可解釋的溶血現象。實驗室檢查符合以下表現:血小板減少或進行性下降,Fg含量減少,3P實驗陽性或D-二聚體升高。PT縮短或較正常對照延長 3 s以上8 .簡述骨髓檢查的適應證:外周血細胞數量、成分及形態(tài)異常。不明原因的發(fā)熱、肝腫大、脾腫大、淋巴結腫大。不明原因的骨痛、骨質破壞、腎功能異常、黃疸、紫瘢、血沉明顯加快。惡性血液病化療后的療效觀察。其他: 骨髓活檢、骨髓細胞培養(yǎng)、微生物學及寄生蟲學檢查等10 .血小板在止血過程中的作用是什么?血小板
17、能維持正常血管壁的完整性,使其通透性減低。通過黏附、聚集和釋放反應在創(chuàng)口處形成血小板栓子。釋放各種血小板因子參與血液凝固,其中PF3最重要。釋放止血物質 TXA 2,使血小板進一步收縮。釋放血小板收縮蛋白,使血塊收縮,有利于止血11 .何為急性白血病 M4型?其亞型如何劃分?M4為粒-單核細胞白血病,按粒細胞、單核細胞的比例,形態(tài)不同分為四 個亞型:M4a:以原始及早幼粒細胞白血病增生為主。單核細胞系統(tǒng)細胞總數20% (NEC)。M4b:以原、幼單核細胞增生為主,原粒細胞+早幼粒細胞20 % (NEC)。M4c;具有粒系又具有單核系特征的原始細胞30%(NEC)。M4E0;除上述特征外,還有顆
18、粒粗大且圓、著色較深的嗜酸性粒細胞,占5%30%12 .何為造血干細胞?它具備哪些特征?造血干細胞是一種具有自身復制能力的細胞,必須具備:有分裂能力:一個 干細胞在經過一個細胞周期活動后可生成兩個與分裂前性質相同的干細胞,這就是干細胞自身復制的特性。由于它有 自身復制能力,所以能保持本細胞庫數的恒定。有分化為更成熟細胞的能力:即具有向骨髓多系細胞分化的能力。造血干細胞既能自身復制,經常維持一定的數量,又能分化為使多系細胞相對穩(wěn)定。概括為:血細胞來源于骨髓的造 血多能干細胞,多能干細胞能分化為多系統(tǒng)的定向干細胞,然后經過原始、幼稚各階段,而后成熟為多種血細胞13 .試舉例說明急性白血病的MICM
19、 分型。M(形態(tài)學)1(免疫學)C(細胞化學)M(分子生物學),以急性早幼粒細胞白血病(M3)為例,Hb和RBC輕中度減少,白細胞不定,分類以異常早幼粒為主,Auer小體易見。骨髓象以顆粒增多的異常早幼粒增生為主, 30%(NEC),早幼與原粒之比3: 1,異常早幼粒胞核大小不一,胞質中有大小不等顆粒,可見 束狀 Auer 小體;POX( + ), CD 13/CD 33(+), CD 34/HLA-DR( );t(15: 17)(q22: q12)形成 PML/RARA 融合 基因14 .試述血栓形成機制。血管壁損傷:局部內皮細胞抗血栓形成活性減弱或喪失,使血栓形成的內皮下成分暴露,促使血小
20、板黏附、聚集和釋放,激活內源性、外源性凝血途徑,局部形成纖維蛋白的凝塊或血栓,同時激肽的生成和 血小板釋放的血管壁通透性因子使血管壁通透性增加,利于血栓形成。血液成分改變:血小板數量過多與功能亢進, 血液凝固性增高。纖溶活性減低及白細胞等均利于血栓形成。血流淤滯:血流緩慢、停滯與渦流均可導致血栓形成、 血黏度增高,利于血小板黏附、聚集,利于血栓形成16.試舉例說明為什么分析骨髓象必須常規(guī)分析血常規(guī)。骨髓象相似而血常規(guī)有區(qū)別,如類白血病反應,其骨髓象與慢粒相似,但血中的白細胞增多不及慢粒顯著。骨髓象有區(qū)別而血常規(guī)相似,如傳染性淋巴細胞增多癥和慢粒時 血常規(guī)都有小淋巴細胞增多,但骨髓象顯示前者淋巴
21、細胞稍增多而后者顯著增多。骨髓象變化不顯著而血常規(guī)有顯 著異常,如傳染性淋巴細胞增多癥,其骨髓象中的異形淋巴細胞遠不及血常規(guī)中明顯。骨髓象有顯著異常而血常規(guī) 變化不顯著,如多發(fā)性骨髓瘤,骨髓中可見特異性骨髓瘤細胞,而血常規(guī)甚少見到。骨髓象細胞難辨認,如白血病, 血常規(guī)中白血病細胞的分化程度較骨髓象為好,也較骨髓象容易辨認18.列舉5例引起外周血全血細胞減少的血液病及豐要的鑒別指征?血紅蛋白再生障礙性貧血:骨髓有核細胞增生低下,淋巴細胞比例相對增高,粒、紅、巨核三系細胞增生減低?;顧z示造血組織減少,脂肪組織增加。PNH: Ham實驗和蔗糖溶血實驗呈陽性反應。MDS:骨髓象中可見至少一系的病態(tài)造血
22、。非白血性白血?。汗撬柘笾锌梢姶罅吭技毎陀字杉毎盒越M織細胞?。汗撬柘笾锌梢姁盒越M織細胞。1 .輸注全血有哪些缺點 ?全血中含有白細胞、血小板和血漿蛋白,可以使受血者產生抗體,再輸血時,可發(fā)生輸血 反應。由于血漿存在,全血容量較大,對老年人和兒童可引起循環(huán)超負荷,發(fā)生心力衰竭。全血的血漿中可能含 有較高濃度的枸檬酸鈉、鉀和氨等,易發(fā)生代謝性堿中毒。2 . ABO定型試驗中常要注意哪此問題 ?ABO亞型:紅細胞上的 A或B抗原很弱,只作正定型時可導致血型誤定。 抗A抗B定型血清質量差,對弱的 A或B抗原漏檢(假陰性)。受檢血清中存在不規(guī)則抗體。紅細胞有多凝集現 象。某些疾病,如低丙種球蛋白
23、血癥等,導致反定型時血清中抗體漏檢(假陰性)3 .抗球蛋白配血法中,陽件對照、陰件對照和鹽水對照的操作步驟杲什么?結果如何判東? (1)取試管2支,分別標明此文檔收集于網絡,如有侵權,請聯系網站刪除主側和次側,主側管加受血者血清2滴和供血者5%紅細胞鹽水懸液 1滴;次側管加供血者血清 2滴和受血者5%紅細胞懸液1滴。(2)混和,置37c水浴致敏1h,取出后用鹽水離心洗滌紅細胞3次,傾去上清液。(3)加最適稀釋度抗球蛋白血清1滴,混勻,1000rpm離心1min,觀察結果。(4)陽性對照:5%不完全抗D致敏的Rh陽性紅細胞懸液1滴, 加抗球蛋白血清1滴。陰性對照:5% O型紅細胞懸液1滴,加抗球
24、蛋白血清 1滴。鹽水對照:供血者5 %紅細胞鹽水懸液1滴加生理鹽水1滴;受血者 5%紅細胞鹽水懸液 1滴加生理鹽水1滴。(5)結果判定:如陽性對照管凝集, 陰性對照管、鹽水對照管不凝集,主側、次側配血管都不凝集,表示無輸血禁忌1 .簡述血糖的來源與去路。肝糖原分解:食物經消化吸收的葡萄糖;糖異生。血糖的去路:氧化供能;合成糖原;轉變?yōu)橹炯澳承┓潜匦璋被?;轉變?yōu)槠渌穷愇镔|2 .根據米一曼氏方程計算,當S是Km的5倍時,反應速度丫相當于最大速度Vmax的多少/艮據公式丫 = VmaxS/(Km+S),當S = 5 Km 時 y = 83% Vmax。3 .說明高氨血癥導致肝昏迷的生化基礎。高
25、氨血癥時,腦中發(fā)生的反應為:氨+ “一酮戊二酸一谷氨酸 氨+谷氨酸一谷氨酰胺腦內a 一酮戊二酸減少導致了三竣酸循環(huán)減弱,從而使ATP生成減少,腦組織供能缺乏表現昏迷4 .體內膽紅素可來源于何種代謝途徑?體內膽紅素大部分由衰老紅細胞破壞降解而來。血紅蛋白破壞后亞鐵血紅素經代謝轉變成膽紅素,約占75%。體內膽紅素小部分來自組織(特別是肝細胞)中非血紅蛋白的血紅素蛋白質 (如細胞色素P450、細胞色素b5,過氧化氫酶等)的血紅素輔基的分解。極小部分由造血過程中血紅素的少量分解,即無效 造血所產生5 .簡述肝功能檢查及其意義 ?膽紅素代謝檢查了解其有無黃疸、黃疸的程度并鑒定其類型。蛋白質代謝檢查了解
26、肝細胞合成蛋白質的能力。酶類測定了解肝細胞受損的程度。反映肝內外膽汁淤滯的檢查。反映肝纖維化程度 的檢查。反映肝占位性病變的檢查。免疫功能檢查以確定肝炎類型。輸血后肝炎檢查6 .試述ApoAI、ApoB測定的臨床意義?Apo作為脂類載體直接與脂類代謝ApoAI測定可直接反映 HDL和LDL水平,ApoAI含量與HDL含量正相關,與冠心病和動脈硬化的發(fā)生呈負相關,ApoAI越高對人體越有益,而 ApoB則相反,其水平越高意味著 LDL越高患冠心病危險越大,ApoAI下降和ApoB增高見于冠心病,還見于未控制的糖尿病、腎病綜合征、活動肝炎、營養(yǎng)不良等,冠心病的優(yōu)選指標是ApoB ,其增高比HDLC
27、H降低和TCH升高更有意義,腦血管病以HDL -CH, ApoAI下降更明顯7 .肌鈣蛋白是反映哪個器官損傷的標志物?有何臨床意義?肌鈣蛋白(Tn)是心肌組織的一種特有的調節(jié)蛋白,嚴重心肌缺損時釋放人血,是反映心肌損傷的血清標志物。肌鈣蛋白以三種球型亞基組成,即TnT、TnI和TnC ,相對分子質量依次減小。其含量與年齡、性別、梗死部位及溶栓藥物種類等無關8 .尿中微量甯白的檢測對診斷早期腎損傷有什么意義?蛋白尿是腎臟疾病的一個重要指標。在某些腎臟病早期,尿常規(guī)測定常為陰性,尿中蛋白質含量實際已有微量的增加(20200 mg/L)。若早期發(fā)現腎臟損害疾病如糖尿病腎損害等,必須做一些尿中微量蛋白
28、的檢測,以監(jiān)測腎臟以及其他器官的功能狀態(tài),提供可靠的生化指標。9 .簡述電泳的工作原理。溶液中帶電粒子在直流電場中向電性相反的方向移動的現象稱為電泳。蛋白質、核酸與生物大分子具有兩性電離及各自等電點(pI)。在pH相同條件下這些生物分子將會有帶不同量的電荷。如果要分離一組等電點不同的蛋白質,只要選擇一個合適pH,使多種蛋白質在該 pH的凈電荷差異最大,即可用此電泳方法檢查得到滿意的分離效果10 .簡述光譜吸收法的原理和朗伯比爾定律。光譜吸收法是指利用各種化學物質所具有的吸收光譜的特性,來確定其性質、結構和含量的方法。朗伯比爾定律: A=kbc,其中k是吸光系數,b是比色杯光徑,c為溶液濃 度。
29、c為1 mol/L, b為1 cm時,則系數k為摩爾吸光系數,以e表示,單位為 L/(mol cm)11 .何為連續(xù)眸測法 ?其特點是什么?連續(xù)測定酶促反應過程中某一反應產物或底物的濃度隨時間變化的多點數據,求 出酶反應初速度,間接計算酶活性濃度的方法稱連續(xù)監(jiān)測法12 .何為由極法?表示由極法的基本公式杲什么?利用電極、電位和物質濃度之間的關系來確定物質含量的分析方法稱為電極法。表示電極法的基本公式是能斯特方程式13 .自動?;治鰞x性能評價指標豐要有哪此?精密度、波長準確性、相關性、取樣量和最小反應體積及攜帶污染情況等14 .簡述干化學法原理。 干化學法是以被測樣本中存在的液體為反應介質(液
30、體中的水溶解了試紙條上的試劑),被測成分直接與固化于載體上的干試劑反應的一種方式此文檔收集于網絡,如有侵權,請聯系網站刪除1 .細菌有那些特殊的結構 ?它們在醫(yī)學上有何實際意義 ?莢膜:許多細菌胞壁外圍繞一層較厚的黏性、膠凍樣物質, 稱為莢膜。鞭毛:某些細菌體表面附著有細長呈波狀彎曲的絲狀物,稱為鞭毛,是細菌的運動器官。菌毛:一些 細菌菌體表面遍布著短而細直的蛋白質絲狀物,稱為菌毛,與細菌的致病性有關。芽抱:某些細菌在一定環(huán)境條件 下,細胞質脫水濃縮,在菌體內形成一個折光性強的圓形或卵圓形小體,稱為芽抱。芽抱對外界的抵抗力增強,不易 被殺火。2 .常見的細菌變異現象有哪些?有何實際意義?常見的
31、細菌變異現象有非遺傳性(表型性)改變和遺傳性(基因型)變異。其意義為:表型性改變,是指當外界環(huán)境條件發(fā)生改變時所引起的細菌某一性狀的改變。當條件回復,可恢復原來的 性狀,不遺傳給后代。常見的有:形態(tài)結構的改變,細菌形態(tài)的改變,毒力的改變?;蛐妥儺?,是細菌自身遺傳物 質(細菌染色體、質粒)發(fā)生改變而引起的變異。新獲得的性狀可以穩(wěn)定地傳給后代3 .外毒素和內毒素有哪些主要的區(qū)別?外毒素是某些細菌在代謝過程中產生并分泌到菌體外的毒性物質。主要由革蘭陽性菌產生,少數革蘭陰性菌也能產生。外毒素的化學成分是蛋白質,性質不穩(wěn)定,易被熱、酸及酶破壞;外毒素的 毒性作用強;不同細菌產生的外毒素對人體組織有選擇
32、性的毒性作用,引起特殊病變。外毒素有較強的抗原性,經甲 醛處理可脫去毒性,但仍保留抗原性,成為類毒素,類毒素可刺激機體產生相應的抗毒素,用于人工自動免疫;內毒 素是革蘭陰性桿菌細胞壁中的脂多糖成分,只有當菌體死亡裂解或用人工方法裂解細菌后才釋放出來。內毒素對機體 組織的毒性作用選擇性不強,引起的病理變化和臨床癥狀基本相同4 .正常菌群一般不引起人體感染,請問在什么情況下可發(fā)生感染?當病人免疫功能下降,體內微生態(tài)環(huán)境失衡或發(fā)生細菌易位時,即可發(fā)生感染。5 .頭抱菌素類抗生素,是否第四代頭抱就一定比第一代頭抱抗菌效果好,為什么?不一定,要看對什么細菌而言。如第一代頭抱菌素對革蘭陽性菌抗菌效果要好于
33、第四代頭抱菌素,而第四代頭抱菌素對革蘭陰性菌抗菌能力則強于第一 代頭抱菌素。6 .藥敏試驗時常報告“中介”結果.你知道其臨床意義嗎?中介是介于敏感和耐藥之間的一個實驗緩沖區(qū)域,有兩層意義:一是反映在操作中可能因控制不好出現的結果有誤,應重復試驗或改做MIC ;二是提示高于正常給藥或在某些生理藥物濃集的部位(如尿液中唾諾酮類)時細菌可被抑制7 .簡述用細菌制片和講行革蘭染色的基本步驟。制片:取生理鹽水一滴,置玻片上,用接種環(huán)挑取菌落,將細菌放在生理鹽水內研勻成薄的菌膜后,自然干燥,并經火焰固定。染色:初染加結晶紫染于涂片上,染1min后,用水洗去染液。媒染加碘液染 1min,水洗。脫色加 95%
34、乙醇,不時搖動約 30s,至無紫色脫落為止,水洗。復染加稀釋 石炭酸復紅染30s,水洗,干后鏡檢。8 .簡述甲基紅試驗的原理。某些細菌能分解葡萄糖產牛丙酮酸,并進一步分解丙酮酸產生甲酸、乙酸、乳酸等使pH下降至4. 5以下,加入甲基紅試劑后呈紅色,為陽性。若分解葡萄糖產酸量少,或產生的酸進一步分解為其他非酸性 物質,則pH在6. 2以上,加入甲基紅試劑后呈黃色,為陰性9 .簡述金黃色葡萄球菌的最低鑒定特征。革二陽性球菌,呈葡萄串狀排列;血平板上產生透明溶血環(huán);觸酶試10 .簡述細菌鑒定的基本思路。是首先進行革蘭染色以區(qū)分細菌的基本形態(tài)和革蘭染色性。根據形態(tài)和染色性的不同做一些大的分類試驗,如革
35、蘭陰性桿菌做氧化酶試驗,革蘭陽性球菌做觸酶試驗,其后再進行不同的生化試驗,必要 時進一步進行血清學試驗11 .請敘述血液感染的細菌學檢驗程序無菌采集血液標本一增菌培養(yǎng) (需氧或厭氧培養(yǎng))一有菌生長取其菌落。 具體步驟:涂片、染色、鏡檢。直接藥敏試驗一初級報告。分離培養(yǎng)一觀察菌落,取菌落涂片、染色、鏡檢。純培養(yǎng)一血 清學鑒定、生化鑒定、藥敏試驗一出示報告2 .補體的牛物學活性是什么一?補體的生物學活性是指補體活化過程的產物表現出的具有擴大免疫效應的多項生物學活 性,根據這些產物的活性特點可分為五類。(1)細胞溶解作用即膜攻擊作用新生的C5b可插入就近的細胞膜上,進而有C6、C7和C9與膜上有C5
36、b組成膜攻擊單位 C5b 67 8 9n,構成可讓細胞膜內外物質自由出入的通道壁,造成細 胞或細菌的破裂死亡。(2)調理作用與病原體或免疫復合物共價鍵結合的C3b,還可與吞噬細胞表面的 C3b受體(CR1)結合,以促進其吞噬過程,成為補體的調理作用。(3)引起炎癥反應引起炎癥反應 (的物質),C3a、C4a、C5a有過敏毒素作用,C5a有對粒細胞的趨化作用,其綜合作用效果是導致組織充血、水腫及滲出等炎癥表現。(4)清除免疫復合物即補體(C3b)的免疫粘連作用在替代活化途徑和經典活化途徑新產生的C3b,都可以借其不穩(wěn)定的硫酯鍵斷裂,直接與病原體(或其成分)或免疫復合物中的抗原成分共價性結合。和病
37、原體或免疫復合物共價結合的C3b,可再與血小板或人精品文檔此文檔收集于網絡,如有侵權,請聯系網站刪除紅細胞表面的C3b受體(CR1)結合,使這些病原體或免疫復合物黏附于血小板或人的紅細胞上,成為免疫黏連作用。 免疫黏連作用不僅可減少血液中游離的免疫復合物及病原體,而且被黏附于血小板或紅細胞表面的免疫復合物或病原體 易被吞噬細胞捕捉吞噬,消除它們對機體的危害。(5)免疫調節(jié)作用補體可對免疫應答的各個環(huán)節(jié)發(fā)揮調節(jié)作用: C3可參與捕捉、固定抗原,使抗原被APC處理與提呈;補體成分可與多種免疫細胞相互作用,調節(jié)細胞的增殖分化例如C3b與B細胞表面 CR1結合,可使 B細胞增殖分化為漿細胞。CR2能結
38、合C3d、iC3b及C3Dg ,助B細胞活化;補體參與調節(jié)多種免疫細胞效應功能,如殺傷細胞結合C3b后可增強對靶細胞的 ADCC作用。3 .細胞因子的生物學作用特點是什么?(1)細胞因子的作用高效性:極微量(pg水平)即可發(fā)揮生物學效應。細胞因子的旁泌和自泌作用自產生分泌出來后作用于附近的細胞或自身產生細胞。(2)細胞因子作用的一時性:只在局部短時間發(fā)揮作用,臨床上細胞因子作為藥物治療時,在藥理劑量下也可隨血流分部全身發(fā)揮作用。(3)細胞因子作用的多效性:一種細胞因子可作用于多種靶細胞,發(fā)揮多種生物學效應如促進靶細胞增殖分化,增強抗感染和殺傷效應,促進或抑 制其他細胞因子的產生和細胞膜表面分子
39、的表達。(4)細胞因子作用的網絡性:不同的細胞因子之間有相互協(xié)同或相互制約的作用,由此構成了復雜的細胞因子免疫調節(jié)網絡,如 IL-1又到產生IL-2, IL-10抑制丫干擾素產生。4 .試論MHC在醫(yī)學上白意義。(1)器官移植:移植排斥反應的實質是免疫應答,故移植成敗的關鍵是供受者間MHC的相容程度。(2)免疫調節(jié):抗原提呈:無論外源性抗原還是內源性抗原大多需經細胞加工處理后形成抗原肽段,再 與HLA- I、n類分子結合,HLA-抗原肽復合物共同表達于細胞膜表面,才能被CD8+T細胞或CD4+T細胞所識別;MHC限制性:在免疫應答過程中各種免疫細胞如Th、M。、B及TC細胞間的相互作用均受到不
40、同的MHC分子的調控或嚴格的約束。例如,TC細胞識別病毒抗原或腫瘤抗原時必須識別自身MHC- I類分子;而 Th細胞識別的抗原肽必須是與自身 MHC- n類分子結合者。這種特定T細胞識別特定類別自身 MHC分子而發(fā)揮效應的現象稱 MHC限制 性;決定免疫應答能力:在 HLA- n類基因區(qū)有一免疫應答基因Ir可對免疫應答進行調節(jié),包括增進免疫應答或抑制免疫應答。(3)HLA與疾病的關系:人類 MHC即HLA復合體是目前已知的最復雜多態(tài)性的人類基因系統(tǒng),在人類 證實強直性脊柱炎與 B27有強相關性后,通過群體的流行病學調查和家系調查發(fā)現許多內分泌疾病、類風濕性疾病、 自身免疫性疾病、腫瘤和感染性疾
41、病等與HLA有關。HLA與疾病易感染相關的主要位點是DR3DR4和B27等。5 .參與體液免疫應答的細胞有哪些?如何發(fā)揮作用?胸腺依賴抗原(TD-Ag)次級B細胞產生抗體有下述細胞參加反應。(1)抗原呈遞細胞(APC):主要是單核-巨噬細胞類將處理的抗原提呈給Th細胞并分泌IL-1 , IL-6活化T細胞。(2)Th細胞:經抗原刺激活化后分泌細胞因子,特別是Th2細胞分泌IL-4、IL-5、IL-10等,除輔助B細胞活化分化變成漿細胞產生抗體,還有調節(jié)抗體產生的作用。(3)B細胞:經抗原次級后變成漿細胞合成并分泌抗體,在對應抗原再次應答時B細胞是主要的抗原提呈細胞 (APC),可處理并提呈抗原
42、給 Th細胞,使之活化。(4)非胸腺依賴抗原(TI-Ag)直接刺激B 細胞產生IgM類抗體,如脂多糖或肺炎球菌莢膜多糖抗原可直接與B細胞表面的Ig結合,刺激其分化為漿細胞。6 .什么是自身抗原?它是怎樣產牛的?有何臨床意義?一般來說,自身物質對自身沒有抗原性。在一定條件下,自身物 質對自身發(fā)揮抗原作用,引起免疫應答,稱之為自身抗原。自身抗原產生的原因:(1)隱蔽的自身抗原:某些自身物質在正常條件下與血流和免疫系統(tǒng)相對隔絕,稱為隱蔽的自身抗原。外傷、感染或手術不甚等原因,使這些物質進入血 流,引起自身免疫應答。例如眼外傷后,眼葡萄膜色素和眼晶體蛋白釋放可引起交感性眼炎和過敏性眼炎;精子抗原 釋放
43、引起男性不育癥;甲狀腺球蛋白釋放引起變態(tài)反應性甲狀腺炎;腦脊液和周圍神經的髓鞘蛋白的釋放引起脫髓鞘 腦脊髓炎和外周神經炎。(2)修飾的自身抗原:在病原微生物感染、電離輻射或藥物等影響下,自身組織分子改變,形 成新的抗原決定簇或暴露出內部的隱蔽的決定簇,成為自身抗原刺激機體產生免疫應答,引起自身免疫疾病。例如, 服用氨基比林或甲基多巴,可改變粒細胞或紅細胞表面的化學結構,出現新的抗原決定簇,從而引起粒細胞減少癥或 自身免疫性溶血性貧血。7 .試述抗原抗體反應的基本原理??贵w能夠特異性結合是基于兩種分子間的結構互補性與親和性,這兩種特性是由抗原與抗體分子的一級結構決定的。抗原抗體反應分為兩個階段:
44、第一階段為抗原與抗體發(fā)生特異性結合階段,此階段 反應快,僅需幾秒鐘至幾分鐘, 但不出現可見反應。 第二階段為可見反應階段,抗原抗體復合物在環(huán)境因素 (如電解質、pH、溫度、補體)的影響下,進一步交聯和聚集,表現為凝集、沉淀、溶解、補體結合介導的生物現象等肉眼可見的反 應。此階段反應慢,往往需要數分鐘至數小時。8 .簡述HVGR和GVHR的豐要區(qū)別。HVGR是由宿主體內致敏的免疫效應細胞和抗體對移植物進行攻擊,導致移植GVHR是由移植物中的抗原特異性淋巴細胞,即“過路”淋巴細胞識別宿主抗原而發(fā)生的一種排斥反應。這種反應不僅導致移植失敗,而且還能給受者造成嚴重后果。9 . T細胞亞群檢測有何臨床意
45、義_?T細胞亞群檢測已作為臨床輔助診斷與研究的一種重要手段,對各種疾病如自身免 精品文檔此文檔收集于網絡,如有侵權,請聯系網站刪除疫病、免疫缺陷病、病毒感染、惡性腫瘤等的發(fā)生、發(fā)展、臨床療效考核和預后估計都具有極其重要的意義;對了解 機體的免疫狀態(tài)也有十分重要的意義。10 .簡述ELISA的基本原理。使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。使抗原或抗體與某種 酶連接成酶標抗原或酶標抗體,這種酶標抗原或酶標抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,令受檢標 本(測定其中的抗原或抗體)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗
46、原抗體復合物與其他物質分開,最后結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質的量成一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化形成有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據顏色反應的 深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,故可極大地放大反應效果,從而使測定方法達到很高的敏感度。 11. 試述直接 Coomb' s試驗與間接 Coomb' s試驗的共同點與不同點。直接 Coomb' s試驗主要用于檢查已吸附在紅細胞上的不完全抗體。 此試驗常用于新生兒溶血癥、自身免疫性溶血癥及特發(fā)性自身免疫性貧血等檢查。間接Coomb's試驗主要用于檢查血清中游離的
47、不完全抗體。此試驗多用于檢測母體Rh(D)抗體,可及早發(fā)現和避免新生兒溶血癥的發(fā)生。亦可對紅細胞抗原不相容性輸血所產生的血型抗體進行檢測。12 .簡述ELISA雙抗體夾心法的操作步驟。(1)特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體:洗滌除去未結合的抗體及雜質。(2)加受檢標本:使之與固相抗體接觸反應一段時間,讓標本中的抗原與固相載體上的抗體結合,形成固相抗原 抗體復合物。洗滌除去其他未結合物質。(3)加酶抗體:使固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。徹底洗滌未結合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢物質的量呈正相關。(4)加底物:夾心復合物中的酶催化底物成為有色產物。根據顏色反應的程
48、度進行該抗原的定性或定量。13 . ELISA操作的注意事項有哪些 ?(1)加樣:在ELISA中除了包被外,一般需進行45次加樣。在定性測定中有時不 強調加樣量的準確性,例如規(guī)定為加樣1滴。此時應該使用相同口徑的滴管,保持準確的加樣姿勢,使每滴液體的體積基本相同。在定量測定中則加樣量應力求準確。標本和結合物的稀釋液應按規(guī)定配制。加樣時應將液體加在孔底, 避免加在孔壁上部,并注意不可出現氣泡。(2)孵育:在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應,即加標本和加結合物后,此時反應的溫度和時間應按規(guī)定的要求,保溫容器最好是水浴箱,可使溫度迅速平衡。各ELISA板不應疊在一起。為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或將平板放在底部墊有濕紗布的濕盒中。濕盒應該是金屬的,傳熱容易。如用保溫箱,空濕 盒應預先放在其中,以平衡溫度,這一步驟在室溫較低時更為重要。加入底物后,反應時間和溫度通常不做嚴格要求。(3)洗滌:洗滌在ELISA過程中雖不是反應步驟,
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