嚴(yán)重創(chuàng)傷救治與損傷組織修復(fù)的基礎(chǔ)研究

1、項(xiàng)目名稱：嚴(yán)重創(chuàng)傷救治與損傷組織修復(fù)的基礎(chǔ)研究首席科學(xué)家：蔣建新 中國人民解放軍第三軍醫(yī)大學(xué)起止年限：2005.12至2010.11依托部門：總后勤部衛(wèi)生部一、研究內(nèi)容（一）擬解決的關(guān)鍵科學(xué)問題制約嚴(yán)重創(chuàng)傷救治水平進(jìn)一步提高的關(guān)鍵：一是傷后并發(fā)癥的預(yù)防和早期治療，二是重要組織損傷后的修復(fù)障礙，尤其是功能性修復(fù)障礙。嚴(yán)重創(chuàng)傷救治的關(guān)鍵在于預(yù)防和早期治療并發(fā)癥以及促進(jìn)損傷組織的功能性修復(fù)。業(yè)已研究表明，嚴(yán)重創(chuàng)傷后機(jī)體內(nèi)不僅發(fā)生嚴(yán)重?fù)p傷性反應(yīng)，而且機(jī)體抗損傷性反應(yīng)明顯減弱，兩者的嚴(yán)重失衡是導(dǎo)致創(chuàng)傷后感染和器官功能障礙等并發(fā)癥的重要前提，其中缺血缺氧和免疫功能紊亂是其中兩個(gè)最為關(guān)鍵的病理生理變化。過去

2、研究主要強(qiáng)調(diào)機(jī)體損傷性反應(yīng)，從“治”的角度，尋找解決傷后并發(fā)癥的措施。對機(jī)體抗損傷性反應(yīng)并未引起足夠重視，正因?yàn)檫@樣，目前缺乏阻斷或減輕創(chuàng)傷后并發(fā)癥的有效措施。造成傷殘的常見原因分別為中樞和外周神經(jīng)損傷、骨愈合障礙、體表大面積創(chuàng)面的疤痕過度增生（尤其是重要功能部位）。近年來，人們對這些重要組織受損后進(jìn)行再生修復(fù)的細(xì)胞、分子機(jī)制和局部微環(huán)境的影響因素有了許多新的認(rèn)識。尤其是干細(xì)胞研究、組織工程技術(shù)等高新技術(shù)的快速發(fā)展與應(yīng)用，使許多過去難以達(dá)到的組織修復(fù)和再生目標(biāo)將成為可能。本項(xiàng)目將在前五年已取得的重要進(jìn)展和一批具有創(chuàng)新性研究成果的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步圍繞如何提高嚴(yán)重創(chuàng)傷救治水平和損傷組織修復(fù)質(zhì)量兩個(gè)核

3、心問題，擬解決以下兩個(gè)關(guān)鍵科學(xué)問題：創(chuàng)傷早期機(jī)體自身抗損傷機(jī)制及其防治器官功能障礙、感染的關(guān)鍵調(diào)控環(huán)節(jié)；創(chuàng)傷后幾種重要組織修復(fù)的細(xì)胞與分子機(jī)制和促進(jìn)其功能性修復(fù)的新措施，減輕重度腦創(chuàng)傷后腦組織進(jìn)一步損傷的關(guān)鍵技術(shù)與理論?？傮w思路如下：傷殘損傷性反應(yīng)­嚴(yán)重創(chuàng)傷全身反應(yīng)局部反應(yīng)抗損傷性反應(yīng)¯組織修復(fù)“結(jié)構(gòu)”修復(fù)功能修復(fù)修復(fù)障礙感 染器官功能障礙缺血、缺氧免疫功能紊亂死亡創(chuàng)傷后并發(fā)癥及傷殘發(fā)生的基本過程（二）主要研究內(nèi)容圍繞上述兩個(gè)關(guān)鍵科學(xué)問題，重點(diǎn)進(jìn)行四方面研究：1、嚴(yán)重創(chuàng)傷早期內(nèi)源性抗損傷反應(yīng)的啟動機(jī)制和調(diào)控作用主要研究嚴(yán)重創(chuàng)傷早期抗損傷保護(hù)反應(yīng)的啟動機(jī)制、變化規(guī)律；揭示抗損

4、傷性保護(hù)反應(yīng)在預(yù)防或減輕創(chuàng)傷早期缺血缺氧損害和免疫功能紊亂中的作用；探尋通過增強(qiáng)內(nèi)源性保護(hù)機(jī)制防治嚴(yán)重創(chuàng)傷早期損害的新措施；2、嚴(yán)重創(chuàng)傷后天然免疫功能紊亂的分子機(jī)制與感染易患性研究主要研究嚴(yán)重創(chuàng)傷后天然免疫功能紊亂發(fā)生的機(jī)理及其預(yù)防感染的調(diào)控途徑；揭示嚴(yán)重創(chuàng)傷后感染易患性與遺傳背景差異性的內(nèi)在聯(lián)系，篩選出影響膿毒癥發(fā)生的“易感基因型”；結(jié)合機(jī)體自身保護(hù)機(jī)制的調(diào)控作用，探討綜合防治創(chuàng)傷感染的新措施。3、重要組織修復(fù)障礙的機(jī)制與重度腦創(chuàng)傷救治研究主要研究皮膚創(chuàng)面修復(fù)細(xì)胞表型改變與修復(fù)結(jié)局的關(guān)系（重點(diǎn)是疤痕增生的機(jī)制與誘導(dǎo)汗腺再生研究）；結(jié)合骨骼發(fā)育，篩選參與骨折修復(fù)的分子靶標(biāo)，尋找促進(jìn)難愈性骨折愈

5、合、防止骨不連的新措施；研究周圍神經(jīng)損傷后神經(jīng)元、雪旺氏細(xì)胞與神經(jīng)生長因子促進(jìn)神經(jīng)生長的調(diào)控措施；明確重度腦創(chuàng)傷后早期防止腦組織繼發(fā)性損傷和促進(jìn)其功能康復(fù)的關(guān)鍵技術(shù)與分子機(jī)制。4、成體干細(xì)胞對創(chuàng)傷修復(fù)的應(yīng)用基礎(chǔ)研究 主要探討創(chuàng)傷微環(huán)境因素（壁龕細(xì)胞對話及體液因子等）對成體干細(xì)胞參與組織修復(fù)的影響及調(diào)控機(jī)制；建立干細(xì)胞安全擴(kuò)增新技術(shù)，并進(jìn)行功能修飾，使干細(xì)胞既促進(jìn)創(chuàng)傷愈合，又具有抗感染和降低免疫原性功能，以增強(qiáng)其促修復(fù)能力；明確成體干細(xì)胞再生皮膚汗腺的關(guān)鍵技術(shù)與機(jī)制。二、預(yù)期目標(biāo)（一）總體目標(biāo)1、堅(jiān)持基礎(chǔ)研究與臨床治療緊密結(jié)合的研究模式，貫徹以預(yù)防創(chuàng)傷并發(fā)癥發(fā)生和提高愈合質(zhì)量為主的指導(dǎo)思想，以解

6、決降低嚴(yán)重創(chuàng)傷傷死和傷殘率為研究目標(biāo)，進(jìn)一步闡明嚴(yán)重創(chuàng)傷并發(fā)癥防治的關(guān)鍵基礎(chǔ)理論，揭示與傷殘相關(guān)的幾種組織過度修復(fù)或修復(fù)障礙的分子機(jī)制，提出相應(yīng)的創(chuàng)新理論。提出預(yù)防和早期治療創(chuàng)傷并發(fā)癥，以及促進(jìn)損傷組織實(shí)現(xiàn)結(jié)構(gòu)和功能重建的新措施或方案，力爭使嚴(yán)重創(chuàng)傷的治療水平取得新突破，從而使我國創(chuàng)傷研究居國際先進(jìn)水平。2、進(jìn)一步提高燒傷等優(yōu)勢領(lǐng)域的研究水平，加快具有堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)的交通傷、復(fù)合傷為代表的常見創(chuàng)傷的研究步伐，基礎(chǔ)研究與臨床救治密切結(jié)合，達(dá)到國際先進(jìn)，某些方面達(dá)國際領(lǐng)先水平。3、以“創(chuàng)傷、燒傷與復(fù)合傷國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室”為依托，帶動我國創(chuàng)傷醫(yī)學(xué)研究的基地建設(shè)，培養(yǎng)一批高水平的中青年科學(xué)家，特別是基礎(chǔ)研究和

7、臨床實(shí)踐相結(jié)合的臨床科學(xué)家（Physician scientist），造就一支具有國際競爭實(shí)力的中青年創(chuàng)傷研究隊(duì)伍。（二）五年預(yù)期目標(biāo)1、揭示創(chuàng)傷后內(nèi)源性保護(hù)反應(yīng)的啟動機(jī)制，確認(rèn)一組最早參與內(nèi)源性保護(hù)性反應(yīng)的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子和蛋白質(zhì)，為上調(diào)內(nèi)源性保護(hù)反應(yīng)提供分子靶點(diǎn)。明確內(nèi)源性保護(hù)反應(yīng)對創(chuàng)傷后細(xì)胞缺血缺氧性損害和感染的負(fù)調(diào)控作用和機(jī)制。提出“內(nèi)源性保護(hù)機(jī)制的始動學(xué)說”。2、進(jìn)一步明確嚴(yán)重創(chuàng)傷后神經(jīng)內(nèi)分泌、創(chuàng)傷血清因子、T細(xì)胞等對組織巨噬細(xì)胞功能的影響，揭示創(chuàng)傷后免疫功能紊亂的分子機(jī)制，以及創(chuàng)傷后體內(nèi)是否存在功能特異的“免疫抑制分子”,并了解其結(jié)構(gòu)、功能和細(xì)胞來源。明確一組與創(chuàng)傷感染易患性密切相關(guān)的

8、基因多態(tài)性譜，并闡明其功能意義。3、從發(fā)育學(xué)、比較生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)以及分子生物學(xué)方面明確皮膚組織在損傷修復(fù)過程中過度纖維化的發(fā)生機(jī)制、關(guān)鍵調(diào)控因素，力爭研制出既促進(jìn)創(chuàng)傷愈合又減少纖維化（瘢痕愈合）的的新措施或藥物。4、利用轉(zhuǎn)基因、基因敲除小鼠和基因組學(xué)等技術(shù)篩選參與骨折、周圍和中樞神經(jīng)損傷修復(fù)的分子靶標(biāo)，初步闡明FGFRs、NgR、NGF等分子在骨折、周圍和中樞神經(jīng)損傷修復(fù)機(jī)制中的作用和分子機(jī)制。提出1-2項(xiàng)促進(jìn)骨折（特別是難愈骨折）、外周神經(jīng)損傷和大腦損傷修復(fù)的新措施。5、闡明創(chuàng)傷條件下成體干細(xì)胞生物學(xué)特性的變化及相關(guān)機(jī)制，驗(yàn)證成體干細(xì)胞與周圍細(xì)胞對話決定其分化的理論假說。建立成體干細(xì)胞安

9、全擴(kuò)增的技術(shù)體系。建立增強(qiáng)成體干細(xì)胞向傷部遷移定植、向功能細(xì)胞分化、以及通過修飾成體干細(xì)胞以降低其免疫排斥反應(yīng)和增強(qiáng)抗感染能力的技術(shù)體系。建立成體干細(xì)胞再生皮膚汗腺的關(guān)鍵技術(shù)。6、在國際本領(lǐng)域主要雜志上發(fā)表學(xué)術(shù)論文75-100篇，其中IF>10的相關(guān)期刊發(fā)表論文5-8篇，申請10-15項(xiàng)發(fā)明和實(shí)用專利。三、研究方案（一）總體研究思路、技術(shù)路線及可行性業(yè)已研究表明，嚴(yán)重創(chuàng)傷從受傷至出現(xiàn)并發(fā)癥都要經(jīng)歷創(chuàng)傷反應(yīng)期，這一發(fā)展階段不僅需要一定時(shí)間（數(shù)小時(shí)至數(shù)天），還具有一定的可逆性，甚至可預(yù)防性。創(chuàng)傷反應(yīng)固然十分復(fù)雜，包括損傷性和抗損傷性兩大類，但從主動減輕創(chuàng)傷后繼發(fā)性損傷，預(yù)防并發(fā)癥發(fā)生的角度看

10、，研究抗損傷性反應(yīng)（內(nèi)源性保護(hù)反應(yīng)）顯得更為重要。細(xì)胞缺血缺氧和免疫功能紊亂是引發(fā)創(chuàng)傷并發(fā)癥的兩個(gè)最基本的病理生理變化。組織損傷或缺失后再生修復(fù)障礙是傷殘的原因，常見于中樞和外周神經(jīng)損傷、骨愈合障礙、體表大面積創(chuàng)面的疤痕過度增生（尤其是重要功能部位）。因此，本項(xiàng)目在前一個(gè)973項(xiàng)目已取得的重要進(jìn)展和一批創(chuàng)新成果的基礎(chǔ)上，一方面重點(diǎn)抓住抗損傷保護(hù)反應(yīng)和天然免疫反應(yīng)，深入研究減輕或防止創(chuàng)傷后細(xì)胞缺血缺氧損害和免疫功能紊亂，以降低并發(fā)癥的相關(guān)理論和方法；另一方面，圍繞與傷殘密切相關(guān)的幾種重要組織損傷，系統(tǒng)研究促進(jìn)其功能性修復(fù)的細(xì)胞與分子機(jī)制，或防止其損傷后繼發(fā)性損傷、促進(jìn)其功能康復(fù)的關(guān)鍵技術(shù)與機(jī)制。

11、為最大限度地降低嚴(yán)重創(chuàng)傷后并發(fā)癥的發(fā)生率和死亡率以及傷殘率提供創(chuàng)新的理論指導(dǎo)和有力的防治措施。在技術(shù)路線上，本項(xiàng)目堅(jiān)持機(jī)制研究與防治研究相聯(lián)系、基礎(chǔ)研究與應(yīng)用研究相對應(yīng)、創(chuàng)傷醫(yī)學(xué)與其它相關(guān)學(xué)科相結(jié)合的思路，首先，利用系統(tǒng)生物學(xué)的新理念，結(jié)合分子生物學(xué)、基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)新技術(shù)，從基因、分子、細(xì)胞、器官和整體的綜合層次上深化研究嚴(yán)重創(chuàng)傷并發(fā)癥防治的基礎(chǔ)理論和組織修復(fù)障礙導(dǎo)致傷殘的細(xì)胞與分子機(jī)制；其次，充分利用前一個(gè)973項(xiàng)目建立的嚴(yán)重創(chuàng)傷病人標(biāo)本庫和臨床研究基地，加強(qiáng)基礎(chǔ)研究與臨床實(shí)際的緊密結(jié)合，確保我們的研究問題來源于臨床，即從臨床走向?qū)嶒?yàn)室（From bed to bench）；第三，突出

12、應(yīng)用基礎(chǔ)研究，結(jié)合高新生物技術(shù)（如干細(xì)胞研究、分子設(shè)計(jì)與重建、蛋白質(zhì)重組、組織工程技術(shù)等），探索早期防治嚴(yán)重創(chuàng)傷并發(fā)癥和降低傷殘的新措施，確保研究成果能更好地解決臨床實(shí)際問題，即從實(shí)驗(yàn)室返回臨床（From bench to bed）?？尚行陨?，近十余年來，項(xiàng)目參加單位一直致力于創(chuàng)傷基礎(chǔ)研究，國家曾多次重點(diǎn)投入。通過一批重大項(xiàng)目，曾提出了系列創(chuàng)新理論（如復(fù)合傷的“復(fù)合效應(yīng)”理論、火器傷的“血流擾動”學(xué)說和“遠(yuǎn)達(dá)效應(yīng)”理論、沖擊傷的 “過牽效應(yīng)”機(jī)制等）以及多種臨床救治技術(shù)（如早期切痂和大張異體皮開洞嵌入小片自體皮移植治療嚴(yán)重?zé)齻⒃缙谀c道喂養(yǎng)、選擇性腸道去污染防治創(chuàng)傷感染、膈神經(jīng)、多組神經(jīng)及健側(cè)

13、頸7神經(jīng)根移位治療臂叢根性撕脫傷等）。特別是前一個(gè)973項(xiàng)目的研究，在嚴(yán)重創(chuàng)傷后并發(fā)癥發(fā)生機(jī)制和損傷組織修復(fù)均有創(chuàng)新性發(fā)現(xiàn)，為本項(xiàng)目奠定了堅(jiān)實(shí)的理論和工作基礎(chǔ)。在研究條件上，創(chuàng)傷、燒傷與復(fù)合傷實(shí)驗(yàn)室為國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，國家重點(diǎn)學(xué)科3個(gè)，省部級重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室7個(gè)，擁有目前國內(nèi)一流的創(chuàng)傷模擬和基礎(chǔ)研究的技術(shù)平臺，為本項(xiàng)目提供了豐富的資源保障和強(qiáng)有力的技術(shù)支撐。在研究隊(duì)伍上，我國創(chuàng)傷醫(yī)學(xué)領(lǐng)域已形成了一支老、中、青三結(jié)合，基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、理工科學(xué)人才相整合的優(yōu)秀團(tuán)隊(duì)，其中不僅有基礎(chǔ)研究的學(xué)術(shù)帶頭人，而且還有臨床創(chuàng)傷專家，包括多名院士，一批國家杰出青年基金獲得者和長江計(jì)劃學(xué)者。曾有多人在國際上獲獎，擔(dān)任重

14、要學(xué)術(shù)職務(wù)。通過十余年來的合作研究和廣泛的學(xué)術(shù)交流，已完全具備多單位、跨學(xué)科聯(lián)合公關(guān)的團(tuán)隊(duì)精神和創(chuàng)新能力，為本項(xiàng)目提供了強(qiáng)大的人力保障。綜上所述，本項(xiàng)目選題瞄準(zhǔn)創(chuàng)傷醫(yī)學(xué)研究前沿，抓住了制約目前創(chuàng)傷醫(yī)學(xué)研究的“瓶頸”問題，幾十年來，項(xiàng)目各參加單位不僅已積累了雄厚的科研基礎(chǔ)，而且在研究隊(duì)伍和實(shí)驗(yàn)條件上均具有從事前沿課題研究的實(shí)力。因此，通過5年的聯(lián)合攻關(guān)，本項(xiàng)目完全有可能達(dá)到預(yù)期目標(biāo)，使我國嚴(yán)重創(chuàng)傷的救治水平實(shí)現(xiàn)新的突破。（二）創(chuàng)新性點(diǎn)1、以機(jī)體內(nèi)源性抗損傷保護(hù)機(jī)制為切入點(diǎn)，提出并闡明內(nèi)源性保護(hù)機(jī)制受損是啟動創(chuàng)傷后器官功能障礙、感染的中心環(huán)節(jié)，即“內(nèi)源性保護(hù)機(jī)制始動學(xué)說”，建立治療創(chuàng)傷并發(fā)癥的“預(yù)

15、防醫(yī)學(xué)”新理念。 2、以吞噬細(xì)胞為核心，率先提出天然免疫功能紊亂和遺傳背景是決定創(chuàng)傷感染發(fā)生發(fā)展的首要因素，闡明創(chuàng)傷后感染發(fā)生的啟動機(jī)制和關(guān)鍵調(diào)控環(huán)節(jié)，為防治創(chuàng)傷感染提供新思路。3、揭示創(chuàng)傷后幾種重要組織修復(fù)障礙的分子機(jī)制，闡明“以細(xì)胞損害為關(guān)鍵環(huán)節(jié)愈合諸因素失調(diào)”致創(chuàng)傷難愈的新學(xué)說，并應(yīng)用細(xì)胞、組織工程等高新技術(shù)，實(shí)現(xiàn)皮膚、骨骼等組織功能性修復(fù)，如建立成體干細(xì)胞再生皮膚汗腺的技術(shù)。（三）課題設(shè)置圍繞上述四個(gè)研究內(nèi)容，設(shè)置五個(gè)課題，分別為：課題一： 內(nèi)源性保護(hù)反應(yīng)減輕嚴(yán)重創(chuàng)傷早期缺血缺氧損害的基礎(chǔ)研究主要研究內(nèi)容：篩選反映細(xì)胞內(nèi)源性保護(hù)機(jī)制啟動的標(biāo)志轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子基因或蛋白，分析其表達(dá)調(diào)控方式和

16、相關(guān)信號途徑, 以及這些蛋白早期表達(dá)的生物學(xué)意義；研究骨架相關(guān)蛋白在細(xì)胞內(nèi)源性保護(hù)反應(yīng)啟動中的作用；研究與血管舒縮功能和細(xì)胞抗損傷作用有關(guān)的細(xì)胞內(nèi)源保護(hù)系統(tǒng)和保護(hù)分子在嚴(yán)重創(chuàng)傷后的啟動和變化規(guī)律，血管平滑肌細(xì)胞啟動內(nèi)源性保護(hù)機(jī)制對血管反應(yīng)性的影響，研究激活血管平滑肌細(xì)胞內(nèi)源保護(hù)機(jī)制提高嚴(yán)重創(chuàng)傷后血管低反應(yīng)性的措施；研究內(nèi)源性保護(hù)反應(yīng)對創(chuàng)傷后血管通透性的調(diào)控作用機(jī)制，尋找改善缺血缺氧所致血管通透性增高的方法；研究內(nèi)源性保護(hù)反應(yīng)對缺血缺氧過程中細(xì)胞能量代謝、氧化損傷和細(xì)胞凋亡的調(diào)控作用；探討天然食物成份、中藥成分、特殊營養(yǎng)素對內(nèi)源性細(xì)胞保護(hù)機(jī)制的調(diào)控作用及保護(hù)效應(yīng)，篩選幾種有效的外源性抗損傷物質(zhì)，

17、研究形成增強(qiáng)內(nèi)源性細(xì)胞保護(hù)機(jī)制防治嚴(yán)重創(chuàng)傷缺血缺氧損害的新措施，提高嚴(yán)重創(chuàng)傷救治水平。目標(biāo)：（1）從新的角度深化對嚴(yán)重創(chuàng)傷早期損害機(jī)制的認(rèn)識，揭示機(jī)體損傷和抗損傷力量的變化規(guī)律，尋找重要的內(nèi)源性保護(hù)分子，提供內(nèi)源性減輕缺血缺氧損害的新靶點(diǎn)，提出并證明“嚴(yán)重創(chuàng)傷后內(nèi)源性保護(hù)機(jī)制受損是缺血缺氧損害的關(guān)鍵”的學(xué)術(shù)思想。（2）闡明嚴(yán)重創(chuàng)傷早期細(xì)胞內(nèi)源性保護(hù)反應(yīng)的啟動機(jī)制及信號途徑，明確內(nèi)源性保護(hù)反應(yīng)對創(chuàng)傷后血管反應(yīng)性和通透性，缺血缺氧過程中細(xì)胞能量代謝、氧化損傷和細(xì)胞凋亡的調(diào)控作用，提出增加血管反應(yīng)性、降低通透性、改善缺血缺氧細(xì)胞能量代謝、減輕氧化損傷和細(xì)胞凋亡的新靶點(diǎn)。（3）闡明外源性細(xì)胞保護(hù)物質(zhì)通

18、過增強(qiáng)內(nèi)源性細(xì)胞保護(hù)機(jī)制發(fā)揮效應(yīng)的分子機(jī)制，提出防治嚴(yán)重創(chuàng)傷缺血缺氧損害的新措施和方案，提高嚴(yán)重創(chuàng)傷救治水平。 （4）國外SCI收錄雜志發(fā)表論文15篇以上，力爭論文累計(jì)IF大于50。承擔(dān)單位：第三軍醫(yī)大學(xué)創(chuàng)傷、燒傷與復(fù)合傷國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室課題負(fù)責(zé)人：黃躍生、劉良明經(jīng)費(fèi)比例：19課題二：嚴(yán)重創(chuàng)傷后天然免疫功能紊亂的分子機(jī)制與感染易患性研究主要研究內(nèi)容：探討嚴(yán)重創(chuàng)傷后天然免疫系統(tǒng)功能紊亂的分子機(jī)制與調(diào)控途徑；以感染發(fā)生過程中起關(guān)鍵作用的天然免疫細(xì)胞表面的模式識別受體、細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子、促炎細(xì)胞因子和抗炎細(xì)胞因子等為候選基因，系統(tǒng)探討基因組多態(tài)性與嚴(yán)重創(chuàng)傷后感染易患性的內(nèi)在聯(lián)系，在此基礎(chǔ)上篩選出影響

19、膿毒癥發(fā)生的“易感基因型”，進(jìn)一步利用基因克隆、點(diǎn)突變和基因轉(zhuǎn)染等技術(shù)，明確“易感基因型”的功能意義。探討內(nèi)源性保護(hù)機(jī)制對創(chuàng)傷感染的負(fù)調(diào)控作用；從拮抗病原菌相關(guān)模式分子、抑制過度炎癥反應(yīng)以及增強(qiáng)機(jī)體自身保護(hù)機(jī)制等層次，探討綜合防治創(chuàng)傷感染的新措施。目標(biāo)：（1）明確嚴(yán)重創(chuàng)傷時(shí)神經(jīng)內(nèi)分泌、創(chuàng)傷血清因子、T細(xì)胞等對組織巨噬細(xì)胞功能的影響，揭示創(chuàng)傷后免疫功能紊亂的分子機(jī)制，以及創(chuàng)傷后體內(nèi)是否存在功能特異的“免疫抑制分子”,并了解其結(jié)構(gòu)、功能和細(xì)胞來源。（2）明確內(nèi)源性保護(hù)機(jī)制在創(chuàng)傷感染發(fā)病過程中的調(diào)控作用，在此基礎(chǔ)上，建立起1-2項(xiàng)增強(qiáng)嚴(yán)重創(chuàng)傷病人內(nèi)源性保護(hù)機(jī)制、防止創(chuàng)傷感染發(fā)生的新措施（3）篩選出一

20、些與創(chuàng)傷感染易患性密切相關(guān)的基因多態(tài)性譜，并闡明其功能意義，初步研制出用于預(yù)測創(chuàng)傷感染易患性的基因多態(tài)性芯片。（4）爭取申報(bào)國家發(fā)明專利2-3項(xiàng)。（5）發(fā)表15篇以上影響因子>2的SCI論文，力爭論文累計(jì)影響因子大于50 (其中前兩年發(fā)表SCI論文累計(jì)影響因子大于20, 后三年累計(jì)影響因子大于30)。承擔(dān)單位：第三軍醫(yī)大學(xué)創(chuàng)傷、燒傷與復(fù)合傷國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室解放軍總醫(yī)院304臨床部課題負(fù)責(zé)人：蔣建新、姚詠明經(jīng)費(fèi)比例：24課題三：皮膚損傷過度纖維化修復(fù)和誘導(dǎo)汗腺再生的實(shí)驗(yàn)研究主要研究內(nèi)容：從發(fā)育學(xué)和比較生物學(xué)領(lǐng)域研究誘導(dǎo)不同發(fā)育階段組織干細(xì)胞向組織修復(fù)細(xì)胞表型轉(zhuǎn)變的基本規(guī)律；進(jìn)一步確證和深入研

21、究細(xì)胞去分化（逆分化）現(xiàn)象的本質(zhì)和規(guī)律以及細(xì)胞分化調(diào)控紊亂對不同修復(fù)結(jié)局的影響；闡明在發(fā)育和損傷條件下多能干細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)樾迯?fù)細(xì)胞表型與功能變化的特征；從基因表達(dá)差異、細(xì)胞外基質(zhì)、真皮模板作用、細(xì)胞（生長）因子以及免疫因子等探討環(huán)境因素對不同組織修復(fù)細(xì)胞表型及功能改變影響的分子基礎(chǔ)及其對過度纖維化發(fā)生的作用；根據(jù)細(xì)胞表型誘導(dǎo)改變理論和技術(shù)，探索誘導(dǎo)成體干細(xì)胞（表皮干細(xì)胞、脂肪干細(xì)胞、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞等）向治療目的細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的相關(guān)理論和建立促進(jìn)皮膚由解剖修復(fù)到功能性修復(fù)（再生汗腺以及皮脂腺等皮膚附件）的實(shí)用措施和方法。目標(biāo)：(1) 提出有關(guān)皮膚組織修復(fù)和再生的創(chuàng)新性理論和建立起相關(guān)的治療技術(shù)和方法；

22、在實(shí)驗(yàn)條件下使創(chuàng)面瘢痕愈合的質(zhì)量有一定的改善；力爭實(shí)現(xiàn)離體或在體MSCs或表皮干細(xì)胞向汗腺細(xì)胞分化并再生出汗腺或汗腺樣結(jié)構(gòu)組織。(2) 提出既能促進(jìn)組織修復(fù)又減少纖維化（瘢痕愈合）的新措施。(3) 在國際本領(lǐng)域重要雜志發(fā)表論文20篇以上，其中總IF值大于55，出版學(xué)術(shù)專著2部。承擔(dān)單位：解放軍總醫(yī)院304臨床部上海第二醫(yī)科大學(xué)瑞金醫(yī)院課題負(fù)責(zé)人：付小兵、陸樹良經(jīng)費(fèi)比例：20 課題四：骨骼、周圍神經(jīng)損傷修復(fù)機(jī)制與措施以及重度腦創(chuàng)傷救治研究主要研究內(nèi)容：建立在軟骨、骨組織敲除FGFRs的小鼠模型，研究FGFRs在骨發(fā)育，特別是骨折愈合中的作用和機(jī)制，探索骨發(fā)育和骨折愈合間的異同；篩選參與骨折修復(fù)的

23、分子靶標(biāo)，并探索通過生物（包括篩選調(diào)節(jié)FGFRs活性的分子）、物理、組織工程骨等措施來激活局部骨骼再發(fā)育，促進(jìn)骨折愈合、防治骨不連、骨缺損的新措施；探討周圍神經(jīng)傷后神經(jīng)元胞體的再生性反應(yīng)規(guī)律和雪旺氏細(xì)胞等的功能活性與軸突再生的關(guān)系。從神經(jīng)營養(yǎng)因子（NTFs）信號變化規(guī)律與調(diào)控機(jī)制等方面研究周圍神經(jīng)再生修復(fù)的細(xì)胞和分子機(jī)制。探索用電磁場、神經(jīng)營養(yǎng)因子、激活態(tài)雪旺氏細(xì)胞、人工神經(jīng)等措施促進(jìn)神經(jīng)再生修復(fù)的新方法；研究低溫腦保護(hù)對重度顱腦創(chuàng)傷的救治作用，以及低溫治療減輕腦創(chuàng)傷后腦組織繼發(fā)性損傷的細(xì)胞與分子機(jī)制。目標(biāo)：(1) 初步明確FGFRs在骨骼發(fā)育，特別是在骨折修復(fù)機(jī)制中的作用、分子機(jī)制及其之間的

24、異同，初步建立從模擬及促進(jìn)骨骼發(fā)育角度加快骨折愈合，防治骨愈合延遲和骨缺損的新策略。(2) 明確NgR在腦損傷修復(fù)機(jī)制中的作用、機(jī)制；篩選參與腦損傷修復(fù)的分子靶標(biāo)。明確骨髓基質(zhì)干細(xì)胞在促進(jìn)大腦損傷修復(fù)中的作用及應(yīng)用方法。(3) 進(jìn)一步明確周圍神經(jīng)損傷后再生修復(fù)的細(xì)胞分子機(jī)制，建立新型人工神經(jīng)，并探索促進(jìn)再生修復(fù)的新策略與新方法。(4) 提出包括人工組織工程骨骼等在內(nèi)的促進(jìn)骨折、防治骨缺損及外周神經(jīng)損傷和大腦損傷修復(fù)的措施2-3項(xiàng)。(5) 申請國家專利2-4項(xiàng)，在國外學(xué)術(shù)雜志發(fā)表論文10-15篇（IF10的文章2-3篇）。承擔(dān)單位：第三軍醫(yī)大學(xué)創(chuàng)傷、燒傷與復(fù)合傷國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 上海復(fù)旦大學(xué)華山醫(yī)

25、院 課題負(fù)責(zé)人：陳林、勞杰經(jīng)費(fèi)比例：18課題五：成體干細(xì)胞參與創(chuàng)傷修復(fù)的基礎(chǔ)與應(yīng)用基礎(chǔ)研究主要研究內(nèi)容：研究創(chuàng)傷微環(huán)境多種因素對ASC參與組織修復(fù)過程的啟動信號、趨化定植、增殖調(diào)控、功能分化作用及相關(guān)機(jī)制，設(shè)計(jì)多種模型驗(yàn)證ASC定向分化取決于創(chuàng)傷微環(huán)境因素（如與周圍細(xì)胞“對話”）的假說；檢測幾種ASC在不同的體外培養(yǎng)條件下的擴(kuò)增效率、干細(xì)胞性狀的保持情況、端粒酶長度、增殖活力、多向分化潛能，分析是否老化或自發(fā)分化或成瘤轉(zhuǎn)化，并據(jù)以進(jìn)一步深入研究相關(guān)機(jī)制；以上述基礎(chǔ)研究結(jié)果為指導(dǎo)，創(chuàng)建幾種應(yīng)用ASC促進(jìn)創(chuàng)傷組織修復(fù)的實(shí)用新技術(shù)，優(yōu)化體外安全擴(kuò)增技術(shù)體系、增強(qiáng)ASC向傷部趨化定植、同時(shí)賦予抗感染能

26、力、延緩或降低免疫排斥反應(yīng)等技術(shù)體系。目標(biāo)：(1) 闡明創(chuàng)傷微環(huán)境因素（壁龕細(xì)胞對話與體液因子等）調(diào)變ASC啟動修復(fù)、遷移定植和定向分化等生物學(xué)特性及其機(jī)制，特別是驗(yàn)證ASC與周圍細(xì)胞對話決定其分化的理論假說。(2) 建立并優(yōu)化干細(xì)胞的體外擴(kuò)增條件，獲得干細(xì)胞安全擴(kuò)增和功能評判相關(guān)分子和技術(shù)方法，為安全正確使用干細(xì)胞提供依據(jù)。(3) 通過功能修飾等途徑，建立提高修復(fù)效率、增強(qiáng)抗感染能力、降低免疫排斥反應(yīng)等新技術(shù)23項(xiàng)(4) 發(fā)表15篇以上IF>2的論文，力爭論文累計(jì)IF大于40。(5) 通過上述研究，為我國將ASC用于創(chuàng)傷修復(fù)提供創(chuàng)新理論和實(shí)效安全的技術(shù)。承擔(dān)單位：第三軍醫(yī)大學(xué)創(chuàng)傷、燒傷

27、與復(fù)合傷研究國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室課題負(fù)責(zé)人：粟永萍經(jīng)費(fèi)比例：19（四）課題間的相互關(guān)系以及與總體目標(biāo)、五年目標(biāo)的關(guān)系上述五個(gè)課題在研究內(nèi)容上既相對獨(dú)立，又在不同層次和高度上有機(jī)整合的課題。課題一“內(nèi)源性保護(hù)反應(yīng)減輕嚴(yán)重創(chuàng)傷早期缺血缺氧損害的相關(guān)基礎(chǔ)研究”和課題二“嚴(yán)重創(chuàng)傷后天然免疫功能紊亂的分子機(jī)制與感染易患性研究”，是針對嚴(yán)重創(chuàng)傷后發(fā)生在全身的、并與引發(fā)并發(fā)癥最密切相關(guān)的兩個(gè)病理變化-缺血缺氧和免疫功能紊亂，深入研究創(chuàng)傷并發(fā)癥的發(fā)生機(jī)制，旨在通過調(diào)理嚴(yán)重創(chuàng)傷早期機(jī)體抗損傷保護(hù)反應(yīng)和免疫功能，達(dá)到預(yù)防或減輕嚴(yán)重創(chuàng)傷早期缺血缺氧損害和防止創(chuàng)傷感染的目的，從而使嚴(yán)重創(chuàng)傷病人通過預(yù)防性早期治療，就能迅速好

28、轉(zhuǎn)治愈，同時(shí)為促進(jìn)局部損傷組織修復(fù)創(chuàng)造有利的全身?xiàng)l件。通過上述兩個(gè)課題的研究，提出并闡明機(jī)體抗損傷保護(hù)機(jī)制受損是啟動創(chuàng)傷后器官功能障礙、感染的中心環(huán)節(jié)，即“內(nèi)源性保護(hù)機(jī)制始動學(xué)說”，揭示創(chuàng)傷后感染發(fā)生的啟動機(jī)制和關(guān)鍵調(diào)控環(huán)節(jié)，在此基礎(chǔ)上，建立治療創(chuàng)傷并發(fā)癥的“預(yù)防醫(yī)學(xué)”新理念。課題三“皮膚損傷過度纖維化修復(fù)和誘導(dǎo)汗腺再生的實(shí)驗(yàn)研究”、課題四“骨骼、周圍神經(jīng)損傷修復(fù)機(jī)制、與措施和重度腦創(chuàng)傷救治研究”和課題五“成體干細(xì)胞對創(chuàng)傷修復(fù)的應(yīng)用基礎(chǔ)研究”，是針對引發(fā)傷殘的幾種重要組織修復(fù)問題進(jìn)行深入研究，目的是為盡可能降低傷殘?zhí)峁┘夹g(shù)支撐和有效措施，同時(shí)為防止創(chuàng)傷后并發(fā)癥消除局部的誘發(fā)因素。通過課題三與課

29、題四的系統(tǒng)研究，可進(jìn)一步揭示創(chuàng)傷后幾種重要組織修復(fù)障礙的分子機(jī)制，闡明“以細(xì)胞損害為關(guān)鍵環(huán)節(jié)愈合諸因素失調(diào)”致創(chuàng)傷難愈的新學(xué)說。尤其在促進(jìn)燒傷大面積創(chuàng)面、骨折等功能性修復(fù)的新措施上（如研制出減少疤痕形成的藥物，構(gòu)建出皮膚汗腺）實(shí)現(xiàn)突破。課題五是為成體干細(xì)胞用于創(chuàng)傷修復(fù)提供創(chuàng)新理論和實(shí)效安全的技術(shù)，以解決常規(guī)促愈措施或自身難于修復(fù)的受損組織的修復(fù)問題?？傊?，五個(gè)課題間相互有機(jī)聯(lián)系，都立足于一個(gè)共同的目標(biāo)，即為最大限度地降低嚴(yán)重創(chuàng)傷的傷死率和傷殘率提供創(chuàng)新理論指導(dǎo)和有效的防治措施。五個(gè)課題間相互關(guān)系見下圖：并發(fā)癥傷 殘?zhí)岣邍?yán)重創(chuàng)傷治療水平課題一課題二課題三課題四課題五四、年度計(jì)劃研究內(nèi)容預(yù)期目標(biāo)第

30、一年初步明確參與創(chuàng)傷后細(xì)胞內(nèi)源性保護(hù)機(jī)制啟動的標(biāo)志基因或分子，研究單核細(xì)胞向炎性巨噬細(xì)胞以及向樹突狀細(xì)胞分化失衡的分子機(jī)理，誘導(dǎo)不同發(fā)育階段組織干細(xì)胞（主要是成體干細(xì)胞）向組織修復(fù)細(xì)胞（包括成纖維細(xì)胞、表皮細(xì)胞以及血管內(nèi)皮細(xì)胞等）表型轉(zhuǎn)變的基本規(guī)律以及與修復(fù)結(jié)局的關(guān)系。觀察一些重要生長因子促進(jìn)骨折和周圍神經(jīng)損傷后再生的作用。研究創(chuàng)傷微環(huán)境因素對ASC生物學(xué)性狀和功能的影響篩選出參與嚴(yán)重創(chuàng)傷后抗損傷保護(hù)反應(yīng)的重要分子，闡明創(chuàng)傷導(dǎo)致單核細(xì)胞分化失衡的主要發(fā)生環(huán)節(jié)，闡明不同發(fā)育階段成體干細(xì)胞向組織修復(fù)細(xì)胞分化調(diào)控機(jī)制及其影響因素。明確參與骨折修復(fù)和周圍神經(jīng)再生修復(fù)的一些重要分子。揭示創(chuàng)傷局部體液因素作用于DMSC后的差異表達(dá)基因譜。第二年研究