探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化 及血球計數(shù)板的構造和使用 ppt課件

1、探求培育液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化探求培育液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化 探求培育液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化是一項有著多方面探求培育液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化是一項有著多方面意義和價值的探求活動。在這個探求活動中用到了意義和價值的探求活動。在這個探求活動中用到了4個科學方個科學方法：法：1數(shù)學模型法；數(shù)學模型法；2抽樣檢測法；抽樣檢測法；3顯微察看法；顯微察看法；4微生物培育法。此外，學生經過親身研討一個真實的種微生物培育法。此外，學生經過親身研討一個真實的種群，加深了對種群數(shù)量變化知識的了解，并且培育了搜集、群，加深了對種群數(shù)量變化知識的了解，并且培育了搜集、整理、分析數(shù)據的才干。整理、

2、分析數(shù)據的才干。1.基基 礎礎 回回 扣扣1酵母菌酵母菌 酵母菌是單細胞真核生物。酵母菌是單細胞真核生物。 生長周期短，增殖速度快，生長周期短，增殖速度快， 還可以用酵母菌作為實驗資料研討探求還可以用酵母菌作為實驗資料研討探求酵母菌的呼吸方式，判別細胞的死活探求膜的酵母菌的呼吸方式，判別細胞的死活探求膜的透性透性2種群數(shù)量的變化種群數(shù)量的變化 種群數(shù)量的變化包括增長、動搖、穩(wěn)定、下降種群數(shù)量的變化包括增長、動搖、穩(wěn)定、下降等等 “S型曲線有一個型曲線有一個K值，即環(huán)境包容量。值，即環(huán)境包容量。 種群數(shù)量的增長也遭到許多環(huán)境要素如溫度、種群數(shù)量的增長也遭到許多環(huán)境要素如溫度、培育液的培育液的pH

3、、培育液的營養(yǎng)種類和濃度、代謝產物、培育液的營養(yǎng)種類和濃度、代謝產物等的影響。等的影響。3血球計數(shù)板血球計數(shù)板 血球計數(shù)板是一種專門用于計算較大單細胞微生物的一血球計數(shù)板是一種專門用于計算較大單細胞微生物的一種儀器。種儀器。 計數(shù)時，常采用樣方法。計數(shù)時，常采用樣方法。4探求性實驗探求性實驗 探求實驗設計時要遵照的原那么：科探求實驗設計時要遵照的原那么：科學性原那么、可行性原那么、對照原那么、學性原那么、可行性原那么、對照原那么、單一變量原那么和平行反復原那么。單一變量原那么和平行反復原那么。培育液中酵母菌種群數(shù)量與時間的變化關系培育液中酵母菌種群數(shù)量與時間的變化關系1實驗原理：實驗原理： 種

4、群的數(shù)量變化有一定的規(guī)律。在理想條件下，種種群的數(shù)量變化有一定的規(guī)律。在理想條件下，種群呈群呈“J型增長，在有限的環(huán)境下，種群呈型增長，在有限的環(huán)境下，種群呈“S型增長。型增長。 酵母菌生長周期短，增殖速度快且世代間不重疊，酵母菌生長周期短，增殖速度快且世代間不重疊，在實驗室條件下，用液體培育基培育酵母菌，可以察看在實驗室條件下，用液體培育基培育酵母菌，可以察看酵母菌種群數(shù)量隨時間變化的情況。酵母菌種群數(shù)量隨時間變化的情況。對于壓在小方格界限上的酵母菌應取相鄰兩邊及頂角對于壓在小方格界限上的酵母菌應取相鄰兩邊及頂角計數(shù)。計數(shù)。 2引出培育液配制、滅菌、接種和培育等步驟引出培育液配制、滅菌、接種

5、和培育等步驟l 培育液配制：配制質量分數(shù)為培育液配制：配制質量分數(shù)為5的葡萄糖溶液的葡萄糖溶液葡萄糖葡萄糖20g，1000 mL水，分裝到水，分裝到5個燒杯中個燒杯中200mL/燒杯燒杯l 滅菌：用高壓蒸汽滅菌鍋將培育液和取樣、計數(shù)滅菌：用高壓蒸汽滅菌鍋將培育液和取樣、計數(shù)時所用的滴管分別滅菌。貼標簽。時所用的滴管分別滅菌。貼標簽。l 接種：接種時要在酒精燈附近，用滅菌干凈的接種：接種時要在酒精燈附近，用滅菌干凈的1mL刻度吸管每次汲取刻度吸管每次汲取0.1mL酵母菌母液，往每個燒杯酵母菌母液，往每個燒杯中參與。留意滴加量不要太多，防止初始菌數(shù)過多。中參與。留意滴加量不要太多，防止初始菌數(shù)過多

6、。l 培育：將燒杯置于培育：將燒杯置于 28的恒溫箱中培育的恒溫箱中培育3設計實驗：設計實驗：A組為實驗組，裝培育液組為實驗組，裝培育液10 mL，酵母菌母液，酵母菌母液0.1mL,環(huán)境溫度環(huán)境溫度28。B組裝培育液組裝培育液10 mL，酵母菌母液，酵母菌母液0.1mL,環(huán)境溫度環(huán)境溫度5，與，與A組構成溫度條件對照。組構成溫度條件對照。C組不裝培育液，只裝無菌水組不裝培育液，只裝無菌水10mL,酵母菌母液酵母菌母液0.1mL,環(huán)境溫度環(huán)境溫度28，與，與A組構成營養(yǎng)條件對照。組構成營養(yǎng)條件對照。4計數(shù)計數(shù)計數(shù)：首先取樣，每計數(shù)：首先取樣，每 天取樣時間大體一致，并要遵守無天取樣時間大體一致，

7、并要遵守無菌操作規(guī)范。每次取樣前要試管振蕩搖勻，正確地運用菌操作規(guī)范。每次取樣前要試管振蕩搖勻，正確地運用1mL刻度吸管將刻度吸管將lmL酵母菌培育液移入酵母菌培育液移入1支干凈的試管里，支干凈的試管里，然后用滴管汲取然后用滴管汲取1滴培育液滴在已蓋在血球計數(shù)板網格上滴培育液滴在已蓋在血球計數(shù)板網格上的蓋玻片的邊緣，待培育液自行滲入并充溢網格后，再放的蓋玻片的邊緣，待培育液自行滲入并充溢網格后，再放在顯微鏡下進展細胞計數(shù)，后立刻將數(shù)據填到記錄表格中。在顯微鏡下進展細胞計數(shù)，后立刻將數(shù)據填到記錄表格中。如如 記數(shù)時發(fā)現(xiàn)，細胞數(shù)較多，不易分辨，汲取的樣液該當記數(shù)時發(fā)現(xiàn)，細胞數(shù)較多，不易分辨，汲取的

8、樣液該當稀釋。稀釋。參考參考1：一次實驗數(shù)據記錄表：一次實驗數(shù)據記錄表 參考參考2：出：出A、B、C各個處置的曲線圖各個處置的曲線圖 3.討論1在計數(shù)前，還應有哪些步驟？需留意些什么？2針對針對“培育液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化，培育液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化，有人提出了新的問題，某同窗按下表完成了有關實驗。有人提出了新的問題，某同窗按下表完成了有關實驗。血球計數(shù)板的構造和運用血球計數(shù)板是由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的血球計數(shù)板是由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的.玻片玻片中有四條下凹的槽中有四條下凹的槽,構成三個平臺構成三個平臺.中間的平臺較寬中間的平臺較寬,其中間又被其中間又被一

9、短橫槽隔為兩半一短橫槽隔為兩半,每半邊上面每半邊上面,刻有一個方格網刻有一個方格網.方格網上刻有方格網上刻有9個大方格個大方格,其中只需中間的一個大方格為計數(shù)室其中只需中間的一個大方格為計數(shù)室,供微生物計供微生物計數(shù)用數(shù)用.這一大方格的長和寬各為這一大方格的長和寬各為1mm,深度為深度為0.1mm,其體積為其體積為0.1mm3. 計數(shù)室通常有兩種規(guī)格計數(shù)室通常有兩種規(guī)格.一種是大方格內分為一種是大方格內分為16中格中格,每一中格每一中格又分為又分為25小格小格;另一種是大方格內分為另一種是大方格內分為25中格中格,每一中格又分為每一中格又分為16小格小格.但是不論計數(shù)室是哪一種構造但是不論計數(shù)

10、室是哪一種構造;它們都有一個共同的特它們都有一個共同的特點點,即每一大方格都是由即每一大方格都是由1625=2516=400個小方格組成個小方格組成,見圖見圖.以計數(shù)酵母菌為例以計數(shù)酵母菌為例(1)用血球計數(shù)板計數(shù)酵母菌懸液的酵母菌個數(shù)用血球計數(shù)板計數(shù)酵母菌懸液的酵母菌個數(shù).(2)樣品稀釋的目的是便于酵母菌懸液的計數(shù)樣品稀釋的目的是便于酵母菌懸液的計數(shù),以每小以每小方格內含有方格內含有4-5個酵母細胞為宜個酵母細胞為宜,普通稀釋普通稀釋10倍即可倍即可. (3)將血球計數(shù)板用擦鏡紙擦凈將血球計數(shù)板用擦鏡紙擦凈,在中央的計數(shù)室上加在中央的計數(shù)室上加蓋公用的厚玻片蓋公用的厚玻片.(4)將稀釋后的酵

11、母菌懸液將稀釋后的酵母菌懸液,用吸管汲取一滴置于蓋玻用吸管汲取一滴置于蓋玻片的邊緣片的邊緣,使菌液漸漸滲入使菌液漸漸滲入,多余的菌液用吸水紙汲取多余的菌液用吸水紙汲取,捎待片刻捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球計數(shù)室內使酵母菌全部沉降到血球計數(shù)室內.血球計數(shù)板的運用血球計數(shù)板的運用(5)計數(shù)時計數(shù)時,假設運用假設運用16格格25格規(guī)格的計數(shù)室格規(guī)格的計數(shù)室,要按要按對角線位對角線位,取左上取左上,右上右上,左下左下,右下右下4個中格個中格(即即100個個小格小格)的酵母菌數(shù)的酵母菌數(shù).假設規(guī)格為假設規(guī)格為25格格16格的計數(shù)板格的計數(shù)板,除了取其除了取其4個對角方位外個對角方位外,還需再數(shù)中央的

12、一個中格還需再數(shù)中央的一個中格(即即80個小方格個小方格)的酵母菌數(shù)的酵母菌數(shù). (6)當遇到位于大格線上的酵母菌當遇到位于大格線上的酵母菌,普通只計數(shù)大方普通只計數(shù)大方格的上方和右方線上的酵母細胞格的上方和右方線上的酵母細胞(或只計數(shù)下方和左或只計數(shù)下方和左方線上的酵母細胞方線上的酵母細胞).(7)對每個樣品計數(shù)三次對每個樣品計數(shù)三次,取其平均值取其平均值,按以下公式計按以下公式計算每算每1ml菌液中所含的酵母菌個數(shù)菌液中所含的酵母菌個數(shù). 3.計算公式計算公式(1)16格格25格的血球計數(shù)板計算公式格的血球計數(shù)板計算公式:酵母細胞數(shù)酵母細胞數(shù)/ml=100小格內酵母細胞個數(shù)小格內酵母細胞個數(shù)/100400104稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù)(2)25格格x16格的血球計數(shù)板計算公式格的血球計數(shù)板計算公式:酵母細胞數(shù)酵母細胞數(shù)/ml=80小格內酵母細胞個數(shù)小格內酵母細胞個數(shù)/80400104稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù)4.血球計數(shù)板的清潔血球計數(shù)板的清潔血球汁數(shù)板運用后血球汁