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1、第二十二章 流式細(xì)胞儀分析技術(shù)及運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)流式細(xì)胞術(shù)(Flow Cytometry, (Flow Cytometry, FCM)FCM)第一節(jié)第一節(jié) 流式細(xì)胞儀的原理流式細(xì)胞儀的原理 Principle of Flow Cytometer臺(tái)式流式細(xì)胞儀臺(tái)式流式細(xì)胞儀臺(tái)式流式細(xì)胞儀臺(tái)式流式細(xì)胞儀臺(tái)式流式細(xì)胞儀臺(tái)式流式細(xì)胞儀落地式流式細(xì)胞儀落地式流式細(xì)胞儀一、任務(wù)原理一、任務(wù)原理一一 液流系統(tǒng)液流系統(tǒng) 細(xì)胞樣品和包裹在外的鞘液,細(xì)胞樣品和包裹在外的鞘液,保證細(xì)胞逐個(gè)以一樣的速度、一樣保證細(xì)胞逐個(gè)以一樣的速度、一樣的軌跡檢測(cè)區(qū)。單細(xì)胞流技術(shù)。的軌跡檢測(cè)區(qū)。單細(xì)胞流技術(shù)。二激發(fā)光與光速成形系統(tǒng)二激

2、發(fā)光與光速成形系統(tǒng) 多為氬離子氣體激光多為氬離子氣體激光488nm,用圓柱形透鏡聚焦成高用圓柱形透鏡聚焦成高15um、寬、寬57um橢圓形光斑橢圓形光斑檢測(cè)區(qū)。長(zhǎng)軸垂檢測(cè)區(qū)。長(zhǎng)軸垂直細(xì)胞流和激光束中心軸,短軸與細(xì)直細(xì)胞流和激光束中心軸,短軸與細(xì)胞軸一致并重疊。胞軸一致并重疊。 保證每一細(xì)胞遭到保證每一細(xì)胞遭到一致的光照。單細(xì)胞照明技術(shù)。一致的光照。單細(xì)胞照明技術(shù)。三細(xì)胞信號(hào)檢測(cè)與分析和處置系統(tǒng)三細(xì)胞信號(hào)檢測(cè)與分析和處置系統(tǒng) 細(xì)胞產(chǎn)生散射光和熒光信號(hào)細(xì)胞產(chǎn)生散射光和熒光信號(hào)360360度發(fā)度發(fā)射。分光鏡和濾光片將不同波長(zhǎng)的光射。分光鏡和濾光片將不同波長(zhǎng)的光分開(kāi),光電倍增管及電子線路接納并分開(kāi),光電倍增管及電子線路接納并轉(zhuǎn)化為電信號(hào),模數(shù)轉(zhuǎn)化器量化為數(shù)轉(zhuǎn)化為電信號(hào),模數(shù)轉(zhuǎn)化器量化為數(shù)字信號(hào)由計(jì)算機(jī)采集、分析、顯示和字信號(hào)由計(jì)算機(jī)采集、分析、顯示和存儲(chǔ)。單細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)。存儲(chǔ)。單細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)。 二、流式細(xì)胞儀檢測(cè)二、流式細(xì)胞儀檢測(cè) 1.1.散射光測(cè)定散射光測(cè)定 2.2.熒光測(cè)定熒光測(cè)定 3.3.細(xì)胞分選原理細(xì)胞分選原理 第二節(jié)第二節(jié) 數(shù)據(jù)的顯示與分析數(shù)據(jù)的顯示與分析一、信道值一、信道值二、

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