菌落總數(shù)和大腸菌群

1、菌落總數(shù)和大腸菌群微微 生生 物物 檢檢 驗(yàn)驗(yàn) 流流 程程 圖圖 無(wú)菌取樣 樣品均質(zhì) 樣液稀釋菌落總數(shù)的測(cè)定菌落總數(shù)的測(cè)定 菌落總數(shù)是指食品檢樣經(jīng)過(guò)處理，在一定條件下培養(yǎng)后，所得1g或1mL檢樣中所含細(xì)菌菌落的總數(shù) 菌落總數(shù)的檢驗(yàn)程序菌落總數(shù)的檢驗(yàn)程序 樣品的處理和稀釋樣品的處理和稀釋充分振搖或研磨25g或25ml檢樣225mL稀釋液含有玻璃珠的滅菌玻璃瓶或乳缽1:10稀釋液。1ml1ml1ml9ml水1:1009ml水1:10009ml水1:10000倒平板熔化已滅菌的培養(yǎng)基并冷卻至45左右倒平板，每種培養(yǎng)基每個(gè)稀釋度各三只平板。 培養(yǎng)及計(jì)數(shù)培養(yǎng)及計(jì)數(shù)培養(yǎng)條件：倒置于371溫箱內(nèi)培養(yǎng)482h

2、。計(jì)數(shù)時(shí)間：到達(dá)規(guī)定培養(yǎng)時(shí)間，應(yīng)立即計(jì)數(shù)。如果不能立即計(jì)數(shù)，應(yīng)將平板放置于0-4，但不得超過(guò)24h。計(jì)平皿中菌落數(shù)：肉眼觀察，必要時(shí)用放大鏡檢查。記下各平板的菌落總數(shù)，求出同稀釋度的各平板平均菌落數(shù)。 大腸桿菌的檢測(cè)大腸桿菌的生物學(xué)特性大腸桿菌的生物學(xué)特性 大腸埃希氏菌習(xí)慣稱為大腸桿菌，分類于腸桿菌科，歸屬于埃希氏菌屬。 大腸桿菌為人和動(dòng)物腸道中的常居菌，一般多不致病，在一定條件下可引起腸道外感染。 大腸桿菌的檢驗(yàn)方法大腸桿菌的檢驗(yàn)方法 檢驗(yàn)程序檢驗(yàn)程序乳糖發(fā)酵試驗(yàn)乳糖發(fā)酵試驗(yàn)分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)證實(shí)試驗(yàn)證實(shí)試驗(yàn)樣品稀釋后，選樣品稀釋后，選擇三個(gè)稀釋度，擇三個(gè)稀釋度，每個(gè)稀釋度接種每個(gè)稀釋度接種三

3、管乳糖膽鹽發(fā)三管乳糖膽鹽發(fā)酵管。酵管。361培培養(yǎng)養(yǎng)482h，觀察，觀察是否產(chǎn)氣。是否產(chǎn)氣。 將產(chǎn)氣發(fā)酵管培將產(chǎn)氣發(fā)酵管培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種于伊紅養(yǎng)物轉(zhuǎn)種于伊紅美藍(lán)瓊脂平板上，美藍(lán)瓊脂平板上，361培養(yǎng)培養(yǎng)18-24h，觀察菌落形，觀察菌落形態(tài)。態(tài)。挑取平板上的可挑取平板上的可疑菌落，進(jìn)行革疑菌落，進(jìn)行革蘭氏染色觀察。蘭氏染色觀察。同時(shí)接種乳糖發(fā)同時(shí)接種乳糖發(fā)酵管酵管361培養(yǎng)培養(yǎng)242h，觀察產(chǎn)，觀察產(chǎn)氣情況。氣情況。 根據(jù)證實(shí)為根據(jù)證實(shí)為大腸桿菌陽(yáng)大腸桿菌陽(yáng)性的管數(shù)，性的管數(shù)，查查MPN表，表，報(bào)告每報(bào)告每100ml（g）大腸菌群的大腸菌群的MPN值。值。 取產(chǎn)酸產(chǎn)氣的發(fā)酵管取產(chǎn)酸產(chǎn)氣的發(fā)酵管中培養(yǎng)

4、液在伊紅美蘭中培養(yǎng)液在伊紅美蘭平板上進(jìn)行劃線平板上進(jìn)行劃線取有核心和帶金取有核心和帶金屬光澤的深紫色屬光澤的深紫色菌落進(jìn)行革蘭氏菌落進(jìn)行革蘭氏染色染色乳糖蛋白胨培養(yǎng)液乳糖蛋白胨培養(yǎng)液鏡檢（鏡檢（革蘭氏陰性菌革蘭氏陰性菌）37 培養(yǎng)培養(yǎng)48h證實(shí)產(chǎn)氣證實(shí)產(chǎn)氣（陽(yáng)性）（陽(yáng)性）結(jié)果與否結(jié)果與否37 培養(yǎng)培養(yǎng)24h37培養(yǎng)培養(yǎng)24h 乳糖膽鹽發(fā)酵管大腸桿菌（右管）產(chǎn)酸產(chǎn)氣 伊紅美藍(lán)平板分離分離將乳糖發(fā)酵陽(yáng)性的乳糖膽鹽發(fā)酵管和增菌液分別劃線接種麥康凱或伊紅美藍(lán)瓊脂平板；污染嚴(yán)重的檢樣，可將檢樣勻液直接劃線接種麥康凱或伊紅美藍(lán)平板，于361培養(yǎng)1824h，觀察菌落。不但要注意乳糖發(fā)酵的菌落，同時(shí)也要注意乳糖不發(fā)酵和遲緩發(fā)酵的菌落。大腸桿菌在伊紅美藍(lán)瓊大腸桿菌在伊紅美藍(lán)瓊脂平板上脂平板上 麥康凱瓊脂平板麥康凱瓊脂平板EMB平板 取其產(chǎn)氣管的培養(yǎng)物劃線接種于伊紅美藍(lán)(EMB)平板，361培養(yǎng)242h。 檢查平板上有無(wú)具黑色中心有光澤或無(wú)光澤的典型菌落。 如有典型菌落，則從每個(gè)平板上至少挑取2個(gè)典型菌落；