IGRA與結(jié)核診斷-201401

1、-干擾素釋放試驗干擾素釋放試驗在結(jié)核病診斷中的應(yīng)用在結(jié)核病診斷中的應(yīng)用 金域醫(yī)學檢驗中心 目錄： 結(jié)核病介紹 傳統(tǒng)肺結(jié)核的診療方法 伽馬干擾素釋放試驗(IGRA)介紹 IGRA與TNF-拮抗劑結(jié)核分枝桿菌進化史Digby F Warner & Valerie Mizrahi，Nat Genet. 2013 ;45(10):1107-8結(jié)核病現(xiàn)狀結(jié)核病現(xiàn)狀 全世界已有13人口約20億人感染了結(jié)核菌，現(xiàn)有結(jié)核病人2000萬，每年新發(fā)病人約900萬，每年死亡人數(shù)高達300萬。且多種耐藥病例日益增高，若不采取強有力的措施，將造成結(jié)核病更為嚴重的流行和威協(xié)。 根據(jù)世界衛(wèi)生組織的最新研究報告指出，每一秒鐘

2、就多一名結(jié)核病患者，結(jié)核病已躍升人類主要殺手之一，每年大約有200萬人死于肺結(jié)核，其中95來自發(fā)展中國家。據(jù)悉，亞洲的肺結(jié)核發(fā)病率約占全世界發(fā)病率的70。 孟加拉國、柬埔寨、中國是結(jié)核病發(fā)病最多的三個國家。如何讓才能真正消除結(jié)核??？如何讓才能真正消除結(jié)核??？接觸活動性結(jié)核病患者接觸活動性結(jié)核病患者暴露程度不足，結(jié)核桿菌被機體清除暴露程度不足，結(jié)核桿菌被機體清除-沒有癥狀,結(jié)核桿菌仍舊存在而不能被偵測 - X-光/ CT 掃描顯示正常-沒有抗體應(yīng)答-診斷困難-傳統(tǒng)的結(jié)核感染檢測只有 TST（PPD）機體被感染機體被感染受機體免疫力抑制受機體免疫力抑制沒有臨床癥狀沒有臨床癥狀終身處于感染狀態(tài)終身處

3、于感染狀態(tài)潛伏感染潛伏感染有臨床癥狀有臨床癥狀具有傳染性具有傳染性-結(jié)核桿菌可以通過涂片、培養(yǎng)檢測出-胸部的 X-光或 CT 掃描顯示異常 -肺外結(jié)核難以診斷 (特別是兒童)活動性結(jié)核活動性結(jié)核5%5%再次激活再次激活結(jié)核感染后的免疫應(yīng)答結(jié)核感染后的免疫應(yīng)答7Small PM et al, N Engl J Med, 20018 卡介苗（BCG）牛結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)13年，傳230代制備1921年卡介苗被首次應(yīng)用于人體免疫我國新出生嬰兒幾乎均接種接種3個月后做結(jié)核菌素試驗。陽性，說明接種成功，體內(nèi)已產(chǎn)生了免疫力；陰性，則說明接種未成功，還需要重新接種。 6傳統(tǒng)防治肺結(jié)核的方法傳統(tǒng)防治肺結(jié)核的方法

4、9 結(jié)核菌素皮膚試驗（TST） 低特異性：與卡介苗和大多數(shù)環(huán)境中的非結(jié)核分枝桿菌感染有交叉反應(yīng)（假陽性） 低敏感性：免疫力低下人群（HIV感染者，兒童，醫(yī)源性免疫抑制患者）較低（假陰性） 需要患者回訪 操作人員導致差異較大（接種和讀數(shù)） 導致局部炎癥和疤痕需要需要特異性、敏感性高、快速特異性、敏感性高、快速的檢測結(jié)核桿菌感染的新方法的檢測結(jié)核桿菌感染的新方法4872h6-干擾素釋放試驗（干擾素釋放試驗（IGRA）原理）原理 IGRA利用結(jié)核分枝桿菌株系表達的抗原刺激外周血單核產(chǎn)利用結(jié)核分枝桿菌株系表達的抗原刺激外周血單核產(chǎn)生生IFN- 如果受試者感染了結(jié)核菌，那么在他體內(nèi)就存在了與結(jié)核菌相匹配

5、的T細胞（即使處于潛伏期也存在）。這個時候，我們使用結(jié)核分支桿菌表達的抗原刺激T細胞，就會使得T細胞發(fā)生免疫反應(yīng)，繼而產(chǎn)生-干擾素。IGRA的特異性的特異性 IGRA實驗中使用的結(jié)核分枝桿菌基因中含有特異性的RD1區(qū)域，而BCG與大部分NTM均缺乏RD1。 RD1區(qū)域共發(fā)現(xiàn)2個對結(jié)核分枝桿菌具有很強的免疫原性早期分泌靶抗原6（ESAT-6）培養(yǎng)濾液蛋白10（CFP-10）（部分試劑添加了RD13的TB7.7）-干擾素釋放試驗流程干擾素釋放試驗流程IGRA陽性代表檢測對象存特異性的T細胞,提示體內(nèi)存在結(jié)核分枝桿菌 對于沒有癥狀但IGRA陽性的標本需要追溯是否以前患過結(jié)核，是否有結(jié)核發(fā)病的家族史，

6、工作學習環(huán)境是否有結(jié)核感染者等，可能為潛伏感染或者隱性感染。IGRA陰性一般可以排除結(jié)核感染，但除外患者免疫功能缺陷。 6結(jié)果解釋結(jié)果解釋15干擾素釋放試驗與干擾素釋放試驗與TST方法學比較方法學比較19IGRATST抗原特異性強(ESAT-6、CFR10)特異性差（PPD）重復試驗導致結(jié)果放大否是需要回訪否是時間16-20h48-72h實驗對象體外體內(nèi)診斷結(jié)果客觀（基于機器）主觀（基于觀察者）結(jié)果依據(jù)IFN-濃度硬塊的大小試驗平臺EILSA無檢測成分外周血無美國CDC指南建議，在當前應(yīng)用在當前應(yīng)用TST的所的所有情況下均可采用有情況下均可采用IGRA替代替代。多個大型公共衛(wèi)生機構(gòu)已將TST全

7、部替換為IGRA。16IGRA綜合PPV為2.7%，顯著高于TST的1.5%IGRA及及TST 預測預測 LTBI 進展為進展為 ATB的情況的情況 28項研究 隨診12-46個月 6項研究在結(jié)核高流行國家 12項研究在結(jié)核中流行國家 10項研究在結(jié)核低流行國家Diel R, Loddenkemper R, Nienhaus A17在結(jié)核病高風險人群中，IGRA綜合PPV為6.8%，TST的2.4%與與TST 相比，相比，IGRA 能夠更好地預測結(jié)核能夠更好地預測結(jié)核活動風險，尤其在結(jié)核高風險人群中。活動風險，尤其在結(jié)核高風險人群中。Diel R, Loddenkemper R, Nienha

8、us A 肺結(jié)核 胸片檢查異常的 涂陽肺結(jié)核患者密切接觸者 涂陰病人 需與其他疾病鑒別診斷的病人 肺外結(jié)核 潛伏性結(jié)核病 TNF-拮抗劑等生物制劑運用前篩查 HIV病毒感染者篩查6臨床運用臨床運用IGRA與與TNF-拮抗劑拮抗劑 TNF-（腫瘤壞死因子）是一種能夠直接殺傷腫瘤細胞而對正常細胞無明顯毒性的細胞因子。很多自身免疫疾病的發(fā)生正是由于TNF-的過度表達，因此很多醫(yī)生使用TNF-拮抗劑作為治療自身免疫病的策略之一。 TNF-可以清除體內(nèi)的結(jié)核菌，當使用 TNF-拮抗劑用于自身免疫病治療的時候，TNF-表達量急劇減少，導致潛伏性結(jié)核菌爆發(fā)。22TNF-拮抗劑拮抗劑 依那西普類風濕性關(guān)節(jié)炎強直性脊柱炎 英夫利昔單抗類風濕性關(guān)節(jié)炎強直性脊柱炎克羅恩病 阿達木單抗類風濕性關(guān)節(jié)炎丁香園，用藥助手1、產(chǎn)品屬性定義：通過定量檢測全血細胞結(jié)核桿菌特異性抗原刺激后釋放的-干擾素，判定體內(nèi)是否產(chǎn)生針對結(jié)核桿菌特異性細胞免疫反應(yīng)，用于臨床結(jié)核病的診斷。2、產(chǎn)品定位替代結(jié)核菌素試驗（TST），三級醫(yī)院，