高效液相色譜法習(xí)題

1、第12章 高效液相色譜法習(xí)題（一）選擇題單選題1. 在高效液相色譜中影響柱效的主要因素是( )A 渦流擴(kuò)散 B 分子擴(kuò)散 C 傳質(zhì)阻力 D 輸液壓力2. 在高效液相色譜中，提高柱效能的有效途徑是( )A 提高流動(dòng)相流速 B 采用小顆粒固定相C 提高柱溫 D 采用更靈敏的檢測(cè)器3. 高效液相色譜法的分離效果比經(jīng)典液相色譜法高，主要原因是( )A 流動(dòng)相種類多 B 操作儀器化 C 采用高效固定相 D 采用高靈敏檢測(cè)器4. 在高效液相色譜中，通用型檢測(cè)器是( )A 紫外檢測(cè)器 B 熒光檢測(cè)器 C 示差折光檢測(cè)器 D 電導(dǎo)檢測(cè)器5. HPLC與GC的比較，可忽略縱向擴(kuò)散項(xiàng)，這主要是因?yàn)? )A 柱前壓

2、力高 B 流速比GC的快C 流動(dòng)相黏度較小 D 柱溫低6液相色譜定量分析時(shí)，要求混合物中每一個(gè)組分都出峰的是( )A 外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法 B 內(nèi)標(biāo)法 C 面積歸一化法 D 外標(biāo)法 7下述四種方法中最適宜分離異構(gòu)體的是是( )A 吸附色譜 B 反離子對(duì)色譜C 親和色譜 D 空間排阻色譜8在液相色譜中，梯度洗脫適用于分離( )A 異構(gòu)體 B 沸點(diǎn)相近，官能團(tuán)相同的化合物 C 沸點(diǎn)相差大的試樣 D 極性變化范圍寬的試樣9在HPLC中，范氏方程中對(duì)柱效影響可以忽略不計(jì)的因素是( ) A 渦流擴(kuò)散 B 縱向擴(kuò)散 C 固定相傳質(zhì)阻力 D 流動(dòng)相傳質(zhì)阻力10當(dāng)用硅膠為基質(zhì)的填料作固定相時(shí)，流動(dòng)相的pH范圍應(yīng)為(

3、 ) A 在中性區(qū)域 B 5一8 C 1一14 D 2一811高效液相色譜法中，常用的流動(dòng)相有水、乙腈、甲醇、正己烷，其極性大小順序?yàn)? ) A 乙腈水甲醇正己烷 B 乙腈甲醇 水正己烷 C 水 乙腈甲醇正己烷 D 水甲醇 乙腈正己烷12高效液相色譜法中,使用高壓泵主要是由于( ) A 可加快流速，縮短分析時(shí)間 B 高壓可使分離效率顯著提高C 采用了細(xì)粒度固定相所致 D 采用了填充毛細(xì)管柱13液相色譜的H-u曲線（ ）。 A 與氣相色譜的一樣，存在著Hmin B H隨流動(dòng)相的流速增加而下降 C H隨流動(dòng)相的流速增加而上升 D H受u影響很小14. 與氣相色譜相比，在液相色譜中（ ）。 A 分子

4、擴(kuò)散項(xiàng)很小，可忽略不計(jì)，速率方程式由兩項(xiàng)構(gòu)成 B 渦流擴(kuò)散項(xiàng)很小，可忽略不計(jì)，速率方程式由兩項(xiàng)構(gòu)成 C 傳質(zhì)阻力項(xiàng)很小，可忽略不計(jì)，速率方程式由兩項(xiàng)構(gòu)成 D 速率方程式同樣由三項(xiàng)構(gòu)成，兩者相同15液相色譜中不影響色譜峰擴(kuò)展的因素是（ ）。A 渦流擴(kuò)散項(xiàng) B 分子擴(kuò)散項(xiàng) C 傳質(zhì)擴(kuò)散項(xiàng) D 柱壓效應(yīng)16在液相色譜中，常用作固定相又可用作鍵合相基體的物質(zhì)是（ ）。 A 分子篩 B 硅膠 C 氧化鋁 D 活性炭 17樣品中各組分的出柱順序與流動(dòng)相的性質(zhì)無關(guān)的色譜是（ ）。 A 離子交換色譜 B 環(huán)糊精色譜 C 親和色譜 D 凝膠色譜 18高效液相色譜法中，對(duì)于極性成分，當(dāng)增大流動(dòng)相的極性，可使其保留

5、值（ ）。A 不變 B 增大 C 減小 D 不一定 19在反相色譜法中，若以甲醇-水為流動(dòng)相，增加甲醇的比例時(shí)，組分的容量因子k與保留時(shí)間tR的變化為（ ）。 A k與tR增大 B k與tR減小 C k與tR不變 D k增大，tR減小多選題20下列檢測(cè)器中，不屬于高效液相色譜中的檢測(cè)器是（ ）A 紫外檢測(cè)器 B 氫火焰離子化檢測(cè)器 C 熒光檢測(cè)器 D 氮磷檢測(cè)器 E 示差折光檢測(cè)器21化學(xué)鍵合固定相具備下列何種特點(diǎn)（ ）A 固定液不易流失 B 選擇性好 C 不適用于梯度洗脫 D 柱效高 E 易和組分形成氫鍵吸附22高效液相色譜法中，不能用于梯度洗脫實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)器為（ ）A 紫外檢測(cè)器 B 示差折

6、光檢測(cè)器 C 熒光檢測(cè)器 D 電化學(xué)檢測(cè)器23梯度洗脫是將兩種或兩上性質(zhì)不同但能互溶的溶劑，按一定的程序連續(xù)改變其配比進(jìn)行洗脫，此方式可改變（ ）A 流動(dòng)相的極性 B 流動(dòng)相的溫度 C 被測(cè)組分的分離效果 D 流動(dòng)相的流速24在高效液相色譜法中，選擇流動(dòng)相時(shí)應(yīng)注意（ ）A 對(duì)被分離的組分有適宜的溶解度 B 黏度大C 與檢測(cè)器匹配 D 與固定相不互溶25評(píng)價(jià)高效液相色譜柱柱效的指標(biāo)是（ ）A 理論塔板高度 B 分配比 C 理論塔板數(shù) D 分離度 26高效液相色譜法的定量指標(biāo)為（ ）A 相對(duì)保留值 B 峰面積 C 峰高 D 半峰寬27高效液相色譜中，提高流動(dòng)相的流速可以（ ）A 減少渦流擴(kuò)散 B

7、降低保留時(shí)間C 改變相對(duì)保留值 D 增大傳質(zhì)阻力項(xiàng)28下列因素影響高效液相色譜塔板高度的是（ ）A 固定相粒度 B 流動(dòng)相的流速C 色譜柱長(zhǎng)度 D 色譜柱直徑29高效液相色譜法分離不同組分的先決條件是（ ）A 色譜柱要長(zhǎng) B 流動(dòng)相流速要大C 各組分的分配系數(shù)不等 D 理論塔板數(shù)要多（二）填空題1高效液相色譜儀一般由 、 、 、 、 和 等部分組成。2高效液相色譜中常用的檢測(cè)器主要包括 、 、 、 、 和 等。3高效液相色譜中的洗脫方式主要包括 和 ，其中 類似于氣相色譜中的程序升溫，前者連續(xù)改變的是流動(dòng)相的 ，而不是溫度。5高效液相色譜的類型主要包括 、 、 、 和 等。6在液液分配色譜中，

8、對(duì)于親水固定液采用 流動(dòng)相，即流動(dòng)相的極性 _（大于或小于）_固定相的極性稱為正相分配色譜。7正相分配色譜適用于分離 化合物、極性 （大或?。┑慕M分先流出、極性 （大或?。┑慕M分的后流出。8流動(dòng)相常用的脫氣方法有 、 和 。9高效液相色譜中的高壓泵按工作原理分為 和 兩大類。11離子對(duì)色譜法是把 加人流動(dòng)相中，被分析樣品離子與 生成中性離子對(duì)，從而增加了樣品離子在非極性固定相中的 ，使 增加，從而改善分離效果。14高效液相色譜法中，如果色譜柱超載則會(huì)造成柱效_，峰形變_。17在液相色譜中，為改善分離度并調(diào)整出峰時(shí)間，可通過改變流動(dòng)相 和_的方法達(dá)到。18在液相色譜中，速率理論方程中的 項(xiàng)很小，

9、可忽略不計(jì)，Van Deemter方程式可寫成 。19通過化學(xué)反應(yīng)，將 鍵合到 表面，此固定相稱為化學(xué)鍵合固定相。21液相色譜流動(dòng)相應(yīng)使用 （高或低）黏度溶劑，可減小溶質(zhì)的 ，有利于提高柱效。22在液相色譜中， 色譜特別適合于分離異構(gòu)體， 洗脫方式適用于分離極性變化范圍寬的試樣。 23以O(shè)DS鍵合固定相，以甲醇一水為流動(dòng)相時(shí)的色譜為 色譜（正相或反相）。24用凝膠為固定相，利用凝膠的 與被分離組分分子 間的相對(duì)大小關(guān)系，而分離、分析的色譜法，稱為空間排阻（凝膠）色譜法。凝膠色譜的選擇性只能通過選擇合適的 來實(shí)現(xiàn)。25在正相色譜中，極性的 （強(qiáng)或弱）組分先出峰，極性的 （強(qiáng)或弱）組分后出峰。（三

10、）判斷題1熒光檢測(cè)器是高效液相色譜法的通用型檢測(cè)器。（ ）2檢測(cè)器性能好壞將對(duì)組分分離產(chǎn)生直接影響。 （ ）3面積歸一化法只能適用于檢測(cè)器對(duì)所有組分均有響應(yīng)的情況。 （ ）4高效液相色譜中常采用程序升溫來提高分離效果、改善峰形、降低檢測(cè)限。（ ） 5Van Deemter方程用于高效液相色譜時(shí)，Cu項(xiàng)可以忽略不計(jì)。 （ ）6在液相色譜中為避免固定相的流失，流動(dòng)相與固定相的極性差別越大越好。（ ）7在反相高效液相色譜中，流動(dòng)相的極性較固定相大。適合于分離極性較性組分。（ ） 8流動(dòng)相的黏度影響高效液相色譜柱柱效，黏度越小，柱效越高。 （ ） 9高效液相色譜法采用梯度洗脫，是為了改變被測(cè)組分的保留

11、值，提高分離度。（ ）10示差折光檢測(cè)器是屬于通用型檢測(cè)器，適于梯度淋洗色譜。（ ）11化學(xué)鍵合固定相具有固定液不易流失，傳質(zhì)速度快，柱效高，熱穩(wěn)定性好，選擇性好等特點(diǎn)，可用梯度洗脫。（ ）12液相色譜的流動(dòng)相又稱為淋洗液，改變淋洗液的組成、極性可顯著改變組分分離效果。（ ）13高效液相色譜法中，若采用內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量時(shí)，選用的內(nèi)標(biāo)物應(yīng)為樣品中不含有的純物質(zhì)。（ ）14高效液相色譜能分離的物質(zhì)都不能用氣相色譜法分離。（ ） 15在液相色譜中，流動(dòng)相的流速大小對(duì)柱效影響不大。（ ）16液相色譜的H-u曲線與氣相色譜的H-u曲線一樣，流速都存在一個(gè)最低點(diǎn)。（ ）17液相色譜的中引起色譜擴(kuò)展的主要原因

12、是縱向擴(kuò)散項(xiàng)。（ ）18正相鍵合色譜的固定相為非（弱）極性固定相，反相色譜的固定相為極性固定相。（ ）19用凝膠色譜分離樣品時(shí)，若分離情況很差，可考慮改變流動(dòng)相的組成以改善分離效果 （ ） 20高效液相色譜中，流動(dòng)相的流速越大，傳質(zhì)阻力項(xiàng)越大，柱效越低。（ ） 21紫外檢測(cè)器因?qū)α鲃?dòng)相溫度和流速非常敏感，所以不能用于梯度洗脫。（ ）22高效液相色譜法中使用的最多的固定相為化學(xué)鍵合固定相，它是用化學(xué)反應(yīng)的方法將固定液的官能團(tuán)鍵合在載體表面上而形成的。 （ ）23化學(xué)鍵合固定相包括非極性、中等極性和極性三類，廣泛使用的十八烷基（C18或ODS）鍵合固定相為非極性，用于分離非極性及中等極性的物質(zhì)。

13、（ ）24高效液相色譜所用的流動(dòng)相，一般要經(jīng)過純化及脫氣處理。（ ）25在反相高效液相色譜法中，流動(dòng)相的極性增強(qiáng)，組分的分配比k及保留時(shí)間tR則會(huì)減少。 （ ）26高效液相色譜柱中存在的流動(dòng)相的傳質(zhì)阻力，包括在流動(dòng)的流動(dòng)相及靜態(tài)的流動(dòng)相中的傳質(zhì)阻力。（ ）（四）簡(jiǎn)答題1提高高效液相色譜的柱效的關(guān)鍵在哪里？2高效液相色譜法中化學(xué)鍵合固定相有哪些優(yōu)點(diǎn)？3簡(jiǎn)述高效液相色譜儀主要部件及其作用。4高效液相色譜常用檢測(cè)器有哪幾種，其適用范圍是什么?5從分離原理、儀器構(gòu)造及應(yīng)用范圍上簡(jiǎn)要比較氣相色譜及液相色譜的異同點(diǎn)。6液相色譜中影響色譜峰展寬的因素有哪些? 與氣相色譜相比較, 有哪些主要不同之處?7液-液

14、分配色譜和液-固分配色譜的分離原理分別是什么？分別適宜分離何種物質(zhì)？8化學(xué)鍵合相色譜、離子交換色譜、空間排阻色譜的分離機(jī)理分別是什么？分別適合分離何種物質(zhì)？ 9什么是正相色譜和反相色譜？10什么是梯度洗脫？試比較梯度洗脫與氣相色譜中的程序升溫之間的異同點(diǎn)？ （五）計(jì)算題 1用高效液相色譜法分離甲、乙兩組分，測(cè)得甲的保留時(shí)間為4.65min，半峰寬為0.15min；乙的保留時(shí)間為6.60min，半峰寬為0.22min。試計(jì)算該色譜柱對(duì)甲、乙兩組分的理論塔板數(shù)、平均理論塔板數(shù)和兩組分的分離度。 （15376，14400，14888，5.27）2在25cm長(zhǎng)的柱上分離A、B混合物，A物質(zhì)保留時(shí)間為1

15、5.20min，峰底寬1.11min；B物質(zhì)保留時(shí)間為16.63min，峰底寬1.21min；不保留物1.30min流出色譜柱。計(jì)算：（1）A、B兩峰的分離度；（2）平均理論塔板數(shù)及理論塔板高度；（3）分離度如要達(dá)到1.5，柱長(zhǎng)應(yīng)為多少？ （1.23；2999，3022，3011；27.5cm）3準(zhǔn)確稱取樣品0.100g，加入內(nèi)標(biāo)物0.100g，測(cè)得待測(cè)物A及內(nèi)標(biāo)物的峰面積分別為51430，84153。已知待測(cè)物及內(nèi)標(biāo)物的相對(duì)校正因子分別為0.80、1.00。計(jì)算組分A的百分含量。 (48.89%)4高效液相色譜法測(cè)定某復(fù)方藥M中有效成分A和B的含量，采用內(nèi)標(biāo)對(duì)比法定量。精密稱取M片劑的質(zhì)量，求得平均片重m1=0.5012g，然后稱取片劑的細(xì)粉m2=0.5010g，加入內(nèi)標(biāo)物S的質(zhì)量(ms)樣品=0.0350g，經(jīng)適當(dāng)處理制備成100mL混合溶液（樣品溶液）。另按藥典中該藥的片劑處方含量