飼料顯微鏡檢與質(zhì)量控制手冊

1、 程序： 1.將 0.1 克試樣放在陪替氏培養(yǎng)皿中。 2.加 3-5 滴二甲替甲酰胺氫氧化鉀試劑或 Sakaguchi 試劑。 陽性反應(yīng)： 1.二甲替甲酰胺氫氧化鉀試劑：吩噻嗪呈現(xiàn)出綠黃色。 2.Sakaguchi 試劑：吩噻嗪呈現(xiàn)出粉紅色。 氨丙嘧吡啶（安普洛里）試驗 第一步 第二步 第三步 第四步 第五步 第六步 第一步 注溶液 A 和溶液 B。 第二步 將溶液 A 和 B 混合。 第三步 溶液 A 和 B 的混合液。 第四步 向試樣上倒溶液 C。 第五步 將試樣的上層清液潷入溶液 A 和 B 的混合液，并混合之。 第六步 陽性反應(yīng)：溶液呈紫色。 對氨基苯胂酸或?qū)Π被诫纤徕c試驗 第一步

2、第二步 第一步 提取試樣（鹽酸、亞硝酸鈉和氨基磺酸鈉）后，加 1 毫升 N-1-萘基乙烯 二胺。 第二步 陽性反應(yīng)：呈紫色。 桿菌肽和紅霉素試驗 第一步 第二步 第三步 第四步 第五步 第六步 第一步 試驗用試劑。 第二步 用茚滿三酮溶液浸濕濾紙，在烘箱中干燥。 第三步 將試樣放到濾紙上。 第四步 加醋酸鹽緩沖液，再放進烘箱干燥。 第五步 桿菌肽的陽性反應(yīng)：呈紫粉紅色。 第六步 紅霉素的陽性反應(yīng)：呈紫粉紅色。 卡巴多試驗 第一步(a 第一步(b 第二步 第三步(a 第三步(b 第四步 第五步 卡巴多陰性和陽性反應(yīng)的比較 第一步 稱 1 克試樣，往試樣上倒 10 毫升溶液 A。 第二步 搖晃燒杯

3、，即成黃色。 第三步 加 20 毫升溶液 B。 第四步 搖晃燒杯。 第五步 卡巴多的陽性反應(yīng)：溶液呈紫色。 金霉素、土霉素和維生素 A 試驗 第一步(a 第一步(b 第一步(c 第二步(a 第二步(b 第三步(a 第三步(b 第四步(a 第四步(b 第一步 用 2-3 滴改進的 Sakaguchi 試劑處理每一試樣。 第二步 用低倍數(shù)顯微鏡觀察。 第三步 維生素 A 小粒呈現(xiàn)出與金霉素幾乎相同的顏色，但保持其球形特征。 第四步 比較同一滴試板上的金霉素、土霉素和維生素 A。 痢特靈和呋喃西林試驗 第一步(a 第一步(b 第二步(a 第二步(b 第三步(a 第三步(b 第一步 痢特靈顆粒在 Wi

4、rthmore 溶液中沉降時呈現(xiàn)藍色蹤跡。 第二步 呋喃西林顆粒在 Wirthmore 溶液中沉降時呈現(xiàn)紅色蹤跡。 第三步 比較同一滴試板上的痢特靈和呋喃西林。 青霉素或普魯卡因青霉素試驗 第一步 第二步 第三步 第一步 將少量試樣放入陪替氏培養(yǎng)皿中。 第二步 用 2-3 滴緩沖液潤濕試樣，加 2-3 滴 Ehrlich 試劑，即呈現(xiàn)濃黃色。 第三步 用低倍數(shù)顯微鏡觀察，青霉素晶粒透明，溶于 Ehrlich 試劑。 胡椒嗪試驗 第一步 第二步 吩噻嗪試驗 用二甲替甲酰胺-氫氧化鉀試劑試驗的陽性 反應(yīng)：呈現(xiàn)綠黃色 第一步 用 2-5 滴 1M 氫氧化鈉溶液潤濕濾紙。 第二步 加 2-5 滴溶液

5、A。 第三步 將試樣撒在濾紙上，即呈現(xiàn)亮紅色。 用 Sakaguchi 試劑試驗的陽性反應(yīng)：呈現(xiàn)粉紅色 維生素的快速檢測 這里介紹的檢驗方法取自文獻資料，本人已對其中某些方法作了改進以派作特 定用途。由于維生素有水溶性和脂溶性兩類，為了獲得滿意的檢測結(jié)果，須用 適當?shù)娜軇⒕S生素化合物制成溶液。為了使某種維生素的顏色特征明顯有別 于其它維生素，應(yīng)采用多種試劑，一些維生素可用與藥物、抗生素及礦物質(zhì)相 同的試驗鑒別出。維生素的細小顆粒與溶劑表面接觸的反應(yīng)區(qū)只有針尖大小， 為了觀察在如此之小的面積上所顯現(xiàn)的顏色，要使用解剖顯微鏡。記錄下顏色 反應(yīng)的形式。積累一些經(jīng)驗后，顯微鏡檢人員就有能力判別色影的

6、特點，從面 增強其應(yīng)用這些檢測方法的信心。 這類檢測方法的基本原理包括兩種已使用成功了的試劑面。一種是將濾紙放入 小陪替氏培養(yǎng)皿，用試劑潤濕，再將飼料撒在濕的表面上。這種方法顯現(xiàn)出較 大的表面積，容易用顯微鏡仔細觀察。另一種可采用白瓷滴試板，試劑可直接 混合在其空穴中。然后將試樣直接撒在試劑表面上。使用帶滴管的小試劑瓶便 于操作。不管哪種檢測方法都簡單迅速。 維生素、藥物和抗生素大多都存在于同一飼料或預(yù)混料中。附表介紹了用相同 試劑檢測的各種維生素、藥物和抗生素所發(fā)生的反應(yīng)。反應(yīng)方式應(yīng)記錄下來， 并與表中所列的對比。 維生素 A 和紅、黃卡諾費爾（carophyll） 試劑： 1.Sakagu

7、chi 試劑：將 1 克硼酸溶解于 100 毫升 80的硫酸中。 程序： 1.將 0.2 克試樣或飼料放在白瓷滴試板上。 2.加入 10 毫升 Sakaguchi 試劑。 3.維生素顯現(xiàn)深褐色。如果維生素 A 已陳，有時需將飼料即維生素樣品粉碎以 便把維生素 A 從小顆粒中釋放出來。 4.紅卡諾費爾顯現(xiàn)深綠色。 5.黃卡諾費爾顯現(xiàn)深紫羅蘭色。 維生素 A 和紅、黃卡諾費爾 采用 Sakaguchi 試劑檢測產(chǎn)生的陽性反應(yīng)：維生素 A 顯深褐色，紅卡諾費爾顯 深綠色，黃卡諾費爾顯深紫羅蘭色。 核黃素（維生素 B2） 試劑： 1.乙二胺（試劑級） 2.Sakaguchi 試劑：與維生素 A 檢測所

8、用相同。 程序： 1.樣品制備與抗壞血酸檢測一項所述相同。 2.將 1 克樣品放入白瓷滴試板。 3.用乙二胺或 Sakaguchi 試劑浸濕試樣。 4.用乙二胺試劑，核黃素顯現(xiàn)出由粉末產(chǎn)生的深黃色蹤跡。 5.用 Sakaguchi 試劑；核黃素顯現(xiàn)出桔黃色到黃色蹤跡。 核黃素檢測 核黃素晶粒結(jié)構(gòu) 用乙二胺試劑檢測， 陽性反應(yīng)顯現(xiàn)出由粉末產(chǎn)生的深黃色蹤跡。 用 Sakaguchi 試劑檢測，陽性反應(yīng)顯現(xiàn)出由粉末 產(chǎn)生的桔黃色到黃色蹤跡。 抗壞血酸（維生素 C） 試劑： 1.硝酸銀酒精溶液：將 3 克硝酸銀溶解于 100 毫升乙醇（95）中。 2.四氯化碳或氯仿。 程序： 1.用四氯化碳或氯仿將飼

9、料中的礦物質(zhì)和有機物浮選分離開來。 2.取 0.1 克礦物質(zhì)放在白瓷滴試板上。 3.用硝酸銀酒精溶液浸濕試樣。 4.沉淀物的蘭黑色表示有抗壞血酸存在。 抗壞血酸檢測 用硝酸銀酒精溶液檢測，陽性反應(yīng)產(chǎn)生蘭 黑色沉淀物。 維生素 K(甲萘醌和亞硫酸氫鈉甲萘醌 試劑： 1.乙二胺（試劑級） 2.四氯化碳 程序： 1.試樣制備與抗壞血酸檢測相同。 2.取 0.1 克樣品放在白瓷滴試板上。 3.用乙二胺試劑將樣品浸濕。 4.甲萘醌顯現(xiàn)不明亮灰綠色到黃褐色。 5.亞硫酸氫鈉甲萘醌顯現(xiàn)橄欖綠色。 甲萘醌和亞硫酸氫鈉甲萘醌檢測 用乙二胺試劑檢測甲萘醌，陽性反應(yīng)顯現(xiàn) 不明亮灰綠色黃褐色。 用乙二胺試劑檢測亞硫酸氫鈉甲萘醌，陽性反應(yīng)顯現(xiàn)橄欖綠色。 注意： （JSK 溶液的替代品） 我們收到許多讀者提出的對 JSK 溶劑混合液的需求。由于中國使用者很難從泰 國進口該溶液，所以我們已請美國加利福尼亞州大學(xué)的普蘭· 沃拉教授建議代替 JSK 的其它溶劑。下面是沃拉教授