動物實(shí)驗(yàn)基本操作技術(shù)

1、動物實(shí)驗(yàn)基本操作技術(shù)動物實(shí)驗(yàn)基本操作技術(shù)l實(shí)驗(yàn)動物的捉拿和固定方法l實(shí)驗(yàn)動物的給藥方法l實(shí)驗(yàn)動物的麻醉方法l實(shí)驗(yàn)動物的編號方法l實(shí)驗(yàn)動物的去毛方法l實(shí)驗(yàn)動物的取血方法l實(shí)驗(yàn)動物的處死方法一、實(shí)驗(yàn)動物的捉拿和固定方法1. 小鼠 捉拿時先用右手將鼠尾抓住提起，放在較粗糙的臺面或鼠籠上， 在其向前爬行時，右手向后拉尾，用左手拇指和食指抓住小鼠的兩耳和頭頸部皮膚，將其固定于左手手心中，拉直四肢并用左手無名指壓緊尾和后肢，右手即可作注射或其他實(shí)驗(yàn)操作。取尾血及尾靜脈注射時，可將小鼠固定在金屬或木制的固定器上。2. 家兔 一手抓住兔頸部的被毛與皮膚，另一手托其臀部或腹部，使其軀干的重量大部分集中在手上。兔

2、手術(shù)固定臺兔手術(shù)固定臺實(shí)驗(yàn)動物的編號方法實(shí)驗(yàn)動物的編號方法染色法染色法耳緣剪孔法耳緣剪孔法掛牌法掛牌法烙印法烙印法1、染色法：淺色動物、染色法：淺色動物 35苦味酸溶液（黃色）苦味酸溶液（黃色）0.5%中性紅或堿性品紅溶液（紅色）中性紅或堿性品紅溶液（紅色）2硝酸銀溶液（咖啡色，涂后光照硝酸銀溶液（咖啡色，涂后光照10分鐘）分鐘）煤焦油乙醇溶液（黑色）煤焦油乙醇溶液（黑色）甲紫（龍膽紫）溶液（紫色）甲紫（龍膽紫）溶液（紫色）小鼠的編號方法小鼠的編號方法 編號原則：先左后右，從上到下編號原則：先左后右，從上到下2、耳緣剪孔法（穿耳孔法）：小型動物、耳緣剪孔法（穿耳孔法）：小型動物3、掛牌法：耳標(biāo)

3、簽、項(xiàng)圈、腿圈，中、大、掛牌法：耳標(biāo)簽、項(xiàng)圈、腿圈，中、大型動物型動物4、烙印法：中、大型動物、烙印法：中、大型動物二、實(shí)驗(yàn)動物的給藥方法1. 注射法給藥：家兔耳緣靜脈注射 大、小鼠尾靜脈注射2. 攝入法給藥： 家兔、大鼠、小鼠灌胃法3. 涂布法給藥攝入法給藥 自動口服給藥 強(qiáng)制灌胃給藥：大鼠 小鼠 家兔 經(jīng)直腸給藥小鼠、大鼠灌胃法器械：灌胃器 由注射器和特殊的灌胃針構(gòu)成。小鼠灌胃針長45cm 直徑1 mm大鼠灌胃針長68cm 直徑1.2mm小鼠灌胃法 按正確方法用左手抓取和固定動物。使腹部朝上，頸部拉直。 固定后，右手持持接灌胃針的注射器吸取藥液（或事先將藥液吸好），將針頭從口角插入口腔內(nèi)，

4、然后用灌胃針頭壓其頭部，使口腔與食管成一直線，再將灌胃針頭沿上腭壁輕輕進(jìn)入，轉(zhuǎn)動針頭刺激動物吞咽，然后沿咽后壁慢慢插入食道。若動物掙扎厲害，應(yīng)退出后灌胃針，待動物安靜后重新插入。切不可強(qiáng)行插入，以免損傷食道或誤入氣管導(dǎo)致動物死亡。 當(dāng)感覺有落空感時表明灌胃針可能進(jìn)入胃內(nèi)，向外抽動注射器活塞，感覺有負(fù)壓說明灌胃針未插入氣管，此時可將藥液灌入。 成年小鼠插管深度一般是：3cm 小鼠灌胃量： 0.10.25ml/10g體重大鼠灌胃法 成年大鼠插管深度一般是：5cm 大鼠灌胃量： 12ml/100g體重兔灌胃法器械： 灌胃管（特制胃管或?qū)蚬埽?開口器（木質(zhì)紡錘狀）兔灌胃法操作方法：1.固定：動物取直

5、立或平臥體位，固定動物頭部。 直立位需2人合作，一人取坐位，將兔的軀體和下肢夾在兩腿之間，左手緊握雙耳固定頭部，右手抓住前肢，將兔固定于豎立體位。另一人將開口器橫放于兔口中，讓動物咬住開口器，即可開始插入灌胃管。兔灌胃法兔灌胃法操作方法：2.插管：將灌胃管由開口器的中央孔插入，沿上顎壁推進(jìn)約15cm。 插管過程中可將灌胃管的另一端放于一杯清水中，若連續(xù)有氣泡，說明插入呼吸道，應(yīng)立即拔出灌胃管，重新操作；若無氣泡，說明沒有插入氣管，即可開始注藥。沿上顎壁沿上顎壁推進(jìn)約推進(jìn)約15cm檢查插入部位檢查插入部位兔灌胃法 操作方法：3.給藥：灌注藥后可用少量清水將灌胃管里的藥全部沖入胃內(nèi)，以保證灌入藥的

6、劑量準(zhǔn)確。灌胃完畢后，先退出胃管，后退出開口器。關(guān)鍵詞：固定，插入（沿上顎壁），檢查關(guān)鍵詞：固定，插入（沿上顎壁），檢查家兔耳緣靜脈注射 將動物固定于實(shí)驗(yàn)臺上，剪去耳緣部位的被毛，用乙醇輕輕擦拭，耳緣靜脈即清晰可見。用左手食指和中指夾住靜脈近心端，拇指和小指夾住耳緣部分，以左手無名指和小指放在耳下作墊，待靜脈充盈后，右手持注射器使針頭盡量由靜脈遠(yuǎn)心端刺入，順血管方向平行、向心端刺入約1cm。 注射完畢抽出針頭，用棉球壓迫注射部位數(shù)分鐘，以免出血。三、實(shí)驗(yàn)動物的麻醉方法三、實(shí)驗(yàn)動物的麻醉方法u全身麻醉法：吸入法，注射法全身麻醉法：吸入法，注射法u局部麻醉法：浸潤麻醉，表面局部麻醉法：浸潤麻醉，表

7、面麻醉麻醉（一）全身麻醉法（一）全身麻醉法1、吸入法、吸入法麻醉藥：麻醉藥：u乙醚乙醚u氯仿氯仿u三氟乙烷三氟乙烷2、注射法、注射法 麻醉藥：麻醉藥：u 巴比妥類藥物巴比妥類藥物u 氯胺酮氯胺酮u 烏拉坦烏拉坦u 水合氯醛水合氯醛（一）全身麻醉法（一）全身麻醉法（二）（二） 局部麻醉法局部麻醉法u 1% 鹽酸普魯卡因鹽酸普魯卡因 局部浸潤麻醉局部浸潤麻醉u 0.022鹽酸可卡因鹽酸可卡因 表面麻醉表面麻醉麻醉藥物應(yīng)用原則：麻醉藥物應(yīng)用原則：l依據(jù)動物體重計算麻醉藥物的劑量；依據(jù)動物體重計算麻醉藥物的劑量；l依據(jù)動物生命體征變化控制給藥速度；依據(jù)動物生命體征變化控制給藥速度；l掌握寧少勿多、分階

8、段給藥的方式。掌握寧少勿多、分階段給藥的方式。針對不同的動物，選擇不同的麻醉藥物、針對不同的動物，選擇不同的麻醉藥物、實(shí)施不同的麻醉方法。實(shí)施不同的麻醉方法。麻醉具體操作：麻醉具體操作：家兔全身麻醉家兔全身麻醉麻醉劑：麻醉劑：1.5%1.5%戊巴比妥鈉，戊巴比妥鈉，2ml/kg2ml/kg前前1/21/2快速推入，快速推入，使動物能順利、快速地渡使動物能順利、快速地渡過興奮期；過興奮期；后后1/21/2速度宜慢，速度宜慢，且邊注射邊注且邊注射邊注意觀察動物的生命體征變化，當(dāng)確定已達(dá)到意觀察動物的生命體征變化，當(dāng)確定已達(dá)到麻醉效果時，即停止給藥，不必急于將剩余麻醉效果時，即停止給藥，不必急于將剩

9、余的麻醉藥物全部推入。的麻醉藥物全部推入。給藥方法：給藥方法：耳緣靜脈注射耳緣靜脈注射麻醉成功標(biāo)志麻醉成功標(biāo)志角膜反射遲鈍角膜反射遲鈍或消失或消失肢體肌肉松弛肢體肌肉松弛疼痛反射消失疼痛反射消失呼吸變深變慢呼吸變深變慢 機(jī)能實(shí)驗(yàn)學(xué)常用手術(shù)方法一、常用手術(shù)器械二、常用手術(shù)插管技術(shù) 氣管插管術(shù) 頸動脈插管術(shù) 頸靜脈插管術(shù)動物實(shí)驗(yàn)常用手術(shù)器械動物實(shí)驗(yàn)常用手術(shù)器械 粗剪 用于蛙類實(shí)驗(yàn)中的剪骨、肌肉和皮膚等粗硬組織以及家兔等實(shí)驗(yàn)動物的剪毛。 剪毛時，剪毛剪自然落下逆毛方向一次次將毛剪下即可，加力下壓或一手提起被毛，均易剪破皮膚。剪下的毛應(yīng)集中放入加有清水的污物盒內(nèi)，避免到處飛揚(yáng)。手術(shù)剪手術(shù)剪用于剪線和剪

10、開、分離組用于剪線和剪開、分離組織。有直、彎、尖頭、圓織。有直、彎、尖頭、圓頭、大、小之分，根據(jù)不頭、大、小之分，根據(jù)不同用途選用。手術(shù)操作中同用途選用。手術(shù)操作中用于沿組織間隙進(jìn)行分離用于沿組織間隙進(jìn)行分離和剪斷組織者稱組織剪，和剪斷組織者稱組織剪，一般為彎形，尖端較鈍圓；一般為彎形，尖端較鈍圓；用于剪斷縫扎線、引流物用于剪斷縫扎線、引流物或敷料等用品者稱剪線剪，或敷料等用品者稱剪線剪，為直形。為直形。眼科剪 主要用于剪血管或神經(jīng)等柔軟組織，眼科剪也有直頭與彎頭之分，正確的執(zhí)剪姿勢與手術(shù)剪相同，即用拇指與無名指持剪，食指置于手術(shù)剪上方。手術(shù)刀手術(shù)刀l 由刀片和刀柄組成，可分為大、由刀片和刀柄

11、組成，可分為大、中、小號不同類型。中、小號不同類型。l 大號大號切開皮膚；切開皮膚；l 中號中號切割臟器組織；切割臟器組織；l 小號小號切割特殊部位。切割特殊部位。l 安裝：先用持針器（或直型安裝：先用持針器（或直型止血鉗）夾住刀片，左手握止血鉗）夾住刀片，左手握住刀柄，按刀片上的空隙對住刀柄，按刀片上的空隙對準(zhǔn)刀柄上的槽隙，順勢推入準(zhǔn)刀柄上的槽隙，順勢推入即可即可。手術(shù)刀握持方法手術(shù)刀握持方法執(zhí)筆式執(zhí)筆式：即以持筆的手即以持筆的手法握住刀柄，適用于小范法握住刀柄，適用于小范圍內(nèi)的組織切開，隨意性圍內(nèi)的組織切開，隨意性強(qiáng)，可作垂直或水平切割強(qiáng)，可作垂直或水平切割。持弓式：持弓式：右手中指、無名

12、指右手中指、無名指按壓在手術(shù)刀柄的外側(cè)緣，按壓在手術(shù)刀柄的外側(cè)緣，拇指放在刀柄內(nèi)側(cè)緣，食拇指放在刀柄內(nèi)側(cè)緣，食指按壓在刀片后指按壓在刀片后1 13 3處。處。適用于切開皮膚。適用于切開皮膚。組織鑷組織鑷l 組織鑷和眼科鑷。組織鑷和眼科鑷。l 組織鑷組織鑷鉗夾組織，分離組鉗夾組織，分離組織和筋膜。織和筋膜。l 眼科鑷眼科鑷分離血管。分離血管。l 使用手法：以食指、中指放使用手法：以食指、中指放于器械的外側(cè)緣，拇指放于于器械的外側(cè)緣，拇指放于內(nèi)側(cè)緣，集內(nèi)側(cè)緣，集3指的力量實(shí)施操指的力量實(shí)施操作動作，而且適用于左右手作動作，而且適用于左右手的同時操作。的同時操作。止血鉗止血鉗l 止血和分離組織。止血

13、和分離組織。l 使用方法：以拇指、中指（或使用方法：以拇指、中指（或無名指）分別套人止血鉗的套無名指）分別套人止血鉗的套扣內(nèi)，控制止血鉗展開的力度，扣內(nèi)，控制止血鉗展開的力度，以食指放在止血鉗的關(guān)節(jié)部位，以食指放在止血鉗的關(guān)節(jié)部位，控制止血鉗的方向和鉗夾組織控制止血鉗的方向和鉗夾組織部位的準(zhǔn)確性。部位的準(zhǔn)確性。l 切忌左右手分別抓住止血鉗的切忌左右手分別抓住止血鉗的套扣部位，用兩手的合力進(jìn)行套扣部位，用兩手的合力進(jìn)行止血或分離組織。止血或分離組織?？p合針縫合針l 有圓針和角針兩種，圓針用于縫合組織結(jié)構(gòu)；有圓針和角針兩種，圓針用于縫合組織結(jié)構(gòu)；l 角針邊緣鋒利，除具有穿刺功能外，還具有角針邊緣鋒

14、利，除具有穿刺功能外，還具有 切割的作用；縫合針需配合持針器同時使用。切割的作用；縫合針需配合持針器同時使用。探針探針包括金屬探針和玻璃分針；用于對精細(xì)部位的分包括金屬探針和玻璃分針；用于對精細(xì)部位的分離和游離等操作。有時，在實(shí)施血管插管技術(shù)時，離和游離等操作。有時，在實(shí)施血管插管技術(shù)時，切開血管壁后往往借助于探針先將切口挑起，然切開血管壁后往往借助于探針先將切口挑起，然后插入導(dǎo)管。后插入導(dǎo)管。 支架 用于蛙類及哺乳類手術(shù)中換能器及刺激電極等的固定與位置調(diào)節(jié)。由底座及支架桿構(gòu)成，支架上附有萬向節(jié)，可在各個方向上調(diào)節(jié)。哺乳類手術(shù)器械哺乳類手術(shù)器械氣管插管 急性動物實(shí)驗(yàn)時插入氣管，以保證呼吸道暢通

15、，一端接氣鼓或呼吸換能器可記錄呼吸運(yùn)動。分為金屬插管和玻璃插管。哺乳類手術(shù)器械哺乳類手術(shù)器械動脈夾 動脈夾分大、中、小三種型號及直、彎兩種，用于夾持動脈，暫時阻斷動脈血流。使用時動脈夾的尖端套有塑料管，以防止夾持動脈時對血管造成損傷。哺乳類手術(shù)器械哺乳類手術(shù)器械動脈插管 用于在急性動物實(shí)驗(yàn)時插入動脈?？捎媒饘?、玻璃以及塑料等不同材料制成，常用細(xì)塑料管自行拉制而成。 在哺乳類動物實(shí)驗(yàn)中，插管一端插入動脈，另一端接壓力換能器以記錄血壓，插管內(nèi)充滿肝素以防止插管內(nèi)血液凝固，插管腔內(nèi)不可有氣泡，以免影響結(jié)果。哺乳類手術(shù)器械哺乳類手術(shù)器械三通管 用于改變實(shí)驗(yàn)中液體流動方向，以便輸液、給藥或描記血壓?？呻S

16、意將三個通道中的任何兩個通道口相通，另一個不通；也可使三個通道同時都通或都不通。哺乳動物手術(shù)器材清單金屬用品玻璃用品消耗品手術(shù)剪1把氣管插管1個紗布眼科剪1把動脈插管1根棉簽血管鉗4把尿道插管1根絲線手術(shù)鑷1把玻璃分針1根動脈夾1個注射器1 支（1ml/5ml）手術(shù)刀1把三通管一個動物實(shí)驗(yàn)常用插管技術(shù)動物實(shí)驗(yàn)常用插管技術(shù)u 氣管插管術(shù)氣管插管術(shù)u 頸動脈插管術(shù)頸動脈插管術(shù)u 頸靜脈插管術(shù)頸靜脈插管術(shù)u 導(dǎo)尿管插管術(shù)導(dǎo)尿管插管術(shù)插管技術(shù)的基本步驟插管技術(shù)的基本步驟1. 動物稱重、麻醉、固定。動物稱重、麻醉、固定。2. 插管部位皮膚去毛、備皮。插管部位皮膚去毛、備皮。3. 皮膚切開。皮膚切開。4.

17、 皮下組織結(jié)構(gòu)的分離。皮下組織結(jié)構(gòu)的分離。5. 目標(biāo)器官或組織結(jié)構(gòu)的游離。目標(biāo)器官或組織結(jié)構(gòu)的游離。6. 導(dǎo)管的插入或固定。導(dǎo)管的插入或固定。家兔頸部神經(jīng)和血管的解剖位置家兔頸部神經(jīng)和血管的解剖位置迷走神經(jīng)迷走神經(jīng) 交感神經(jīng)交感神經(jīng)減減壓壓神神經(jīng)經(jīng)氣管插管術(shù)氣管插管術(shù)1 1、麻醉固定、頸部、麻醉固定、頸部皮膚去毛、備皮皮膚去毛、備皮2 2、在頸前區(qū)正、在頸前區(qū)正中作一約中作一約5-7cm5-7cm的切口的切口3 3、鈍性分離皮下組織、肌肉，游離出氣管，、鈍性分離皮下組織、肌肉，游離出氣管，穿線備用。穿線備用。4 4、在甲狀軟骨下、在甲狀軟骨下方第方第3-43-4個環(huán)狀軟個環(huán)狀軟骨上作一倒骨上作

18、一倒“T”T”形切口，插入形切口，插入“Y”Y”形氣管插管，并用形氣管插管，并用線固定好。線固定好。頸動脈插管技術(shù)頸動脈插管技術(shù)1、頸正中作一約、頸正中作一約5-7cm的切口的切口2、鈍性分離皮下筋膜、鈍性分離皮下筋膜3 3、分離一側(cè)頸總動脈，穿雙線備用。、分離一側(cè)頸總動脈，穿雙線備用。4 4、結(jié)扎遠(yuǎn)心端，在距結(jié)扎線約、結(jié)扎遠(yuǎn)心端，在距結(jié)扎線約2-3cm2-3cm處用處用動脈夾夾閉頸總動脈近心端。動脈夾夾閉頸總動脈近心端。5 5、在靠近結(jié)扎線處用眼科剪剪一、在靠近結(jié)扎線處用眼科剪剪一“v”v”形切形切口，切口大小約為動脈口徑的口，切口大小約為動脈口徑的1/31/21/31/2。6 6、將壓力換

19、能器與動脈插管連接好并充滿肝、將壓力換能器與動脈插管連接好并充滿肝素，向近心端插入動脈插管，用線結(jié)扎牢固。素，向近心端插入動脈插管，用線結(jié)扎牢固。三通的使用：三通的使用：u進(jìn)入進(jìn)入BLBL410/420410/420系統(tǒng)。系統(tǒng)。u選擇選擇“實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目” 選擇選擇“循環(huán)實(shí)驗(yàn)循環(huán)實(shí)驗(yàn)” “兔動脈血壓調(diào)節(jié)兔動脈血壓調(diào)節(jié)”實(shí)驗(yàn)?zāi)K；實(shí)驗(yàn)?zāi)K；7 7、打開換能器開關(guān)，觀察并記錄動脈血壓。、打開換能器開關(guān)，觀察并記錄動脈血壓?；?選 擇或 選 擇 “ 輸 入 信 號輸 入 信 號 ” 選 擇選 擇 “ 通通道道”“壓力壓力”點(diǎn)擊點(diǎn)擊“開始開始”實(shí)驗(yàn)按鈕，實(shí)驗(yàn)按鈕，即可在屏幕上觀察到正常的血壓曲線。即可在屏幕上觀察到正常的血壓曲線。動脈插管注意事項(xiàng)動脈插管注意事項(xiàng)l動脈插管和血壓換能器內(nèi)注滿肝素生理動脈插管和血壓換能器內(nèi)注滿肝素生理鹽水