實(shí)驗(yàn)一 顯微鏡構(gòu)造 臨時(shí)玻片的制作

1、植物學(xué)實(shí)驗(yàn)植物學(xué)實(shí)驗(yàn)的有關(guān)注意事項(xiàng) 座位及顯微鏡使用安排座位及顯微鏡使用安排 課程的學(xué)時(shí)安排課程的學(xué)時(shí)安排 考核、考察要求考核、考察要求 實(shí)驗(yàn)報(bào)告的上交要求實(shí)驗(yàn)報(bào)告的上交要求 值日安排值日安排 發(fā)放實(shí)驗(yàn)用工具盒（登記編號(hào)）發(fā)放實(shí)驗(yàn)用工具盒（登記編號(hào)） 鑷子（鑷子（1 1） 解剖針（解剖針（2 2） 雙面刀片（雙面刀片（1 1） 放大鏡（放大鏡（1 1） 小手巾（小手巾（1 1） 載玻片（載玻片（4 4） 蓋玻片（蓋玻片（4 4）注意：注意： 1、每位同學(xué)領(lǐng)取、每位同學(xué)領(lǐng)取一套工具盒。一套工具盒。 2、請(qǐng)妥善保管，、請(qǐng)妥善保管，并于本課程結(jié)束時(shí)交并于本課程結(jié)束時(shí)交還給植物學(xué)教研室。還給植物學(xué)教研

2、室。 3、如有損壞，原、如有損壞，原價(jià)賠償價(jià)賠償實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 （一）（一）顯微鏡的構(gòu)造與使用方法顯微鏡的構(gòu)造與使用方法 （二）（二）顯微鏡臨時(shí)玻片的制作顯微鏡臨時(shí)玻片的制作 （三）（三）植物細(xì)胞的繪圖法植物細(xì)胞的繪圖法一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊笠弧?shí)驗(yàn)?zāi)康囊?.1. 掌握顯微鏡的構(gòu)造及原理，熟練使用光學(xué)顯微鏡。掌握顯微鏡的構(gòu)造及原理，熟練使用光學(xué)顯微鏡。2.2. 了解顯微鏡使用的基本要求、注意事項(xiàng)及一般維了解顯微鏡使用的基本要求、注意事項(xiàng)及一般維 護(hù)方法。護(hù)方法。3.3. 學(xué)習(xí)臨時(shí)玻片制作及掌握生物繪圖學(xué)習(xí)臨時(shí)玻片制作及掌握生物繪圖的基本要求及的基本要求及方法。方法。（一）顯微鏡的構(gòu)造和使用方法（

3、一）顯微鏡的構(gòu)造和使用方法 分辨率分辨率： 能分辨清楚的物體的最小的兩點(diǎn)中心的距能分辨清楚的物體的最小的兩點(diǎn)中心的距離，稱為分辨率。離，稱為分辨率。 人肉眼的分辨率最高可達(dá)：0.10.2mm 光學(xué)顯微鏡的分辨率最高可達(dá)：0.2m 電子顯微鏡的分辨率最高可達(dá)：0.2nm 1mm=1000 m=1000 000nm 顯微鏡放大倍數(shù)顯微鏡放大倍數(shù)物鏡放大倍數(shù)物鏡放大倍數(shù) x 目鏡放大倍數(shù)目鏡放大倍數(shù) 光鏡的有效放大倍數(shù)可達(dá)1250倍透射電子顯微透射電子顯微鏡鏡 用途：用途： 觀察細(xì)胞內(nèi)部的觀察細(xì)胞內(nèi)部的超微結(jié)超微結(jié)構(gòu)構(gòu) 放大倍數(shù)：放大倍數(shù)：300萬(wàn)倍萬(wàn)倍 分辨率：分辨率：約為約為0.3納納米米 透射

4、電子顯微鏡透射電子顯微鏡-觀察植物細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)電鏡下的線粒體電鏡下的線粒體掃描電子顯微鏡掃描電子顯微鏡 用途：用途： 觀察器官、組織觀察器官、組織表面的表面的形態(tài)和結(jié)形態(tài)和結(jié)構(gòu)構(gòu) 放大倍數(shù)放大倍數(shù) 分辨率分辨率用用掃描電鏡掃描電鏡與與光鏡光鏡觀察比較植物葉表面的形態(tài)觀察比較植物葉表面的形態(tài)掃描電鏡下的形態(tài)掃描電鏡下的形態(tài)光學(xué)顯微鏡下的形態(tài)光學(xué)顯微鏡下的形態(tài)1、光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造、光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造 光學(xué)系統(tǒng)光學(xué)系統(tǒng) 物鏡物鏡 目鏡目鏡 聚光器聚光器 虹彩光圈虹彩光圈 光源（或光源（或反光鏡）反光鏡） 機(jī)械裝置機(jī)械裝置 鏡座鏡座 鏡柱鏡柱 鏡臂鏡臂 載物臺(tái)載物臺(tái) 鏡筒鏡筒 物鏡轉(zhuǎn)換器物鏡轉(zhuǎn)換器 調(diào)

5、焦裝置調(diào)焦裝置 粗調(diào)焦螺旋粗調(diào)焦螺旋 微焦調(diào)螺旋微焦調(diào)螺旋一、光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造一、光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造 （一）機(jī)械部分（一）機(jī)械部分: 1、鏡筒、鏡筒:鏡筒的作用是保護(hù)成像配合保持一定的距離，一鏡筒的作用是保護(hù)成像配合保持一定的距離，一般般 160mm。 2、物鏡轉(zhuǎn)換器：安裝低倍和高倍物鏡、物鏡轉(zhuǎn)換器：安裝低倍和高倍物鏡 3、 粗調(diào)焦螺旋：位于鏡柱兩側(cè)的一對(duì)大螺旋，用于調(diào)節(jié)粗調(diào)焦螺旋：位于鏡柱兩側(cè)的一對(duì)大螺旋，用于調(diào)節(jié)焦距，旋轉(zhuǎn)一周可使載物臺(tái)上升或下降焦距，旋轉(zhuǎn)一周可使載物臺(tái)上升或下降 10 mm 4、細(xì)調(diào)焦螺旋：與粗調(diào)焦螺旋同軸的一對(duì)小螺旋，旋轉(zhuǎn)、細(xì)調(diào)焦螺旋：與粗調(diào)焦螺旋同軸的一對(duì)小螺旋，旋轉(zhuǎn)一

6、周可使載物臺(tái)上升或下降一周可使載物臺(tái)上升或下降0.1mm 5、鏡座：方形金屬座，用以穩(wěn)固和支持鏡身。、鏡座：方形金屬座，用以穩(wěn)固和支持鏡身。 6、鏡座：方形金屬座，用以穩(wěn)固和支持鏡身。、鏡座：方形金屬座，用以穩(wěn)固和支持鏡身。 7、鏡臂：亦稱執(zhí)手，連接鏡筒與鏡柱，是用于執(zhí)鏡的部、鏡臂：亦稱執(zhí)手，連接鏡筒與鏡柱，是用于執(zhí)鏡的部位。位。 8、載物臺(tái)：放置玻片的平臺(tái)，中央有一通光孔、有固定、載物臺(tái)：放置玻片的平臺(tái)，中央有一通光孔、有固定制片的壓片夾和推進(jìn)器制片的壓片夾和推進(jìn)器一、光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造一、光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造 （二）光學(xué)部分：二）光學(xué)部分： 由成像系統(tǒng)和照明系統(tǒng)組成。成像系由成像系統(tǒng)和照明系統(tǒng)組

7、成。成像系統(tǒng)包括物鏡和目鏡，照明系統(tǒng)包括反光鏡和聚光器統(tǒng)包括物鏡和目鏡，照明系統(tǒng)包括反光鏡和聚光器 1、目鏡：、目鏡： 2、物鏡：裝在物鏡轉(zhuǎn)換器和上，短者為低倍鏡（、物鏡：裝在物鏡轉(zhuǎn)換器和上，短者為低倍鏡（ 4 、 10 ），長(zhǎng)者為高倍鏡（），長(zhǎng)者為高倍鏡（ 40 ），其上刻有），其上刻有N.A 0.25 0.5等，為等，為數(shù)值孔徑數(shù)值孔徑（光線經(jīng)過(guò)蓋玻片引起折射后成光錐（光線經(jīng)過(guò)蓋玻片引起折射后成光錐底面的口徑數(shù)值，數(shù)值越大，吸收光線量越多，越清楚），底面的口徑數(shù)值，數(shù)值越大，吸收光線量越多，越清楚）， 3、聚光器：、聚光器： 4、光圈：、光圈： 5、照明器或反光鏡：、照明器或反光鏡：鏡座鏡

8、座鏡柱鏡柱鏡臂鏡臂鏡筒鏡筒載物臺(tái)載物臺(tái)物鏡轉(zhuǎn)換器物鏡轉(zhuǎn)換器粗調(diào)焦螺旋粗調(diào)焦螺旋微調(diào)焦螺旋微調(diào)焦螺旋目鏡目鏡物鏡物鏡聚光器聚光器光源光源虹彩光圈虹彩光圈二、光學(xué)顯微鏡的使用二、光學(xué)顯微鏡的使用 1、低倍鏡的使用方法、低倍鏡的使用方法 （1）取鏡和放置：）取鏡和放置： （2）對(duì)光：打開(kāi)電光源，用拇指和中指移動(dòng)旋轉(zhuǎn)器）對(duì)光：打開(kāi)電光源，用拇指和中指移動(dòng)旋轉(zhuǎn)器(切忌手切忌手持物鏡移動(dòng)持物鏡移動(dòng))，使低倍鏡對(duì)準(zhǔn)鏡臺(tái)的通光孔，使低倍鏡對(duì)準(zhǔn)鏡臺(tái)的通光孔 。左眼在目鏡上。左眼在目鏡上觀察觀察 (右眼睜開(kāi)右眼睜開(kāi)),同時(shí)調(diào)節(jié)反光鏡方向，直到視野內(nèi)的光線同時(shí)調(diào)節(jié)反光鏡方向，直到視野內(nèi)的光線均勻明亮為止。均勻明亮為

9、止。 （ 3）放置玻片標(biāo)本：取一玻片標(biāo)本放在鏡臺(tái)上，一定使有）放置玻片標(biāo)本：取一玻片標(biāo)本放在鏡臺(tái)上，一定使有蓋玻片的一面朝上，將所要觀察的部位調(diào)到通光孔的正中。蓋玻片的一面朝上，將所要觀察的部位調(diào)到通光孔的正中。 （4）調(diào)節(jié)焦距：雙手轉(zhuǎn)動(dòng)（向后，載物臺(tái)上升）調(diào)節(jié)焦距：雙手轉(zhuǎn)動(dòng)（向后，載物臺(tái)上升 ）粗調(diào)節(jié)器）粗調(diào)節(jié)器（在內(nèi)，大調(diào)解螺旋），使鏡臺(tái)緩慢地上升至物鏡距標(biāo)本片（在內(nèi)，大調(diào)解螺旋），使鏡臺(tái)緩慢地上升至物鏡距標(biāo)本片約約5毫米處毫米處 ，切勿在目鏡上觀察。一定要從右側(cè)看著鏡臺(tái)上，切勿在目鏡上觀察。一定要從右側(cè)看著鏡臺(tái)上升升 ，然后，兩眼同時(shí)睜開(kāi)，用左眼在目鏡上觀察，向前緩，然后，兩眼同時(shí)睜開(kāi)，

10、用左眼在目鏡上觀察，向前緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器，使載物臺(tái)緩慢下降，直到視野中出現(xiàn)清晰慢轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器，使載物臺(tái)緩慢下降，直到視野中出現(xiàn)清晰的物象為止。的物象為止。 如果物象不在視野中心可調(diào)節(jié)推片器將其調(diào)到中心如果物象不在視野中心可調(diào)節(jié)推片器將其調(diào)到中心 。 光學(xué)顯微鏡的使用光學(xué)顯微鏡的使用 高倍鏡的使用方法高倍鏡的使用方法 ： （1）選好目標(biāo)：一定要先在低倍鏡下把需進(jìn)一步觀察的部）選好目標(biāo)：一定要先在低倍鏡下把需進(jìn)一步觀察的部位調(diào)到中心，同時(shí)把物象調(diào)節(jié)到最清晰的程度，才能進(jìn)行高位調(diào)到中心，同時(shí)把物象調(diào)節(jié)到最清晰的程度，才能進(jìn)行高倍鏡的觀察。倍鏡的觀察。 （2）轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，調(diào)換上高倍鏡頭，轉(zhuǎn)換高倍鏡時(shí)轉(zhuǎn)

11、動(dòng)速）轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，調(diào)換上高倍鏡頭，轉(zhuǎn)換高倍鏡時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)速度要慢，并從側(cè)面進(jìn)行觀察度要慢，并從側(cè)面進(jìn)行觀察(防止高倍鏡頭碰撞玻片防止高倍鏡頭碰撞玻片)，如高，如高倍鏡頭碰到玻片，說(shuō)明低倍鏡的焦距沒(méi)有調(diào)好，應(yīng)重新操作。倍鏡頭碰到玻片，說(shuō)明低倍鏡的焦距沒(méi)有調(diào)好，應(yīng)重新操作。 （3）調(diào)節(jié)焦距：轉(zhuǎn)換好高倍鏡后，用左眼在目鏡上觀察，）調(diào)節(jié)焦距：轉(zhuǎn)換好高倍鏡后，用左眼在目鏡上觀察，此時(shí)一般能見(jiàn)到一個(gè)不太清楚的物象，可將細(xì)調(diào)節(jié)器（在外、此時(shí)一般能見(jiàn)到一個(gè)不太清楚的物象，可將細(xì)調(diào)節(jié)器（在外、小螺旋）的螺旋移動(dòng)（向后）約小螺旋）的螺旋移動(dòng)（向后）約0.51圈，即可獲得清晰的圈，即可獲得清晰的物象物象(切勿用粗調(diào)節(jié)器切

12、勿用粗調(diào)節(jié)器!) 果視野的亮度不合適，可用集光器和光圈加以調(diào)節(jié)，果視野的亮度不合適，可用集光器和光圈加以調(diào)節(jié)， 更換玻片標(biāo)本或取玻片時(shí)，必須向前轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器更換玻片標(biāo)本或取玻片時(shí)，必須向前轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器(切勿轉(zhuǎn)切勿轉(zhuǎn)錯(cuò)方向錯(cuò)方向)使載物臺(tái)下降，方可取下玻片標(biāo)本。使載物臺(tái)下降，方可取下玻片標(biāo)本。 推進(jìn)器向前后左右，顯推進(jìn)器向前后左右，顯微鏡下，物象移動(dòng)方微鏡下，物象移動(dòng)方向如何？向如何？二、光學(xué)顯微鏡的使用二、光學(xué)顯微鏡的使用拿取顯微鏡拿取顯微鏡對(duì)光對(duì)光使用低倍物鏡使用低倍物鏡（1）放置玻片標(biāo)本；）放置玻片標(biāo)本；（2）調(diào)節(jié)焦距；）調(diào)節(jié)焦距；（3）調(diào)節(jié)視野反差）調(diào)節(jié)視野反差（4）認(rèn)真觀察）認(rèn)真觀察使

13、用高倍物鏡使用高倍物鏡（1）選好目標(biāo)；）選好目標(biāo)；（2）使用微調(diào)螺旋調(diào)整焦點(diǎn)；）使用微調(diào)螺旋調(diào)整焦點(diǎn)；（3）調(diào)節(jié)光亮度和反差）調(diào)節(jié)光亮度和反差（4）認(rèn)真觀察）認(rèn)真觀察顯微鏡使用后顯微鏡使用后的整理的整理 請(qǐng)使用請(qǐng)使用臺(tái)面上的臺(tái)面上的玻片標(biāo)本玻片標(biāo)本進(jìn)行練習(xí)進(jìn)行練習(xí)放置顯微鏡放置顯微鏡三、三、顯微鏡的維護(hù)顯微鏡的維護(hù) 1、經(jīng)常性的維護(hù)、經(jīng)常性的維護(hù) （）防潮如果室內(nèi)潮濕，光學(xué)鏡片就容易生霉、（）防潮如果室內(nèi)潮濕，光學(xué)鏡片就容易生霉、生霧。生霧。 （）防塵光學(xué)元件表面落入灰塵，不僅影響光線（）防塵光學(xué)元件表面落入灰塵，不僅影響光線通過(guò)，而且經(jīng)光學(xué)系統(tǒng)放大后，會(huì)生成很大的污斑，通過(guò)，而且經(jīng)光學(xué)系統(tǒng)放

14、大后，會(huì)生成很大的污斑，影響觀察。影響觀察。 （）防腐蝕（）防腐蝕 顯微鏡不能和具有腐蝕性的顯微鏡不能和具有腐蝕性的化學(xué)試劑化學(xué)試劑放在一起。如硫酸、鹽酸、強(qiáng)堿等。放在一起。如硫酸、鹽酸、強(qiáng)堿等。 （）防熱（）防熱 防熱的目的主要是為了避免熱脹冷縮引防熱的目的主要是為了避免熱脹冷縮引起鏡片的開(kāi)膠與脫落。起鏡片的開(kāi)膠與脫落。 三、顯微鏡的保護(hù)三、顯微鏡的保護(hù) 、光學(xué)系統(tǒng)的擦拭、光學(xué)系統(tǒng)的擦拭光學(xué)部分用用擦鏡紙擦拭干凈即行光學(xué)部分用用擦鏡紙擦拭干凈即行 。 方法：先用干凈的毛筆或吹風(fēng)球除去鏡片表方法：先用干凈的毛筆或吹風(fēng)球除去鏡片表面的灰塵。用擦鏡紙從鏡片中心開(kāi)始向邊緣面的灰塵。用擦鏡紙從鏡片中心

15、開(kāi)始向邊緣作螺旋形單向運(yùn)動(dòng)。直至擦凈為止。如果鏡作螺旋形單向運(yùn)動(dòng)。直至擦凈為止。如果鏡片上有油漬、污物或指印等擦不掉時(shí)，可用片上有油漬、污物或指印等擦不掉時(shí)，可用柳枝條裹上脫脂棉，蘸少量酒精和乙醚混合柳枝條裹上脫脂棉，蘸少量酒精和乙醚混合液（酒精液（酒精80，乙醚，乙醚20）擦拭。）擦拭。 3、機(jī)械部分的擦拭、機(jī)械部分的擦拭 ：可用軟布擦拭。但不：可用軟布擦拭。但不能使用酒精、乙醚等有機(jī)溶劑能使用酒精、乙醚等有機(jī)溶劑 二、臨時(shí)玻片的制作二、臨時(shí)玻片的制作 材料：材料：洋蔥鱗葉的下表皮洋蔥鱗葉的下表皮 方法：方法：撕片法撕片法 步驟：步驟：特別注意特別注意： 觀察臨時(shí)裝片時(shí)一定要加觀察臨時(shí)裝片時(shí)一定要加蓋蓋玻片，并將其四周溢出蓋蓋玻片，并將其四周溢出的水擦干。的水擦干。（三）（三）生活細(xì)胞的觀察生活細(xì)胞的觀察洋蔥鱗葉下表皮細(xì)胞觀察與思考：觀察與思考：在你的制片中是否在你的制片中是否每個(gè)細(xì)胞都具有細(xì)每個(gè)細(xì)胞都具有細(xì)胞核？為什么？胞核？為什么？你如何解釋不同細(xì)你如何解釋不同細(xì)胞中細(xì)胞核在形態(tài)胞中細(xì)胞核在形態(tài)和位置上的差異？和位置上的差異？3 3、你能看見(jiàn)細(xì)胞、你能看見(jiàn)細(xì)胞核中的核仁嗎？一核中的核仁嗎？一般有幾個(gè)？般有幾個(gè)？細(xì)胞核細(xì)胞核細(xì)胞壁細(xì)胞壁細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞質(zhì)液泡液泡（四）植物細(xì)胞與組織繪圖法（四）植物細(xì)胞與組織繪圖法 生物繪圖的要求生物繪圖的要求： 科學(xué)性、真